Biochimie de l’hémolyse Dr.

FZ Lahouel

Université d’ORAN
Faculté de médecine
Département de pharmacie

Biochimie de l’Hémolyse

Plan:
Introduction

I. Les hémoglobines

II. L’hémolyse

Hémolyse physiologique

Hémolyse pathologique

III. Bilan de l’hémolyse

Introduction
Le globule rouge naît et vit son "enfance" dans la moelle osseuse : c'est
l'érythropoïèse.

Chez le sujet sain environ 15% de l’érythropoïèse n’aboutit pas à la production de

GR : les érythroblastes défectueux sont éliminés (phagocytose par les macrophages
médullaires) et leurs composants sont dégradés

En pathologie l’érythropoïèse inefficace peut devenir majeure

Toutes ces situations ont en commun une anémie non ou peu régénérative (Nb de
réticulocytes normal ou diminué) et des signes d’hémolyse intra tissulaire excessive
(LDH et bilirubine libre augmentées)

I. Les hémoglobines
L’hémoglobine HB est un pigment qui transporte l’oxygène dans le sang

C’est une hétéroprotéine formée de:

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 La globine (partie protéique):

Quatre chaines identique deux à deux

• chaîne α (α, ou embryonnaire z) et chaînes non α ( β, δ, ε, γ) : la

composition de chaque hémoglobine est variable mais toujours 2
chaînes a et 2 chaînes non α

• Vie fœtale: Hb F (α 2 γ 2)

• Après 6 mois et adulte: Hb A (α 2 β 2) à 98%, Hb A2 (α 2 δ 2) 2%

Hb F à l’état de traces

 L’hème (groupement prosthétique):

Tétrapyrole cyclique lié à un atome de fer ferreux au quel se fixe l’oxygène de
façon réversible lors du transport

II. L’hémolyse
A/ Hémolyse physiologique

1. Définition de l’hémolyse:
L'hémolyse est le phénomène irréversible par lequel les globules rouges sont
détruits et libèrent leur contenu hémoglobinique.

Il s'agit d'un phénomène qui touche les hématies à la fin de leur vie dont la durée
moyenne est de 120 jours.

Causes principales de la mort : diminution des activités enzymatiques provoquant

ralentissement de la glycolyse et déficit en ATP, et diminution de la plasticité,
incapacité à lutter contre l’oxydation, et l’hyper-hydratation

Les globules rouges (GR) vieillis disparaissent du torrent circulatoire par un

mécanisme intra tissulaire (85%), et pour une petite partie par hémolyse dans le
torrent circulatoire (15%). L’hémolyse pathologique amplifie l’un ou l’autre de ces
2 mécanismes.

2. Localisation :
 L’Hémolyse tissulaire:

Assurée par les macrophages de la moelle osseuse, de la rate et du foie.

En pathologie les GR légèrement altérés seront plutôt phagocytés dans la rate,

alors que fortement altérés ils le seront aussi bien dans la rate que le foie.

Marqueur de l’hémolyse tissulaire bilirubine non conjuguée

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Le métabolisme de la bilirubine:

Synthèse:

Elle provient en majeure partie de la destruction dans le système réticulo-

endothélial des hématies vieillies :

 Les chaines de globine sont dégradées en AA

 Le fer est recyclé, après ouverture du noyau de l’hème et sera stocké dans
les macrophages ou recyclé, surtout dans l’érythropoïèse
 L’hème est oxydée en biliverdine par l’hème oxydase

La biliverdine est ensuite réduite en bilirubine ==>bilirubine libre non conjuguée

Les monocytes relâchent la bilirubine dans la circulation

Etant hydrophobe ; la bilirubine est véhiculée par l’albumine vers le foie

Transport intrahépatique:

La bilirubine est lié à la ligandine→limiter le reflux vers le plasma, empêcher la

diffusion dans les organites.

Conjugaison :

La bilirubine est conjuguée à l’acide glucuronique → bilirubine glucuroconjuguée

hydrosoluble activement éliminée dans les canalicules biliaires

Excrétion dans la bile :

Dans l’intestin:

 Déconjugaison par une β-glucuronidase (épithélium intestinal)

 Ensuite :
♦20%réabsorbé →circulation entérohépatique ou urobiline excrété dans les
urines
♦80%transformé par des enzymes de la flore bactérienne en stércobiline,
éliminé dans les selles

Valeurs NORMALES de la bilirubine :

BILIRUBINE TOTALE : 3 à 17 μmol/l

BILIRUBINE LIBRE : < 10 μmol/1

BILIRUBINE CONJUGUEE : < 11 μmol/1

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REMARQUE:

Lors de certaines hémolyses pathologiques les capacités de transport de l'albumine

sont dépassées, la bilirubine libre qui s'accumule dans le plasma est toxique peut
traverser la barrière hémato-encéphalique et léser gravement les noyaux gris
centraux provoquant de lourdes séquelles psychomotrices, et parfois la mort c’est
l’ictère nucléaire;

La photothérapie modifie la structure spatiale de la bilirubine libre et la rend

hydro soluble.
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 L’Hémolyse vasculaire:

Par lyse osmotique des GR vieillis ou fragmentation (diminution de déformabilité)

dans les capillaires de taille réduite.

Marqueur de l’hémolyse haptoglobine, hémopexine

Devenir de l’Hb libre:

L'hémoglobine est libérée dans le plasma où elle forme un complexe avec

l'haptoglobine (hp)

L’hp est une glycoprotéine synthétisée par le foie appartenant la famille des
alpha2globuline, .

Le complexe Hp-Hb est éliminé par les hépatocytes en < 30 minutes où les 2
protéines sont dégradées.

L’Hp peut disparaître totalement du sang en cas d’hémolyse excessive.

Dans le torrent circulatoire l’hème peut se fixer à l’albumine et à l’hémopexine

(bêta glycoprotéine synthétisée par le foie).

Le complexe hémopexine – hème est capté par les hépatocytes: l’hémopexine est
libérée du complexe et retourne dans le plasma tandis que l’hème est dégradée

L’hémolyse intravasculaire s’accompagne également de la libération des substrat

contenu dans les globules rouges dans la circulation: K+, LDH, phosphore…etc

La taille du complexe haptoglobine-hémoglobine ne lui permet pas de traverser le

glomérule rénal

Si la capacité de fixation de l'haptoglobine est débordée, l'hémoglobine en excès

reste libre et traverse le filtre glomérulaire

Elle est réabsorbée par les cellules du tubule rénal qui la catabolisent et se
chargent de dépôts de fer une hémosidérinurie apparaît quelques jours plus tard
apres desquamation des cellules.

Si la réabsorption tubulaire est dépassée, il existe une hémoglobinurie.

Valeurs normales de l’haptoglobine sérique:

Adulte = 0.7 – 2.5 g/l

Absente chez le NNé, sa synthèse est progressive et les valeurs normales sont
progressivement atteintes dans l’enfance.
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B/ Hémolyse pathologique

Il s’agit d’une destruction précoce et exagérée des GR circulants sous l’effet d’un
processus hémolytique du:

 Soit une anomalie du globule rouge (intrinsèque) : hémolyses corpusculaires

ou globulaires
 Soit à une agression extrinsèque des hématies : hémolyses
extracorpusculaires

1. Les anémies hémolytiques corpusculaires :

Elles sont essentiellement congénitales:

Anomalie de la membrane :

maladie de Minkowski-Chauffard ou sphérocytose héréditaire (anomalie de la

spectrine).

Anomalie de l'hémoglobine :

- soit hémoglobinopathie : mutation d'un acide aminé sur une chaîne de la globine
:(Drépanocytose).

- soit déficit de synthèse d'une chaîne de la globine (Thalassémie).

déficit enzymatique:

- déficit en PK : Pyruvate Kinase de la voie anaérobie.

- déficit en G6PD : Glucose 6 Phosphate Deshydrogénase de la voie aérobie.

2. Les anémies hémolytiques extracorpusculaires :

Elles sont dues à diverses agressions dirigées contre les hématies

Agression toxique :

. industriels : arsenic, chlorates, benzène, plomb…

. médicamenteux (phénacétine)

. toxiques animaux : venins de serpents

. toxiques végétaux : champignons (amanite phalloïde)

. toxiques physiques : noyade, brûlures, gelures étendues, radiations

Agression immunologique :

- accident de la transfusion sanguine

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- anémie hémolytique du nouveau né

- anémie hémolytique auto-immune

Agressions mécaniques :

prothèses intracardiaques, circulations extra-corporelles,

Agressions infectieuses

Virus ebola

III. BILAN D’HEMOLYSE

En cas d’hémolyse pathologique :

Cliniquement :
Pâleur,

Asthénie,

Dyspnée

Pas de signes hémorragiques

Ictères

Douleurs abdominales, lombaires

Urines porto ou coca-cola

Insuffisance rénale oligoanurique(tubulopathie)

Splénomégalie

Biologiquement :
Diagnostic biologique anémie par Taux Hb, puis Orientation par :

-Numération Réticulocytes sanguins:

> 150 000/mm3 , anémie régénérative, (souvent cause périphérique)

< 150 000/mm3 , anémie arégénérative, (souvent cause centrale)

-VGM: Anémie microcytaire ou macrocytaire

-TCMH: Anémie normochrome ou hypochrome

On dosera des paramètres généraux :

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Bilirubine libre et conjuguée

Hémoglobine libre plasmatique (N < 0,2g/l) hémoglobinurie

Haptoglobine sérique

LDH

On utilise quelques paramètres d’orientation :

Test de Coombs direct

Etude de la morphologie érythrocytaire sur lame

Expression des molécules CD55 et CD59 sur les GR ou les leucocytes