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A. OBJETIVOS
Con esta práctica de laboratorio se pretende:
1. Observar algunos tipos de células tanto animales como vegetales.
2. Observar estructuras celulares como pared celular, cloroplastos, núcleo,
mitocondrias y ribosomas.
3. Determinar algunas semejanzas y diferencias entre la célula procariota y la
eucariota.
4. Determinar la importancia de ciertos colorantes y soluciones en la identificación
de estructuras y sustancias celulares.
5. Verificar que las células tienen formas y tamaños variables.
B. MATERIALES
Microscopio.
Portaobjetos.
Cubreobjetos (laminillas).
Goteros.
Beakers o frascos pequeños con agua.
Aceite de inmersión.
Palillos de dientes.
Bisturí.
Lugol al 1%
Azul de metileno.
Bulbos de cebolla de huevo.
Elodea (Anacharis sp.)
Papas (Solanum tuberosun).
Placas con sangre humana.
Tela para limpiar.
C. PROCEDIMIENTO
1. Células vegetales.
a. Cebolla de huevo.
Tome una cebolla de huevo y divídala en ocho partes. Note que
consta de varias partes o escamas. Cada capa está recubierta, en ambas
superficies por una membrana transparente formada por células epidérmicas o
epiteliales. Separe una porción pequeña de la membrana externa (que es más
pigmentada y coloreada que la interna). Extiéndala sobre un portaobjetos,
agregue una gota de agua y póngale un cubreobjetos tratando de evitar la
formación de burbujas. Dibuje varias células en 10X y en 40X. ¿Qué forma tienen
las células?
Agregue una gota de solución de lugol a un lado del cubreobjetos y al lado
opuesto ponga un pedazo de papel absorbente para facilitar la entrada del
colorante a la muestra.
Observe nuevamente en 10x y en 40x. ¿Qué diferencia encuentra en relación con
la observación que hizo anteriormente?
b. Elodea
Ponga una hoja de la planta acuática sobre un portaobjetos, agregue una gota de
agua y colóquele un cubreobjetos. Esquematice varias células en 10x y en 40x.
¿Se ve le núcleo celular? ¿Se nota en ellas algún movimiento? ¿Si es así, ¿Cómo
se llaman las estructuras que permiten darse cuenta de ese movimiento? ¿Qué
nombre recibe este fenómeno?
c. Papa
Con una cuchilla quítele la cascara a un pedazo de papa. A continuación saque
porciones en forma de palitos de aproximadamente medio centímetro de ancho.
Luego haga un corte muy delgado, transparente, en uno de los extremos y
deposítelo sobre un portaobjetos, agregue una gota de agua y póngale un
cubreobjetos. Observe que hay un gran número de estructuras transparentes, de
tamaños variables y formas más o menos ovaladas. Estas estructuras también son
plastidios, como los cloroplastos. ¿Cómo se llaman?
Coloree una preparación de lugol. ¿Qué coloración toman los plastidios? ¿Por
qué?
2. Células animales
a. Epitelio de Mucosa oral humana.
Ponga una gota de agua sobre un portaobjeto. Enjuáguese la boca y con un
palillo de dientes haga un raspado suave sobre la pared interna de las mejillas.
Mezcle el raspado con la gota de agua, espárzalo sobre el portaobjetos, póngale
un cubreobjetos y observe con los objetivos de 10x y de 40x. ¿Qué estructuras
observa en estas células?
Coloree la preparación con azul de metileno. ¿Qué diferencias encuentra entre
esta observación y la inmediatamente anterior? Dibuje algunas de las organelas
observadas (membrana celular, núcleo, nucléolo, citoplasma).
b. Sangre humana
La sangre está compuesta de diferentes tipos de células que se encuentran
suspendidas en un líquido llamado plasma. Cada centímetro cubico de sangre
puede contener millones de estas células. Las tres formas de células sanguíneas
son los eritrocitos o glóbulos rojos, los leucocitos o glóbulos blancos y los
trombocitos o plaquetas.
Para observar estas células tome una placa permanente de extendido de sangre,
que ha sido tratada con colorante de Wright, y enfóquela con los objetivos
de 40x y de 100x.
¿Cuántas clases diferentes de células hay? ¿Qué función tiene cada una de las
diferentes tipos de células sanguíneas? Dibuje lo observado con el objetivo de 40x
y con el de 100x.
c. Observación de organismos unicelulares.
En los cuerpos de agua dulce como estanques, humedales, lagos y lagunas
habitan un sinnúmero de formas vivientes unicelulares, que van desde bacterias y
hongos hasta protistas como algas microscópicas. Descubra como en una gota de
agua de un ecosistema acuático habitan diversas formas de vida celular.
1. Coloque con una pipeta una muestra de agua de acuario o laguna.
2. Cúbrala con una laminilla.
3. Observa a menor y mayor aumento, diferenciando los organismos
unicelulares.
4. Dibuja lo observado.
D. OBSERVACION DE CÉLULAS VEGETALES Y ANIMALES.
INFORMACIÓN
Montaje húmedo
vista microscópica
Para el corte de papa se quitó totalmente la cascara que recubre el tubérculo y luego
se realizaron varios cortes transversales, estos debían ser muy finos y
transparentes al verlos a trasluz, en la caja de petri se enjuago el corte para evitar
el exceso de almidón y para lograr notar los diferentes cortes y cuál era el más
indicado para realizarlo, una vez puesto en la lamina, a el corte se le agregó una
gota de lugol para lograr distinguir alguno organelos de la célula También este
corte se observo bajo los tres aumentos principales del microscopio óptico y esto
fue lo observado :
1.2 Corte de papa (4x)
En este corte se puede observar por medio del aumento del lente las divisiones
que la muestra del montaje tiene.
Corte de papa (40x)
Ya en ésta última etapa podemos observar netamente lo mismo que en la
anterior pero con mayor claridad y nitidez, claro está que es debido al tamaño
que éste aumento ofrece.
2. OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES
La célula animal no tiene pared celular (membrana celulosa) y presenta
diversas formas de acuerdo con su función. No tiene plastas a diferencia de las
células vegetales Puede tener vacuo las pero no son muy grandes. Presenta
centriolos: Agregado de microbios cilíndricos que forman los cilios y los flagelos
y facilitan la división celular en células animales.
Las estructuras internas de la célula animal están separadas por membranas.
Destacan las mitocondrias, orgánulos productores de energía, así como las
membranas apiladas del retículo endoplasmático liso (productor de lípidos) y
rugoso (productor de proteínas). El aparato de Golgi agrupa las proteínas para
exportarlas a través de la membrana plasmática, mientras que los lisosomas
contienen enzimas que descomponen algunas de las moléculas que penetran
en la célula. La membrana nuclear envuelve el material genético celular.
Para el montaje de la epidermis bucal humana se realizó un raspado en el
interior de la mejilla con un palillo de abajo hacia arriba, luego se esparció en
toda la lamina o portaobjetos y se le agregó una gota de Azul de metileno y se
coloco la laminilla para proceder a ser observado, al igual que los dos
anteriores, en los tres aumentos principales (4x, 10x, 40x), en esta se debió
enfocar una sola célula, dado que estaban esparcidas por toda la lámina.
Para la segunda parte del laboratorio se realizaron los otros dos montajes los
cuales tuvieron un poco mas de complejidad, en especial la frotis de
sangre. En el montaje de la Elodea se pudo observar claramente un
proceso natural de la célula,
3.1 Método
Hemos de tener en cuenta que esos animales, cuando las condiciones
ambientales son desfavorables, se enquistan, por lo que los meses de frío no son
buenos para su recogida.
Si así fuera, habrá que dejar el recipiente con agua en un lugar iluminado y a una
buena temperatura durante varios días antes de su observación al microscopio.
Cuando tomemos unas gotas de agua con un cuentagotas y puestas a la lupa
observemos “actividad biológica”, es el momento de poner una gota de un
portaobjetos y visualizarla al microscopio, una vez hemos colocado encima un
cubre objetos con cuidado de no aplastar demasiado la gota.
El tiempo de exposición ha de ser pequeño, porque de lo contrario se nos secaría
el medio y morirían los organismos, con lo que pueden adoptar formas muy
lejanas de la realidad biológica.
3.2 Observaciones
Los protozoos son animales unicelulares de sistemas de órganos simples, por lo
general de tamaño microscópico, y que pueden formar colonias.
Viven libres en medios acuáticos tanto dulces como salados, así como parásitos o
comensales en el interior de los seres vivos.
Los de vida libre son de sumo interés en las cadenas tróficas, pues los hay
productores (Autótrofos) y consumidores (Carnívoros), etc. Existen siete filos a
cada cual más interesante, pero en aras a la brevedad y con la intención de dar
una idea general de cómo son estos desconocidos seres, vamos a recurrir a tomar
agua de cualquier charca y dedicarnos a observarla durante varios días.
Los primeros órdenes que aparecen son:
1. Orden Dinoflagellida
Su forma es redondeada con una floja estrangulación a modo de cinturón
transversal que divide al protozoo en dos porciones o tecas: Epiteca e Hipoteca, y
otro perpendicular al primero y en su intersección surge un largo flagelo.
Dentro de este orden, los géneros más frecuentes que podemos encontrar son :
Dinophisis: Con los bordes del surco transversal y longitudinal con
prolongaciones
Piridinium: Con una prolongación en la epiteca y dos apéndices en la
hipoteca.
Ceritium: Con una larga prolongación (mayor que en Peridinium) en la
epiteca y largos apéndices en la hipoteca.
En una muestra de agua de charca, los géneros que posiblemente se vean son:
Euglena: Son de color verde y poseen un pirenoide. Su tamaño está
entre 20 y 400 micras. Destacan las especies: Euglena gracilis y
Euglena desses.
Más adelante surgirán órdenes del Subfilo Sarcodina, caracterizados por poseer
Seudópodos de función locomotora, así como en algunos casos caparazones,
esqueletos que permiten la salida de pseudópodos de varios tipos: finos,
transparentes y ramificados pero no anastomosados, o gruesos y redondeados, o
finos y rectos, etc.
A. COMPARACIONES
Unos de los grandes dilemas de la vida es que aunque exista un gran
conocimiento teórico, nunca puede llegar a equilibrar la práctica del mismo, por lo
tanto la comparación fundamental de la existencia es llevar lo escrito al verbo.
En los libros, en la tutoría y en general las fuentes de conocimiento que fueron
utilizadas antes de los procesos realizados representaron un papel fundamental en
la correcta elaboración de los procesos experimentales referentes a la célula, sin
embargo al momento de utilizar el microscopio fuimos conscientes de las
limitaciones que éste representa frente a la completa determinación de los
diferentes organelos, aquellos que desafortunadamente no lograron lucir como lo
anteriormente investigado, sin embargo fue posible identificar las partes más
fundamentales de las células comprobando así que la importancia de la actividad
de cada organelo es directamente proporcional al tamaño del mismo.
B. ANÁLISIS DE LA INFORMACIÓN
Hoy en día al igual que desde el comienzo de los tiempos los seres pensantes se
han preguntado acerca de la vida y el porqué de ésta, por lo tanto al momento de
descubrir la célula, o como le llaman algunos: “el origen de todo ser vivo”, se
puede atribuir la gran importancia que merece. Con el transcurrir de los años la
información acerca de la célula ha ido avanzando gracias a las invenciones
científicas que cada vez hacen más posible hallar el sentido de todo cuanto nos
rodea, un ejemplo claro de éste es el hecho de poder identificar las partes
fundamentales de la unidad estructural y funcional de los seres vivos (la célula),
con éste innovador instrumento científico que es el microscopio manual, sin
embargo la vida transcurre y con ésta aumenta el interés por saber más, debido a
esto se ha creado la inconformidad con la no claridad de que al momento de
querer identificar todos los diferentes organelos que conforman la célula no sea
posible llegar a hacerlo, por lo tanto surge dentro de la curiosidad de quien
aprende el hecho de tomar como nuevo instrumento de trabajo el nuevo
microscopio electrónico, el último a saber que ha logrado revolucionar con toda la
historia de éste gran invento.
Por otro lado la teoría y la práctica se hayan encontradas en el momento en el que
se comprueba la una en la otra identificando básicamente la congruencia de la
fisiología y estructura de los dos tipos de célula, detalles claramente definidos y
comprobados, en éste momento del proceso es interesante y gratificante ver como
se puede entender el porqué de lo que aparece consignado en los libros y dejar a
un lado la idea de que todo se hace por inercia, ya que todo tiene una razón de ser
y esa es la causa del avance tanto del hombre individual y en sociedad, por lo
tanto consideramos fundamental entender el hecho de empezar por el comienzo
para poder dar un paso adelante. Que claro está es nuestra meta a seguir.
Al momento de realizar un proceso es fundamental el hecho de manejar bien los
instrumentos y pasos a seguir dentro del mismo, por lo tanto aprendimos a
correlacionar con los medios de trabajo como lo fueron, en primer lugar: la
instrumentación brindada de parte del tutor (profesor Martín Barrera), el laboratorio
del Colegio Colombo Británico, al que tenemos acceso y las diferentes ayudas
como los colorantes e instrumentos, confirmando una vez más lo fundamental de
la ciencia en nuestros días
CONCLUSIONES
1. Después de haber realizado de una manera óptima los procesos inicialmente
planteados en la práctica de laboratorio, se puede llegar a determinar y
comprender la importancia del avance de la ciencia en el campo de la citología,
éste convirtiéndose en un sinónimo del avance personal de quien quiere aprender
y acomodarse a las etapas de crecimiento del mundo, por lo tanto en ésta parte de
finalización dejaremos claro el grande interés en comprender el porqué de las
cosas, en éste caso la trascendencia del trabajo celular en la estructuración de la
vida misma.
2. Por otro lado llegamos al punto de establecer, claramente, la importante
posición que la previa preparación de un proceso de éste tipo implica, por lo tanto
la teoría sigue y seguirá representando un papel fundamental si se habla de una
respuesta óptima que cumpla con todas las expectativas planteadas
anteriormente, sin olvidar que las limitaciones del material deben ser superadas en
algún momento por alguien que al igual que todos los descubridores se dejan
llevar por la curiosidad de llegar a respuestas claramente establecidas pero sin
desarrollar en el campo de la ciencia.
3. Dejando a un lado las conclusiones generales pasaremos a lo netamente
relacionado con el tema de la Célula; es paradójico notar cómo es que las
diferencias que nos separan de los vegetales están claramente definidas, ya que
desde la unidad más pequeña hasta el momento descubierta se marca
claramente, desde su morfología hasta su funcionamiento, las grandes distancias
existentes respecto al ser humano tanto como el animal, en éste caso enmarcados
en un mismo grupo (célula animal).
4. Es impresionante cómo es que un sencillo aumento de un lente puede abrirnos
las puertas a un mundo antes desconocido, gracias a esto es que surge una
interrogación muy objetiva respecto a lo que existe pero que aún no ha sido
descubierto, quizá más adelante con las otras generaciones, la célula pasará a un
segundo lugar en el que existirá una unidad aún no descubierta en la que se
resuma el porqué de la existencia, de la vida; esa es la realidad del avance del
conocimiento humano que ha estado presente desde el comienzo y no terminará
mientras el ser humano continúe en la búsqueda de respuestas científicas a sus
interrogantes.
5. Un ser vivo es un conjunto de tejidos, a la vez estos están formados por un conjunto de órganos
y estos por un conjunto de células. De lo anterior se infiere que la unidad más pequeña de un ser
vivo es la célula.
6. Este trabajo de laboratorio fue enfocado especialmente a la observación de células vegetales.
7. En este laboratorio se observó el tejido de cebolla, dentro de este tejido se encuentran un grupo
de células con sus determinados elementos. Para apreciar estas células se utilizo una herramienta
de suma importancia para nuestro objetivo El Microscopio, las observaciones con este instrumento
arrojaron las formas hexagonales de las múltiples células constituidas en el trozo de tejido de
cebolla. Los aumentos de los lentes utilizados fueron de 4X, 10X, 40X, observándose nítidamente
las células, el aumento 100X también fue utilizado, pero sin un mayor provecho para nosotros, ya
que con este lente no fue posible aumentar más o ver más nítidamente nuestro objetivo.
8. Cabe señalar que aunque pudimos ver las células del tejido de cebolla no pudimos observar sus
distintos componentes, esto es porque el microscopio utilizado no es el más potente. Con un
microscopio de mayor definición como es el microscopio electrónico se podrían haber visto todos
los elementos celulares, ya sea membrana, bacterias, hongos, etc.
9. Lo observado en laboratorio fue de células de forma más bien rígidas, esto es por la pared
celular de los vegetales, esta pared es más gruesa que la de los animales, por esto es que las
distintas células vegetales forman figuras más bien geométricas.
10. Al ponerles una tinción (azul de metileno) estas células se pudieron ver con mayor definición, a
la vez hubo múltiples reacciones donde esta tinción, más específicamente con el azul de metilo, se
observo que al parecer desintegraba la célula en sus distintos componentes, pudiéndose ver
grupos de partículas que daban la impresión de ser fibras y otras agrupadas que se dedujo que
podrían ser distintos componentes de la célula.
11. Otro detalle importante observado es el de las vacuolas, estas se encuentran solamente en los
vegetales y en gran tamaño, estas son contenedoras de diversos elementos, como son, sales
minerales, nutrientes, proteínas, etc.
BIBLIOGRAFIA
TERESA AUDESIRK, Biología, La vida en la tierra. Ed. Pearson, México, 2003.