Unidad 2: Tarea 3

Biodegradabilidad de contaminantes y seguimiento de la biorremediación

Presentado por:

Cristian José Delosreyes – Código.

Bianellys Nuñez Ovalle - Código. 1148199484

Yolianys Ariza Berrocal – Código. 1063965204 – Cead. Valledupar

Presentado a:

Raul David Peralta

PROCESOS DE BIORREMEDIACIÓN

GRUPO: 358025_12

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

Escuela de ciencias agrícolas pecuarias y del medio ambiente

Ingeniería Ambiental

2020 I
 Introducción

El presente trabajo se realizó implementando el análisis de documento científico

(biodegradación de toxafeno por hongos de la pudrición blanca) este documento se
implementó para determinar la solución a una problemática como sería la
contaminación de suelo por toxafeno en el municipio del Copey. El toxafeno es un
pesticida utilizado en las plantaciones agrícolas, pero este pesticida genera impactos
negativos para el ambiente y la salud humana. El toxafeno es un compuesto tóxico,
potencialmente carcinógeno, que puede causar daños neurológicos y defectos
congénito Posee un elevado grado de halogenación que permite su solubilidad en
lípidos y difundirse a través de membranas biológicas. [ CITATION Jor16 \l 9226 ] Por
esta razón se realizó la investigación de biorremediación con los hongos de
reproducción blanca (Pleurotus ostreatus y Ganoderma lucidum).
 Marco conceptual

Toxafeno: El toxafeno es un compuesto tóxico, potencialmente carcinógeno, que puede

causar daños neurológicos y defectos congénitos. Posee un elevado grado de
halogenación que permite su solubilidad en lípidos y difundirse a través de
membranas biológicas, por lo que ha sido detectado en la carne, huevos, leche
materna y dentro de la red trófica en distintas especies de peces entre otros.
[ CITATION Jor16 \l 9226 ]

Pleurotus ostreatus: Pleurotus ostreatus es una especie rica en polisacáridos de

estructura molecular compleja, con unidades de (1,3)-β-D-Glucanos, lineales y
ramificados, reportados con actividad antitumoral, los cuales forman la pared del hongo,
junto con la quitina y algunas proteínas. A nivel genético presentan una poderosa
inhibición de mutaciones. Se indica que la actividad contra líneas celulares de sarcoma
180 y carcinoma de Ehrlich es de 100 y 90 % respectivamente, a una concentración de
0.1 mg/kg de peso.[ CITATION Nah16 \l 9226 ]

Ganoderma lucidum: Esta especie conocida como reishii y lingzhi, tiene una
composición química muy variada, por lo que los metabolitos bioactivos encontrados en
el hongo, presentan una gran variedad de metabolitos secundarios activos con
propiedades farmacológicas muy interesantes y con aplicación en la vida diaria como
antitumorales, inmunomoduladoras, hipoglucemiantes, antiinflamatorias,
hepatoprotectoras e hipolipemiantes. Entre las estructuras encontradas están los
polisacáridos (1.1-5.8 %) del tipo β-glucanos y peptidoglucanos; así como triterpenoides
(8.0 %) y esteroles (principalmente ergosteroles). [ CITATION Nah16 \l 9226 ]

La biorremediación: puede emplear organismos autóctonos del sitio contaminado o de

otros sitios (exógenos), puede realizarse in situ o ex situ, en condiciones aerobias (en
presencia de oxígeno) o anaerobias (sin oxígeno). Aunque no todos los compuestos
orgánicos son susceptibles a la biodegradación, los procesos de biorremediación se
han usado con éxito para tratar suelos, lodos y sedimentos contaminados con
hidrocarburos del petróleo, solventes, explosivos, clorofenoles, pesticidas,
conservadores de madera e hidrocarburos aromáticos policíclicos, en procesos
aeróbicos y anaeróbicos. [ CITATION Adr11 \l 9226 ]
Metodología: El suelo fue tamizado Materiales.
con el fin de obtener un tamaño o Aserrín
máximo de partícula de 2 mm y o cascarilla de arroz
separarlo de otros restos. o bolsas ziploc de 1 kg
A partir del sustrato de arroz o Pleurotus ostreatus
inoculado con los hongos, se o Ganoderma Lucidum
depositaron 50 g de éstos en las bolsas o Sustrato de arroz
que contenían cascarilla de arroz y
o Suelo contaminado
aserrín, distribuyéndolos de manera
o agua destilada
homogénea en la superficie de cada
una. Las bolsas se incubaron a 22 ± 2 o sulfato de sodio
º C por 20 días hasta que se o isooctano
observó la colonización de los o helio como gas de arrastre
sustratos por un micelio blanco. o nitrógeno como gas make up,
Luego del periodo de incubación (20
días) de las
bolsas con los sustratos inoculados con Equipos.
P. ostreatus y G. lucidum, se o Tamizador
realizaron diferentes mezclas de o Azar recta
suelo con los sustratos (tabla 1) por o Caja de Petri
triplicado, tomando 500 g de suelo o Mechero
contaminado y 500 g del inoculo en o bandejas plástica.
aserrín y en cascarilla de arroz o tubos de vidrio con tapa rosca
(relación 1/1). Las diferentes o jeringa y aguja
mezclas se colocaron en bandejas o filtro de nylon
plásticas cerradas debidamente en
o Cabina de flujo laminar
condiciones aeróbicas. Los ensayos se
mantuvieron a temperatura ambiente o Incubadora de laboratorio
(25°C – 27°C), e hidratados o sonicador marca Branson
con agua destilada agregando 20 mL modelo 3510
por bandeja cada 3 días, removiendo o cromatógrafo de gases marca
las mezclas en cada hidratación Shimadzu GC-2014
según el criterio del investigador.
De cada unidad experimental se
pesaron 5 g de suelo previamente
secado al aire y luego fue depositado
en tubos de vidrio con tapa rosca de 20
mL, se agregó 5 g de sulfato de
sodio y 10 mL de isooctano, las
muestras se agitaron vigorosamente y
se sometieron a baño de ultrasonido
con sonicador marca Branson modelo
3510 por 18 horas. Finalizado el tiempo
de las muestras en el ultrasonido, se
tomó el solvente con jeringa y aguja,
luego se filtró el solvente con filtro de
nylon(Sartorius NY 0.20 μm)
previamente instalado en la jeringa.
Las primeras 5 gotas del filtrado se
descartaron y el restante se depositó
en un vial de cromatografía.
Técnica o ensayo
Muestreo
Ensayos de biodegradación del
contaminante
Ensayos de Biodegradación de
toxafeno a través
de Bioaumentación
Las muestras de suelo se tomaron
teniendo en cuenta las manchas de
color café causadas por toxafeno en
las antiguas bodegas de Cenalgodón
(Copey). El suelo fue depositado en
bolsas ziploc de 1 kg de capacidad
con cierre hermético, debidamente
rotuladas. Y trasladadas hasta el
Laboratorio de Calidad de Agua de la
Universidad del Magdalena.
La cuantificación de toxafeno se
realizó con un cromatógrafo de gases
marca Shimadzu GC-2014, equipado
con automuestreador AOC-20s,
autoinyector AOC-20is, columna DB-
XLD (30 metros por 0.25 mm diámetro
interno, 0.25 μm de espesor) y detector
FID. Se utilizó helio como gas de
arrastre y nitrógeno como gas make
up, temperatura a 220°C en el puerto
de inyección y la temperatura de la
columna programada a 170°C (2
min) aumentando 7°C/min hasta
210°C (0 min), 4°C/min hasta 250°C
(0 min) y 2°C/min hasta 280°C
manteniéndose por 7 minutos, la
temperatura del detector a 300°C.
Modo de inyección Split, inyectando
1.0 μl de muestra.
La curva de calibración se realizó
con ocho concentraciones (50, 100,
200, 400, 600, 800, 1000,
 1200 mg*L-1) por triplicado, es decir,
tres inyecciones por concentración y
coeficiente de determinación (r2:
0.9948). Los cromatogramas de
los patrones de toxafeno se integraron
por picos, con tiempos de retención de:
14.056 min, 15.956 min,
19.973 min, 20.075 min, 21.781 min y
23.717 min.

Preguntas

1. Cuál sería el tratamiento, el control positivo y el control negativo.

2. Cuál sería el medio de cultivo o sustrato y su composición

3. Cuáles serían las condiciones de cultivo.

Las condiciones del cultivo mediante el ensayo mantuvieron a temperatura

ambiente (25°C – 27°C), e hidratados con agua destilada agregando 20 mL
por bandeja cada 3 días, removiendo las mezclas en cada hidratación
según el criterio del investigador.

4. Cuál será el grupo de organismos vivos que serían evaluados.

En cuanto al ensayo, la biodegradación de este compuesto químico (taxofeno)

altamente contaminante tanto para suelo como para fuentes hidricas
superficiales, se hizo por organismos vivos Hogos de la Pudrición Blanca los
cuales serían evaluados.

Diagrama de flujo
 Bibliografía
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