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RESUMEN
Los alimentos que consumimos, los lugares que habitamos y casi todo aquello que tocamos esta recubierto y morado por
microorganismos. Entre estos encontramos a los hongos y bacterias, de diversas formas, tipos y especies que pueden ser
estudiados en un laboratorio disponiendo de los elementos necesarios. En el presente trabajo se ha desarrollado un
análisis que abarca la determinación de carga microbiana en dos espacios aislados pertenecientes a la Universidad
Nacional de Colombia, sede Bogotá: El laboratorio de ornitología en el ICN y la puerta secundaria del Departamento de
Biología; con el objetivo de conocer y reconocer los organismos allí presentes y determinar qué restricciones en su
ubicación se presentan de acuerdo a ciertas condiciones ambientales como lo son productos químicos, vegetación o
locación. Para esto se han hecho diferentes exposiciones al medio que posteriormente mostrarán el crecimiento de
diferentes colonias para proceder con su estudio detallado. Se realizaron recuentos y, una descripción macroscópica y
microscópica para cada UFC. Se reportaron levaduras, bacilos Gram + y Gram -, con más diversidad en la puerta secundaria
del Departamento de Biología, allí mismo se observaron hongos filamentosos que se consideraron pertenecientes a
Ascomycetes y Basidiomycetes. Se logró concluir que el medio de cultivo usado PDA no es totalmente selectivo para
hongos, puesto que de igual manera crecieron algunas bacterias. La presencia de algunos compuestos circundantes en el
Laboratorio de Ornitología pudo haber incurrido en baja diversidad microbiana. A diferencia de la Salida del Departamento
de Biología, en donde la carga microbiana era mucho mayor con relación a la anterior.
Palabras Clave: Hifas, Levaduras, Bacterias, Unidades formadoras de colonias, microorganismos, Hongos Filamentosos
ABSTRACT
Food we consume,, the places we inhabit and almost everything we touch is covered by microorganisms. Among these we
find fungi and bacteria, of various forms, types and species that can be studied in a laboratory with the necessary
elements. In the present work an analysis has been developed that covers the determination of microbial load in two
isolated spaces belonging to the National University of Colombia, Bogotá Campus: The ornithology laboratory at the ICN
and the secondary door of the Department of Biology; on the objective of know and recognizing the organisms present
there and determining what restrictions on their location are presented according to certain environmental conditions
such as chemicals, vegetation or location. For this, different exposures have been made to the environment that will
subsequently show the growth of different colonies to proceed with their detailed study. Counts were made and a
macroscopic and microscopic description for each CFU. Yeasts, Gram + and Gram - bacilli were reported, with more
diversity in the secondary door of the Department of Biology, there were filamentous fungi that were considered belonging
to Ascomycetes and Basidiomycetes.It was concluded that the growth medium used PDA is not totally selective for fungi,
since some bacteria also grew. The presence of some surrounding compounds in the Ornithology Laboratory may have
incurred low microbial diversity. Unlike the Departure of the Department of Biology, where the microbial load was much
higher compared to the previous one.
Key words: Hyphae, Yeasts, Bacteria, colony-forming unit, microorganisms, Filamentous fungi.
DETERMINACIÓN DE CARGA MICROBIANA EN DOS ESPACIOS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE
COLOMBIA: UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.
puerta secundaria del departamento de Biología y dos para hongos y bacterias. Algunas colonias poco
en el laboratorio de ornitología. En la salida secundaria relevantes fueron descartadas por no aportar
del departamento, una zona al aire libre y por lo tanto información adicional que complementa el análisis del
expuesta, se presentaron corrientes de aire muy cultivo en general. La colonia 1 del laboratorio de
fuertes, y alrededor de esta zona, se encontraban heces ornitología presentaba dos UFC, por tanto se
de vaca, el paso de varias personas y de autos, además multiplicará de este modo para la determinación de la
de la presencia de insectos. El Segundo lugar Dcm.
corresponde a el laboratorio de ornitología en donde Respecto a la descripción microscópica de bacterias, se
se depositan diferentes tipos de compuestos químicos reportan bacilos Gram + y Gram - (Anexo 4, 5 y 6), con
provenientes del área de trabajo. más diversidad a la salida del Departamento de
Biología.
Exposición Únicamente se observaron hongos filamentosos
En ambos caso se expusieron las cajas de Petri abiertas analizables en la salida del Departamento de Biología.
durante 10 minutos para realizar una siembra por Todos resultaron septados con presencia de conidias y
sedimentación o impacto, cuyo medio fue Agar Papa algunos (Anexo 3 sup.) con estructuras reproductivas.
Dextrosa (PDA), determinante para hongos; Para para el parámetro de clasificación se han usado la
bacterias se realizó el mismo procedimiento con una presencia de esporas y el carácter septado de las hifas;
diferencia en el medio, pues para este caso se usó Agar por lo cual se asumen tales colonias pertenecientes a
Nutritivo. Posteriormente fueron llevadas a incubación Ascomycetes y Basidiomycetes. Por otro lado, hubo
a 20°C durante una semana. presencia de levaduras en ambos sitios (Orden
Endomycetales), reconocidas por su tamaña
Preparación de las muestras voluminoso en comparación a un coco. Hubo presencia
En el montaje de las muestras al microscopio se debió en ambos casos de bacilos Gram + sobre medio PDA.
tener en cuenta las muestras ya que se usaron
diferentes reactivos, para hongos se determinó primero Realizando la suma de todas la áreas y asumiendo el
el color de su esporada y se teñían con azul de teórico crecimiento radial de los hongos:
lactofenol o ácido láctico, dependiendo de si eran - Dcm para hongos y bacterias en la salida del
dematiáceas o no; para luego ser preparados por Departamento de Biología.
punción con aguja o por impronta con cinta sobre una Dcm = 0.4 Unidades/cm
lámina portaobjetos. - Dcm para hongos y bacterias en el laboratorio
Se realizó la tinción de Gram, para lograr determinar la de ornitología.
morfología bacteriana y diferenciarla de levaduras, pues Dcm = 0.45 Unidades/cm
pueden llegar a confundirse macroscópicamente por el - % AC para hongos en el laboratorio de
aspecto de las colonias. ornitología.
%AC = 3,00%
Observación de las muestras - % AC para hongos en la salida del
Las colonias de hongos se caracterizan Departamento de Biología.
macroscópicamente y luego se pasaron bajo el %AC = 16.63%
microscopio, en él se observaron y con ayuda de claves
taxonómicas se trato de hacer una identificación, en el
DISCUSIÓN
aumento de 40x. Para ello se debe tener presente las
estructuras reproductivas, la forma de las esporas y la
presencia o ausencia de septos en las hifas. Uno de los hechos inusuales que se presentaron en la
A las colonias bacterianas, se les realizó la práctica de exposición ambiental fue el reducido
caracterización macroscópica, y en el microscopio se número de hongos filamentosos que crecieron en la
determinó su forma por la tinción y la agrupación en la caja de petri que se dejó cerca a ornitología en
que se encontraran. contraste con la alta presencia de levaduras, pues los
primeros suelen presentarse de manera elevada como
lo evidencia Malca (2018) en un estudio realizado en
RESULTADOS líneas de transporte público en donde asilaron 165
colonias de hongos filamentosos, principalmente del
Luego de realizar el conteo de UFC, se realiza la género Aspergillus, Penicillium y Rhizopus; y en el
descripción macroscópica alojada en las tablas 1 y 2 trabajo de Méndez-Puentes, Et al donde la mayoría de
DETERMINACIÓN DE CARGA MICROBIANA EN DOS ESPACIOS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA: UN
ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.
Con base en los resultados obtenidos, el crecimiento Por otra parte, en ambientes líquidos (Tilbury 1980
de levaduras y la poca presencia de hongos con base en Christian, 1967), con alta concentración
filamentosos en los medios de cultivo tras la de sustancias orgánicas y baja humedad relativa y por
exposición en el laboratorio de ornitología, ende poca presión de vapor (Rose, 1987 con base en
probablemente se deba a la presencia de naftalina en Mossel, 1975), pueden permanecer y crecer levaduras
el lugar. La naftalina en escamas es usada en toda el xerotolerantes (Rose, 1987), que toman como fuente
área compartida de ornitología y entomología del ICN, de carbono principalmente glúcidos, y suplen la
con el fin de absorber la humedad del ambiente para carencia de agua principalmente con arabitol o
evitar la aparición de lepidópteros (Stone y Strock, glicerol, que funcionan como protectores de enzimas y
2008) que puedan afectar los ejemplares de colección. osmorreguladores compatibles (Tilbury, 1980);
Al ser un compuesto tan volátil y duradero, llena todo además de que no requieren altas concentraciones de
el espacio perdurando durante meses. nitrógeno, minerales ni vitaminas, estas últimas las
Adicionalmente, no se ha reportado crecimiento de pueden sintetizar (Tilbury 1980 con base en Ingram,
colonia mucoides de levaduras sobre los utensilios o 1958).
mobiliario del laboratorio, posiblemente debido a la Aunque estas levaduras resistan a humedades
baja capacidad de fijación de las levaduras a este tipo relativas bajas, no pueden desarrollarse óptimamente
de superficies inorgánicas (Douglas, 1987). si el medio carece del mínimo de carbono y nitrógeno
Los hongos filamentosos requieren de humedad (Feldmann, 2012).
atmosférica o en el sustrato para desarrollarse, de lo De esta manera se puede relacionar la dominancia de
contrario entran en latencia o producen esporas levaduras sobre hongos filamentosos en los medios de
resistentes a la deshidratación (Garcés de Granada et cultivo expuestos, con un ambiente de poca humedad
al., 2003); aunque hay algunos hongos filamentosos relativa causada por la naftalina y pocos sustratos
osmofílicos (xerotolerantes) que pueden crecer orgánicos sólidos en el laboratorio, pues el único
óptimamente en superficies sólidas (más que en sustrato ideal al momento de la exposición ambiental
líquidas) donde el potencial redox es mejor para estos fué el PDA, que al ser coloidal y contener elementos
debido a su condición aeróbica (Tilbury, 1980). esenciales de la papa y dextrosa 20g/L (Merck
DETERMINACIÓN DE CARGA MICROBIANA EN DOS ESPACIOS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA:
UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.
CUBIELLA T, FERNÁNDEZ E. Simbiosis hormigas MOHR AJ. Fate and transport of microorganisms in air. in:
attine-hongos-actinomicetos. 2008. Hurst CJ et al. (ed). Manual of environmental microbiology.
American Society for Microbiology. 1997.
ESPINOSA CI, RODRIGUEZ FC, MARTÍNEZ MA, VIZUELA JF,
TORRES SM, LEMA LA, PESANTEZ LF, ABAD AM. Carga MOURITSEN OG, STYRBAEK K. Umami. Unlocking the secrets
microbiana y lavado de manos en el personal de emergencia of the fifth taste. Columbia University Press. 2014. p. 172.
del Hospital de Especialidades José Carrasco Arteaga.
Archivos Venezolanos de Farmacología y Terapéutica. PÉREZ S, BARRERO E. Biología de los líquenes. Consejería de
2018;37(3): 266-269. Medio Ambiente. 2003. p. 1-18.
EUROLAB. Pruebas de carga microbiana. Recuperado de: CUEVAS JA. Los hongos: héroes y villanos de la prosperidad
https://www.eurolab.com.tr/es/testler/medikal-tibbi-cihaz- humana. 2016;17(9).
performans-testleri/mikrobiyal-yuk-testleri
VILANOVA L. Interacción fruta-patógeno: factores de
FELDMANN H. Yeast. Molecular and cell biology. virulencia de Penicillium spp. y mecanismos de defensa de
Wiley-Blackwell. 2012; 183, 280. naranjas y manzanas. Universitat de Lleida. 2014.
GREGORY PH, MONTEITH JL Airborne microbes. Ed. -Pírez, M., & Mota, M. (2006). Morfología y estructura
Cambridge University Press, Cambridge. 1967. bacteriana. Temas de bacteriología y virología médica.
GREGORY PH The microbiology of the atmosphere. Ed. John QUINCENO J, BASTIDAS J, ROJAS D, BAYONA M. La mosca
Willey and Sons, New York. 1973. doméstica como portador de patógenos microbianos, en
cinco cafeterías del norte de Bogotá. Rev. U.D.C.A Act. & Div.
HURST CJ, GARLAND JL, MILLS AL, CRAWFORD RL, LIPSON Cient. 2010;13 (1): 23-29.
DA, STETZENBACH LD. Manual of environmental
Microbiology. Third edition. American Society of RÍOS S, AGUDELO RM, GUTIÉRREZ LA. Patógenos e
Microbiology Press. 2007; 72-73, 644. indicadores microbiológicos de calidad del agua para
consumo humano. Rev. Fac. Nac. Salud Pública. 2017; 35(2):
LABORATORIOS BRITANIA SA. Hoja técnica, Extracto de 236-247. DOI: 10.17533/udea.rfnsp.v35n2a08
levadura. Recuperado de:
https://www.britanialab.com/back/public/upload/producto ROSE AH. Responses to the chemical environment. In: ROSE
s/upl_5a3160270a43a.pdf AH, HARRISON JS. (ed). The yeasts Vol. 2 Yeasts and
environment. Academic Press. 1987; 7-8
LABORATORIOS BRITANIA SA. Nutritivo Agar. PI7149. 2015.
Recuperado de: SÁNCHEZ J. Ecología microbiana con énfasis en micorrizas.
https://www.britanialab.com/back/public/upload/producto Cartilla Interactiva. Universidad Nacional de Colombia.
s/upl_5a28446b169d8.pdf 2013. Recuperado de:
DETERMINACIÓN DE CARGA MICROBIANA EN DOS ESPACIOS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA:
UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.
STONE D, STOCK T. El control de polillas: las bolas de VALIÑO E, ELÍAS A, TORRES V, ALBELO N. Estudio de la carga
naftalina y otros métodos.Oregon State University Extension microbiana en el bagazo de caña de azúcar fresco como
Service. 2008 sustrato para la alimentación animal, mediante
evista Cubana de Ciencia
fermentaciones en estado sólido. R
SPOTO MH, GALLO CR, DOMARCO RE, ALCARDE AR, Agrícola. 2002; 36(4): 373-378.
WALDER JM, BLUMER L. Radiação gama na redução da carga
microbiana de filés de frango. Ciênc. Tecnol. Aliment. VARGAS T, KUNO A. Morfología bacteriana. Revista de
Campinas. 1999;19(3). Actualización Clínica. 2014; 49(2): 2594-2598.
ANEXOS
ANEXO 1 : Superior: Cajas de Petri, Medio PDA, Laboratorio de Ornitología. Inferior: Medio AN, Laboratorio
de ornitología.
CAJA 1 CAJA 2
ANEXO 2: Superior: Cajas de Petri, Medio AN, Salida del Departamento de Biología. Inferior: Cajas de Petri,
Medio PDA, Salida del Departamento de Biología.
DETERMINACIÓN DE CARGA MICROBIANA EN DOS ESPACIOS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE
COLOMBIA: UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.
ANEXO 3: Observación microscópica de hongos, Medio PDA, Salida del Departamento de Biología. Levaduras
e hifas septadas con conidias.
DETERMINACIÓN DE CARGA MICROBIANA EN DOS ESPACIOS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE
COLOMBIA: UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.
ANEXO 4: Observación microscópica, Medio PDA, Laboratorio de Ornitología. Levaduras, Bacilos Gram + y
Gram -
ANEXO 5: Observación microscópica de bacterias, Medio AN, Salida del Departamento de Biología. Bacilos
Gram -.
DETERMINACIÓN DE CARGA MICROBIANA EN DOS ESPACIOS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE
COLOMBIA: UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.
ANEXO 6: Observación microscópica de bacterias, Medio AN, Laboratorio de Ornitología. Bacilos Gram +, a la
derecha, formadores de endospora.