6. Evaluarea uleiului esențial obținut din Mentha×piperita L.

împotriva tulpinilor
rezistente la mai multe medicamente - https://www.dovepress.com/evaluation-of-essential-oil-
obtained-from-menthaxpiperita-l-agains-peer-reviewed-fulltext-article-IDR

Context: Rezistența bacteriană multidrog reprezintă în prezent o amenințare din ce în ce mai

gravă, cu consecințe clinice importante în ceea ce privește opțiunile de tratament. În 2017, OMS
a publicat o listă globală de bacterii rezistente, identificând bacteriigram-negative multirezistente
la medicamente (MDR), ar fi Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa sau Acinetobacter
baumannii, cu spectru extins Enterobacteriaceae rezistentă la cefalosporine ca priorități critice
pentru dezvoltarea de noi strategii de tratament.
Scop: Noutatea prezentată în acest studiu se referă la evaluarea uleiului volatil obținut din
frunzele de Mentha × piperita L., pe tulpini MDR de la pacienții spitalizați.
Material și metode: Uleiul esențial a fost extras prin distilare cu abur și testat pe șase tulpini
bacteriene de referință, dar și pe tulpinile MDR colectate de la pacienții Spitalului Clinic
Județean de Urgență "Pius Brînzeu" Timișoara. Activitatea antibacteriană in vitro a fost evaluată
prin metoda de difuzie a discului agar și prin metoda de microdiluare.
Rezultate: Testarea activității antibacteriene a uleiului de mentă pe ambele tulpini de referință și
tulpini mdr izolate de la pacienți spitalizați au demonstrat efectul său bactericid. Concentrația
minimă inhibitorie (CMI) a fost mai mică (20 mg/ml) pentru Staphylococcus aureus, Escherichia
coli și Proteus mirabilis și mai mare (40 mg/ml) pentru tulpinile de Klebsiella pneumoniae,
Pseudomonas aeruginosa și Acinetobacter baumannii. Concentrația bactericidă minimă (MBC) a
fost egală cu CMI, cu excepția tulpinilor Pseudomonas aeruginosa, unde MBC a fost dublul Mic.
Concluzie: Studiul de față evidențiază activitatea bactericidă a mentha×piperita L. ulei esențial
pe toate tulpinile testate MDR sau extensiv rezistente la medicamente Gram-pozitive și Gram-
negative ale Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiellapneumoniae, Proteus mirabilis,
Pseudomonas aeruginosa și Acinetobacter baumannii. Acest ulei poate fi o opțiune terapeutică în
viitorul apropiat pentru multe boli infecțioase produse de bacterii MDR.
Cuvinte cheie: rezistenta bacteriana multidrog, menta, ulei esential, efect bactericid
Introducere
Plantele aromatice medicinale, definite ca plante care conțin uleiuri esențiale cu proprietatea
volatilizării la temperatura camerei, au fost utilizate încă din cele mai vechi timpuri și sunt bine
cunoscute de toate civilizațiile și culturile pentru potențialul lor nutrițional, terapeutic și
cosmetic.1 În plus, prin istoria omenirii, simboluri mistice și religioase au fost atribuite acestor
esențe vegetale.2,3 Formarea fitochimicalelor volatile are loc în celule, canale, pungi secretorii
sau perii de glandă structuri histologice.4 Din punct de vedere chimic, uleiurile esențiale sunt
metaboliți secundari formați din zeci până la sute de molecule aparținând clasei de terpenoide
(bio-generate de calea mevalonatului) și fenilpropan (bio-generat de calea acidului shikimic).
compuși sesquiterpene și fenolici cu derivați oxigenați sau neoxigenați.6 Stereochimia se reflectă
puternic prin mirosul metaboliți secundari.5 Uleiul esential (EO) poate fi depozitat în toate
organele plantei (flori, muguri, frunze, fructe, semințe, scoarță de copac, lemn, rădăcini), dar în
cantități diferite.4 Plantele conțin frecvent aproximativ 1% ulei volatil, rareori mai mult de 15%.
Unele dintre cele mai reprezentative familii care conțin plante oleaginoase esențiale sunt
Lamiaceae, Apiaceae, Myrtaceae, Zingiberaceae, Lauraceae, Rutaceae, Asteraceae și
Cupressaceae.7,8 Metoda de extracție este aleasă în funcție de conținutul de ulei volatil, iar
principalele proceduri includ: (i) distilare și/sau antrenarea cu vapori de apă; (ii) extracția cu
solvenți volatili sau nevolatili; (iii) extracția cu gaze supercritice; (iv) metode mecanice –
presare.9,10 Compoziția chimică complexă se reflectă prin activitatea biologică, astfel, în funcție
de tipul de constituenți.11,12 Pe lângă utilizările terapeutice, uleiurile volatile sunt utilizate pe
scară largă în industria cosmetică și alimentară.
Din diferitele specii de mentă existente, Mentha × piperita L. (MP) este cel mai cunoscut și
utilizat în domeniile medicale, precum și industriale și culinare. Menta este o planta aromatice
perene, care aparține familiei Lamiaceae. Ea are o istorie ca un remediu terapeutic datând din
timpurile antice egiptene, romane și grecești, fiind atribuite cu valori terapeutice diferite.13,14
Din punct de vedere botanic, menta este o încrucișare între Mentha spicata L., de asemenea,
cunoscut sub comune numele de mentă, și Mentha aquatica L., de asemenea, cunoscut sub
numele comun de mentă de apă.15 Europa, America de Nord și Asia sunt locurile în care această
specie este cel mai frecvent cultivate. În scop terapeutic, frunzele uscate sunt folosite cu cel puțin
1% conținut de ulei volatil. Recolta se poate face de două ori pe an în iunie și septembrie, la
maturitatea deplină a florilor. Uscarea se face la maximum 35°C pentru a preveni volatilizarea.16
Din punct de vedere chimic, frunzele conțin ulei esențial (0,5–4%), flavonoide, taninuri, acizi
carboxilici polifenolici, triterpene, tocoferol, carotenoide și minerale. Principalii constituenți ai
uleiului volatil obținut din această specie prin distilare sunt mentolul, mentolada, izomentona,
acetatul de metil, mentofuranul, limoneanul, puleglia, eucaliptolul și carvone.17 Cele mai
cunoscute efecte terapeutice pentru frunzele de mentă sub formă de ceai sau diferite tipuri de
extracte includ coleretic-cholagogue, antispastice, stomacale, antidiabetice, antiseptice,
antibacteriene, antivirale, antifungice, antioxidante, antialergenice, antitumorale, antipruritice
activities.16,18 În cazul uleiului volatil, principalele efecte biologice raportate sunt
antiinfecțioase (bactericid, antiviral, fungicid, antimalarice, vermicidale), tonic digestiv,
stimulent, analgezic, anestezic local, antispastice, antiinflamatoare, astringente,
decongestionante, vasoconstrictor, mucolitice, expectorant și carminative.16,19–24
Noutatea prezentată în acest studiu se referă la evaluarea uleiului volatil obținut din frunzele de
Mentha×piperita L., colectat din partea de vest a României și obținut prin distilare, pe tulpinile
MDR colectate de la pacienții spitalizați.
Materiale și metode
Aprobare etică
Acest studiu a fost aprobat de Comitetul de Etică al Spitalului Clinic Clinic de Urgență "Pius
Branzeu" Timișoara (nr.
Material vegetal
Părțile aeriene ale MP au fost colectate manual în momentul etapei maxime de înflorire a
plantelor, în Ludeștii de Jos, județul Hunedoara (Coordonate: 45°43′5"N 23°10′21"E45°43′5"N
23°10′21"E) în iulie-august 2017. Materialul vegetal a fost uscat în condiții naturale și depozitat
în pungi duble de hârtie la temperaturi de 3-5°C. După identificare, specimenele voucher
(VSNH. BUASTM89/5) au fost depuse în erbariumul Departamentului de Tehnologii Agricole,
Facultatea de Agronomie, Universitatea de Științe Agricole și Medicină Veterinară din Banat
"Regele Mihai I al României" din Timișoara.
Izolarea EO-urilor
EO-urile au fost extrase prin distilare cu abur, conform metodei descrise anterior de Jianu et
al.25 EOs au fost separate prin decantare, uscate (sulfat de sodiu anhidru Sigma-Aldrich,
Germania) și depozitate în flacoane închise ermetic (−18°C) pentru analize ulterioare.
Caracterizarea GC-MS a uleiului esențial Mentha×piperita L. (MPEO)
Analiza MPEO a fost efectuată cu ajutorul echipamentului de cromatograf de gaz cu
spectrometrul de masă (GC-MS) Shimadzu QP 2010 Plus cu o coloană capilară care are
următoarele caracteristici: AT WAX 30 m × 0,32 mm × 1 μm. Gazul purtător utilizat a fost
Helium cu un debit de 1 ml/min. Temperatura cuptorului a fost programată după urmează:
Temperatura inițială a cuptorului a fost de 40°C timp de 1 min, apoi ridicată la 210°C la o viteză
de 5°C/min, menținându-se timp de 5 minute. Temperaturile injectorului și sursei de ioni au fost
de 250°C și, respectiv, 220°C. Volumul injectării de 1 μL la un raport de 1:50 a fost utilizat
pentru identificarea compușilor volatili. Constituenții MPEO au fost identificați utilizând baza de
date NIST26 și sunt prezentați indicii de retenție liniară calculată (LRI).
Tulpini bacteriene
Uleiul a fost testat pe șase tulpini bacteriene de referință: Escherichia coli ATCC 25922,
Escherichia coli ATCC BAA-196, Klebsiella pneumoniae ATCC 1705, Pseudomonas aeruginosa
ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 25923 și Staphylococcus aureus ATCC 43300
( ThermoScientific, Lenexa, Kansas, SUA), precum și pe tulpinile MDR colectate de la pacienții
Spitalului Clinic Clinic de Urgență "Pius Brînzeu" Timișoara (PBECCHT).
În studiul nostru, tulpinile MDR au provenit din activitatea clinică de rutină. La început,
bacteriile au fost izolate pe Columbia 5% agar sânge de oaie (Sanimed, București, România).
Identificarea tuturor izolatelor a fost efectuată în funcție de caracterele morfologice ale coloniilor
și de testele biochimice obținute cu ajutorul sistemului automat Vitek 2 (bio-Mérieux, Marcy
l'Etoile, Franța). Sensibilitatea la medicamentele antimicrobiene a fost testată în conformitate cu
criteriile Institutului Clinic de Laborator și Standarde (CLSI), prin determinarea concentrației
minime inhibitoriale (CMI) cu sistemul Vitek 2.27
Pentru bacilegram-negativ (GNB), confirmarea fenotică a producției ESBL s-a făcut folosind
testul de sinergie dintre cefalosporine cu spectru extins și acid clavulanic.27,28
Producția de carbapenemase a fost demonstrată prin metode combinate de disc (KPC, MBL și
OXA-48 Confirm kit, Rosco Diagnostica, Danemarca).27,29,30
Pentru tulpinile staphylococcus aureus (MRSA) rezistente la meticilină, s- a efectuat screeningul
cefoxitinei. Fenotipul constitutiv macrolide-lincosamid-streptograminB (MLSBc) a fost
determinat pe baza rezistenței sale la eritromicină și clindamicină. inductibil macrolide-
lincosamid-streptograminĂ B (MLSBi) fie a fost detectat pe vitek AST-P592 carduri sau de
apariția unei regiuni D în jurul discului clindamicină în apropierea eritromicinei, care a fost
asociat cu eritromicină rezistență (pe disc de difuzie de testare).
Includerea în grupul MDR a fost făcută în conformitate cu definiția propusă de Magiorakos
(2012). Astfel, MDR a fost definit ca o rezistență dobândită la cel puțin un agent din trei sau mai
multe categorii de antimicrobiene, în timp ce XDR au fost considerate tulpini bacteriene care au
rămas susceptibile la cel mult două categorii de antimicrobiene.31
După fenotipare, tulpinile MDR au fost stocate pe un microbancă (Pro-Lab Diagnostics, Toronto,
Canada) la −80°C. Reconstituirea a fost realizată prin descărcarea criobilelor pe Columbia +5%
sânge de oaie agar mediu (Sanimed, București, România) și prin incubație timp de 24 de ore la
37°C. După reconstituire, a fost testată susceptibilitatea tulpinilor la uleiul de mentă.
Activitatea antibacteriană in vitro
Activitatea antimicrobiană a acestui ulei a fost evaluată prin metoda de difuzie a discului agar și
prin metoda de microdiluare, așa a fost descrisă anterior.32,33
Metoda difuziei discului
Suspensiile bacteriene au fost ajustate cu salină fiziologică la o concentrație de 0,5 Mac Farland
(108bacterii/ml) și 100 μL din aceste suspensii au fost plasate pe suprafața agarului Mueller-
Hinton (Sanimed, București, România). Zece microlitri de ulei au fost adăugați pe un disc de
hârtie gol (BioMaxima, Lublin, Polonia) și apoi depozitați pe suprafața plăcilor Mueller-Hinton
inoculate cu suspensiile microbiene și, în consecință, incubate la 37 °C timp de 24 de ore. Citirea
zonelor de inhibare s-a făcut în milimetri. Toate testele au fost efectuate în trei exemplare pentru
fiecare tulpină bacteriană. Gentamicină 10 μg (BioRad, Marnes la Coquette, Franța) a fost folosit
ca un control pozitiv, iar pentru control negativ, am folosit un disc de hârtie gol, care nu a fost
impregnat.
Metoda de diluare -determinare a CMI și concentrația bactericidă minimă (MBC)
Testul de diluare a bulionului a fost efectuat conform recomandărilor (CLSI).26 În șapte tuburi
de testare, diluarea serială de două ori a uleiului (80, 40, 20, 10, 5, 2,5, 1,25 mg/ml) în bulionul
Mueller-Hinton (Sanimed, București, România) au fost realizate și a fost adăugat ă cu inoculul
bacterian (5×105 bacterii/ml). După incubarea tuburilor de testare la 37°C timp de 24 ore, s-a
determinat CMI (cea mai mică concentrație fără creștere vizibilă). MBC a fost determinată prin
sub-cultivarea de 1 μL pe Columbia agar +5% sânge de oaie și a fost considerată ca fiind cea mai
mică concentrație care a ucis 99,9% din inoculul inițial.
Analiza statistică
Corelarea între parametri (coeficienți Pearson) a fost obținută utilizând programul "Microsoft
Excel 2010".
Rezultatele
Compoziția chimică a MPEO
Figura 1 și tabelul 3 prezintă profilurile GC-MS (cromatograf în gaz cu spectrometru de masă)
ale MPEO și procentele componentelor volatile în ordinea eluției. În MPEO, 17 compuși (peste
0,08%) au fost identificate 99,896% din componența totală a MPEO. Hidrocarburile
monoterpenice (MH) reprezintă 34,229%, oxigenatele monoterpenice (MO) 60,826%,
hidrocarburile de sesquiterpen (SH) 4,635% și oxigenatul de sesquiterpene (SO) 0,206% din
compușii totali (tabelul 3).

Figura 1 Cromatogramă a MPEO.

Tabelul 3 Compoziția chimică a MPEO (% din total)

Profilul GC-MS a evidențiat principalii compuși ai MPEO: p-Mentha-6,8-diene-2-onă (57.920%)

și p-Mentha-1,8-diene (29,576%). De asemenea, alți fitocompuși caracteristici ai MPEO ar putea
fi detectați conform descrierii din tabelul 3.
Valorile zonelor de inhibare ale diametrelor, MIC și MBC pentru uleiul de mentă împotriva a 21
de tulpini bacteriene sunt enumerate în Tabelul 4.

Tabelul 4 Activitatea antibacteriană a uleiului esențial studiat

Testarea activității antibacteriene a uleiului de mentă pe ambele tulpini de referință și tulpini

leMDR izolate de la pacienți spitalizați a demonstrat efectul său bactericid. Din cele 21 de tulpini
testate, 16 au fost reprezentate de GNB (Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella
pneumoniae, Proteus mirabilis și Pseudomonas aeruginosa), în timp ce restul de cinci au fost
reprezentate de Staphylococcus aureus. Mic a uleiului testat a fost mai mic (20 mg/ml) pentru
Staphylococcus aureus, Escherichia coli și Proteus mirabilis și mai mare (40 mg/ml) pentru
tulpinile Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa și Acinetobacter baumannii (Tabelul
4). MBC a fost egal cu MIC, cu excepția tulpinilor Pseudomonas aeruginosa, unde MBC a fost
dublul MIC.
Pentru a evalua influența moleculelor funcționale de ulei și posibila activitate antibacteriană a
acestor compuși, Pearson corelația dintre zonele de inhibare (mm) a principalelor tulpini
bacteriene (Acinetobacter baumannii, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Pseudomonas
aeruginosa și Staphylococcus aureus) și derivații constituenți chimici din menton (p-Mentha-1,8-
diene, p-Mentha-6,8-diene-2-one, menton și trans-p-Mentha-6,8-diene-2-one).
Analiza corelației (Tabelul 5) evidențiază o corelație pozitivă foarte puternică (r=1) între
tulpinile de Acinetobacter baumannii și compușii totali care includ mentazonă în moleculă care
sugerează efectul acestor compuși asupra creșterii celulelor bacteriene. De asemenea, a fost
obținută o corelație pozitivă puternică (r=0,867) între compușii de tip Klebsiella pneumoniae și
menton. În aceste cazuri, putem presupune o legătură reciprocă între acești compuși chimici și
efectul lor antibacterian. Corelații pozitive scăzute (r=0,248 și, respectiv, r=0,179) au fost
identificate între perechi: Pseudomonas/menton ă și compuși de tip Staphylococcus/menton, în
timp ce o corelație negativă scăzută (r=−0,046) a fost identificată între compușii de tip E. coli și
mentoni.

Tabelul 5 Coeficienții Pearson (r) între tulpinile bacteriilor și compoziția chimică, exprimați în
menton și derivați de menton
Discuţie
În ceea ce privește compoziția chimică a MPEO, în studiul nostru, hidrocarburile monoterpene
(MH) reprezintă 34,229%, oxigenațimonoterpene (MO) 60,826%, hidrocarburi de sesquiterpen
(SH) 4,635% și oxigenat de sesquiterpen (SO) 0,206% din compușii totali (Tabelul 3 ).
Principalii compuși detectați ai MPEO au fost următorii: p-Mentha-6,8-diene-2-onă (57,920%) și
p-Mentha-1,8-dien (29,576%) (Tabelul 3). Compoziție similară a fost raportată de Ashrafi et al
care a înregistrat un conținut de mentol în MPEO de 45,05% și mentol 17,53%.34 Studiul
publicat de Yu et al a raportat că principalii constituenți se încadrează în clasele fitochimice de
monoterpene oxigenate (73,9–94,8 %), hidrocarburi de tip monoterpene (1,0-21,9%) și
sesquiterpenes (0,5–16,6%).35 Reddy et al găsit mentol (36,02%) ca principal compus chimic în
MPEO, urmat de menton (24,56%).36 Compoziție similară a fost raportată în alte studii.37,38 În
MPEO italian, mentol (32,4%) mentazonă (26,6%) au fost determinate 39, în timp ce acetatul de
linalool și linalyl a fost detectat ca compuși majori ai MPEO.40 tunisiene
În ceea ce privește rezistența bacteriană multimedicamentoasă, aceasta reprezintă în prezent o
amenințare din ce în ce mai gravă, cu consecințe clinice importante în ceea ce privește opțiunile
de tratament. În ultimii ani, infecțiile cauzate de bacteriile MDR au devenit endemice în multe
unități de îngrijire a sănătății, iar focarele dobândite în spitale care implică astfel de
microorganisme sunt raportate la nivel mondial.41-43
Din cauza impactului creșterii rezistenței la antimicrobiene, începând din 2001, Organizația
Mondială a Sănătății (OMS) a concluzionat că ar trebui acordată o prioritate deosebită măsurilor
care vizează încetinirea apariției MDR, aceste măsuri fiind deosebit de importante, având în
vedere că dezvoltarea agenților antimicrobieni a fost redusă în ultimii ani.44 În 2017, OMS a
publicat o listă globală de bacterii rezistente, identificând bacteriile Gram-negative MDR, ar fi
Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa sau Acinetobacter baumannii, Enterobacteriaceae
rezistentla cefalosporine cu spectru extins ca prioritati critice pentru dezvoltarea de noi strategii
de tratament.
Din aceste motive, am inițiat acest studiu multidisciplinar pentru a găsi o nouă alternativă
terapeutică pentru infecțiile induse de bacterii MDR.
În alegerea tulpinilor bacteriene obținute de la pacienții spitalizați, am încercat să arătăm diferite
fenotipuri de rezistență, fie în cadrul aceleiași clase, fie în diferite clase de antibiotice, pentru a
raporta eficacitatea uleiului mp pe mai multe tulpini MDR. Astfel, majoritatea izolatelor clinice
Enterobacteriaceae și Pseudomonas au fost MDR, secretând diferite beta-lactase, în timp ce
tulpinile de Acinetobacter baumannii au fost XDR.
Diferite mecanisme ar putea determina rezistența la antimicrobiene; acestea includ degradarea
enzimatică a medicamentelor antimicrobiene, sunt beta-lactazele în cazul rezistenței la beta-
lactam sau al enzimelor modificate în rezistența la aminoglicozide. Modificarea țintelor
antimicrobiene în cazul rezistenței MRSA sau a fluorochinolonelor. În plus, modificările
permeabilității membranei bacteriene pot duce la rezistență la mulți agenți antimicrobieni.45
Activitatea antibacteriană a uleiurilor esențiale este incomplet cunoscută, dar unele mecanisme
au fost propuse în literatură de-a lungul timpului, ar fi modificarea permeabilității membranei
agenților patogeni prin perturbarea sistemelor de transport și a producției de energie.
Efectul antimicrobian al uleiului esențial al MP a fost studiat în diferite tipuri de
microorganisme, atât bacterii gram-pozitive, cât și gram-negative.
Mimica-Dukic et al a obținut un MIC mic (8 μL/ml) pe tulpini de E. coli, în timp ce Hammer et
al a raportat un Mic Mic de 25 μL/ml pentru E. coli și 12 μL/ml pentru S. aureus.46,47 Câteva
grupuri, inclusiv cel al Aridogan et al raportat activitate antibacteriană numai pentru S. aureus și
nu pentru E. coli.488
Aceste diferențe s-ar putea datora diferențelor din compoziția chimică a uleiurilor colectate din
diferite părți ale lumii.
Acțiunea antimicrobiană a uleiurilor esențiale a fost explicată în principal prin prezența
terpenelor, alcoolilor, aldehidelor și esterilor. Din terpene, compușii fenolici, în special, timolul
și carvacrolul, par să poată crește permeabilitatea membranei plasmatice la metaboliții celulari.
Soković et al a folosit ulei volatil obținut de la Mentha×piperita L., colectat din Pančevo,
Serbia.20 Această regiune geografică este similară cu zona din care a fost obținut uleiul esențial
de mentă utilizat în studiul nostru. Toate uleiurile de mentă testate au arătat activitate
bacteriostatică în concentrație de 1 μg/disc. Zonele de inhibare obținute pentru uleiurile MP au
fost de 16,0–25,0 mm și 13,0–25,0 mm. Efectul antibacterian a fost testat pentru următoarele
bacterii patogene umane: Micrococcus flavus, Enterobacter cloacae, Escherichia coli O157:H7,
Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium,
Staphylococcus aureus și Streptococcus epidermidis. Uleiurile din MP au prezentat o activitate
antibacteriană mult mai mare cu același MIC (1,0–3,0 μg/ml) și MBC (1,5–5,0 μg/ml).20
Cu toate acestea, în literatura de specialitate, există mai puține studii privind activitatea
antimicrobiană a uleiurilor esențiale de MP pe tulpini bacteriene MDR. Shalayel et al au evaluat
activitățile antibacteriene ale extractelor de etanol, acetat de etil, metanol și cloroform pe zece
izolate patogene bacteriene patogene MDR, raportând efectul bactericide al acestor extracte, în
special extractele de acetat de etil, împotriva MDR S. pyogenes, E. faecalis, MRSA, MRSE și e.
coli rezistente la carbapenem și K. pneumoniae.49
De asemenea, s-a observat o activitate antibacteriană puternică a uleiului de arbore de ceai
împotriva microorganismelor MDR, care a prezentat un nivel ridicat de sinergie cu oxacilină
împotriva MRSA.50
În plus, derivații ditiodiketopiperină (izolați din culturi le Trichoderma harzianum și Epicoccum
nigrum din Zingiber officinale și Salix sp.) au manifestat activitate antibacteriană, antifungică și
citotoxică împotriva mai multor microorganisme MDR.51
Pentru moment, se cunosc puține despre moleculele funcționale responsabile pentru activitatea
antibacteriană a MPEO și mecanismul lor de acțiune, mentolul și mentazona fiind principalii
constituenți responsabili de activitatea antibacteriană și cei mai descriși în literatură.52-54 În
plus, asocierea mentolului, mentolului, limonenei, neomenților, carvonei și 1,8 cineolcu cu alți
constituenți minori ar putea induce o activitate antibacteriană sinergică, deși partea plantei
utilizată (rădăcină, frunze etc.); compoziția extractului utilizat, concentrația substanței active și
tipul de microorganism sunt factori extrem de importanți pentru potența acțiunii
antimicrobiene.55-57
În acest studiu, uleiul de MP a avut un efect bactericid asupra tuturor tulpinilor testate bacteriene,
indiferent de fenotipurile rezistente pe care aceste tulpini le-au expus împotriva agenților anti-
infecțioși aplicați în prezent. Diferitele fenotipuri rezistente la beta-lactam ale bacteriilor testate
au fost asociate cu diferențe minore în diametrele zonelor de inhibare, dar cu variații
semnificative ale MIC și MBC, confirmând astfel importanța determinării MIC/MBC pentru
determinarea activității antibacteriene a substanțelor. Rezistența la aminoglicozide,
fluorochinolone, sulfamide, macrolide sau lincosamide nu a influențat activitatea antibacteriană a
uleiului de MP. Ca și în alte studii, speciile bacteriene au influențat semnificativ rezultatele
testelor, cu cele mai sensibile tulpini la uleiul de MP reprezentate de S. aureus, E. coli și Proteus
mirabilis, în timp ce tulpinile Pseudomonas aeruginosa au prezentat cele mai mari valori MIC și
MBC.58
În ceea ce privește corelația dintre parametrii chimici și cei microbiologici, o corelație puternică
a fost înregistrată între compușii mentoni și mentoni (p-Mentha-1,8-diene, p-Mentha-6,8-diene-
2-one, trans-p-mentha-6,8-diene-2-one) și tulpinile bacteriene ale Klebsiella pneumoniae și
Acinetobacter baumannii, care sugerează un potențial efect al mentonului și al derivaților săi în
inhibarea creșterii bacteriene. În ceea ce privește dezvoltarea celulelor Escherichia coli,
Staphylococcus aureus și Pseudomonas aeruginosa în corelație cu compoziția chimică, s- au
observat valori scăzute ale coeficienților Pearson. Aceste constatări conduc la ideea că un nivel
ridicat de mentonă și derivați de menton este responsabil pentru o inhibare pronunțată a tulpinilor
De Klebsiella pneumoniae și Acinetobacter baumannii, fără a afecta dezvoltarea tulpinilor
Escherichia coli, Staphylococcus aureus și Pseudomonas aeruginosa. Efectul microbiologic al
uleiului esențial Mentha piperita poate fi explicat prin sinergia exercitată de componentele
minoritare ale uleiului și compușii derivați din menton. Studiile noastre sunt de acord cu datele
anterioare obținute de grupul nostru care au raportat influența sinergiei compușilor chimici
asupra activității microbiologice a uleiurilor esențiale aparținând familiei Lamiaceae.59
Datorită efectului bactericid al uleiului MP demonstrat asupra bacteriilor MDR, acesta ar putea
deveni un nou agent antimicrobian. MPEO volatil poate fi utilizat la nivel local, prin inhalare în
tractul respirator sau în tratamentul diferitelor infecții ale pielii. Sunt necesare studii
suplimentare pentru a investiga toxicitatea potențială a uleiului de MP și pentru a standardiza
efectul inhibitor al uleiului de MP împotriva agenților patogeni MDR.
Concluzie
Studiul de față evidențiază activitatea bactericidă a MPEO pe toate tulpinile gram-pozitive și
gram-negative testate ale MDR sau XDR: Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella
pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa și Acinetobacter Baumannii. Acest ulei
poate fi o opțiune terapeutică pentru infecții mai multe și mai frecvente cauzate de bacterii MDR
în viitor. În acest scop, ar trebui efectuate studii care investighează, de asemenea, posibilele
efecte adverse ale acestui ulei esențial.
Abrevieri
Ag-, aminoglicozide rezistenta; c, constitutiv; Carba-R, rezistență la carbapenem; CAZ,
hiperproducție cefalosporiinazei; CLSI, Institutul clinic de laborator și standarde; ESBL, beta-
lactamază cu spectru extins; EO, ulei sential; Rezistența la fq-, fluorochinolone; GC-MS,
cromatograf cu gaz-cromatograf cu spectrometru de masă; I, inductibil; Act de identitate,
identificare; LRI, indici liniari de retenție; M-, macrolide rezistență; MBC, concentrație
bactericidă minimă; MDR, multirezistent la medicamente; MLSB, macrolide-lincosamid-
streptograminb b; MIC, concentrație minimă inhibitorie; MH, hidrocarburi monoterpenice; MO,
oxigenează monoterpene; MP, Mentha × piperita L.; MPEO, Mentha × piperita L. ulei esențial;
MRSA, s. aureus rezistent la meticilină; PASE, hipersecreție penicilină; SH, hidrocarburi de
sesquiterpen; Deci, oxigenat sesquiterpene; SXT, rezistenta inhibitorilor de calea acidfolic;
OMS, Organizația Mondială a Sănătății; XDR, rezistent la medicamente pe scară largă.