Microbiología

Mecanismos de variabilidad genética

Fernanda Besa A.

MECANISMOS DE VARIABILIDAD
GENÉTICA: MUTACIÓN Y THG
Todas las bacterias se dividen por fisión binaria generando clones. Sin embargo, las bacterias
también pueden variar la información genética con la que vienen mediante procesos de mutación o
transferencia horizontal de genes. Muchas veces estos genes cedidos por las bacterias o
provenientes de una mutación, le otorgan habilidades a los MO para sobrevivir en un ambiente
hostil, y si a la bacteria le sirven estos genes o esta nueva mutación, toda su descendencia también
la va a heredar.

Genética bacteriana

Estudia la unidad básica: el gen. Los genes se encuentran

dispuestos en un cromosoma único de ADN de doble hebra
haploide. Se van a encender por distintos reguladores, para
poder expresarse dependiendo de las condiciones en las que
esté el entorno. Por ejemplo, si hay una bacteria en el teléfono
que cause diarrea, esta no se va a encontrar produciendo
toxinas, solo se van a activar cuando la bacteria se encuentre en
un lugar susceptible a enfermar, que posea todos los parámetros
para poder desarrollarse.

Las bacterias difieren en la cantidad de pares de bases que tiene

su cromosoma. A medida que aumenta su complejidad,
aumentan sus pares de base. Mycoplasma genitalium
corresponde a una estructura bacteriana bastante simple que no
tiene peptidoglicano y posee 580 kbp, mientras que
Mycobacterium tuberculosis posee 4410 kbp ya que necesita
sintetizar peptidoglicano, arabinogalactano, lípidos, etc. Mientras
más información tengan, más acciones va a ser capaz de
realizar el MO.

¿Cuándo no hay variabilidad genética?

Por fisión binaria. El cromosoma se divide en dos, dando origen a dos células
hijas iguales a la célula madre (clones). Toda la información genética pasa de
manera vertical de la madre a la hija.

Variabilidad genética: Mutaciones

Una de las formas de adquirir variabilidad genética es por mutación. Las mutaciones corresponden
a cambios heredables en las secuencias de ADN y son azarosas. Pueden resultar de manera natural
o se pueden inducir en el laboratorio al enfrentar a un MO a cantidades de antibióticos reiteradas

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veces, hasta que este MO mute volviéndose resistente al antibiótico o adquieriendo otras
capacidades que no tenía.

Por ejemplo, en la costa entre Concon y Quinteros hay vertidos de petróleo de manera recurrente,
por lo que más de alguna de las bacterias que habitan en la playa tuvo que mutar para utilizar el
petróleo como fuente de carbono, y así transformarlo en CO2 y agua. Habitualmente se toman este
tipo de MO para hacerlos crecer en un medio de cultivo y luego se manguerean las playas para
ayudar a bio remediar la zona.

Si no se sigue el tratamiento de antibiótico como debe ser, las

bacterias que faltaban por morir se acostumbran a vivir en
presencia de antibiótico en dosis subletales, y así se vuelven
resistentes de manera natural o inducida, o porque otra bacteria
les transmite esta información.

Ciertos agentes físicos como la radiación UV, o químicos como la

naranja de acridina, también pueden modificar el genoma de
estas bacterias, ya que azarosamente podrían aparecer
proteínas que les den ventajas adaptativas.

Muchas veces cuando la mutación no les sirve la bacteria se

recupera, es decir, se recupera la secuencia original.

1. Sustituciones: cambio de base. Puede ser o no

ventajoso.
 Neutras o silenciosas: cambio de base  cambio triplete  codifica al mismo aa.
 Con sentido erróneo: cambio de base  cambio triplete  codifica otro aa.
 Sin sentido: cambio de base  cambio triplete: de término (fin adelantado a síntesis
de proteína).
2. Deleciones
3. Inserciones
4. Reordenamientos

Mutaciones inducibles

 Luz UV, naranja de acridina: daña al ADN, forma dímeros de timina. No se produce
edición genética. Pueden introducirse errores de secuencia durante la reparación de este
daño genético.
 Mutágenos químicos: pueden alterar la estructura física o química del ADN.

El efecto directo de los mutágenos físicos o químicos es el daño del ADN.

Mecanismo de reparación

 Reversión genotípica: volver a la secuencia original.

 Reversión fenotípica: genera el mismo aa pero con otra secuencia.
 Mutación de supresión: mutación en un segundo sitio que restablece la actividad perdida.
Puede ser de tipo intragénica (en el mismo gen afectado) o extragénica (fuera del gen):
ambas apagan o silencian la primera mutación.

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Variabilidad genética: Transferencia génica vertical u horizontal (THG)

Otro mecanismo que permite a las bacterias modificar el genoma es la transferencia horizontal de
genes. Cuando viene de la célula madre la transferencia es vertical (de la madre a la hija). Hay
bacterias que se pueden convidar genes entre ellas, aunque no tengan ningún parentesco en
común: transferencia horizontal de genes. Cuando las bacterias están relacionadas el proceso es
mucho más fácil.

Los mecanismos de THG son:

Conjugación: consiste en la donación de un plásmido, el cual puede

contener: factores de virulencia, producción de cápsula, fimbrias,
aumento de enzimas y también resistencia a los antibióticos. En las
bacterias gramm -, se observa la fimbria modificada que corresponde
al pili sexual, el cual tiene la misión de encontrar una bacteria que no
posea plásmido para donárselo. Una vez que se unen, esta bacteria
avanza y se retrae hasta formar un puente de conjugación, el cual
funciona como medio para transferir una hebra del plásmido y luego
crea la hebra complementaria. Al separarse, cada una queda con su plásmido, y, por lo tanto, con
la información. Las proteínas de membrana actúan como quimioreceptores.

Al plásmido se le va a llamar factor F, y la bacteria que posea el plásmido F+. F+ va a buscar a F-

para transmitirle la información.

En el caso de las bacterias gramm +, como no hay pili sexual, la F- produce fermonas, las que van
a dar a los receptores de la F+ para que esta se dirija a F- y produzca sustancias de agregación,
encargadas de formar el puente de conjugación. Al igual que entre gramm – , se transmite una
hebra de ADN y luego se forma la complementaria. Al finalizar el proceso ambas bacterias son F+.

Conjugación se puede dar tanto entre bacilo-

bacilo como entre bacilo-coco. Es muy
importante evitar este tipo de transferencia
sobre todo en hospitales, donde una bacteria
resistente puede ser transmitida a un paciente
en estado grave por no desinfectar los
instrumentos, y empeorar su condición.

El factor F (plásmido) también puede

encontrarse integrado en el cromosoma
bacteriano. De ser así, la célula F+ pasa a
llamarse célula Hfr (alta frecuencia de
recombinación), la cual también puede donar
información por conjugación. A veces, el trozo de
material que se desliga para ser transferido no
sale completo, y corresponde a mitad plásmido y
mitad cromosoma. El cromosoma bacteriano es
capaz de incorporarse en el cromosoma de la
bacteria F- (cuando le es útil), pero el plásmido se pierde, por lo que la bacteria sigue siendo F- pero
con genes adquiridos de F+.

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Transducción generalizada: es la movilización

de genes de una bacteria a otra por medio de un
virus. Los bacteriófagos tienen tropismo celular,
es decir, reconocen sus receptores, y una vez que
esto ocurre, el fago se une a la célula que quiere
infectar y desnuda su genoma para que quede
libre en el citoplasma bacteriano, tomando el
control de la maquinaria metabólica de la célula.
El ADN del virus obliga a la célula a trabajar para
el: replica solamente el genoma viral y los
ribosomas traducen solo proteínas virales. Una
vez que las proteínas están listas se ensambla el
genoma a la cápside, y en ocasiones por error se
encapsula cromosoma bacteriano. Una vez que la
bacteria se llena de virus se lisa (ciclo lítico). Cuando el bacteriófago que lleva el genoma
bacteriano infecta a la célula e ingresa su material, el genoma bacteriano se incorpora, se
recombina de manera estable y la célula pasa a ser una célula transducida.

Se le llama generalizada porque el trozo que se tomó del cromosoma bacteriano fue cualquiera. De
esta forma la bacteria transducida adquiere genes de otra bacteria.

Ciclo lítico: fagos líticos (T2 y T4: habitualmente infectan a E. coli)

1. Virus llega y reconoce a su receptor (tropismo celular).

2. Incorpora el genoma a la bacteria.
3. El genoma se replica y se traduce: genera muchos viriones (un virión puede llevar
cualquier trozo del cromosoma bacteriano).
4. Lisis.

Transducción especializada: el virus no entra en ciclo lítico, sino

que pasa a una infección lisogénica, es decir, en vez de lisar la
bacteria, el material viral se incorpora al cromosoma bacteriano. La
bacteria va a seguir replicándose hasta que el virus quiera salir del
cromosoma y vuelva al ciclo lítico. Para que el ciclo lítico ocurra, el
material del virus debe salir del cromosoma bacteriano, replicarse,
traducirse, ensamblarse y lisar. También puede ocurrir que al
separarse el material viral se lleve parte del cromosoma bacteriano,
y luego al replicarse todo lo que se replique va a ser mitad virus y
mitad bacteria.

Se le llama especializada porque solo puede llevar los genes

adyacente al ADN del virus.

Ciclo lisogénico

1. Virus reconoce su receptor.

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2. Entra el genoma viral, el cual se incorpora por varios ciclos al cromosoma bacteriano.
Una vez incorporado el genoma viral se le conoce como profago (al cromosoma).
3. Genoma sale arrastrando o no material de la bacteria.

En ocasiones, sobre todo en los niños, estos pueden adquirir escarlatina; un exantema generalizado
que se puede presentar en el torso y en las extremidades. Habitualmente, la escarlatina es causada
por una bacteria que produce faringitis bacteriana (Streptococcus pyogenes), la cual posee ADN
adicional, por lo que genera no solo faringitis bacteriana sino también toxinas que producen este
exantema (infección doble: por bacteria y virus).

¿Qué se puede donar por plásmidos y por fagos?

Las bacterias pueden poseer fagos y plásmidos simultáneamente.

Transformación: bacterias son capaces de

incorporar en su genoma ADN que se encuentra en
el ambiente y recombinarlo para adquirir la
capacidad de traducir
los genes que
incorporaron. Esta
bacteria debe ser
competente: capaz de
incorporar el gen de
una bacteria que murió, rompió su membrana o su peptidoglicano,
pero quedaron fragmentos de su ADN en el entorno.

Por ejemplo, si Streptococcus pneumoniae sin cápsula es inoculado en

una rata, su sistema inmune la va a reconocer y eliminar. Pero si se
hace el mismo procedimiento con la bacteria capsulada, los antígenos

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de la bacteria se van a encontrar escondidos en la capsula, por lo tanto el sistema inmune de la

rata no lo va a poder reconocer ni fagocitar, y va a morir. Si se inocula la bacteria con cápsula,
muerta por calor, no va a afectar a la rata. Y por último, si se inocula la bacteria con capsula,
muerta por calor, y la bacteria viva sin capsula juntas, la rata muere. ¿Por qué? Porque ambas
bacterias son de la misma especie, y el gen para producir capsula es incorporado por la célula viva
desde su entorno, obteniéndose una bacteria capsulada.

Se observa en color verde un Vibrio cholerae que extiende su pili

sexual y lo utiliza como una “aspiradora”. En rojo se ven los
fragmentos de ADN de una bacteria muerta, los cuales pueden ser
integrados por el vibrio y que este incorpore toda la información
genética del MO muerto, de esta forma se generan las
“superbacterias”, bacterias inmortales, mas virulentas y/o más
resistentes.

Adaptación y evolución

La incorporación de nuevos genes produce que estos MO se adapten a las nuevas condiciones
ambientales y evolucionen, si antes moría en la presencia de un antibiótico ahora va a sobrevivir.

Cuando apareció el primer tratamiento para la gonorrea, en el que se daba penicilina, la gente no
seguía los tratamientos completos por lo que moría la mayoría de las bacterias, pero también
surgían células mutantes (las rojas en la imagen de arriba), ya que algunas de las bacterias se
acostumbran a dosis subletales, y estas se multiplicaban. En la actualidad, todos los tipos de
gonorrea son resistentes a la penicilina.

Es importante dejar de consumir bacterias resistentes a través de los alimentos. Industria ganadera
y pesquera ocupan una gran cantidad de antibióticos, generando bacterias resistentes que pueden
ser incorporadas en nuestro organismo si no mueren, por lo que es necesaria una buena cocción de
las carnes. Las bacterias consumidas le pueden transferir genes resistentes a la microbiota, y
cuando llegue un patógeno, las mismas bacterias de la microbiota le puede dar información de
resistencia a las células patógenas.

Islas de patogenicidad

Una bacteria que antes era inocua (no enfermaba) se puede tornar virulenta gracias a que un fago
(virus) o plásmido le transmita un gen o una isla genómica completa. Isla genómica o isla de

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patogenicidad es donde se encuentran los genes de virulencia que causan patogenicidad, genes
para producir un azúcar, vitamina, toxina o resistencia se encuentran planteados por secuencias de
inserción o transposones, que gracias a una enzima integrasa se recombina con el cromosoma
bacteriano de forma estable y mantenida en el tiempo.

Transposones

Poseen la enzima
transposasa: corta y pega.
Por lo tanto, si la isla de
patogenicidad lleva
transposones es mucho más
fácil el corte.

Los transposones replicativos

al saltar dejan una copia en el lugar de origen, lo que genera que el cromosoma tenga varias copias
de esta secuencia.

Enzimas de restricción y otras limitantes de la transferencia génica

Enzimas de restricción: corresponden a endonucleasas que

diferencias su ADN del ADN de otros orígenes biológicos, por
lo que son específicas y cortan solo donde reconocen (en
sitios de restricción). Corta entre 4 a 13 pares de base.

Se utilizan mucho en ingeniería genética para incorporar

genes predeterminados en pares de bases “adhesivos”.

Por ejemplo, para

hacer la insulina
recombinante se retira
el ADN de interés de la
célula y se corta el gen con la información para producir
insulina con enzimas de restricción. Por otro lado,
simultáneamente se extrae el ADN vector, que en el caso de
la imagen corresponde a un plásmido, y también se le quita
una parte con enzimas de restricción. Se insertan los genes
de interés en el plásmido y una vez que se alcanza la T°
óptima estos se pegan, de esta forma se puede incorporar a
la fuerza el plásmido modificado a una célula bacteriana
como la E. coli en el laboratorio. La E. coli se va a reproducir
cada 30 min. generando a las horas un gran numero de
bacterias, todas con la nueva característica para expresar la proteína de interés.

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Incompatibilidad de plásmidos: en ocasiones las bacterias pueden tener uno o varios plásmidos
disueltos, pero, estos pueden no ser compatibles, es decir, uno inhibe la replicación del otro. En
estos casos, en la próxima fisión binaria uno de los plásmidos va a perderse. Los plásmidos pueden
coexistir de forma estable cuando pertenecen a distintos grupos de incompatibilidad.

¿Cuándo la recombinación es exitosa y heredada a la descendencia?

Cuando los genes de la bacteria donadora se incorporan en la receptora de manera estable. E. coli
(bacilo G-) le puede donar un gen de resistencia antibiótica a Streptococcus pneumoniae (coco G+)
y la incorporación va a ser estable, por lo que toda la descendencia va a poder incorporar esta
capacidad.

Resumen: ¿Cómo puede recibir genes la bacteria?

Por conjugación, transformación y

transducción. El nuevo genoma se
puede incorporar, o si es un
plásmido este debe ser capaz de
replicarse al igual que el
cromosoma y pasar a la siguiente
generación. Si eso ocurre, hay una
población recombinante estable y
la incorporación permanece en el
tiempo. A veces la información no
le da habilidades a la bacteria, por
lo que no pasa a la siguiente
generación o no se puede
incorporar, y ya que la información
no es estable, no es heredable.

Mecanismos de recombinación

 Homóloga: cuando existe mucha similitud entre el ADN del donante y del receptor porque
comparten ancestro común. Va a ser un proceso más sencillo.
 No homóloga: las secuencias de recombinación son integradas por integrasas y
transposasas (cortan y pegan). Produce inserciones y/o deleciones.

E. coli comensal (parte de la flora del

organismo) puede incorporar plásmidos,
fagos o islas, adquiriendo capacidades para
volverse enterotoxigénica (plásmido),
enteropatógena (plásmido e isla de
patogenicidad), enterohemorrágica (isla y
fago), enteroinvasiva (isla y plásmido) o
uropatógena (islas). Es por esto que, una
misma bacteria puede generar muchos
cuadros clínicos distintos.