Sunteți pe pagina 1din 10

Invazia si infectia bacteriana parodontala: contributia la

patologia aterosclerotica

Obiectiv: Scopul acestui articol a fost acela de a realiza o evaluare sistematica a raportului
stiintific actual pentru bacteria parodontola in calitate de contribuitor la ateroscleroza.
Metode: Literatura de specialitate epidemiologica, studiile clinice si experiementale asupra
bacteriei parodontale si ateroscleroza au fost revizuite. Datele colectate au fost clasificate in 7
dovezi ai bacteriei parodontale : 1) Difuzeaza din cavitatea orală şi ajung la ţesuturile vasculare
sistemice; 2) pot fi gasite in tesuturile afectate; 3) traiesc in locul deja afectat ; 4) invadeaza
tipurile de celule in vitro; 5) induc ateroscleroza la anumite animale bolnave; 6) bacterii
parodontale mutante, non invasive determina patologia in vitro si in vivo; 7) bolile parodontale
izolează ateroamele umane ce pot provoca boli la animale de infectate.
Rezultate: S-au gasit dovezi substantiale pt dovezile de la 1 la 6. Cu toate acestea, dovada 7 nu a
fost inca finalizata.
Concluzii : În ciuda lipsei de dovezi ca bacteriile parodontale obținute de la ateroame umane pot
provoca ateroscleroză la modelele de animale infectate, obtinerea probelor de la 1 până la 6 ofera
un suport ca agentii patogeni parodontali pot contribui la ateroscleroza

Introducere:
Incidenta aterosclerozei (CA) nu poate fi explicata integral de către factorii de risc clasice. Prin
urmare,importanta infecţiilor ca o potenţială cauză a aterosclerozei a câştigat favorite(castigate),
si este susţinută de o multitudine de dovezi epidemiologice dovedind aceasta notiune. Agenti
infectiosi, inclusiv bacteria(boala) parodontala, au fost implicati in etiologia a diverse stari
vasculare prin mecanisme multiple, inclusiv invazia microbiana directa a celulelor endoteliale.
Aceasta recenzie se va concentra pe dovezile si semnificatia de celula gazda a agentilor patogeni,
in patogenia aterosclerozei, precum si diferitele linii de proba in sprijinirea si rolul bolii
parodontale in bolile cardiovasculare.
Privire de ansamblu asupra patologiei bolilor cardiovasculare
Celulele endoteliale joaca un rol predominant în menținerea funcției cardiovasculare optime prin
producerea de factori paracrine care modulează vasodilatație, inflamație, tromboză și proliferarea
celulară în vasele sanguine. Perturbările funcției endoteliale este unul dintre cei mai vechi
indicatori de boli cardiovasculare, ce pot fi initiate de un numar de factori, inclusiv infectiile.
Infectiile parodontale cronice pot induce indirect activarea sau disfunctia endoteliului printr-o
stare de inflamatie sistemica dupa cum reiese din faza acuta a proteinelor plasmatice crescute,
interleukina-6 (IL-6) și a fibrinogenului. In mod similar, eliberarea de produse bacteriene în
circulație, cum ar fi vezicule cu membrană exterioară din Porphyromonas gingivalis, sau
componente bacteriene solubile liberi de la Aggregatibacter Actinobacillus pot induce răspunsuri
pro-aterogene in celulele endoteliale. Mai mult decat atat, bacteriile orale pot induce, de
asemenea, disfuncții endoteliale, prin invazia acestor celule.
Ca urmare a prejudiciului, celulele endoteliale inițiază o serie de semnale pro-inflamatorii, cum
ar fi eliberarea de chimio-kine, expresia crescută a moleculelor de adeziune celulară care
promovează atașamentul și transmigrarea leucocitelor în intima vasculara, activarea celulelor
musculare netede și moartea celulelor endoteliale programate. Endoteliul deteriorat declanșează
de asemenea, agregarea trombocitelor și inițiază formarea trombusului la locul de origine, ceea
ce poate duce la ocluzia vaselor. Leucocitele activate care au migrat în spațiul subendotelial
continua ciclul inflamator prin producerea de citokine pro-inflamatorii suplimentare, specii
reactive de oxigen (ROS) și eliberarea de proteinaze tisulare care degradeaza matricea
extracelulară înconjurătoare. Deși monocitele reprezintă o leucocita predominantă în cadrul
placii vasculare, limfocitele, neutrofilele, celulele mastocite și celulele dendritice au fost
detectate în cadrul leziunilor vasculare. Celulele musculare netede prezente în intima și in stratul
mediu al vasului contribuie la patologia vasculară secretand matrici metaloproteinaze și
proliferarea supusa. In mod semnificativ, bacteriile parodontale pot afecta toate aceste procese,
fie in mod direct inter-acționează cu / invadează celulele endoteliale, celulele musculare netede,
leucocitele și trombocitele, sau indirect, prin stimularea eliberării de factori paracrini care
modulează funcția acestor celule.
Invazia bacteriala a celulelor gazda
Invazia celulei gazdă prin bacterii patogene reprezinta o strategie sofisticata pentru a contracara
apararea organismului uman. Țesuturile sau invazia celulară este o proprietate cheie virulenta
pentru multe specii de bacterii. Acesta oferă o "nișă privilegiată" cu accesul la gazduirea
proteinei, fierului și alte substraturi nutritive, un adăpost de anumite răspunsuri imune, precum și
un mecanism de persistenta in tesutul infectat. Un stil de viață intracelular oferă, de asemenea
bacteriei o oportunitate de a evita uciderea de către terapia anti microbiană, așa cum s-a observat
in cazul infectiei cu Chlamydophila pneumoniae. Anumite bacterii au evoluat pentru a invada
celulele fagocitare non-profesionale. Invazia bacteriena de succes, definita ca supraviețuire în
interiorul celulei gazdă, poate fi considerata a avea loc în cinci etape: (1) de fixare, (2) de
intrare / internalizare, (3) trafic, (4) persistență și (5) de ieșire. Internalizarea bacterie, de
asemenea, duce la reacții de raspuns al celulei. Astfel, în timpul traficului, o bacterie de succes se
localizează uneori, prin modificarea compartimentelor celulare sau vezicule și uzurpă funcțiile
celulei gazdă pentru a contracara răspunsul antimicrobian celular. bacteriile internalizate pot
ramane intr-o stare latenta și / sau se multiplica, rezultând în infecția persistentă. În cele din
urmă, bacteriile intracelulare ies, fie prin celula gazdă, fie printr-un control unui proces al celulei
gazdă, sau prin ambele. Conceptul pe care bacteriile orale pot invada celulele gazda a fost
controversat atunci când Meyer a furnizat dovezi conform cărora A. actinomy-cetemcomitans a
invadat celulele de carcinom KB. Dupa acest prim raport, au fost publicate mai multe studii de
raportare diferite aspecte ale invaziei celulare de către bacterii parodontale
Gingivita , ca un organism model de ateroscleroza
Deși P. gingivalis nu este singura bacterie periodontopatogenica implicata in bolile
cardiovasculare, interacțiunile sale cu celule ale sistemului cardiovascular au fost studiate
extensiv și oferă astfel un model de interacțiuni între o specie periodontopatogenica și celule
cardiovasculare. Invazia celulei gazdă începe cu adeziunea mediată printr-o varietate de adeziune
de suprafață celulară. Din moment ce atașamentul față de celula țintă trebuie să fie anterioară
intrării, adeziunea P. gingivalis a fost studiata extensiv. Atașamentul său față de invazia celulelor
gazdă este mediată de multiple adezine, cum ar fi cea mai mare fimbrie (FIMA) pentru celulele
endoteliale și macrofagele. În macrofage, internalizarea FIMA e mediată de P. gingivalis ce
implică semnalizarea receptorilor Toll-like 2 (TLR2) la b 2integrin receptorul complex. Unele
clone genotipice Fima, cum ar fi de tip II se găsesc cel mai frecvent în țesuturile vasculare
urmate de tipurile I și IV. În plus față de fimbrii, alte adezine gingivalis P. include gingipains și
hemagglutinins. Kozarov a raportat o asociere între un număr mai mare de domenii repetate în
hemaglutinină A (haga) și potențialul invaziv al P. gingivalis. Tulpini invazive de P. gingivalis,
cum ar fi 381, 33277 și W83 conțin trei sau mai multe haga ce se repetă în timp ce tulpina non-
invaziva AJW4 are doar două repetiții. În plus față de adezine, alte bacterii din microbiome orale
pot fi semnificative, deoarece, Fusobacterium nucleatum facilitează invazia celulelor endoteliale
de către P. gingivalis. Realizator de tip celulă, tulpina bacteriană și încărcătura microbiană
influențează direct traficul P. gingivalis. Invazia celulelor endoteliale este un proces activ inițiat
de o bacterie care necesită polimerizarea actinei și o celulă activă metabolic. Cu toate acestea,
numai anumite tulpini de P. gingivalis, cum ar fi 381 și W83, uzurpă calea autofagie în timpul
invaziei celulelor endoteliale . Invazia pe calea autofagiei se observă la o multiplicitate scăzută a
infecției (100MOI), care este mai consistentă cu numere de bacterii care pot satisface celulele
endoteliale din cauza evenimentelor bacteremice. La o valoare MOI mai mare de 1000,
majoritatea organismelor gingivalis P. călătoresc prin endozomi în loc de autophagosomes, ceea
ce sugerează că doza bacteriană joacă un rol în traficul de P. gingivalis. In celulele epiteliale, P.
gingivalis iese prin calea endocitica reciclata. Rămâne necunoscut dacă ieșirea P. gingivalis din
celulele cardiovasculare este prin aceeași cale. Indiferent de caile folosite de P.gingivalis, aceste
strategii sunt susceptibile de a fi critice pentru diseminarea microbiană și evaziune a
mecanismelor celulei gazdă și a modificărilor patologice în cadrul sistemului cardiovascular.
După cum s-a menționat mai devreme, infecția cu gingivalis P. induce migrația monocitelor și
îmbunătățește în mod semnificativ producția de citokine pro-inflamatorii. P. gingivalis induce, de
asemenea, efecte pro-coagulante în celulele endoteliale aortice umane si provoaca apoptoza si
cresterea de celule mononucleare. Adeziunea la celulele endoteliale are loc in vitro între tipuri
de celule vasculare primare, ceea ce sugerează că P. gingivalis poate traversa de la o celulă la
alta, in vivo, cum ar fi de la celulele endoteliale pentru a netezi celulele musculare ca procesul
aterosclerotic sa progreseze. Critice pentru transmisia infectioasa, P. gingivalis de supraviețuire
în functie de tipurile de celule umane vasculare, precum si gingivalis P. necultivate ar putea fi
reactivate după internalizarea lor de către fagocite.
Alti agenti parodontali patogeni in ateroscleroza
Deși invazia endoteliului și a altor celule vasculare de P. gingivalis cu siguranță, pot explica o
mare parte din patologia aterosclerotică, există date care indică că ateroscleroza este o infectie cu
mai multe specii. Dovezi pentru detectarea mai multor specii parodontale în ateroame
individuale au început cu primele rapoarte ale detectarii de genomuri bacteriene orale din cadrul
ateroamelor. Faptul că mai multe specii de bacterii orale sunt asociate cu ateroscleroza nu este
nici irațională, nici de neașteptat, având în vedere complexitatea speciilor din placa dentară.
Eficienta invaziei celulelor epiteliale este dependentă de tulpina bacteriană sau morfologia
coloniilor microbiene, precum și intrarea microbiană în celulele gazdă, ele pot să apară prin mai
mulți receptori. De exemplu, A. actino-mycetemcomitan poate intra în celulele gazdă prin
cuplarea cu receptorii transferină și integrină. Mai mult decât atât, A. actinomycetemcomitans
intra în celula gazdă prin tulpina variabilă. Faptul că unele tulpini intra in celule gazdă printr-un
mecanism dependent de actină, în timp ce alte tulpini folosesc o intrare-actină independentă . In
timpul ultimului deceniu, mai multe grupuri de cercetare s-au adăugat la cunoștințele noastre de
invazie a A. actinomycetemcomitans. Printre acestea, s-a demonstrat că A. actinomycetem-
comitans invadeaza celulele endoteliale vasculare umane ce implică o interacțiune
între phosphorylcholine bacteriană (PC) și factorul de activare al trombocitelor (PAF) receptor al
celulei gazdă.
P. intermedia poate invada celulele arteriale coronare (ambele endoteliale si celule musculare
netede). Tipul C. fimbrie si proteina invaziva, ADPC par sa remedieze procesul de invazie.
Tannerella forsythia
Multiple tulpini de Forsythia atasate pentru a invada celulele epiteliale in vitro,mediate de stratul
de suprafață, compus din matrici proteinice. Similar cu P. Intermedia atașarea celulelor epiteliale
și invazia sunt de asemenea dependente de o proteină de repetare bogată în leucină ,de suprafață
asociate, BSPA. În prezent, există informații minime despre T. Forsythia cu interacțiuni ale
celulelor cardiovasculare.
Alte specii bacteriene orale
Nu este limitat in vitro (Tabelul 1a-d) sau in vitro (tabelul 2) dovada că alte specii bacteriene, ca
si treponema denticola si Campylobacter rectus, au fost detectate in specii de ateroame sau au
demonstrate ca invadeaza celula gazda.
Mecanisme de emergenta in ateroscleroza:degradarea ca un raspuns de stres endotelial a
perturbațiilor prin P.gingivalis
Autofagia reprezintă un răspuns celular reparatoriu care degradează organite celulare senescente,
proteine intracelulare deteriorate, și invadarea bacteriilor intracelulare .Există in curs de
dezvoltare dovezi că răspunsul autofagie poate influența rezultatele bolii cardiovasculare in
timpul aterosclerozei prin afectarea stabilității plăcii. De exemplu, activitatea autofagie a crescut
măsurată prin activarea LC3 sau expresiei, detectate în cadrul plăcilor ateromatoase la oameni si
modele murine de ateroscleroză sterile.In ateroscleroza sterila, autophagia este considerata un
mecanism de protectie care previne apoptoza in celulele care sunt supuse stresului oxidativ sau
stresul reticulului endoplasmatic, care este o trăsătură comună a bolii aterosclerotice. Cu toate
acestea, studiile in vitro au demonstrat că supra-activarea autophagiei sau dereglarea caii
autofage in celulele cardiovasculare pot fi dăunătoare prin promovarea moartii a celulelor numite
"necropto-sis ", potențial pro-aterogene datorită efectelor sale pro-inflamatorii.
Ca un mecanism înnăscut imun, autophagia poate fi activata ca răspuns la semnalizarea prin
intermediul receptorilor Toll-like (TLRs), receptorii NOD-like (NLRs) și / sau sequestasome.
Unii agenți patogeni intracelulari, inclusiv P.gingivalis si-au dezvoltat strategii pentru a submina
această linie de apărare (Deretic & Levine 2009). Tulpina P.gingivalis 381 uzurpă calea
autofagiei în timpul invaziei umane. Celulele endoteliale ale arterelor coronare si a celulelor
musculare netede in vitro, așa cum se arată în Fig. 1 (Dorn et al. 2001). In mod specific,
bacteriile întârzie fuziunea autophagosome cu lizozomii astfel incat să interfereze cu un flux de
autofagie. Acest proces poate afecta abilitatea celulei gazdă de a utiliza răspunsul autofag ca
mijloc de salvare a celulei de oxidare sau stresul reticulului endoplasmatic. Rodrigues și colab.
(2012) au demonstrat recent că nu toate tulpinile gingivalis P. Pot manipula această cale în
timpul invaziei celulei gazdă; W83 perturba calea autofagie a celulelor endoteliale într-un mod
similar cu 381, în timp ce tulpinile A7436 și 33277 nu.
Evaluarea probelor
Într-un cadru clinic, este extrem de dificil să se stabilească factorul cauzator al aterosclerozei din
mai multe motive. În primul rând, factorul initiator e cel mai probabil ratat încă din faza timpurie
a prejudiciului endotelial, de obicei asimptomatic.(Vita & Loscalzo2002). În al doilea rând,
leziunea aterosclerotică este un răspuns inflamator comun mai multor factori (Keizer 2012,
Raman și colab. 2013), precum și unele sau toate aceste elemente pot fi asociate cu leziunea la
momentul descoperirii. În al treilea rând,studii interventionale care au evaluat impactul
tratamentului parodontal, cu sau fără tratament antimicrobian, asupra inflamației sistemice sau
disfuncției endoteliale, au demonstrat rezultate mixte, inclusiv nici o schimbare, tranzitorie sau
agravarea semnelor imediat după tratament, sau o ameliorare a semnelor care nu persistă în mod
necesar în timp (pe larg revizuite de Kebsccoca și colab. 2010). În ciuda acestor limitări, este
posibil cel puțin, să demonstreze plauzibilității biologice ca invazia țesuturilor cardiovasculare
prin bacteriile parodontale au potențialul de a promova ateroscleroza prin îndeplinirea mai
multor probe, discutate în altă parte în articol (tabelul 3).
Dovada că bacteriile parodontale pot ajunge la țesuturile vasculare sistemice
Nu există nici o îndoială că speciile bacteriene orale pot intra în circulație și cauza bacteriemie
(Tabelul 4a-d), care a fost documentat de mai multe grupuri. Există mai multe mecanisme
potențiale de diseminare sistemică a bacteriilor parodontale:

 Deoarece buzunarul gingival este separat de micro-capilarele gingivale prin cateva


celule, se crede că speciile parodontale care invadează celulele orale pot traversa acest
strat și intră în circulație printr-un mecanism transcelular
 Cel mai adesea, cu toate acestea, bacteriile parodontale probabil intra în circulație în
urma perturbărilor fizice ale gingiei. Printre aceste perturbatii, unele sunt legate de
proceduri dentare, cum ar fi lustruirea dinților, scalarea, extracția dentară, extracția
chirurgicală a molarulu (vezi tabelul 4AD). Alte perturbatii sunt activitati de viata de zi
cu zi, inclusiv periaj dentar, folosirea atei dentare, de mestecat sau musca un măr, așa
cum sunt enumerate în tabelul 4a-d. Frecvența bacteriei a arătat o mare variabilitate, în
funcție de modelul de studiu, metodologia microbiologică, stimulul și starea de sănătate
parodontală a pacienților. In unele studii, o asociere cu placa și / sau a fost raportată
(Silver și colab. 1977, Forner și colab.2006, Lockhart și colab. 2009). O analiza
sistematica recenta cu meta-analize privind prevalența bacteriei în urma periajului dentar,
a evaluat rapoartele cumulate ale influenței plăcii. În plus, așa cum se arată în tabelul
4AD, mai multe studii au detectat diferiți agenți patogeni parodontali bacterieni, mai ales
după debridarea subgingivala si proceduri la pacienții cu parodontite. Cu toate acestea,
aceste rezultate trebuie interpretate cu precauție, datorită variabilității dintre aceste studii,
care ar putea fi din cauza limitărilor metodologiei pe care s-a utilizat, care poate afecta
sensibilitatea și detectare a pragurilor(Metode bazată pe cultură). In plus, metodele bazate
pe PCR bine validate nu au fost utilizate în mod frecvent.
 Un alt mecanism propus, dar nedovedit este faptul că bacteriile parodontale intră în
circulație și difuzeaza la site-uri indepartate prin supravietuire in imunitate.(abordarea de
tip cal troian) (Hoit și colab., 2012). În aceste cazuri, fagocitoza este benefica pentru
agentul patogen bacterian, dar în detrimentul gazdei. În acest scenariu, agentul patogen
internalizat eludează uciderea microbiană cu leucocitele și este capabil să scape din
fagocite după ce celula ajunge la un alt loc în interiorul corpului (Zeituni et al.2009). De
exemplu, P. gingivalis castiga intrarea in celulele dendritice si perturba functia lor
fagocitara evidențiată prin menținerea unui fenotip imatur caracterizat printr-o producție
scăzută de mediatori inflamatorii (Zeituni și colab. 2009, 2010). Indiferent de mecanism,
nu există nici o îndoială că agenții patogeni orali intră frecvent în circulație.

Dovada ca bacteriile parodontale se gasesc in tesuturile afectate


Din moment ce bacteremia de origine orală este frecventa, asocierea agenților patogeni
parodontali cu patologie aterosclerotică a fost în centrul de mai multe studii. O varietate de specii
bacteriene orale au fost identificate în țesuturile ateromatoase la nivelul ADN, ARN sau antigen.
Haraszthy și colab. (2000a) au fost primii care au raportat detectarea ADN-ului genomic de A.
actinomycetemcomitans, P. Gingivalis și alte specii bacteriene folosind 16S ARNr analize
specifice PCR. Aceste studii de detectare a PCR s-au extins și au fost confirmate de către alții
(Tabelele 5, 6). Interesant, cele mai multe dintre aceste rapoarte au găsit dovezi ale mai multor
specii în ateroame individuale. Astfel, nu există date suficiente pentru a concluziona ca mai
multe specii patogene ajung la locul afectat. Cu toate acestea, impactul acestor rezultate sunt
oarecum îngreunate de mai mulți factori. De exemplu, prezența unor componente bacteriene
(ADN, ARN și antigeni) nu face distincție între bacterii vii și moarte în interiorul țesutului. Mai
mult, unele specii de bacterii, cum ar fi,, Veillonella sp care au fost detectate în cadrul
ateroamelor (Koren et al.2011), nu sunt cultivabile (Chalmers și colab. 2008). În cele din urmă,
nu toate studiile au detectat produse microbiene în cadrul ateromului, iar această lipsă de
coerență se poate datora diferențelor de metodologie (Figuero et al.2011) sau etiologiilor care
stau la baza ateromului.
Dovezi ale bacteriilor parodontale vii la locul afectat
Timp de mai mulți ani, mai multe grupuri au încercat să cultiveze organisme patogene de la
ateroame fără nici un rezultat. În cele din urmă, Kozarov și colab. (2005) au raportat dovezi ale
gingivalis P. și A. actinomyce-temcomitans în țesutul ateromatos. Acest lucru a fost realizat prin
incubarea țesutului ateromatos omogenizat în cultură cu celulele coronare endoteliale ale
arterelor umane primare (HCAECs). După câteva zile de incubare, grupul a utilizat anticorpi
marcați fluorescent pentru a vizualiza bacteriile intacte in celulele endoteliale. Deoarece ambele
specii trebuie să fie în viață, în scopul de a invada, prezența bacteriilor, din cadrul celulelor non-
fagocitare, au furnizat dovezi puternice ale existenței unor bacterii vii în ateroame. În plus,
Rafferty și colab. (2011)au cultivat probe de aterom cu macrofage ca un pas intermediar și a fost
capabil de a izola P. gingivalis pe plăci de cultură. Aceste studii necesită ateroame proaspete
(angioplastia si stenting devenind standardul de ingrijire), precum și complexitatea protocolului
pare să fi exclus rapoartele de confirmare până în prezent. Astfel, cu toate că agenții patogeni
parodontali nu pot fi in mod curent de cultura de la ateroame direct pe plăci, există dovezi in care
bacteriile parodontale sunt prezente în cel puțin unele ateroame.
Dovezi in vitro a invaziei in functie de tipul de celule afectate
Sunt date incontestabile că, cel puțin, unii agenți patogeni parodontali invadează celulele
cardiovasculare umane in vitro (Tabelul 1a-d). Deshpande și colab. (1998) și Dorn și colab.
(1999) au fost primii care au raportat invazia celulelor endoteliale prin gingivalis P. De la aceste
prime rapoarte, au existat o serie de grupuri de cercetare care au furnizat detalii cu privire la
mecanismele de invazie de celule cardiovasculare prin P.gingivalis. Au fost evidentiate mai
inainte.
Demonstrarea faptului că bacteriile parodontale pot provoca ateroscleroza la modele de
animale bolnave
Modelele animale pot fi utilizate pentru a sprijini ipotezele bazate pe date in vitro (Graves și
colab., 2008) și au fost folosite pentru a demonstra patologia aterosclerotică cauzata de agenți
patogeni parodontali. De exemplu, P. gingivalis a fost raportată de către mai multe grupuri ca ar
accelera ateroscleroza la modele murine (Lalla și colab. 2003, Gibsonet colab. 2004, Amar și
colab. 2009). Pe lângă modelele murine, iepuri cu boala parodontală au dezvoltat striuri lipidice
induse experimental in aorta mai repede decât la animalele sănătoase parodontal (Jain și colab.,
2003). La porcii normocholesterolemic, P. Gingivalis recurenta, a indus leziuni atat la nivelul
aortice si coronariene, si de asemenea au îmbunătățit ateroscleroza la porcii
hypercholesterolemic (Brodala et al. 2005). Astfel, pe lângă identificarea organismelor vii
parodontale in placi aterosclerotice umane, experimentele in vitro au oferit informatii biologice
ca P. gingivalis poate spori aterogeneză.
Dovezi că mutanții non-invazivi determina patologia redusa semnificativ (modele animale)
Mutanții cu capacitate redusa semnificativ de a invada in vitro au fost evaluate in vivo. In
contrast cu tulpina invaziva de tip sălbatic de P.gingivalis, un mutant fimA non-invaziv cu deficit
nu a accelerat ateroscleroza in ApoE . Mai mult, FIM O mutantul cu deficit a fost mai puțin
proaterogen si a obtinut un nivel mai scăzut de mediatori pro-inflamatori decât tulpina parentală
invazivă în ApoE desoareci cu deficit. Cu toate acestea, există date minime de alte specii
parodontale la modelele animale.
Postulatul modifcat al lui Koch pentru a demonstra că ateromul uman izolat cauzeaza
boala la modelele animale
Dovada finală, îndeplinind o variație a postulatelor lui Koch, nu a fost încă atinsa. Aceasta
necesită izolarea și caracterizarea periodontopatogena din ateroame umane și demonstrarea
faptului că izolatii cauzeaza patologie aterosclerotica pe modele animale care pot fi atribuite
bacteriei izolate. Având în vedere succesul de cel puțin un grup în cultivarea tulpini de P.
gingivalis din ateroame umane (Rafferty et al. 2011), acest lucru ar putea fi realizat în viitor. O
abordare similară a fost folosită pentru a investiga rolul unei tulpini invazive de Streptococcus
mutans în anevrisme infectioase cerebrale, cu demonstrarea faptului că un mutant eliminat pentru
gena care permite invazia nu a fost în măsură să provoace boli (Nakano și colab. 2011)
Discutii
În această reexaminare, probele pentru a evalua rolul direct al periodontopatogenie in
ateroscleroza a fost evaluată luând în considerare șapte probe:
•dovada 1
-ar trebui să fie considerat valid, deoarece literatura de specialitate este convinsa că
microorganismele orale pot să obțină acces la circulație
•dovada 2
-bacteriile parodontale au fost identificate în ateroame umane de mai multe grupuri folosind
tehnologii de detectare multiple. Astfel, există puține întrebari că bacteriile orale se gasesc in
ateroame umane. Cu toate acestea, încă lipsește dovada vizuală a bacteriilor în interiorul
celulelor din ateroame. În cazul în care numai o minoritate de celule contin bacterii, microscopia
electronică de transmisie (TEM) poate fi ineficienta pentru a le găsi. De asemenea, există unele
variații în organismele identificate în țesuturi. Acest lucru ar putea fi atribuite diferențelor în
tehnicile folosite sau diversitatea inter-individuala a organismelor orale capabile să infecteze
ateroame. În cele din urmă, aceasta ipoteză ar putea fi testata pe modele de animale, dar
complexitatea microbiana va complica modelele.
•dovada 3
-date folosind mijloace indirecte de cultură care susțin dovada 3, au fost publicate, dar sunt
necesare studii suplimentare de confirmare. In vitro, P. gingivalis devine inactiv sau viabilă, dar
nu cultivata (Li et al. 2008), și in vivo bacteriile au fost cultivate din omogenate aterom.Este
posibil ca același fenomen sa se produca in vivo și contactul cu celulele neinfectate "proaspete"
pot oferi semnale pentru bacterii să iasă din latența.
•dovada 4
-evidenta in vitro a invaziei de tipuri de celule afectate este de necontestat. De-a lungul celor
15 ani, au existat o serie de documente care au raportat invazia de tipuri de celule
cardiovasculare de bacterii parodontale.
•dovada 5
-este de asemenea bine documentată utilizând diverse modele animale, deoarece bacteriile
parodontale testate în aceste modele cauzate de frecventa si marimea leziunilor aterosclerotice au
crescut. În măsura în care modelele animale ale aterosclerozei reprezintă boli umane, atunci
această dovadă este îndeplinită. Un singur scop ar trebui să fie includerea mai multor complexe
de bacterii in aceste modele.
•dovada 6
-invazia si fenotipul de boala, adică boala redusa semnificativ de mutanți non-invazivi,
comparativ cu tulpina parentală de tip sălbatic este, de asemenea, documentată de grupuri de
cercetare multiple. Cu toate ca experimente cu mutanți suplimentari invazivi se vor dovedi,
datele actuale confirma acesta dovada specifica tulpinii.
•Dovada finală
- dovada 7, nu este încă finalizata. Cum specimenele de aterom devin tot mai greu de obținut, am
putea fi aproape, lipsește posibilitatea de a testa această dovadă finală.
Propunerea unui model
Va prezentam un model (fig. 2), bazat pe ceea ce se cunoaște despre componenta microbiană
orală a aterogenezei. Se propun ambele căi bacteriene și mediată de fagocitele de livrare a
bacteriilor la locul inflamației. Bacteriile derivate de bacteriemii invada stratul endotelial și se
răspândesc în țesuturi mai profunde(stânga).În plus, leucocitele pot adaposti bacterii viabile
internalizate, ceea ce reprezintă a doua cale de diseminare bacteriana sistemica la locuri de la
distanță. Bacteriile aderă la celulele endoteliale, intra si uzurpa procesele de celule endoteliale
pentru trafic, moment în care acestea pot deveni necultivabile (roșu în verde). Internalizarea lor
de fagocite sau interacțiuni cu celule neinfectate pot fi reactivate (de la verde la roșu).
Ateroamele pot crește datorită unor factori de crestere secretati de macrofage care duc la
proliferarea celulelor musculare netede. Bacteriile sunt, de asemenea,eliberate după moartea
celulei gazdă (descris la dreapta) pentru a re-infecta celulele suplimentare.
Semnificația tulpinii
Peste tot în lumea microbiana, există diferențe tensometrice în cadrul unei specii, iar aceste
diferențe influențează uneori virulenta. Noi propunem ca acesta este cazul pentru speciile
periodontopatogenice în ceea ce privește bolile cardiovasculare. Există mai multe exemple citate
în această revizuire, care ilustrează diferențele fenotipice între tulpini ale unei anumite specii. De
exemplu, Brissette & Fives-Taylor (1999) a raportat eterogenitatea invazivă a tulpinii A.
Actinomycetemecomitans. De asemenea, așa cum s-a discutat mai sus, numai anumite tulpini P.
Gingivalis pot induce autophagia in celulele endoteliale și tulpinile variază în numărul de
repetiții din adezina Haga. In plus, am testat peste 20 de tulpini P. Gingivalis pentru capacitatea
de a invada diferite tipuri de celule (Dorn et al. 2000). Rezultatele noastre au relevat o capacitate
larga printre tulpini de a invada celulele cardiovasculare cu tulpini grupate in categorii, inclusiv
invadatori mari, invadatori moderati și non-invadatori. Astfel, este posibil ca diferite tulpini de P.
Gingivalis sa induca răspunsuri variate în promovarea disfuncției endoteliale. Invers,tulpina P.
gingivalis W83, care este capsula pozitiv, dar nu exprimă fimbrii, induce activarea moderată a
TLR2 și un răspuns inflamator atenuat în HCAEC comparativ cu 381 (Rodrigues și colab.,
2012). În mod similar, capsula A7436 pozitivă, care exprimă tip IV fimbrii, induce, de asemenea,
un răspuns inflamator moderat în HCAEC (date nepublicate). Interesant, ambele W83 si A7436
pot accelera ateroscleroza la șoareci ApoE-nul (Li et al.2002, Maekawa et al. 2011), ceea ce
sugerează că bacteriile parodontale pot promova ateroscleroza prin alte mecanisme care nu pot
implica activarea profundă a celulelor endoteliale. Interesant, studii similare cu tulpini de S.
mutans au demonstrat că 10-15% din tulpini pot invada celulele endoteliale cardiovasculare si ca
o tulpină invazivă determinată patologic, comparativ cu șoarecii martor într-un ApoE - model de
șoarece al aterosclerozei accelerate (Kesavalu et al.2012).
În consecință, pe baza informațiilor disponibile, vă sugerăm că numai anumite tulpini de
periodontopathogens invazive joaca un rol in infectii ale tesuturilor cardiovasculare. Semnificația
acestui fapt este că indivizii care adăpostesc aceste tulpini pot fi la un risc mai mare pentru bolile
cardiovasculare (Nakano și colab., 2007). Prin urmare, detectarea tulpinilor pro-aterogene poate
fi un obiectiv al viitorului.
Concluzii
În concluzie, având în vedere dovezile pentru postulatele oferite aici, dar nu au fost încă
concludente, dovezile pentru invazia celulelor cardiovasculare umane prin specii de bacterii
parodontale ca un mecanism de ateroscleroza. De cand postulatele lui Koch nu pot fi aplicate la
om, în acest caz, ne propunem un postulat modificat Koch pt a fi testate în cazul în care, și atunci
când sunt obținute și construite tulpini și mutanti ale acestor tulpini adecvate. Astfel, munca
suplimentară este necesară pentru a confirma sau de a contesta această etiologie. Această lucrare
suplimentară ar conduce nu numai la o mai bună înțelegere a mecanismelor aterosclerozei
infecțioase, dar, de asemenea, poate fi o cheie pentru proiectarea de noi tratamente eficiente și
abordări preventive.