DETERMINACIÓN DE CARGA MICROBIANA EN DOS ESPACIOS DE LA

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

Un Acercamiento Básico al Estudio de Hongos y Bacterias

Determination of Microbial Charge in Two Spaces of the National

University of Colombia
A basic approach to bacteria and funguses study
__________________________________________________________________________________
Nixon Andres CASTILLEJO-LOZANO​1​, Laura Milena HERNANDEZ-HERNANDEZ​1​, Dannys Alejandra HERRERA-ALFARO​1​,
Santiago David ORDOÑEZ-MAZABEL​1​, Erick Nicolas PATIÑO-ACOSTA​1​, Dylan Alexander RODRÍGUEZ-DÍAZ​1​,
1​
​ Departamento de Biología, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia, Ciudad Universitaria de Bogotá
Cra. 30 Este # 45-03 Bogotá, Colombia.

RESUMEN
Los alimentos que consumimos, los lugares que habitamos y casi todo aquello que tocamos esta recubierto y morado por
microorganismos. Entre estos encontramos a los hongos y bacterias, de diversas formas, tipos y especies que pueden ser
estudiados en un laboratorio disponiendo de los elementos necesarios. En el presente trabajo se ha desarrollado un
análisis que abarca la determinación de carga microbiana en dos espacios aislados pertenecientes a la Universidad
Nacional de Colombia, sede Bogotá: El laboratorio de ornitología en el ICN y la puerta secundaria del Departamento de
Biología; con el objetivo de conocer y reconocer los organismos allí presentes y determinar qué restricciones en su
ubicación se presentan de acuerdo a ciertas condiciones ambientales como lo son productos químicos, vegetación o
locación. Para esto se han hecho diferentes exposiciones al medio que posteriormente mostrarán el crecimiento de
diferentes colonias para proceder con su estudio detallado. Se realizaron recuentos y, una descripción macroscópica y
microscópica para cada UFC. Se reportaron levaduras, bacilos Gram + y Gram -, con más diversidad en la puerta secundaria
del Departamento de Biología, allí mismo se observaron hongos filamentosos que se consideraron pertenecientes a
Ascomycetes y Basidiomycetes. Se logró concluir que el medio de cultivo usado PDA no es totalmente selectivo para
hongos, puesto que de igual manera crecieron algunas bacterias. La presencia de algunos compuestos circundantes en el
Laboratorio de Ornitología pudo haber incurrido en baja diversidad microbiana. A diferencia de la Salida del Departamento
de Biología, en donde la carga microbiana era mucho mayor con relación a la anterior.
Palabras Clave:​ Hifas, Levaduras, Bacterias, Unidades formadoras de colonias, microorganismos, Hongos Filamentosos

ABSTRACT
Food we consume,, the places we inhabit and almost everything we touch is covered by microorganisms. Among these we
find fungi and bacteria, of various forms, types and species that can be studied in a laboratory with the necessary
elements. In the present work an analysis has been developed that covers the determination of microbial load in two
isolated spaces belonging to the National University of Colombia, Bogotá Campus: The ornithology laboratory at the ICN
and the secondary door of the Department of Biology; on the objective of know and recognizing the organisms present
there and determining what restrictions on their location are presented according to certain environmental conditions
such as chemicals, vegetation or location. For this, different exposures have been made to the environment that will
subsequently show the growth of different colonies to proceed with their detailed study. Counts were made and a
macroscopic and microscopic description for each CFU. Yeasts, Gram + and Gram - bacilli were reported, with more
diversity in the secondary door of the Department of Biology, there were filamentous fungi that were considered belonging
to Ascomycetes and Basidiomycetes.It was concluded that the growth medium used PDA is not totally selective for fungi,
since some bacteria also grew. The presence of some surrounding compounds in the Ornithology Laboratory may have
incurred low microbial diversity. Unlike the Departure of the Department of Biology, where the microbial load was much
higher compared to the previous one.
Key words​: Hyphae, Yeasts, Bacteria, colony-forming unit, microorganisms, Filamentous fungi.
DETERMINACIÓN DE CARGA MICROBIANA EN DOS ESPACIOS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE
COLOMBIA: UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.
INTRODUCCIÓN
Los estudios microbiológicos abarcan el análisis de
diversos organismos tales como hongos, bacterias
y protozoos; que se encuentran en casi cualquier
ambiente donde se hallen las condiciones mínimas
para vivir, incluso en ambientes extremos como el
caso de las arqueas o algunas bacterias
extremófilas. Esto puede ser confirmado en la
cotidianidad cuando de repente se olvida retornar
el pan a la bolsa sellada y este termina con una
extendida masa filamentosa de color oscuro. Sin
embargo, lo que parece un error humano,
demuestra realmente la eficiencia y el éxito de
organismos que liberan sus numerosas esporas al
aire y acompañan hasta el mas recondito lugar: los
hongos. Estos microorganismos tienen un amplio
espectro de relaciones simbióticas que abarcan
desde parásitos, en relaciones fruta-patógeno
(Torren, 2014) como en las naranjas con el hongo
del género ​Penicillium​, hasta mutualismos como
micorrizas (con plantas) (Nieves, 2013), líquenes
(con algas o cianobacterias) (Barreno & Ortega,
2003) y relaciones con animales como
Bongo-​Attine que a menudo incluyen
Basidiomycetes (Victorero & Fueyo, 2018). Del
mismo modo ocurre con las bacterias sobre
alimentos y casi cualquier objeto. La
determinación de carga microbiana ayuda a
esclarecer en un laboratorio, los microbios que
rodean una zona. No obstante, si se diera a estos
organismos los componentes adecuados para su
desarrollo y crecimiento, sería posible su estudio
detallado en escalas micro y macro como se verá a
continuación.
Medios de cultivo.
Los estudios respectivos a la carga microbiana
indican qué tipo de microorganismos hay en el
ambiente de exposición y cual es su densidad o
número en una muestra tomada (Valiño et al.,
2002). Para ello se procede a utilizar diferentes
medios de cultivos, como en este caso, agares
Papa Dextrosa (PDA) y Nutritivo (AN). Su principio
es otorgar al organismo el ambiente propicio para
poder crecer, acompañado de factores como
humedad, aireación y temperatura. El PDA es un
medio bastante común para realizar cultivos de
hongos, su contenido de glucosa o dextrosa junto
al almidón de la papa benefician el crecimiento de
estos por su alto contenido de carbono (Acumedia,
2015). Por el contrario, el AN se utiliza para
siembra de bacterias, siendo el extracto de carne
el componente que proporciona carbohidratos,
vitaminas y nitrógeno a las colonias (Britania
2015).
Breve descripción de los microorganismos a
estudiar.
En lo que a este trabajo respecta, se hará un
estudio de diferentes hongos y bacterias en los
ambientes expuestos: Laboratorio de Ornitología y
la entrada del Departamento de Biología.
Las bacterias son microorganismos procariotas,
carentes de núcleo definido, unicelulares y de
reproducciòn por fisión binaria (Pírez & Mota,
2006) Su particularidad está dada por su forma y
además por presentar una pared celular de
peptidoglicano (N-acetilglucosamina unido a
N-acetilmurámico), una bicapa lipídica en la
membrana y en algunas bacterias por presentar
flagelo (Flores & Vargas, 2014). Pueden ser de
vida libre u obligadas, siendo cosmopolitas.
Los hongos son microorganismos eucariotas, con
núcleo definido y pueden ser unicelulares o
multicelulares. Presentan, como principio, fase
reproductiva sexual y asexual, dando a estos una
gran plasticidad genética y éxito evolutivo (Cepero
de Garcia, 2012). Se caracterizan principalmente
por tener una pared celular de quitina (similar al
exoesqueleto de los artrópodos), presentar
digestión extracelular y poseer ergosterol en la
membrana. Se reproducen por esporas y su
estructura básica es la hifa (Moreno, 2016). La
mayoría, al igual que los animales, almacenan el
alimento en forma de glucógeno (Cepero de
Garcia, 2012).
Hongos y bacterias juntos, representan
actualmente un amplio estudio de gran interés
biológico, industrial y de salud pública; tal como la
producción de fármacos basados en antibióticos
producidos por hongos (e.g ​Penicillium​), estudios
de patògenos cómo ​Batrachochitrium
dendrobatidis​, conocimiento de bacterias como ​E.
coli​, ​Staphylococcus aureus para la producción de
sus antibacteriales, entre otros. Recientemente se
ha venido estudiando el efecto y la aplicaciòn de
las esporas de ​Basillus clausii para combatir la
diarrea, un medicamento llamado Enterogermina
que aprovecha las propiedades de los probióticos y
evita la deshidratación de elementos
fundamentales y sales (Laniro et al., 2018).
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COLOMBIA: UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.
Caracteres macroscópicos de hongos y bacterias.
Cuando los hongos se encuentran dispuestos en
un medio de cultivo, en este caso PDA, es posible
realizar el análisis previo a la vista microscópica.
Esto es, observar la coloración de la colonia al
reverso y el anverso de la caja de Petri, si esta
presenta zonación (círculos concéntricos) , si es
dematiacea, no dematiacea o hialina y si su textura
es algodonosa, cremosa o aterciopelada. Teniendo
en cuenta que los hongos presentan crecimiento
radial, es necesario realizar la medida a estos de su
diámetro.
De igual forma, para las bacterias se realiza un
criterio similar analizando la forma, luz
transmitida, contextura de la superficie, elevación,
consistencia y presencia de pigmentos difusibles.
Es importante recalcar que así como las bacterias
presentan formas filamentosas (e.g ​Actinomice-
tos)​ , los hongos presentan formas cremosas
(Orden ​Endomycetales​).
Caracteres microscópicos de hongos y bacterias.
Las descripciones microscópicas de los hongos
tienen en cuenta principalmente la forma de las
hifas: si estas presentan septos (septadas) o si no
(cenocíticas). Para su observación es necesario
usar un colorante para esclarecer ciertas
estructuras: cuando el hongo es dematiáceo, se
usa ácido láctico, pero cuando es no dematiáceo o
hialino, se usa azul de lactofenol. Para hacer un
análisis más detallado y hacer uso de claves
taxonómicas, es necesario la ubicación de
estructuras reproductivas y conocer de antemano
que si las hifas son cenocíticas, probablemente es
un hongo inferior (zygomycetes o chytridiomyce-
tes) y si son septadas, seguramente es superior
(Ascomycete o Basidiomycete). Ahondando más,
se analizan las estructuras reproductivas para
observación de esporas, conidias y conidiogenesis;
ascas, basidios, flagelos en zoosporas o
zigosporangios.
Los criterios básicos para clasificar bacterias son la
forma: si son cocos, bacilos o menos comunes
vibrios o actinomicetos. La clasificación de Gram: si
son Gram + o Gram - y en caso de ser bacilos Gram
+, verificar si presentan o no formación de
endospora.
Formulación para determinar la carga microbiana
Hay varias formas de determinar la carga
microbiana, una de ellas es el conteo de Unidades
Formadoras de Colonia (UFC), de manera
cualitativa determinando si son muchas o pocas y
el efecto que tienen componentes sobre este
crecimiento o decrecimiento (Pineda et al., 2000);
y de manera cuantitativa determinando cuántas
son y diferentes percentiles (Díaz et al., 2018).
Esto, claramente ligado al hecho de reconocer que
tipo de microorganismos son. es decir: cuantos y
cuales son.
Para el presente trabajo, se ha optado por un
método empírico que reúna información de que
tipo de microorganismos hay y adjunto a esto,
realizar un análisis de posibles químicos disueltos
en el aire que restrinjan la presencia de hongos o
bacterias. El camino que se considera más
adecuado es la determinación de carga microbiana
cualitativa con dos ecuaciones básicas que den
información de la presencia y densidad de estos
microorganismos sobre las cajas de petri con PDA
y AN.
La Ecuación 1 muestra la densidad de organismos
por área en el medio de cultivo, por lo tanto, entre
mayor sea el valor del cociente entre las UFC y el
área de la caja de Petri (x constante) mayor será la
Dcm​ (Densidad de Carga Microbiana) (UFC/cm^2)
1) Dcm = U F C/ x
La ecuación 2 permite saber el porcentaje de Área
de Cubrimiento (%AC) de las colonias totales en el
medio de cultivo, lo cual aporta información
adicional a la Ecuación 1 asumiendo un mayor
valor de ambas ecuaciones como una alta carga
microbiana en la zona de exposición. Esta ecuación
permite saber también, hasta el dia, que tanto se
expandieron los microorganismos en el medio.
2) %AC = (Area de cubrimiento de U F C/x) * 100
Siendo​ x​ constante= 314 cm^2
MATERIALES Y MÉTODOS
Área de exposición
Se realizaron dos exposiciones ambientales para
hongos y bacterias, en dos sitios diferentes del
Departamento de Biología de la Universidad
Nacional. Los medios se colocaron: uno en la
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puerta secundaria del departamento de Biología y dos
en el laboratorio de ornitología. En la salida secundaria
del departamento, una zona al aire libre y por lo tanto
expuesta, se presentaron corrientes de aire muy
fuertes, y alrededor de esta zona, se encontraban heces
de vaca, el paso de varias personas y de autos, además
de la presencia de insectos. El Segundo lugar
corresponde a el laboratorio de ornitología en donde
se depositan diferentes tipos de compuestos químicos
provenientes del área de trabajo.
Exposición
En ambos caso se expusieron las cajas de Petri abiertas
durante 10 minutos para realizar una siembra por
sedimentación o impacto, cuyo medio fue Agar Papa
Dextrosa (PDA), determinante para hongos; Para
bacterias se realizó el mismo procedimiento con una
diferencia en el medio, pues para este caso se usó Agar
Nutritivo. Posteriormente fueron llevadas a incubación
a 20°C durante una semana.
Preparación de las muestras
En el montaje de las muestras al microscopio se debió
tener en cuenta las muestras ya que se usaron
diferentes reactivos, para hongos se determinó primero
el color de su esporada y se teñían con azul de
lactofenol o ácido láctico, dependiendo de si eran
dematiáceas o no; para luego ser preparados por
punción con aguja o por impronta con cinta sobre una
lámina portaobjetos.
Se realizó la tinción de Gram, para lograr determinar la
morfología bacteriana y diferenciarla de levaduras, pues
pueden llegar a confundirse macroscópicamente por el
aspecto de las colonias.
Observación de las muestras
Las colonias de hongos se caracterizan
macroscópicamente y luego se pasaron bajo el
microscopio, en él se observaron y con ayuda de claves
taxonómicas se trato de hacer una identificación, en el
aumento de 40x. Para ello se debe tener presente las
estructuras reproductivas, la forma de las esporas y la
presencia o ausencia de septos en las hifas.
A las colonias bacterianas, se les realizó la
caracterización macroscópica, y en el microscopio se
determinó su forma por la tinción y la agrupación en la
que se encontraran.
RESULTADOS
Luego de realizar el conteo de UFC, se realiza la
descripción macroscópica alojada en las tablas 1 y 2
para hongos y bacterias. Algunas colonias poco
relevantes fueron descartadas por no aportar
información adicional que complementa el análisis del
cultivo en general. La colonia 1 del laboratorio de
ornitología presentaba dos UFC, por tanto se
multiplicará de este modo para la determinación de la
Dcm.​
Respecto a la descripción microscópica de bacterias, se
reportan bacilos Gram + y Gram - (Anexo 4, 5 y 6), con
más diversidad a la salida del Departamento de
Biología.
Únicamente se observaron hongos filamentosos
analizables en la salida del Departamento de Biología.
Todos resultaron septados con presencia de conidias y
algunos (Anexo 3 sup.) con estructuras reproductivas.
para el parámetro de clasificación se han usado la
presencia de esporas y el carácter septado de las hifas;
por lo cual se asumen tales colonias pertenecientes a
Ascomycetes y Basidiomycetes. Por otro lado, hubo
presencia de levaduras en ambos sitios (Orden
Endomycetales), reconocidas por su tamaña
voluminoso en comparación a un coco. Hubo presencia
en ambos casos de bacilos Gram + sobre medio PDA.
Realizando la suma de todas la áreas y asumiendo el
teórico crecimiento radial de los hongos:
- Dcm para hongos y bacterias en la salida del
Departamento de Biología.
Dcm = 0.4 Unidades/cm
- Dcm para hongos y bacterias en el laboratorio
de ornitología.
Dcm = 0.45 Unidades/cm
- % AC para hongos en el laboratorio de
ornitología.
%AC = 3,00%
- % AC para hongos en la salida del
Departamento de Biología.
%AC = 16.63%
DISCUSIÓN
Uno de los hechos inusuales que se presentaron en la
práctica de exposición ambiental fue el reducido
número de hongos filamentosos que crecieron en la
caja de petri que se dejó cerca a ornitología en
contraste con la alta presencia de levaduras, pues los
primeros suelen presentarse de manera elevada como
lo evidencia Malca (2018) en un estudio realizado en
líneas de transporte público en donde asilaron 165
colonias de hongos filamentosos, principalmente del
género ​Aspergillus, Penicillium y Rhizopus​; y en el
trabajo de ​Méndez-Puentes, ​Et al donde la mayoría de
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aislamientos ambientales fúngicos fueron de hongos
filamentosos principalmente del género ​Aspergillus,
Penicillium y Rhizopus;​ y en el trabajo de
Con base en los resultados obtenidos, el crecimiento
de levaduras y la poca presencia de hongos
filamentosos en los medios de cultivo tras la
exposición en el laboratorio de ornitología,
probablemente se deba a la presencia de naftalina en
el lugar. La naftalina en escamas es usada en toda el
área compartida de ornitología y entomología del ICN,
con el fin de absorber la humedad del ambiente para
evitar la aparición de lepidópteros (Stone y Strock,
2008) que puedan afectar los ejemplares de colección.
Al ser un compuesto tan volátil y duradero, llena todo
el espacio perdurando durante meses.
Adicionalmente, no se ha reportado crecimiento de
colonia mucoides de levaduras sobre los utensilios o
mobiliario del laboratorio, posiblemente debido a la
baja capacidad de fijación de las levaduras a este tipo
de superficies inorgánicas (Douglas, 1987).
Los hongos filamentosos requieren de humedad
atmosférica o en el sustrato para desarrollarse, de lo
contrario entran en latencia o producen esporas
resistentes a la deshidratación (Garcés de Granada ​et
al​., 2003); aunque hay algunos hongos filamentosos
osmofílicos (xerotolerantes) que pueden crecer
óptimamente en superficies sólidas (más que en
líquidas) donde el potencial redox es mejor para estos
debido a su condición aeróbica (Tilbury, 1980).
Méndez-Puentes, ​Et al donde la mayoría de
aislamientos ambientales fúngicos fueron de hongos
filamentoso
Por otra parte, en ambientes líquidos (Tilbury 1980
con base en Christian, 1967), con alta concentración
de sustancias orgánicas y baja humedad relativa y por
ende poca presión de vapor (Rose, 1987 con base en
Mossel, 1975), pueden permanecer y crecer levaduras
xerotolerantes (Rose, 1987), que toman como fuente
de carbono principalmente glúcidos, y suplen la
carencia de agua principalmente con arabitol o
glicerol, que funcionan como protectores de enzimas y
osmorreguladores compatibles (Tilbury, 1980);
además de que no requieren altas concentraciones de
nitrógeno, minerales ni vitaminas, estas últimas las
pueden sintetizar (Tilbury 1980 con base en Ingram,
1958).
Aunque estas levaduras resistan a humedades
relativas bajas, no pueden desarrollarse óptimamente
si el medio carece del mínimo de carbono y nitrógeno
(Feldmann, 2012).
De esta manera se puede relacionar la dominancia de
levaduras sobre hongos filamentosos en los medios de
cultivo expuestos, con un ambiente de poca humedad
relativa causada por la naftalina y pocos sustratos
orgánicos sólidos en el laboratorio, pues el único
sustrato ideal al momento de la exposición ambiental
fué el PDA, que al ser coloidal y contener elementos
esenciales de la papa y dextrosa 20g/L (Merck
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Millipore), entra en un rango óptimo de
requerimientos físicos y nutricionales para las
levaduras (Tilbury, 1980 con base en Tilbury 1967) que
pudieron entrar en contacto con el PDA en forma de
esporas y posteriormente desarrollarse en la etapa de
incubación de los medios de cultivo.
La liberación de péptidos, vitaminas y aminoácidos
(Britania) al medio luego de la ruptura de la pared
celular (Mouritsen y Styrbaek, 2014) tras la apoptosis
en las levaduras (Feldmann, 2012), puede favorecer el
crecimiento bacteriano tal como lo hace el extracto de
levaduras usado en agares especiales para estas (Hurst
et al.​ ,2007). Aun así, una menor densidad de UFC en el
PDA respecto de las obtenidas con AN, puede
relacionarse con que el PDA tiene un mayor radio C:N
que favorece el crecimiento fúngico, y el AN tiene un
radio tendiente a N:C que favorece el crecimiento
bacteriano (Tilbury, 1980).
En el aire se aíslan frecuentemente como bacterias
esporuladas de los géneros Bacillus, Clostridium y
Actinomicetos (Underwood, 1992). además podemos
decir que ciertas bacterias también son muy
frecuentes, como los bacilos pleomórficos Gram
positivos (Corynebacterium) y los cocos Gram
positivos (Micrococcus y Staphylococcus). Los bacilos
Gram negativos (Flavobacterium, Alcaligenes) se
encuentran en menor proporción y disminuyen con la
altura (Gregory, 1973; Pelczar et al., 1993).
Cladosporium es el hongo que predomina en el aire,
tanto sobre la tierra como sobre el mar, aunque
también es frecuente encontrar otros mohos, como
Aspergillus, Penicillium, Alternaria y Mucor (Takahashi,
1997) y la levadura Rhodotorula (Underwood, 1992)
Su escasa densidad les permite permanecer
suspendidas en el aire sin sedimentar. Algunas son
muy ligeras e incluso contienen vacuolas de gas y
otras tienen formas aerodinámicas que les permite
viajar por la atmósfera (Gregory, 1973).
Diversos estudios mostraron que el aire atmosférico
producía un mayor grado de inactivación que el aire
inerte obtenido, en el laboratorio. La causa podría ser
las reacciones entre el ozono y las olefinas debido a
una combinación de factores que incluyen
concentración de contaminantes e iones en el aire,
humedad y fluctuaciones de la presión, al conjunto de
los cuales se les llama factores del aire abierto (Mohr,
1997).
El análisis conjunto de dos sitios de exposición con
diferentes ambientes permitió hacer un contraste
entre las áreas afectadas por reactivos y baja
circulación de aire como es los sectores aledaños al
laboratorio de ornitología comparado a la salida de
biología que presenta un área abierta con constante
circulación de aire, que cuenta con la presencia de
actividad de ganado y sin potenciales agentes
químicos que inhiban el crecimiento de
microorganismos. En esta última área pudo
evidenciarse el crecimiento de 3 hongos filamentosos
como generalmente se presenta en este tipo de
ambientes, aunque la prevalencia de bacterias
esporuladas Gram positivas es común también, no se
logró obtener crecimiento de estas, probablemente a
causa de que el tipo de medio que está diseñado para
favorecer el crecimiento fúngico aunque no es
excluyente.
CONCLUSIONES
Los medios de cultivo, no son completamente
selectivos, pues son medios enriquecidos para
propiciar el crecimiento de hongos y bacterias por lo
que; se evidenció el crecimiento de hongos en el agar
nutritivo de bacterias; y de la misma manera bacterias
en el Agar Papa Dextrosa de los hongos. Indicando que
en un caso donde se necesite el crecimiento único de
un tipo de microorganismo, que para el tipo de prác-
tica de exposición ambiental no presenta inconve-
nientes pues el objetivo es la recuperación y captación
de la microbiota presente en determinado ambiente
pero si se busca un análisis de identificación es nece-
sario contar con medios de tipo selectivo que per-
mitan la recuperación de los microorganismos de
interés. Finalmente las características macroscópicas
de las levaduras nos permiten asociarlas con una tex-
tura cremosa junto a los colores pastel (Rosa, naranja
salmón) mientras que las bacteria generalmente pre-
senta la textura pero con aspecto transparente.
Finalmente se concluye que, de acuerdo a los resul-
tados numéricos, el laboratorio de ornitología presen-
ta una baja densidad de UFC al igual que la salida del
departamento de biología, sin embargo la carga micro-
biana de ornitología es baja debido a compuestos cir-
cundantes que disminuyen está junto a su diversidad,
esto igualmente contrastado con la baja cobertura de
los hongos sobre el agar. Por el contrario, la salida del
departamento de biología presenta una alta carga
microbiana, que se ve representada en su diversidad
de microorganismos y en la cobertura que estos
tienen sobre el agar, aunque hayan sido pocas las
colonias, se asume que llenaron por lo menos, más del
16 % del espacio del agar en solo organismos fúngicos
filamentosos.
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UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.
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DETERMINACIÓN DE CARGA MICROBIANA EN DOS ESPACIOS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE
COLOMBIA: UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.

ANEXOS

ANEXO 1 : ​Superior: Cajas de Petri, Medio PDA, Laboratorio de Ornitología. Inferior: Medio AN, Laboratorio
de ornitología.

CAJA 1 CAJA 2

ANEXO 2: ​Superior: Cajas de Petri, Medio AN, Salida del Departamento de Biología. Inferior: Cajas de Petri,
Medio PDA, Salida del Departamento de Biología.
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COLOMBIA: UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.

ANEXO 3: ​Observación microscópica de hongos, Medio PDA, Salida del Departamento de Biología. Levaduras
e hifas septadas con conidias.
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COLOMBIA: UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.

ANEXO 4: ​Observación microscópica, Medio PDA, Laboratorio de Ornitología. Levaduras, Bacilos Gram + y
Gram -

ANEXO 5: ​Observación microscópica de bacterias, Medio AN, Salida del Departamento de Biología. Bacilos
Gram -.
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COLOMBIA: UN ACERCAMIENTO BÁSICO AL ESTUDIO DE HONGOS Y BACTERIAS.

ANEXO 6: ​Observación microscópica de bacterias, Medio AN, Laboratorio de Ornitología. Bacilos Gram +, a la
derecha, formadores de endospora.