Universidad de Sonora

Dpto. Ciencias Químicas Biológicas

Materia: Química analítica ll

 Maestra: Luisa Alondra Rascón Valenzuela 

Alumnos: 
 Aguirre Quintana Jorge
Bustamante Robles Jonathan Javier
Encinas Montes Ana Laura
Rosas Domínguez Carlos Julián 

Hermosillo, Sonora.                       04 de Marzo de 2020

 PRÁCTICA NÚMERO 3

LEY DE BEER: CURVA DE CALIBRACIÓN

Marco teórico
Un procedimiento analítico muy utilizado en análisis cuantitativo es el llamado de
calibración que implica la construcción de una “curva de calibración”. Una curva de
calibración es la representación gráfica de una señal que se mide en función de la
concentración de un analito. La calibración incluye la selección de un modelo para estimar
los parámetros que permitan determinar la linealidad de esa curva. y, en consecuencia, la
capacidad de un método analítico para obtener resultados que sean directamente
proporcionales a la concentración de un compuesto en una muestra, dentro de un
determinado intervalo de trabajo. En el procedimiento se compara una propiedad del
analito con la de estándares de concentración conocida del mismo analito (o de algún otro
con propiedades muy similares a éste). Para realizar la comparación se requiere utilizar
métodos y equipos apropiados para la resolución del problema de acuerdo al analito que
se desee determinar.

La etapa de calibración analítica se realiza mediante un modelo de línea recta que

consiste en encontrar la recta de calibrado que mejor ajuste a una serie de “n” puntos
experimentales, donde cada punto se encuentra definido por una variable “x” (variable
independiente, generalmente concentración del analito de interés) y una variable “y”
(variable dependiente, generalmente respuesta instrumental). La recta de calibrado se
encuentra definida por una ordenada al origen (b) y una pendiente (m), mediante la
ecuación y = mx + b .

A partir de la curva de calibración (conjunto de concentraciones que describen el intervalo

en el cual se deberá cuantificar el compuesto por analizar) y a fin de asegurar que la recta
encontrada con los puntos experimentales se ajuste correctamente al modelo matemático
de la ecuación se calculan los valores de la ordenada al origen, la pendiente y el
coeficiente de determinación. (fundamentos Química Analitica,2014)

Justificación
Un gran número de moléculas, iones y complejos son capaces de absorber luz a
una longitud de onda dada en la región ultravioleta y/o visible. La Ley de Beer
establece que la absorbancia de una muestra, a determinada longitud de onda,
depende de la cantidad de especie absorbente con la que se encuentra el haz de
luz al pasar por la muestra. La ley dice que tres fenómenos son responsables de
disminuir la cantidad de luz después que esta pasa por algún medio que absorba:
1) La cantidad (concentración) de materia que absorbe en el medio.
2) La distancia que la luz tiene que viajar a través de la muestra (trayecto
óptico).
3) La probabilidad de que el fotón de cierta longitud de onda sea absorbido por
el material (coeficiente de absorción o de extinción molar).
La curva de calibración nos permite saber si la concentración de una sustancia
patrón se encuentra entre los límites requeridos y permitidos. De tal manera que
cuando la sustancia patrón se encuentra en el rango de trabajo está disponible
para aplicarla y usarla en ciertos procesos, ya sea experimental o en la generación
de reacciones.

Objetivo 
 Elaborar una curva de calibración a partir de la medición de la absorbancia
de soluciones estándar de sulfato de cobre (II).
 Determinar la concentración de una solución de concentración desconocida
de sulfato de cobre (II) a partir de la curva de calibración.

Procedimiento
 Encender el espectrofotómetro 15 minutos antes de iniciar las
lecturas.
 Seleccionar la opción d ingresar la longitud de onda de trabajo (para
esta práctica, 810 nm).
 Hacer el blanco utilizando el mismo disolvente en el que se
prepararon las disoluciones.
 Colocar aproximadamente 15 mL de la solución estándar de CuSO4
0.100 M en un vaso de precipitado y aproximadamente 15 mL de
agua destilada en otro vaso de precipitado.
  Etiquetar cinco tubos de ensayo limpios y secos, 1-5 y preparar las
soluciones estándar de acuerdo a la siguiente tabla, asegurándose
de mezclar muy bien con el agitador y de limpiar el agitador entre
cada uso.
Tubo mL de agua destilada mL de CuSO4 0.100M

1 4 1

2 3 2

3 2 3

4 1 4

5 0 5

Resultados
Los resultados obtenidos por medio del espectrofotómetro fueron los siguientes:

Tubo Conc, de CuSO4 Absorbancia

1 0.02 0.234
2 0.04 0.471
3 0.06 0.734
4 0.08 0.956
5 0.1 1.163
 Chart Title
1.4

1.2
f(x) = 11.72 x + 0.01
R² = 1
1
Absorvancia

0.8

0.6

0.4

0.2

0
0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 0.1 0.11
Conc CuSO4

Para la muestra problema obtuvimos el siguiente resultado, el cual sustituyéndolo

por Y en la ecuación de la recta nos dio el valor de X.

Muestra problema: Absorbancia

3.041
X=3.041−0.0087/11.715 = 0.2588

Cuestionario
1. ¿Cuáles son las principales limitaciones de la ley de Beer?
 Limitaciones propias:
La ley de Beer solo se cumple en disoluciones diluidas, a
concentraciones del orden de 10 ^ -2 M, por encima de este valor la recta
se curva debido a que a medida que aumenta la concentración de especies
absorbentes, estas
 se van aproximando entre ellas hasta que se pone en marcha las
interacciones electrostáticas, alterando la capacidad de las especies a
absorber a unas determinadas longitudes de onda. No vamos a obtener
por lo tanto una relación lineal entre A y c. Los niveles de energía en los
que se mueven los electrones son
distintos.Lo mismo ocurre en disoluciones de baja concentración de
especies absorbente,pero con concentraciones elevadas de otras especies
(sales interferentes).Los iones de las sales interaccionan con las especies
absorbentes y se modifica la capacidad de absorción. De esta manera el
diagrama de energía y la capacidad de absorción de radiación variarán.
Por lo tanto el efecto salino también afecta.
 Limitaciones debidas a desviaciones químicas: Tienen lugar cuando
el analito se
disocia, asocia o reacciona con el disolvente para dar lugar a un producto
con un espectro de absorción, diferente al del analito. Y esta asociación,
disociación, reacción depende de la dilución. La ley de Beer no se cumple
debido a los cambiosen los equilibrios que se producen. Cuanto más
parecidos sean los coeficientes de absorción molar de las especies, la
relación lineal tiende a ser más recta.
 Desviaciones instrumentales con radiaciones policromáticas
Otra de las razones por las que no obtenemos una linealidad se puede
deber a desviaciones instrumentales, del instrumento en sí.
Si seleccionamos una longitud de onda única, lo ideal sería que el
monocromador dejase escapar esa longitud de onda que seleccionamos
(Radiación monocromática)

2. El método más ampliamente utilizado para realizar un ajuste lineal es

el método de mínimos cuadrados. Explicar brevemente en que
consiste dicho método.
El metodo de minimos cuadrados se aplica para ajustar rectas a una serie
de datos presentados como punto en el plano. Supongamos que se tienen
los siguientes datos para las variables x,y
x1 x2 · · · xn
y1 y2 · · · yn

Esta situación se puede presentar en estudios experimentales, donde se

estudia la variación de cierta magnitud x en función de otra magnitud y.
Teóricamente es de esperarse que la relación entre estas variables sea
lineal, del tipo y = mx + b El método de mínimos cuadrados nos
 proporciona un criterio con el cual podremos obtener la mejor recta que
representa a los puntos dados.

3. ¿Cómo se ve afectada la absorbancia de una solución si en lugar de

utilizar una celda de 1 cm de paso óptico si se utiliza una celda de 2
cm?
La luz tendrá una mayor longitud que atravesar, por lo que la absorbancia
será muy distinta en una de 2 cm a si fuera de 1 cm.

4. Una solución de una muestra problema de concentración 1 M

presenta una absorbancia de 1.2. Si de esta solución se toman 2 mL y
se diluyen a 5 mL ¿cuál será el valor la absorbancia de la nueva
solución? 0.3 de absorbancia

Discusión
En la práctica obtuvimos los resultados de la concentración según lo esperado y
esto lo supimos ya que al utilizar la fórmula que se tenía, nos dio el resultado
preciso, sin embargo el resultado de la absorbancia en el espectrofotómetro
variaba entre un intervalo de una unidad, pero esto era porque la concentración
que se tenía del sulfato de cobre (CuSO4) era muy concentrada y cuando se
tienen especies muy concentradas estas hacen que aumente más el riesgo de
error o de variabilidad en la muestra por tantas moles de este.
Para la muestra problema nos dio una absorbancia de 3.041 y esto nos muestra
un resultado de X que fue =0.2588 en concentración lo cual no es un valor que se
aleje mucho de nuestra grafica que se hizo con el blanco y las diferentes
concentraciones, pudiendo asi ubicar nuestro valor en nuestra gráfica y
compararlo con nuestra recta.

Conclusión
Para la realización de esta práctica utilizamos los conocimientos adquiridos de la
anterior ya que manejamos el espectrofotómetro para medir la concentración de
diferentes disoluciones de sulfato de cobre con el fin de obtener la absorbancia
para posteriormente realizar una curva de calibración. De la misma manera a partir
de la curva de calibración se obtuvo la concentración de una sustancia
desconocida por lo que se pudo cumplir con los objetivos de esta práctica.

Referencias
- Sugelita. (2013). Limitaciones de La Ley de Lambert. 2019, de SCRIBD Sitio web:
https://es.scribd.com/doc/155980553/Limitaciones-de-La-Ley-de-Lambert

- Esteban Rub´en Hurtado Cruz. (2016). C´alculo Diferencial e Integral III. 2019, de
Facultad de Ciencias UNAM Sitio web:
http://sistemas.fciencias.unam.mx/~erhc/calculo3_20171/derivadas_parciales_dire
ccionales_2016_12.pdf