Microbiología Clínica clase 1

Infecciones del sistema nerviosos central

Leve sintomatología para reconocer una infección del sistema nervioso central.

- Recién nacido con fiebre de 39 grados centígrados, irritabilidad, vómitos y convulsiones, fontanela tensa.
- Lactante de 11 meses con fiebre, vómitos, somnolencia, tos, rigidez de nuca, brudzinsky + (evalúa los reflejos
motoros), espasticidad musculara e hiperflexión. Rto de GB: 25000 con predominio de PMN - glucosa 90mg/dl.
- Femenino de 5 años con cefalea intensa, vómitos, rigidez muscular, rash eritematoso (petequias y purpura).

En todos los casos tienen la fiebre muy alta, algo que indica problemas en el SNC son los vómitos y las convulsiones,
fontanela tensa (cuando los nenitos nacen con un cráneo no compacto) y existen ciertos signos como la rigidez de nuca en los
recién nacidos. En el caso en los bebes con este cuadro la cabeza no cae hacia atrás, esto indica también un problema en el
SNC. El brudzinsky es para ver cómo funciona el sistema nervioso periférico. Espasticidad (tensión muscular), hiperreflexia.
Los GB indican una infección. Rash eritematoso (se rompen los capilares sanguíneos cuando el individuo se enferma
provocándose una petequia).

Todos estos signos son de una meningitis, es una de las enfermedades comunes en los recién nacidos, lactantes y niños
menores a 5 años. Es una enfermedad del SNC en los cuales existe la inflamación de la meninges (membranas que protege al
cerebro  duramadre aracnoides, piamadre) el aracnoides se comunica con las otras meninges a través de extensiones entre
ellas, no están pegadas una a las otras o sea que hay espacios (espacio epidural (entre la duramadre y la aracnoides) el
espacio subaracnoideo (entre el aracnoides y la piamadre)). Por lo general en el espacio epidural es común que se produzcan
los abscesos que son como tumores que pueden ser de origen bacteriológico, parasitológicos y fúngicos, y son los que se
llama masa ocupante que solamente se puede ver con diagnósticos por imágenes. Hay abscesos por amebas, tuberculosos,
Cryptococcus neoformans (que provoca abscesos en inmunodeprimidos). En el espacio subaracnoideo se encuentra el
1 reservorio del líquido céfalo raquídeo. Las meninges no se conectan con el sistema circulatorio sino que están
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la barrera hematoencefálica (barrera casi impermeable) que impide que cualquier cosa que, ande en sangre, entre al cerebro
(toxinas, gérmenes).

Normalmente el LCR mantiene un ambiente de protección de las meninges, tiene algunas funciones linfáticas, y es estéril.
Cuando se produce la meningitis, lo que paso es que la BHE se volvió más permeable permitiendo la entrada de gérmenes,
sustancias, toxicas además de glóbulos blancos y glucosa que este ultimo las bacterias van a necesitar para desarrollarse.
Todos lo anterior produce la inflamación de las meninges. Solo las sustancias que nutren al cerebro van a poder ingresar. La
meningitis las podemos definir como la inflamación de las meninges o como la presencia de gérmenes en el LCR.

La meningitis va a tener diferentes agentes etiológicos según la edad del paciente. Entonces se dividen en:

- Recién nacidos / lactantes de 0 a 3 meses  treponema pallidum, Escherichia coli K1 (se contrae en el canal de parto)
Streptococcus agalactiae (se contrae en el canal de parto), listeria monocytogenes (se obtiene por comer alimentos mal
procesados y se contagia por vía intrauterina).
- Niños de 3 meses a 5 años > de 5 años y adultos  Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Neisseria
meningitidis.
- Ancianos > de 65 años  Neisseria meningitidis, listeria monocytogenes.

Clasificación de las meningitis  se dividen en dos grupos LCRT (líquido cefalorraquídeo turbio) y LCRC (liquido
cefalorraquídeo claro)

El LCR es la muestra para hacer el diagnostico de meningitis. Lo que se hace al paciente es ponerlo en cubito dorsal el cual se
le hará una punción en la cuarta y quinta vertebra doral en el cual en el espacio entre las dos vértebras se le hará una
punción con aguja estéril el cual caerá por goteo en un frasco también estéril el LCR. En adulto se podrá obtener entre 5 a 10
ml y en un niño 2ml.
 Esta punción no tiene nada contraproducente si es que no tiene ningún obseso bacteriano, tuberculoma o cualquier oma. Se
produce una presión intracraneal, el cual la punción le podría provocar la muerte (enclavamiento cerebral) por lo que el
medico tiene que estar seguro de que está buscando una meningitis, por esta razón las meningitis viene acompañado por un
diagnóstico por imágenes para estar seguro de que no tiene ningún quiste o tumor.

Junto con el LCR se hace un Hemocultivo seriado de sangre son las dos muestras que se hacen en el laboratorio para la
detección de meningitis.

El hemocultivo seriado consiste en sacarle al paciente muestras de sangre cada 30 minutos hasta 3 muestras. 5 ml en los
adultos y 2 en niños, la sangre se pone en una botellita de hemocultivo el 10% del volumen total de la botellita hay de 20 y
50ml el cual contiene un caldo altamente nutritivo. El frasco se tiene que mantener lo más estéril posible asegurándose de
aplicar todas las medidas para que el hemocultivo no se contamine. El hemocultivo se saca dentro de las 24 horas porque es
urgente para prevenir y disminuir los síntomas.

LCRT (meningitis bacteriana es la más peligrosa)  contiene gran cantidad de leucocitos

LCRC  son infecciones de tipo viral, fúngica o tuberculosa.

Meningitis agudas son las que duran dentro de las 24 horas o menos de 7dias, podemos considerar algunas meningitis virales
como meningitis agudas. Las meningitis crónicas son aquellas producidas por parásitos y por hongos, y duran 15 días. Las
meningitis fúngicas siempre van a estar relacionadas con una inmunosupresión.

Las meningitis por traumas en la cabeza  Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis y algún bacilo Gram negativo
o que no sea Escherichia coli, como Klebsiella spp. También podría tener algún anaerobio como Clostridium spp.

LCR se hace en la cámara de Bauer el recuento de GB y hematíes, Rto diferencial para ver si hay PMN y MN, un Gram y un
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Ziehl Neelsen. En el Gram buscamos cocos positivos en cadenas o B- y B+ y Ziehl Neelsen para ver si hay BAAR. Después se
hace un físico químico para determinar  glucosa, proteínas y cloruros. Cultivos agar a sangre, agar chocolate, Thayer Martin
(estos van a estufa a 37 grados con CO2) si sospecho de un anaerobio hago un agar sangre en anaerobiosis, y puedo hacer un
Levine o MacConkey para encontrar Escherichia coli.

¿Qué informo al médico? Le informo los resultados del recuento de blancos del Gram y del Ziehl Neelsen. También puedo
infórmale glucosa y proteínas. Porque es importante el recuento de PMN porque dan generalmente meningitis bacteriales y
MN si es meningitis Viral o fúngicas.

Gram si es coco positivo en cadena, pueden ser dos o Streptococcus pneumoniae o agalactiae. Si es coco positivo en racimo
puede ser Staphylococcus aureus o epidermidis. Si son bacilos negativos posiblemente sea Haemophilus influenzae o
Escherichia coli (Escherichia coli bacilo más gordo y Haemophilus bacilo más flaco) y si es un bacilo positivo será listeria
monocytogenes. La coloración de Ziehl Neelsen es igual que la Gram, utiliza dos colorantes. La Ziehl Neelsen utiliza primero la
fucsina fenicada, se hace un preparado en un porta objeto, El LCR se fija con la llama al mechero y 1) se coloca la fucsina
fenicada se deja actuar un minuto 2) flamear y lavar 3) le ponemos acido-alcohhol,4) lavamos 5) agregamos el azul de
metileno. Si tengo Mycobacterium tuberculosis se va a quedar con el color de la fucsina, y si le pongo acido-alcohol no se le
ira el color por esto se le llama BAAR. Y las otras bacterias que acompañan al bacilo tubérculo se teñirán de azul porque no
son resistentes al Acido-alcohol. Para hacer una buena observación de BAAR se tienen que observar 100 campos para dar un
buen informe recorriendo el porta objeto en guarda griega, para ver si encuentre 1 bacilo rosa esto puede ser diagnóstico de
tuberculosis. Por lo tanto para informar esto se informara de acuerdo a la cantidad de bacilos que veo con capos con +++.
Glucosa proteínas, la glucosa va a estar más baja de lo normal y las proteínas aumentadas. La glucosa disminuye porque las
bacterias la consumen y las proteínas aumentan porque la BHE aumenta su permeabilidad.
 El agar sangre  Que espero encontrar  Colonias Alfa hemolíticas,  Colonias Beta Hemolíticas, Colonias aspecto
mantecoso puntiforme,  Colonia aspecto mantecoso grande.

Si tengo colonias alfa hemolíticas, que tipo de Gram tengo que haber visto al microscopio  cocos Gram positivos en cadena
o diplo. Que tengo que hacer con esta información?

1) Coco positivo en cadena, catalasa negativo, optoquina positivo, solubilidad en bilis positivo.  esto es Streptococcus
Pneumoniae.
2) Coco positivo en cadena, catalasa negativo, bacitracina Resistente, Grupo B de la clasificación de Lancefield 
Streptococcus agalactiae. (grupo A pyogenes)
3) Coco positivos en racimo, catalasa positivo, coagulasa positivo o negativa (si es positiva le hago el manitol), manitol
positivo y negativo,  manitol positivo Staphylococcus aureus/// manitol negativo  Staphylococcus epidermidis.
4) Bacilo negativo, antes de confirmar me fijo si creció en el Levine (colonia oscura) o MacConkey(colonia rosa)y si
fermento o no la glucosa/lactosa. Si es colonia rosa es fermentador de glucosa por lo cual procedo con el TSI, citrato, LIA, y
una SIM (para ver motilidad e indol). Si es Escherichia coli será TSI H+/H+ con gas, citrato negativo, LIA positivo, SIM positivo,
indol positivo, Sulfuro de hidrogeno negativo.

También puedo pensar si me da colonias de aspecto mantecoso grande y beta hemolíticas, pienso en listeria monocytogenes.
Si hay beta hemolisis me tiene que coincidir con un bacilo Gram positivo en el Gram entonces pienso en listeria.

Si en el Thayer Martin veo crecimiento de colonias puntiformes, por lo cual se encontraran diplococos Gram negativos que
será Neisseria por lo cual se lo identifica de la fermentación de azucares, pero principalmente se lo serotipifica(detectamos el
componente capsular u otro componente antigénico.) Neisseria meningitidis tiene 13 serogrupos el cual en la argentina hay 4
serogrupos el B,C W135 y el Y. la vacuna de Neisseria meningitidis esta dirigidas a estos 4 serogrupos.

En el Levine y MacConkey generalmente crecen bacilos por los cuales si no viran de color serán Bacilos no fermentadores
3 (BNF) que para su identificación, como el TSI no hubo viraje de color hare una oxidasa el cualMicrobiología
si es positivo será Pseudomona
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aeruginosa y si es negativo Acinetobacter