Microbiología Periodontal 24/Octubre/2019

Conceptos básicos de microbiología y métodos de estudio de los

microorganismos
Virus: organismos no celulares
Microbiología-rama de la ciencia que estudia a los microorganismos
Microoganismos-formas muy pequeñas de vida que generalmente requieren de
magnificación para ser observadas
Células- unidad organizacional fundamental de todo sistema vivo. Base esencial de
organización, crecimiento, metabolismo, reproducción y desendencia

Origen Evolutivo de las especies

ARBOL DE LA VIDA
Dominos- bacteria-archaea-eucariotes
Reinos- Fungi-animalea-plantae-alga-protozooarios
Todos los organismos viene de un ancestro común
Bacterias y archaea son los mas parecidos al
ancestro común.
Virus organismos que no tienen envoltura celular
Células procariontes- arquea- bacterias
Células eucariontes- hongos-algas-protozooarios

- altamente organizadas
- capaz de crecer y desarrollarse
- Contienen la misma molécula hereditaria
(DNA)
- Expresan la información genética en el DNA mediante los procesos de
transcripción y traducción.
ORGANIZACIÓN
Unicelular- cada organismo compuesto por una sola célula
Multicelular-Grupos de células asociadas para formar un tejido
HISTORIA
Antony van Leewenhoek(1632-1723)- descubrió organismos celulares
Louis Pasteur(1822-1895)- vacuna contra la rabia, rechaza teoría
generación espontánea, pasteurización.
Robert Koch(1843-1910) postulados de Koch
Joseph Lister(1827-1912)- asepsia y antisepsia
Alexander Fleming(1861-1955)- penicilina, por que sus cultivos se contaminaron con
penicilium notatum.
Rosalin Franklin-descubrio el ADN.
ESTRUCTURA GENERAL DE LAS BACTERIAS
1. Cromosoma bacteriano (DNA)
2. Ribosomas(RNA)
3. Inlcusiones citoplasmáticas
4. Membranas citoplasmáticas
5. Pared celular( peptidoglicanos)
6. Cápsula
7. Fimbrios,pilis o pilus
8. Flagelos
CLASIFICACIÓN, IDENTIFICACIÓN Y NOMENCLATURA
Clasificación: distribución de microorganismos en grupos taxonómicos de acuerdo con
similitudes o relaciones
Nomenclatura: Asignación de nombre a los grupos taxonómicos clasificados siguiendo
reglas internacionales
Identificación: proceso mediante el cual se determina a que grupo taxonómico
pertenece un grupo
Genero:
Homo sapiens en cursiva en computadora
Escrito va subrayado por que esta escrito en latín
Porphyromonas gingivalis
F. nucleatum subsp. Nucleatum
METODOS DE ESTUDIO

BIOPELICULAS
¿Qué son las biopelículas?
En la zona subgingival cambian más la
cantidad de microorganismos por la
superficie que pueden adherirse a dentina
y epitelio.
Las biopelículas solo crecen en donde hay liquido con lo que puedan
envolverse.
Las biopelículas son comunidades bacterianas fuertemente asociadas entres si, envueltas en
una matriz de exopolisacáridos, que se adhieren a superficies naturales (dientes) o
artificiales(implantes, tuberías catéteres, etc..) y que están rodeadas de un fluido.

FORMACIÓN
Adhesión y colonización- una vez que se adhiere
puede comenzar la colonización
crecimiento-Comienza la colonización y llegada de
microorganismos
Maduración y Migración- por medio del quorum
sensing
MATRIZ EXOPOLISACÁRIDOS
- Estimula la adhesión inicial de las células
- Mantener la estructura de las micro-colonias
- Resistencia al estrés ambientes (antibióticos,
cel. De defensa, protozoarios)
- Retener nutrientes
Una de las características comunes de todas las biopelículas es que contienen canales para el paso
de nutrientes
Quorum Sensing: medio de comunicación, inhibe el crecimiento.
Impacto en la salud humana
Como se determinó la resistencia a los antibióticos- se inhibió el gen que produce matriz
exopolisacáridos (gen mutado) y se les dio antibiótico.
La resistencia a los antibióticos en las biopelículas se da por:
-Ritmo de crecimiento lento
Modificación directa de los antimicrobianos por la
presencia de la matriz de polisacáridos y enzimas
dentro de la biopelícula.
-Transferencia de genes de resistencia

COAGREGACIÓN BACTERIANA
COMPLEJOS BACTERIANOS
Los colonizadores primarios actinomices, estreptococos, y puedes intra-relacionarse.
Colonizadores puente complejo naranja (patógenos putativos)
Complejo rojo especies periodonto patógenas.
PIRAMIDE ECOLÓGICA
Formación normal de la biopelícula dental
La pirámide representa las proporciones de los complejos.
Dentro de la biopelícula se consideran benéficos colonizadores tempranos
Actinomyces sp.
Streptococcus sp.
Capnocytophaga sp.
Vellonella sp.
Después de 4-12 hrs después de limpieza profesional

Patógenos putativos
Fusobacterium sp.
Prevotella sp.
Campylobacter sp.
Después de 12 horas de limpieza profesional
Patógenos (colonizadores tardios)
Porphyromonas
A principios de 1960 se
Comensales- forma de interacción en que uno de los intervenientes obtiene un beneficio.
Gibbons y Nygaard descubrieron la coagregación de bacterias
Se lleva a cabo por interacciones bacterianas, una azúcar es capaz de romper estas uniones.
Inhibición por carbohidratos
Inhibitorias- lactosa
No inhibitorias- sacarosa
Que ayudan o no a la adhesión bacteriana
Disociación por lactosa solo in vitro no en boca
Puentes de coagregación
Polisacáridos y adhesinas
COMPETICIÓN POR COAGREGACIÓN
Un mismo microorganismo tiene múltiples receptores y compite con otros microorganismos
Principios básicos de agregación (alta especificidad, puente, competencia y similitud funcional)
Ritz 1967 describe los cambios en la composición microbiana de la placa supragingival durante
observación en 9 días
El desarrollo de la placa subgingival está directamente influenciado por el ambiente supragingival.
DIVERSIDAD BACTERIANA
Realizaron un estudio con unidad ribosomal 16s (es la forma de identificar a las bacterias) comparan
una secuencia con otra secuencia de ARN.
50% de las bacterias han sido cultivadas
Identidicación filotipos: grupo taxonómico definido por el grado de similitud entre las secuencias
del gen 16s y no por características fenotípicas.
Filotipo: grupo de secuencias de clones que diferencian de las especies
TM7- bacterias derivados del suelo y sedimentos de aguas profundas.
Dferribacteres c4 de los filotipos encontrados, prevalecieron en la GUNA

Microbiología de la Periimplantitis
Implantes: Son un excelente método para reemplazar dientes pérdidos
Biomateriales
-Titanio- aleaciones de titanio
PERIIMPLANTITIS
Proceso inflamatorio destructivo que afecta los tejidos duros y blandos alrededor del implante
oseointegrado, formado bolsas peri-implantares y pérdida de hueso de soporte.
1st European Workshop on Periodontology, Ittinger, Switzerland, 1993
Análisis microbiológicos de implantes mostraban pérdida ósea, revelaron una microbiota similar a
la encontrada en pacientes con algún tipo de periodontitis.
Mombelli
BIOPELICULAS
Son asociaciones de microorganismos, ciertas proteínas son capaces de adherirse al esmalte y
formar una película adquirida, en implantes también algunas proteínas van a poder adherirse a la
superficie del implante, pero va a ser de una composición diferente.
1000 veces más resistencia a cualquier antibiótico.
FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ADHESIÓN BACTERIANA
- La bacteria que se adhiere:
a) La hidrofobicidad de la superficie de la bacteria
b) Carga superficial (Fuerzas de van der Waals)
c) Múltiples especies (en el caso de cavidad oral
- La superficie:
a) composición química (ti, SS, Ti/Al/Va, etc)
b) Rugosidad superficial (Topografía) en el implante una rugosidad e 2 micras favorece la
oseointegración y si se aumenta va a ser más propenso a una agregación bacteriana
c) Hidrofobicidad o hidrofilicidad de la superficie.
- El medio liquido: Tipo de medio (saliva, sangre, Fc, medio de cultivo)
- temperatura, ph, tiempo de exposición, tensión, superficie del medio.
ESCALA DE RUGOSIDAD
Nano, micro, micro+ nano
Cuando el ángulo de contacto es mayor es una superficie más hidrofóbica, energía superficial baja
Cuando el ángulo de contacto es menor es una superficie más hidrofílica, energía superficial alta
INFECCIONES EN LOS DISPOSITIVOS MÉDICOS
En presencia de una biopelícula, las células del huésped no se adhieren a la superficie del implante.
2. No hay biopelículas si se adhieren a la superficie del implante.
Películas delgadas de:
- Carbono amorfo+ plata
- Óxidos de Ti, Zr, Nb
- Polielectrolitoc(quitosán)
- Superhidrofóbicos

Modificaciones superficiales en Biomateriales

Las modificaciones superficiales se realizan para mejorar la respuestas biológicas
Topográficas ( rugosidad y porosidad)
- Prop. Bioquimicas (liberación de iones y adsorción de biomoléculas).
- Prop. Micro-mecánicas (resistencia al desgaste)
CUAL ES LA DIFERENCIA DE LA DUREZA DEL HUESO CON EL TITANIO Y OXIDO DE
ZIRCONIO –EXAMEN—
Los implantes mas utilizados para muestras es
Acero inoxidable
Titanio
OBJETIVOS:
Ver como se forma la biopélicula, describir la formación inicial de las biopelículas y su
comparación con medio de cultivo.
Efectos de el tratamiento de la superficie de los implantes también intervienen en la
agregación de elementos celulares
Articulo de Mombelli

EFECTOS DE LOS ANTIBIOTICOS EN LA MICROBIOTA PERIODONTAL

¿Por qué no está establecido un protocolo de terapia antibiótica?
1. Por la microbiota múltiple
2. Por la estructura de la biopelícula
3. Por la cantidad de medicamento en el fluido crevicular
A principios del siglo XX surgieron terápias enfocadas a la eliminación de los agentes
microbianas que se creía causaban las enfermedades periodontales(amibas, espiroquetas,
fusiformes y estreptococos)
Estas terapias incluían:
-Vacunas: pero las bacyterias están en bocas son endógenas, ya que hay anticuerpo para esto-
Terarapia con luz Uve
Actividad antimicrobiana
Existen dos factores que deben ser considerados para la elección de antibióticos sistémicos
utlilizados en el tratamiento de las enfermedades periodontales:
- La concentración que el antibiótico alcanza en el fluido crevicular(Cgcf)
- La concentración mínima inhibitoria del antibiótico (CMI)
Actividad antimicrobiana= Cgcf/ CMI
MECANISMOS DE ACCIÓN DE FARMACOS SOBRE LAS ESTRUCTURAS BACTERIANAS
1. Inhibicion de la síntesis de la pared celular
2. Alteración de la membrana
3. Inhibición de la sínstesis de proteínas
4. Inhibición de la síntesis de ácidos nucleicos
Modo de acción sobre las estructuras bacterianas

Inhibicion de la síntesis de la pared---- Penicilina/cefalosporinas

PARED CELULAR GRAM+ COMPUESTO POR PEPTIDOGLICANOS
PARED CELULAR GRAM – membrana celular/tiene una pared celular/membrana celular
Efecto de los beta lactamicos sobre la pared celular bacteriana- en los enlaces cruzados de pared
de peptidoglicanos .
Los beta-lactámicos se adhieren a los PBP e inhiben la formación de entrecruzamiento, y
conducen a la fragilidad de la pared bacteriana.
Son antibióticos bactericidad, que inhiben la síntesis de la apred celular e inducen un efecto
autolítico en las bacterias.
Se unene a las PBPs(penicillin Bingin Proteins) que son enximas importantes en la formación y
mantenimiento de la pared celular.
Evitar el entrecruzamiento de las cadenas largas
PENICILINA
Amoxicilina- alcanza una concentración de Cgcf de 1.5 a 14 ug/ml
Solo en combinación con el ac. Clavulánico o con otros antibioticos como el metronidazol,
mejor parámetros clínicos periodontales como NI y disminuye la prevalencia de bacterias
periodontopatógenas.
Otros estudios sugierne que no proporciona mejorias adicionales a la teraía mecánica
convencional.
INHIBICIÓN DE SINTESIS DE PROTEINAS
Tetracilinas
Inhibe síntesis de proteínas evitando la unión del tRNA en el sitio receptor del ribosoma
Doxiciclina
 Alcanza niveles de Cgcf 1 a 8 ug/ml
Propiedades como efecto anti-inflamatorio, inhibición de la colagenasa, etc.
Estudios clínicos indican que su uso mejora parámetro clínicos periodontales.
Clindamicina
Alcanza niveles de Cgcf de 2 ug/ml
Se ha encontrado útil en el tx de pacientes con periodontitis refractaria
Sintesis de proteínas.
Metronidazol
Alcanza concentración de 3.6 a 13.8 ug/ml
Estudios demuestran que su uso se reduce de manera importante la PB
Actua inhibiendo la síntesis de acidos nucleicos.
Resistencia a los Antibióticos
Resistencia natural: permeabilidad de la bacteria, metabolismo
Resistencia adquirida: Mutaciones, Plásmidos, transposones, Integrones.
Alteracion del receptor:
Resistencia B-lactámica
Reistencia a macrólidos
Alteracion en la entrada de la droga
Efflux
Fallas en la entrada del antibiotico a la célula
Inactivación de la droga
Destrucción del agente- como el anillo beta
lactámico
Modificiación del agente
Sintesis de vías de resistencia
Modicicaciones metabólicas
CONCENTRACIÓN MINIMA INHIBITORIAµ
Concentración en la que ya no se observa el
crecimiento bacteriana
CONCENTRACIÓN MINIMA BACTERICIDA- una
después de la mínima inhibitoria.
ANTIBIOGRAMA- Halo de inhibición: entre mas
grande el halo más suceptible. Si es mas pequeño es
más resistente.