UNAM

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

Análisis de Fármacos y Materias Primas II

Sulfato de quinina. Técnica fluorometría, comparación con

un estándar.

Semestre: Quinto
Grupo: 2503
No. de equipo: 1
Fecha: 7 de marzo del 2017
Elaboró informe Revisó informe: Aprobó informe: Aprobó informe:
Nombre(s) y firma Nombre(s) y firma Nombre(s) y firma Nombre(s) y firma

Calificaciones

Nombre alumno Evaluación Experimental

Informe Bitácora

Cruz Izaguirre Diego

Cruz Sánchez Daniela

Cuevas Jacinto Jessica Guadalupe

Sánchez Bello Brenda Evelia

ANTECEDENTES
La fluorescencia es un proceso de emisión en el cual las moléculas son excitadas por la
absorción de la radiación electromagnética, esas moléculas al relajarse a su estado
fundamental, liberan su exceso de energía en forma de fotones. En otras palabras, una
molécula absorbe luz de una determinada longitud de onda, la energía asociada a esa λ 1
provoca un estado electrónico más alto en la molécula, al perder el exceso de energía
regresa a su estado basal emitiendo esta energía radiante a otro λ 2, lo que se llama
fotoluminiscencia tarda de 10−9 a 10−7segundos, si tarda 10−4 el proceso se llama
fosforescencia. La λ 1 es menor a la λ 2, esto es, la primera tiene más energía que la segunda.
La intensidad de la fluorescencia F es proporcional a la radiación absorbida por las
moléculas, derivando de manera a la Ley de Beer, se tiene que F=KC K=2.303 Eb.
Los factores que afectan a la fluorescencia son:
Rendimiento o eficiencia cuántica: es la relación entre el número de moléculas que
emiten fluorescencia respecto al número total de moléculas excitadas, se saca de la
constante de velocidad de fluorescencia y depende de su estructura.
Estructura: compuestos aromáticos aumentan la fluorescencia, estructuras alifáticas
y alicíclicas de carbonilo tiene mediana fluorescencia; la eficiencia cuántica
aumenta con el número de anillos y su grado de conjugación, la rigidez estructural
aumenta la fluorescencia. La sustitución por halógenos disminuye la fluorescencia
con el aumento atómico del halógeno.
Tipo de transición: π-----> π* tiene más eficiencia cuántica que Ƞ----->π*
Temperatura: la fluorescencia disminuye al aumentar la temperatura ya que aumenta
el número de choques y se pierde energía sin emisión de radiación.
Disolvente: disminuye la fluorescencia con disolventes pesados (bromuro de
carbono, yoduro de etilo) por formación de estado triplete excitado, aumenta la
fluorescencia con disolventes viscosos al disminuir el número de coaliciones entre
las moléculas y con disolventes polares.
pH: afecta cuando existen grupos funcionales ácidos o básicos en la molécula
analizada ya que se asocian diferentes especies resonantes al cambiar el pH.
Oxígeno disuelto: disminuye la fluorescencia por propiedades paramagnéticas del
oxígeno favoreciendo cruce de sistemas.
Concentración: es directamente proporcional a la fluorescencia, en altas
concentraciones ocurre la autoextinción y auntoabsorción.

Espectrofluorometro
Fuente de Selector Selector de
Celda Detector Medidor
radicación de λex λem

Componentes de un fluorómetro de un solo

haz
Fuente de radiación: arco de mercurio, arco de xenón (300 a 1300 nm)
 Selector de λ : puede ser filtro de interferencia o monocromador de red, el primario
selecciona la λ a la que se excita la molécula, el secundario selecciona la λ que
emite la muestra; el secundario se coloca a 90° de la muestra porque de esta manera
se evita la dispersión producida en la disolución y las paredes de la celda ya que la
fluorescencia se da en todas partes.
Celda: son de vidrio y sílice
Detector: son tubos fotomultiplicadores, diodos en serie, etc.
Aparato de medida: micro amperímetros, etc.

Las características analíticas de la fluorometría son: muy selectivo, límite de detección de

10−7 a 10−9, se usa con minerales, compuestos metálicos, sustancias policíclicas, es rápido y
económico.

OBJETIVO
Determinar el porcentaje de pureza del sulfato de quinina como materia prima utilizando
como técnica fluorometría mediante la comparación con un estándar.

HIPÓTESIS
Contiene no menos del 99.0% y no más del 101.1% de sulfato de quinina calculado como
alcaloides totales y en relación con la sustancia seca. Según la Farmacopea de los Estados
Unidos Mexicanos, undécima edición página 1297.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

 •Preparación del estándar

Se pesó 0.0112 gr del estándar de Sulfato de quinina en la balanza número 3, se vertió en
un matraz volumétrico de 100 ml y se disolvió con agua hasta el aforo, posterior a esto se
tomó una alícuota de 1 mL con una pipeta volumétrica y se vertieron en un matraz de 100
mL se aforo nuevamente con agua, se tomó una alícuota de 2 mL de esta solución con una
pipeta volumétrica y se vertió a un matraz de 10 mL.

 •Preparación de la muestra.1
Se pesó 0.0129 gr de sulfato de quinina en la balanza número 3, se vertió en un matraz
volumétrico de 100 mL y se disolvió con agua hasta el aforo, posterior a esto se tomó una
alícuota de 1 mL con una pipeta volumétrica y se vertieron en un matraz de 100 mL se
aforo nuevamente con agua, se tomó una alícuota de 2 mL de esta solución con una pipeta
volumétrica y se vertió a un matraz de 10 mL.

 •Preparación de la muestra.2
Se pesó 0.0109 gr de sulfato de quinina en la balanza número 3, se vertió en un matraz
volumétrico de 100 mL y se disolvió con agua hasta el aforo, posterior a esto se tomó una
alícuota de 1 mL con una pipeta volumétrica y se vertieron en un matraz de 100 mL se
aforo nuevamente con agua, se tomó una alícuota de 2 mL de esta solución con una pipeta
volumétrica y se vertió a un matraz de 10 mL.
  •Preparación de la muestra.3
Se pesó 0.0115 gr de sulfato de quinina en la balanza número 3, se vertió en un matraz
volumétrico de 100 mL y se disolvió con agua hasta el aforo, posterior a esto se tomó una
alícuota de 1 mL con una pipeta volumétrica y se vertieron en un matraz de 100 mL se
aforo nuevamente con agua, se tomó una alícuota de 2 mL de esta solución con una pipeta
volumétrica y se vertió a un matraz de 10 mL.

 Medición de las absorbancias.

Se prendió el flurímetro 15 minutos antes de usarlo posteriormente se calibro con el blanco
(agua destilada) una vez realizado esto se prosiguió a medir las absorbancias, de la solución
estándar de sulfato de quinina, y de la solución problema.

PROPIEDADES E INSUMOS

*Sulfato de quinina

-CAS: 130-89-2
-PM: 360.88 anhidro y 396.88 di hidratado
-Descripción: Se presenta en forma de cristales aciculares, finos, blancos y por lo general
sin lustre formando una masa ligera y fácilmente comprimible. Inodoro y de sabor muy
amargo persistente. Expuesto a la luz adquiere un tinte pardo.
Solubilidad: Fácilmente soluble en una mezcla de cloroformo – etanol (2:1); ligeramente
soluble en agua a 100 °C, poco soluble en agua, etanol y cloroformo, muy poco soluble en
éter etílico.
-Identificación: Acidifíquese con ácido sulfúrico diluido en una solución acuosa de sulfato
de quinina, la solución revea una fluorescencia azul vivo.
-Propiedades farmacológicas: Es un alcaloide natural que se extrae de la corteza desecada
de ciertas plantas rubiáceas (cinchona calisaya). Es un antipalúdico con acción supresiva
sobre el Plasmodium falciparum, pero su acción es mucho menos potente que los derivados
de las 4-aminoquinolinas (cloroquina), de allí que sólo se la emplee en pacientes con
paludismo resistente a la cloroquina. No tiene acción profiláctica causal ya que no actúa
sobre los esporozoítos ni sobre las formas preeritrocíticas o exoeritrocíticas. Desarrolla
sinergismo al asociarse con la pirimetamina; desarrolla además un efecto hipotérmico en
sujetos febriles con producción de termólisis, pérdida de calor al actuar sobre el centro
termorregulador. Los efectos de la quinina sobre el musculoesquelético se producen según
tres mecanismos: 1) incremento del período refractario (acción directa sobre la fibra
muscular), 2) disminución de la excitabilidad de la placa neuromuscular (acción similar a la
del curare) y 3) alteración de la distribución del calcio dentro de la fibra muscular. Se
absorbe rápidamente por vía oral, es degradada extensamente (sólo 5% se excreta inalterada
en la orina). Se une en alto grado a proteínas plasmáticas y se excreta a doble velocidad en
la orina ácida que en la alcalina. Vida media: 4-5 horas. La quinina alcanza en el LCR sólo
2% a 5% de la concentración plasmática. Atraviesa la barrera placentaria y ocasiona daños
al feto.

* Ácido sulfúrico
Fórmula molecular:H2SO4
Peso molecular:98.08gr
Numero CAS:7664-93-9
Aspecto: Transparente incoloro.
Olor: Inodoro en frío, picante en caliente.
Estado físico: Líquido.
Densidad relativa (H2O=1), 25ºC 1,836
Solubilidad en agua (g/100g): Muy soluble en agua.
Temperatura de cristalización: 0ºC
Temperatura de descomposición térmica: 338ºC
Materias a evitar: Agua, metales alcalinos, compuestos alcalinos, amoniaco, metales
alcalinoterreos, soluciones de hidróxidos alcalinos, anhidruros, halogenuros de
halógeno, halogenados, permanganatos, nitratos, carburos, sustancias inflamables,
disolventes orgánicos, acetiluros, nitrilos, nitrocompuestos orgánicos, anilinas,
peróxidos, picratos, nitruros, litio, siliciuro, hipocloritos, cloritos, cloratos, oxidantes
fuertes.
.
INSUMOS
Material Material para Equipo Reactivos
general
contener y medir
Celdas de 4 Vasos de precipitados Fluorímetro Sulfato de quinina
vidrio o sílice 150 mL estándar al 90%
Turner® Model 1450
8Vasos de precipitados Fluorometer
1000 mL

1 Vaso de precipitados
de 30 mL
Gotero Una Pipeta volumétrica Balanza analítica Sulfato de quinina
de 1 y 2 mL. Número 3 XB220A
Inventario 08002661
Papel suave Pipeta graduada de 5 Agua inyectable
mL
4 Matraces aforados de Solución 0.1 N de
ácido sulfurico
10 y 100 mL

RESULTADOS
1.- Concentración del estándar
Peso del estándar: 0.0112 g Pureza del estándar: 90 %

0.0112 g 1 mL 2 mL 90 g 1 X 106 µg
( )( )( )( )( )= 0.2016 µg/ mL
100 mL 100 mL 10 mL 100 g 1g

2.- Concentración de la muestra problema

Para obtener la concentración de las muestras problema se utilizó la siguiente formula
Ce Fp
Cp =
Fe
Dónde:
Cp= Concentración del problema
Ce= Concentración de estándar
Fp = Fluorescencia de la muestra problema
Fe= Fluorescencia del estándar

Número de Concentración Fluorescencia Fluorescencia de Concentración de

muestra del estándar del estándar la muestra la muestra
µg/mL µg/mL
1 595 0.19728
2 0.2016 608 548 0.13170
3 861 0.28548

Tabla 1. Fluorescencia y concentración de sulfato de quinina (materia prima) mediante

fluorometría.

3.- Concentración de sulfato de quinina.

Para conocer la concentración en µg se utilizó la siguiente formula: (Cp)(FD)
Donde:
Cp = concentración de la muestra problema
10 mL 100 mL
FD = Factor de dilución = ( )( )(100 mL)
2 mL 1mL
Fórmula final:
µ g 10 mL 100 mL 1g
(Cp )( )( )(100 mL) ( 6 µ g ) = g
mL 2 mL 1mL 10

Número de muestra Concentración de la Concentración de la

muestra problema (µg/mL ¿ muestra problema por el FD
(g)

1 0.19728 9.86445X10−3
2 0.13170 9.08525X10−3
3 0.28548 1.42744X10−2

Tabla 2. Concentración en g de sulfato de quinina. En base a las concentraciones de las

muestras obtenidas en la tabla 1 multiplicadas por el factor de dilución.
4.-Calculó del porcentaje de pureza
Se calculó mediante una regla de 3.
g pesados 100 %
concentración de la muestra en g x%

Número de Pesadas de Concentración de la Pocentaje de pureza % de la

muestra sulfato de la muestra problema muestra
muestra (g) por el FD
(g)

1 0.0129 9.86445X10−3 76.4686%

2 0.0109 9.08525X10−3 83.3509%
3 0.0115 1.42744X10−2 124.125%
Tabla 3. Porcentaje de pureza de cada muestra de sulfato de quinina.

5.- Calculo del promedio de porcentaje de pureza de las muestras, desviación estándar y
coeficiente de variación.
Se emplearon las siguientes formulas
X + X 2 +…+ X n
*Promedio X́ = 1
n

* Desviacion estandar :
Donde : X = cada dato
X́ = Promedio de los datos
n= numero de datos
*Coeficiente de varacion %CV=¿)100
Número de Pocentaje % de Promedio Desviacion Coeficiente de
muestra pureza de la X́ estandar variacion
muestra S %CV
1 76.4686% 79.90975% 4.866521 6.09002
2 83.3509%
Tabla 4 . Promedio de porcentaje de pureza de las muestras, desviación estándar y
coeficiente de variación, eliminando los resultados de la muestra 3.

CRÍTICA A LA TÉCNICA USADA

Empleando la técnica de fluorescencia se llevó a cabo la cuantificación de la
solución de Sulfato de Quinina mediante la comparación con un estándar. Se
realizó sin percances y en un periodo de tiempo corto. La técnica permitió analizar
al analito realizando varias disoluciones al estándar (a diferencia de una curva de
adición de estándar).

ANÁLISIS DE RESULTADOS
Para el análisis de resultados y cálculo de X́ , S y %CV se tomó únicamente en cuenta la
muestra 1 y 2. Se descartó la muestra 3 debido a que considerando esta muestra la
desviación estándar seria 25.7585 a su vez el coeficiente de variación seria de 27.2150%.
Se atribuye lo anterior a errores aleatorios en la elaboración de la muestra 3 por parte de los
experimentadores, principalmente a contaminantes en los matraces volumétricos empleados
en su elaboración.

El por ciento de pureza de sulfato de quinina como materia prima es de 79.9095 % ±

6.09002, siendo resultados no confiables ya que el CV ˃3 %. Se recomienda un reanálisis.
Considérese que la farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos 11a ed pp 1297 establece
el porcentaje de pureza del sulfato de quinina para la sustancia seca , y la muestra analizada
podría encontrarse hidratada.

CONCLUSIÓN
El porcentaje de pureza de sulfato de quinina como materia prima es de 79.9095 % ±
6.09002, por lo cual no cumple con los establecido con la la Farmacopea de los Estados
Unidos Mexicanos, undécima edición página 1297. “Contiene no menos del 99.0% y no
más del 101.1% de sulfato de quinina calculado como alcaloides totales y en relación con la
sustancia seca”.

GRUPO FUNCIONAL CUANTIFICADO

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
•Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos 11a ed. México: Secretaria de Salud;
pp.1297.
•Clarke´s Analysis of Drugs and Poisons in pharmaceuticals, body fluids and postmortem
material. Fourth edition. Pharmaceutical Press. London. Chicago. pp 1519-1520.
•Kenneth A. Connors Curso de análisis farmacéutico (ensayo del medicamento) Editorial
Reverté, S.A. España 1981. pp 258-270

ANEXO
Preparación del estándar:

10 mg sulfato de quinina estandar 1mL H 2 SO 2mL H 2 SO 1000 µ g

( )( )( ¿( ) = 0.2 µg/mL
4 4

100 mL H 2 SO
4
100 mL H 2 SO 10 mL H 2 SO 1 mg
4 4

Preparación de la muestra

10 mg sulfato de quinina 1mL H 2 SO 2mL H 2 SO 1000 µ g

( )( )( ¿( ) = 0.2 µg/mL
4 4

100 mL H 2 SO
4
100 mL H 2 SO 10 mL H 2 SO 1 mg
4 4

Preparación de 1L de H2SO4 0.1N

0.1 equivalentes 98.08 g 1 mL 98 g

1L H2SO4 ( )( )( )( )= 2.61 mL H2SO4
1L 2 equivalentes 1.84 g 100 g