Litoral Laboratorios Industriales, S.A. de C.V.

Procedimiento para la determinación de

Nitrógeno Total Kjeldahl.

Versión 3.4

Alcance: Este procedimiento aplica para la determinación del Nitrógeno

orgánico y el nitrógeno amoniacal en aguas naturales, residuales y
residuales tratadas.

Autor:

Fecha de inicio de vigencia: 19 de febrero 2013

Revisado por: Jesús Alfredo Argaez González, Gerente de Laboratorio.

Aprobado por: Guadalupe Obrador Olán, Diretor General.

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Procedimiento para la determinación de Nitrógeno Total Kjeldahl

LLI-PT-LR-014

Contenido

1. Introducción...............................................................................................................................3
2. Fundamento...............................................................................................................................3
3. Objetivo......................................................................................................................................3
4. Cantidad mínima cuantificable...................................................................................................4
5. Intervalo de trabajo....................................................................................................................4
6. Documentos de referencia.........................................................................................................4
7. Norma de referencia..................................................................................................................4
8. Definiciones................................................................................................................................4
9. Interferencias.............................................................................................................................5
10. Material......................................................................................................................................6
11. Equipo........................................................................................................................................6
12. Reactivos....................................................................................................................................6
13. Preparación de soluciones..........................................................................................................7
14. Control de Calidad......................................................................................................................8
15. Recolección, Preservación y Almacenamiento de Muestras......................................................9
16. Procedimiento............................................................................................................................9
17. Cálculos....................................................................................................................................11
18. Seguridad.................................................................................................................................12
19. Registros...................................................................................................................................12
20. Bibliografía...............................................................................................................................13

1.

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1. Introducción.

Los compuestos nitrogenados se encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza. Las fuentes de

nitrógeno incluyen además de la degradación natural de la materia orgánica, fertilizantes, productos de
limpieza y tratamiento de aguas potables. Debido a que el nitrógeno es un nutriente esencial para
organismos fotosintéticos, es importante el monitoreo y control de descargas del mismo al ambiente.

2. Fundamento.

Este procedimiento se basa en la obtención del Nitrógeno Total Kjeldahl, el cual se encuentra constituido
por el Nitrógeno orgánico y el Nitrógeno amoniacal.
El nitrógeno orgánico Kjeldahl puede ser determinado directamente por remoción del nitrógeno
amoniacal antes de la digestión.
Los tres procesos básicos de la digestión Kjeldahl son:
Digestión: La descomposición del nitrógeno orgánico en la muestra se logra empleando una solución
ácida. El resultado final es una disolución de sulfato de amonio.

N-Org + H2SO4 → (NH4)2SO4 + H2O + CO2

Destilación: Es la adición de un exceso de álcali a la mezcla ácida de digestión para convertir el NH 4+ en

NH3, seguido por la ebullición y condensación del NH 3 gas el cual es recibido en una disolución de
concentración conocida de ácido bórico.

(NH4)2SO4 + 2NaOH → 2NH3 + Na2SO4 + 2H2O

NH3 + H3BO3 → NH4 +:H2BO3- + H3BO3

Cuantificación: La cantidad de nitrógeno en la muestra puede ser calculada de la cantidad cuantificada

de iones amoniaco (amonio) en la disolución de concentración conocida de ácido bórico

Titulación:

2NH4H2BO3 + H2SO4 → (NH4)2SO4 + 2H3BO3

El método Kjeldahl cuantifica el nitrógeno en su estado de valencia trinegativo; excepto cuando se trata
de los grupos funcionales: azida, azina, azo, hidrazina, Nitrato, nitrito, nitrilo, nitro, nitroso, oxima y semi-
carbazona.

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3. Objetivo.

Este procedimiento técnico establece el método de prueba para la determinación de nitrógeno total
Kjeldahl en aguas naturales, residuales y residuales tratadas.

4. Cantidad mínima cuantificable.

De acuerdo en la realización de muestras control, la cantidad mínima cuantificable es de 5 mg/L, para

nitrógeno total kjeldahl

5. Intervalo de trabajo.

El intervalo de trabajo para nitrógeno total kjeldahl es el siguiente:

De acuerdo a muestras control se ha establecido estadísticamente como intervalo de trabajo de 5 a 1000
mg/L de nitrógeno total kjeldahl, pudiéndose ampliar este rango hacia el límite superior con muestras
reales.

6. Documentos de referencia.

Procedimiento para Muestreo y Control de muestras. LLI-PT-PM-001.

Procedimiento para la Recepción de Muestras. LLI-PT-PM-002.
Procedimiento de Operación de Aparato de Digestión Kjeldahl y Micro-Kjeldahl. LLI-PE-015.
Procedimiento para Control de Calidad de Pruebas LLI-PT-LR-035.

7. Norma de referencia.

NMX-AA-026-SCFI-2010. Determinación de Nitrógeno Total Kjeldhal en aguas naturales, residuales y

residuales tratadas.

8. Definiciones.

Límite de Es la menor concentración de un analito o sustancia en una muestra que puede

cuantificación ser cuantificada con precisión y exactitud aceptables bajo las condiciones de en
del método que se lleva a cabo el método. Se reporta los resultados <LCM cuando el valor
(LCM) se encuentre entre este y el LDM.
Límite de Es la mínima concentración de un analito o sustancia en una muestra, pero no
detección del necesariamente cuantificada bajo las condiciones de en que se lleva a cabo el
método (LDM) método. Los resultados menor a este, se reporta con no detectada (ND).

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Aguas naturales Se define como agua natural el agua cruda, subterránea, de lluvia, de tormenta,
residual y superficial.
Aguas residuales Las aguas de composición variada provenientes de las descargas de usos
municipales, industriales, comerciales, agrícolas, pecuarias, domésticos y
similares, así como la mezcla de ellas.
Nitrógeno total Es la suma del nitrógeno orgánico y el nitrógeno amoniacal.
Kjeldahl.

9. Interferencias.

 Elimínese el cloro de la muestra previamente, con sulfito de sodio, el cloro residual reacciona
con el nitrógeno amoniacal, se puede remover agitando la muestra o dejándola expuesta a luz
solar por al menos 1 hora.
 Nitratos: Durante la digestión, el nitrato en concentraciones por arriba de 10 mg/L puede oxidar
parte del amoniaco liberado produciendo N 2O y dando lugar a una interferencia negativa.
Cuando se encuentre presente materia orgánica reductora, el nitrato puede reducirse a
amoniaco, resultando una interferencia positiva, puede prevenirse usando resina por medio de
un intercambio iónico.
 Sales: Durante la digestión, puede haber pérdidas de nitrógeno por pirólisis. Si la muestra
contiene una gran cantidad de sales o materia inorgánica que se disuelvan durante la digestión,
la temperatura podría alcanzar los 400 °C; esta temperatura es el punto pirolítico menor del
nitrógeno. Para prevenir que se presenten estás altas temperaturas, añadir más ácido sulfúrico
para mantener el balance sal-ácido. No todas las sales incrementan la temperatura hasta 400 °C,
por lo cual la adición a la muestra de 1 mL de H 2SO4 / g de sal proporciona resultados aceptables.
La adición de ácido debe hacerse por igual a la muestra, blanco y estándares. Tener cuidado con
la cantidad de ácido adicionado ya que un exceso disminuye la temperatura de destilación por
debajo de 380 °C, lo cual resulta en una digestión y recuperación incompleta. Grandes
cantidades de sales o sólidos pueden causar golpeteo durante la destilación. Si esto ocurre
añadir más agua de dilución después de la digestión.
 Materia orgánica: Durante la digestión, el H 2SO4 oxida la materia orgánica a CO2 y H2O. Si
estuviera presente una gran cantidad de materia orgánica, se consume mucho ácido, aumentar
la proporción de sal-ácido y aumentar la temperatura de digestión. Si está presente una gran
cantidad de materia orgánica, resulta en perdida pirolítica del nitrógeno. Para prevenir está
situación añadir al matraz de digestión 10 mL de H 2SO4 concentrado por cada 3 g de DQO.
Alternativamente, añadir 50 mL más de reactivo de digestión por cada gramo de DQO. La
adición de más ácido puede ocasionar la necesidad de añadir más reactivo hidróxido-tiosulfato
de sodio para lograr el pH alto requerido para la destilación.

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 Dado que los reactivos pueden contener trazas de amoniaco, trate el blanco de reactivos igual
que las muestras.

10. Material.

 Pizeta.
 Matraz tipo Kjeldahl de 800 mL.
 Buretas de 10 y 25 mL.
 Matraz Erlenmeyer de 500 mL.

11. Equipo.

 Aparato para determinación de nitrógeno tipo Kjeldahl que consta de: Digestor con sistema de
extracción de humos y destilador con sistema de condensación para mantener la temperatura
por abajo de 29°C.
 Balanza analítica.

12. Reactivos.

Los reactivos que se mencionan, deben ser grado analítico.

 Tetraborato de sodio decahidratado (Na2B4O7 •10H2O).
 Hidróxido de sodio (NaOH).
 Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4).
 Ácido bórico (H3BO3).
 Indicador de rojo de metilo.
 Indicador de azul de metileno.
 Alcohol etílico (CH3CH2OH).
 Sulfato de cobre (II) anhidro (CuSO4).
 Sulfato de potasio (K2SO4).
 Tiosulfato de sodio pentahidratado (Na2S2O3•5H2O).
 Carbonato de sodio anhidro (Na2CO3), Material de Referencia.
 Cloruro de amonio (NH4Cl) patrón primario.
 Ácido Sulfámico H2NSO3H
 Naranja de metilo C14H14N3NaO3S (Indicador en Valoración del Acido.)
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13. Preparación de soluciones.

 Disolución indicadora de ácido bórico.

Secar aproximadamente 30 g de ácido bórico en un desecador que contenga silica gel como desecante
por 24 h. Pesar aproximadamente 20.0 g de ácido bórico seco disolver en 500 mL agua, agregar 10 mL de
la mezcla de indicadores y diluir a 1 L. Guardar la disolución en un envase de plástico o en un contenedor
libre de boro, preparar mensualmente.
 Disolución de tetraborato de sodio.
Pesar aproximadamente pero con precisión 9.50 g de tetraborato de sodio decahidratado en 50 mL de
agua y llevar a 1 L con agua.
 Disolución amortiguadora de boratos.
Añada 88 ml de la disolución de NaOH 0,1 mol/L a 500 mL de disolución de tetraborato de sodio y diluya
a 1 L en un matraz aforado.
 Disolución de hidróxido de sodio (≈ 0.1 mol/L).
Pesar aproximadamente 4.0 g de hidróxido de sodio y disolver en 500 mL de agua, dejar enfriar a
temperatura ambiente y llevar a 1 L.
 Disolución de ácido sulfúrico (0.05 mol/L). ver cálculo en anexo 1.
Preparar una disolución de ácido sulfúrico aproximadamente 0.05 mol/L diluyendo 3 mL de ácido
sulfúrico concentrado en 1 L de agua.
 Disolución valorada de ácido sulfúrico (≈ 0.01 mol/L).
Diluir 200 mL de la disolución de ácido sulfúrico 0.05 mol/L en un litro de agua. Titular la disolución de
ácido sulfúrico obtenida con una disolución de 30 mL de agua libre de dióxido de carbono y 0.031 8 g ±
0.000 5 g de carbonato de sodio anhidro previamente secado por 1 h a 140 °C ± 2 °C, y 2 gotas del
indicador anaranjado de metilo; titular esta disolución con el ácido sulfúrico hasta que el indicador vire
de amarillo a canela.
Calcular la concentración de masa exacta de la disolución (1 mL = 0,28 mg de N-amoniacal u orgánico).

 Mezcla de indicadores.
Pesar aproximadamente 200 mg de indicador rojo de metilo aforar a 100 mL con alcohol etílico. Pesar
aproximadamente 100.0 mg de indicador azul de metileno y aforar a 50 mL con alcohol etílico; dejar
reposar por 24 h. Mezclar las dos disoluciones en un frasco de vidrio. Preparar mensualmente.
 Reactivo para la digestión.
Pesar aproximadamente y con precisión 134.0 g de sulfato de potasio y 7.3 g de sulfato de cobre (II)
anhidro disolver en 800 mL de agua destilada libre de amoniaco, agregar cuidadosamente 134 mL de
ácido sulfúrico concentrado. Dejar enfriar a temperatura ambiente y diluir la mezcla a 1 L con agua.
Almacenar la disolución a una temperatura de 20 °C para evitar la cristalización.

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 Disolución reactivo de hidróxido - tiosulfato de sodio.

Pesar aproximadamente y con precisión 500.0 g de hidróxido de sodio y 25.0 g de tiosulfato de sodio
pentahidratado disolver en agua libre de amoniaco; dejar enfriar hasta temperatura ambiente y llevar a
1 L.
 Disolución de hidróxido de sodio (≈ 6 mol/L)
Pesar aproximadamente 240.0 g de hidróxido de sodio y llevar a 1 L con agua libre de amoniaco.
 Disolución madre de nitrógeno amoniacal (0.07 ml/L N-NH 3) 1 ml = 1.0 mg de nitrógeno
amoniacal.
Pesar aproximadamente3.819 g de cloruro de amonio (secado por una hora a 100° Celsius) y aforar a 1 L
con agua.
 Disolución madre de nitrógeno orgánico 0.07 mol/L N-Org) 1 ml = 1.0 mg de nitrógeno
amoniacal.
Pesar 6.93 g de ácido sulfámico, disolver en agua y aforar a 1 L.
 Disolución de hidróxido de sodio para neutralización.
Pesar aproximadamente 500 g de hidróxido de sodio, disolver en agua; dejar enfriar hasta temperatura
ambiente y diluir a 1 con agua.
 Disolución de ácido sulfúrico para neutralización.
Tomar 500 mL de ácido sulfúrico concentrado disolver en agua; dejar enfriar hasta temperatura
ambiente y diluir a 1 L con agua.
 Disolución de anaranjado de metilo.
Pesar 0.05 g del reactivo anaranjado de metilo y diluir a 100 mL con agua.

14. Control de Calidad.

Por cada lote de muestras analizar un blanco y un control. Ver Procedimiento LLI-PT-LR-035, “Control de
Calidad de las Pruebas”
Blanco: Ver Procedimiento técnico LLI-PT-LR-035, Preparar un blanco con 500 mL de agua y darle el
mismo tratamiento que a la muestra.
Control: Ver Procedimiento técnico LLI-PT-LR-035, Tomar 2.5 mL de la solución madre de amonio y 2.5
mL de la solución madre de ácido sulfámico aforar a un litro y mezclar para formar una solución control
que es llevada por todo el proceso que se aplica a las muestras método macro-kjeldahl.
Valoración de la solución de ácido sulfúrico. Ver procedimiento técnico LLI-PT-LR-018, “Valoración de
Soluciones”

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Método micro-kjeldahl: Los controles de nitrógeno total kjeldahl serán preparados de la siguiente forma:
Del control de cloruro de amonio de 1000 mg/L y de ácido sulfámico de 1000 mg/L, se tomará 2.5 mL de
cada uno y se aforará a 50 mL con agua destilada, los controles pueden hacerse por separados
dependiendo si en la determinación de un lote solo se analiza N-NH 3 ó N-Norg.

15. Recolección, Preservación y Almacenamiento de Muestras.

Recolectar 2 litros de muestra para el método macro-Kjeldahl y 500 ml para el método Micro Kjeldahl, en
un envase de polietileno, pueden utilizarse muestras simples o compuestas, para preservación de la
muestra acidificar con ácido sulfúrico 1:1 a un pH de 1 a 2, mantener a 4 °C ± 2 °C hasta su análisis. El
tiempo máximo de almacenamiento previo al análisis es de 30 días en condiciones de oscuridad.

16. Procedimiento.

Limpiar el equipo de destilación antes de utilizarlo, destilando una mezcla (1:1) agua-disolución hidróxido
- tiosulfato de sodio hasta que el destilado esté libre de amonio. Esta operación debe realizarse cada vez
que el aparato este fuera de servicio. Macro-Kjeldahl.
 Selección de volumen de muestra: Determinar el volumen de la muestra de acuerdo a la tabla 1,
si es necesario, ajustar el volumen aproximadamente 500 mL y neutralizar a pH 7, con hidróxido
de sodio o ácido sulfúrico Colocar la muestra medida en un matraz Kjeldahl de 800 mL.
 Nota: si no se desea cuantificar el contenido de nitrógeno amoniacal, destilar casi hasta
sequedad y continuar desde la digestión del nitrógeno orgánico.

TABLA 1.- Selección del volumen de muestra

Cantidad de nitrógeno en la Volumen de muestra

muestra (mg/L) necesario
0–1 500
1- 10 250
10 – 20 100
20 - 50 50
50 - 100 25

 Nitrógeno amoniacal.

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Tomar una muestra dependiendo de las concentraciones esperadas, de acuerdo a la tabla 1, diluir con
agua hasta 500 mL.
Añadir 25 mL de la disolución amortiguadora de boratos y ajustar el pH a 9.5 con disolución de hidróxido
de sodio 6 mol/L utilizando potenciómetro o papel indicador para verificar. Transferir la disolución a un
matraz Kjeldahl y añadir unas cuentas de vidrio o perlas de ebullición.
Conectar el matraz Kjeldahl al condensador, destilar la muestra cuidando que la temperatura del
condensador no pase de 302 K (29°C), recolectando el condensado con la punta del tubo del refrigerante
sumergido en 50 mL de la disolución indicadora de ácido bórico.
La destilación se completa cuando se hayan recolectado 300 mL de destilado aproximadamente,
incluyendo los 50 mL de la disolución amortiguadora de Boratos con la disolución indicadora de ácido
bórico.
Retirar el matraz colector y titular con solución de ácido sulfúrico valorada ≈ 0.01 mol/L hasta que la
solución vire de un verde esmeralda a morado. Registrar en la bitácora el consumo de la solución de
ácido.
 Nitrógeno orgánico.
Enfriar el residuo contenido en el matraz Kjeldahl.
Digestión:
Adicionar cuidadosamente 50 mL de reactivo para la digestión al matraz de destilación y mezclar
perfectamente. Añadir unas perlas de ebullición. Mezclar y calentar a ebullición hasta que el volumen de
la disolución se reduzca aproximadamente entre 25 mL y 50 mL y se observe gran desprendimiento de
vapores blancos (estos vapores pueden oscurecerse cuando la muestra presenta grandes cantidades de
materia orgánica).
Nota: Si la muestra contiene una gran cantidad apreciable de material suspendido, añadir 50 mL
adicionales de reactivo de digestión.
Continuar la digestión durante 30 min más. En este período, la disolución cambia de turbia hasta ser
transparente e incolora o con una ligera coloración amarillo pálido. Durante la digestión el matraz
Kjeldahl debe permanecer inclinado. Enfriar el matraz y su contenido, diluir a 300 mL con agua y mezclar.
Cuidadosamente añadir 50 mL de la disolución de hidróxido-tiosulfato de sodio para formar una capa
alcalina en el fondo del matraz, conectar el matraz a un equipo de destilación y sumergir la punta del
condensador en un matraz que contenga 50 mL de disolución de ácido bórico y la mezcla de indicadores
por abajo del nivel de esta disolución. Agitar hasta asegurarse que está completamente mezclado, el pH
de la disolución debe ser mayor a 11.0.

Destilación:

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Destilar y colectar el destilado en un recipiente que contenga 50 mL de disolución indicadora de ácido

bórico, sumergiendo la punta del condensador en la disolución, no permitir que la temperatura en el
condensador pase de 29°C. Cuando se alcance un volumen aproximado de 250 mL en el matraz colector
del destilado, sacar la punta del condensador del destilado sin retirarlo del matraz y continuar la
destilación durante 1 min o 2 min para limpiar el condensador.

Titulación del destilado:

Titular el volumen destilado con disolución valorada de ácido sulfúrico ≈ 0.01 mol/L, hasta el cambio del
indicador de verde esmeralda a morado. Registrar el volumen gastado de la solución valorada de ácido.
Realizar un blanco durante todos los pasos del procedimiento.

17. Cálculos.

Calcular la concentración de masa de nitrógeno amoniacal, en mg/L en la muestra como se indica a

continuación:

VA= son los mL de acido sulfúrico gastados en la titulación de la muestra

VB= son los mL de Ácido sulfúrico gastados en el blanco
c(H2SO4)= es la concentración del ácido sulfúrico en mol/L
Ar(N)= Masa atómica del Nitrógeno
Vm= son los mL de muestra

Calcular la concentración de masa de nitrógeno orgánico, en mg/L en la muestra como se indica a

continuación:

VC= son los mL de ácido sulfúrico gastados en la titulación de la muestra

VB= son los mL de ácido sulfúrico gastados en el blanco

c (H2SO4)=es la concentración del ácido sulfúrico en mol/L

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Vm= son los mL de muestra

Ar(N) = es la masa atómica del nitrógeno.

Calcular la concentración de masa de nitrógeno total Kjeldahl, en mg/L en la muestra como se indica a
continuación:

Donde:

La concentración de masa de nitrógeno total Kjeldahl es igual a la suma de la concentración de masa de

nitrógeno amoniacal y la concentración de masa de nitrógeno orgánico.

18. Seguridad.

Cuando se trabaje con este método debe hacerse de acuerdo a lo indicado en los Requisitos de
Seguridad para el Laboratorio.

19. Registros.

Persona
Tiempo
Nombre del responsable Sitio de
No. Código mínimo de
registro del control del almacenamiento
conservación
registro
1 Bitácora del LLI-LR-005- X Analista Archivo de 5 años.
analista. laboratorio.
2 Reportes de LLI-LR-013 Responsable de Área de 5 años.
resultados de Recepción/Jefe Recepción
Análisis de Área
3 Cadena de LLI-GE-007 Responsable de Área de 5 años.
custodia interna Recepción/Jefe Recepción
de Área
4 Bitácora de uso LLI-LR-006-B Analista Archivo de 5 años.
balanza analítica laboratorio.

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Persona
Tiempo
Nombre del responsable Sitio de
No. Código mínimo de
registro del control del almacenamiento
conservación
registro
5 Bitácora de LLI-LR-015 Control de Archivo de 5 años.
control de agua Calidad laboratorio.
destilada
6 Bitácora de LLI-LR-018 Analista Archivo de 5 años.
preparación de laboratorio.
soluciones
7 Registro de LLI-LR-007-R Analista Archivo de 5 años.
temperatura de laboratorio.
cámara de
conservación de
muestra
Nota: X es el consecutivo de la bitácora del analista.

20. Bibliografía.

Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 21th Edition, 4500-Norg B, 4500
NH3 C
Official Methods of Analysis of AOAC INTERNATIONAL. 18th edition, 2005. AOAC Official method 973.48
NMX-AA-115-SCFI-2001. Análisis de Agua. Criterios generales para el control de la calidad de resultados
analíticos.

Anexo 1- Método micro Kjeldahl para la determinación de nitrógeno.

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Objetivo y campo de aplicación.

El método micro Kjeldahl es aplicable a muestras que contienen altas concentraciones de nitrógeno
orgánico y preferiblemente optar por muestras que presenten una concentración de masa de nitrógeno
amoniacal en el rango de 0.2 mg N-NH 3/L a 2 mg N-NH3/L.
Reactivos y soluciones.
Son los indicados en los apartados 12 y 13 para la determinación de nitrógeno por el método Kjeldahl
de este procedimiento.
Equipo y materiales.
 Aparato de digestión para utilizar matraces kjeldahl de 100 mL, equipado con elementos de
calentamiento para acomodar los matraces kjeldahl y salida para succionar los vapores. Las
parrillas de calentamiento deben proveer un rango de temperatura de 375 a 385 °C para una
digestión efectiva.
 Matraces Kjeldahl de 100 mL.
 El resto del equipo utilizado será similar al utilizado para el método macro Kjeldahl.
Procedimiento.
1.-Remoción del nitrógeno amoniacal:
 Selección de volumen de muestra: Determinar el volumen de la muestra de acuerdo a la tabla 2.
Si es necesario, ajustar el volumen aproximadamente 50 mL. Añadir 3 mL del buffer de boratos y
ajustar el pH a 9.5 con la solución de NaOH 6 mol/L.
TABLA 2.- Selección del volumen de muestra
Concentración de nitrógeno Volumen de
orgánico en la muestra muestra (mL)
(mg/L)
4 – 40 50
8 - 80 25
20 – 200 10
40 – 400 5

 Cuantitativamente transferir la muestra a un matraz micro Kjeldahl de 100 mL. Colocar el matraz
en el equipo micro-Kjeldahl y permitir que se evaporen aproximadamente 30 mL, en este
momento iniciar la destilación como en el punto 3.
Nota: si no se desea cuantificar el contenido de nitrógeno amoniacal, digerir la muestra como se
indica en el proceso de digestión.

2.-Digestión.
 Cuidadosamente añadir 10 mL del reactivo de digestión al matraz Kjeldahl que contiene la
muestra. Añadir algunas perlas de ebullición y colocarlo en el equipo de digestión.
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 Calentar la solución obtenida hasta que se vuelva transparente y se observe la formación

abundante de humos ligeramente verdes. Aumentar el calentamiento al máximo permitido por
el equipo y digerir por 30 minutos más. Cuantitativamente transferir el contenido del matraz
Kjeldahl al equipo de destilación cuidando que el volumen total transferido no exceda de 30 mL
(aproximadamente 10 mL en el matraz). Añadir 10 mL de la solución de hidróxido de sodio-
tiosulfato de sodio más 30 mL de agua y colocar en el destilador.
3.-Destilación
 Regular la velocidad de destilación para prevenir pérdidas.
 Colocar el matraz Kjeldahl al condensador, destilar la muestra cuidando que la temperatura del
condensador no pase de 302 K (29 °C).
 Recolectar el condensado en un recipiente que contenga 10 mL de ácido bórico, sumergiendo la
punta del condensador o una extensión del mismo por debajo de la superficie del líquido, lo
recolectado debe ser aproximadamente 30 mL.
 Retirar el matraz colector y titular con la disolución de ácido sulfúrico 0.01 mol/L (0.02 N) hasta
que el indicador en la disolución vire de verde esmeralda a morado. Registrar el volumen
gastado de H2SO4 0.01 mol/L.
 Permitir que continúe la destilación por 1 minuto o 2 minutos para que el sistema se limpie.
 Llevar a un blanco de reactivos y estándares a través de todos los pasos del procedimiento y
aplicar las correcciones necesarias a los resultados.
Cálculos.
Realizar los cálculos como se indica en el punto 17 de este procedimiento, tomando en cuenta las
modificaciones de volumen de muestra.

Valoración del ácido sulfúrico 0.01 M.

Se pesara aproximadamente 0.0318 g ± 0.5 mg de carbonato de sodio previamente secado por 1 h a 140
° C ± 2° C , el cual se disolverá en 30 mL de agua destilada previamente hervida y atemperada, una vez
disuelto el carbonato de sodio se le añadirá 2 gotas de anaranjado de metilo; titular esta disolución con
el ácido sulfúrico hasta que el indicador vire de amarillo a canela.
Formula:

g
M= ∗1000
V∗P . M .

Dónde:
M: Mol por litro del ácido sulfúrico valorado.

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ɡ: gramos del carbonato de sodio empleados en la valoración.

V: gasto del ácido sulfúrico en la valoración menos el blanco preparado con agua destilada.
P.M.: Peso Molecular del carbonato de sodio.

Anexo 2.

Se realizan los cálculos para calcular las concentraciones de las soluciones de ácido sulfúrico.
La concentración de ácido sulfúrico ≈0.05 mol/L, resulta de obtener la concentración de la solución en
base.
Gravedad especifica del H2SO4 =1.84
Gravedad especifica del agua = 1
Masa molar del H2SO4 =98.08 g/mol
Masa de H2SO4 en 3 mL= 1.84 x 3 mL x 97.9 = 5.4 g

5.4 g
moles de H 2 SO4 = = 0 . 055 mol
g
98 . 08
mol

Los cuales se disuelven en un litro de agua. Obtenemos la concentración de 0.055 mol/L.

La concentración de la solución valorada se realiza diluyendo 5 veces la solución de acido sulfúrico 0.011
mol/L, se hizo la comprobación estequiométrica. Se comprobó el método, en base a esto se hacen los
ajustes a las ecuaciones.

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Identificación de los cambios y del estado de revisión del documento

Fecha de
Descripción de los
inicio de Versión Autores Revisó Aprobó
cambios
vigencia

4 de Diciembre de 1.0 Primera versión Alicia Zavala Alicia Vidal Roca Guadalupe Obrador
2006 Morales, Jefa de Gerente de Olán,
Sección de aguas. Laboratorio. Director General

03 de Septiembre 1.1 Sección 12. Se anexa el punto Pedro F. Várguez Alicia Vidal Roca Guadalupe Obrador
de 2007 de “Control de calidad” en el Gómez Gerente de Laboratorio Olán,
procedimiento. Jefe de Sección Director General
Angélica Flores, Jefa de
Se elimina la valoración de la Aguas Sección Alimentos
solución de ácido sulfúrico
0.02 N del punto de
“Preparación de soluciones y
se anexa en el punto de
“Control de calidad.
Se cambia las unidades de
volumen, ml (mililitro) por mL
y l (litro) por L

04 de Febrero de 2.0 Secc. 4 se agrega límite de Santiago Nieves Alicia Vidal Roca Guadalupe Obrador
2009 detección del método y límite Verduzco, Jefe de Gerente de Laboratorio Olán,
de cuantificación. Sección de aguas Director General
Secc. 5 Se agrega intervalo de
trabajo
Secc. 9 se agrega una
interferencia y su
preparación.

11 de Julio de 3.0 Secc. 2 Se agregan Reacciones Miguel Antonio Fritzia Ramírez Velueta, Guadalupe Obrador
2011 Químicas basadas en la NMX- Ramos Morales, Gerente de Laboratorio. Olán,
AA-026-SCFI-2010. Analista Director General
Secc. 4 Se cambia el límite de
cuantificación basado en
muestras control.
Secc. 5 Se cambia el intervalo
de trabajo basado en la tabla
de la NMX vigente y lo
máximo que se ha detectado

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en el laboratorio
Secc. 7 Se hace referencia a la
norma vigente para la
determinación de Nitrógeno
Secc. 9 Se agregan soluciones
y formas de eliminar
inferencias.
Secc. 12 Se agregan Reactivos
por ejemplo el ácido
sulfámico.
Secc. 13 Se agregan
Soluciones
Secc. 14 Se agrega la
preparación del control
Secc. 15 Se establece la
conservación y tiempo de
almacenamiento de la
muestra.

14 de Agosto de 3.1 Secc.4. Se modificó el límite Miguel Antonio Fritzia Ramírez Velueta, Guadalupe Obrador
2011 de cuantificación del método. Ramos Morales, Gerente de Laboratorio. Olán,
Analista Director General

10 de Septiembre 3.2 Anexo. Se hace la aclaración Miguel Antonio Fritzia Ramírez Velueta, Guadalupe Obrador
de 2011 del porque se sigue utilizando Ramos Morales, Gerente de Olán,
la ecuación anterior de la Analista Laboratorio. Director General
NMX-AA-026-2001

10 de Diciembre 3.3 Se añade el anexo que se Pedro Felipe Fritzia Ramírez Velueta, Guadalupe Obrador
de 2012 refiere a la determinación del Várguez Gómez Gerente de Olán,
nitrógeno orgánico por el Jefe de Sección de Laboratorio. Director General
método de micro kjeldahl. Aguas Residuales
El anexo 1 que era la forma
de calcular la concentración
de la solución de ácido
sulfúrico, se le cambia el
nombre como “anexo 2”,
quedando como “anexo 1” el
procedimiento para el análisis
de nitrógeno orgánico por el
método micro kjeldahl.

19 de febrero de 3.4 Se añade en el anexo 1 la Miguel Antonio Jesús Alfredo Argaez Guadalupe Obrador

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2013 valoración del ácido sulfúrico. Ramos Morales, González, Olán,

Sección 4.- Se establece la Responsable de Gerente de Director General
cantidad mínima Control de Calidad. Laboratorio.
cuantificable.
Sección 5.-Se establece el
intervalo de trabajo
estadísticamente.

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