Centro de Bachillerato Tecnológico y de Servicios 149

Curso se Bacteriología I

Cocos Grampositivos

PQFB. Juan Carlos Calderón Duarte

El nombre del género Staphylococcus procede del griego staphylé, «racimo de
uvas».
La mayor parte de los estafilococos tiene un diámetro de entre 0.5 y 1 µm y son
anaerobios facultativos (es decir, crecen aerobia y anaerobiamente) inmóviles
capaces de crecer en un medio con una elevada concentración de sal.

En la actualidad, el género
comprende 35 especies y 17
subespecies, muchas de las cuales se
encuentran en el ser humano. Por
ejemplo, Staphylococcus aureus
coloniza las narinas anteriores.
 La superficie de la mayoría de las cepas de S. aureus (pero no la de los estafilococos coagulasa-
negativos) está recubierta de la proteína A. Esta proteína se une a la capa de peptidoglucano o a la
membrana citoplásmica y tiene afinidad de unión especial el receptor Fc de las inmunoglobulinas
IgG1, IgG2 e IgG4, lo que previene de forma eficaz la eliminación inmunitaria del microorganismo
mediada por anticuerpos.
 Las bacterias del género Staphylococcus conforman un importante grupo de
patógenos en el ser humano y originan un amplio espectro de enfermedades
sistémicas que pueden poner en peligro la vida, infecciones de la piel, las
partes blandas, los huesos y el aparato genitourinario e infecciones
oportunistas.

Las especies que se asocian con

mayor frecuencia a enfermedad
en el ser humano son:

 S. aureus (el miembro más

virulento y mejor conocido del
género).

 Staphylococcus epidermidis .

 Staphylococcus saprophyticus.
Epidemiologia.

Forman parte de la flora normal de la piel y superficies de las mucosas.

Los microorganismos pueden sobrevivir en las superficies secas durante

períodos de tiempo prolongados.

La transmisión de persona a persona ocurre a través del contacto directo o de la

exposición a fómites contaminados (aunque la mayor parte de las infecciones se
producen con los propios microorganismos del paciente).

Los pacientes de riesgo son los que tienen cuerpos extraños (p. ej., sutura,
prótesis, derivación o catéter).

Los microorganismos son ubicuos, por lo que no hay restricciones geográficas ni

estacionales.
Bacteriemia relacionada con el catéter.

Endocarditis subaguda asociada a patología

valvular previa o a válvulas protésicas.

Infección de derivación en el sistema

nervioso central.
Catéter venoso central.
Infección de las heridas quirúrgicas cuando
existe un cuerpo extraño (p. e¡., sutura,
prótesis, soporte).

Endocarditis infecciosa.
Fractura expuesta de tibia
 Factores de virulencia de Staphylococus aureus
Factores de virulencia Efectos biológicos

Capsula Inhibe la quimiotaxis y la fagocitosis; inhibe la proliferación de las células

mononucleares; facilita la adherencia a los cuerpos extraños.

Peptidoglucano Proporciona estabilidad osmótica; estimula la producción de pirógenos

endógenos (actividad de tipo
endotoxina); quimioatrayente leucocitario (formación de abscesos); inhibe la
fagocitosis.

Proteína A Inhibe la eliminación mediada por anticuerpos al unirse a los receptores Fc de

lgG1, lgG2 e lgG4; quimioatrayente leucocitario; anticomplemento.

Toxinas exfoliativas Proteasas séricas que rompen los puentes intercelulares del estrato granuloso
de la epidermis.

Enterotoxinas Superantígenos (estimulan la proliferación de los linfocitos T y la liberación de

citocinas); estimulan la liberación de mediadores inflamatorios en los
mastocitos, aumentando el peristaltismo intestinal y la pérdida de líquidos, así
como la aparición de náuseas y vómitos.

Hialuronidadas. Hidroliza los ácidos hialurónicos en el tejido conectivo, facilitando la

diseminación de los estafilococos en los tejidos
Coagulasa, catalasa, lipasas, Convierte el fribrinogeno soluble a fribrina insoluble, Desdoblan el peróxido
nucleasas, penicilasas. de hidrogeno, rompen grasas, rompen ácidos nucleídos, rompen penicilinas.
Tratamiento, control y prevención:

Los antibióticos de elección son oxacilina (u otras penicilinas resistentes a la

penicilinasa) o vancomicina para las cepas resistentes a oxacilina.

Generalmente es necesario retirar el cuerpo extraño para que el tratamiento tenga

éxito.

El tratamiento precoz de la endocarditis o de las infecciones de derivación es

necesario para evitar posterior daño tisular o la formación de inmunocomplejos.

EI mantenimiento de catéteres intravasculares estériles ayuda a prevenir las

infecciones.
Enfermedades estafilocócicas.

Aislamiento de estafilococos de las zonas

de infección. 1+, menos del 10% de
cultivos positivos; 2+, del 10% al 50% de
cultivos positivos; 3+, del 50% al 90% de
cultivos positivos; 4+, más del 90% de
cultivos positivos.
 Impetigo pustuloso

Impetigo ampolloso.

Artristis séptica
Síndrome de la piel escaldada estafilocócica
El género Streptococcus es un grupo formado por diversos cocos grampositivos
que normalmente se disponen en parejas o en cadenas. La mayoría de las
especies son anaerobios facultativos. Sus exigencias nutricionales son
complejas, y su aislamiento requiere el uso de medios enriquecidos con sangre
o suero. Son capaces de fermentar hidratos de carbono, proceso que produce
ácido láctico, y son catalasa-negativos, a diferencia de las especies del género
Staphylococcus.

Microscopia de contraste de fases

Estreptococos de más importancia
clinica:

S. pyogenes

S. agalactiae

S. pneumoniae

S. viridans
Clasificación de los estreptococos:

 Morfología de la colonia.

 Reacciones hemolíticas sobre agar sangre.

 Especificidad serológica de la sustancia especifica de grupo de la pared celular.

 Reacciones bioquímicas y resistencia a factores físicos y químicos.

 Los tipos de S. pneumoniae (neumococo) se clasifican con base en la

composición antigénica de los polisacáridos capsulares.
Hemolisis

La mayoría de los estreptococos tienen la capacidad de causar hemolisis de células

rojas “in vitro” en diferentes grados:

La lisis
Se conoce como β-
incompleta de
Hemolisis a la
eritrocitos con
disrupción
reduccion de la
completa de los
hemoglobina a la
eritrocitos con
formacion de un
aclaramiento de la
pigmento verde
sangre al rededor
(biliverdina)
de las bacterias en
recibe el nombre
crecimiento.
de α-hemolisis

No hemoliticos, o γ-
hemolisis.
Clasificación de Lancefield

Los carbohidratos contenidos dentro de la pared celular de muchos

estreptococos forman la base de la clasificación serológica en los grupos
de Lancefield A-H y K-U. La especificidad serológica del carbohidrato
especifico está determinada por un amino azúcar.

Grupo A, ramnosa-N-acetilglucosamina.

Grupo B, ramnosa-glucosalina.

Grupo C, ramnosa-N-acetilgalactosamina

Grupo D, glicerol de ácido teicoico que cntiene D-alanina y glucosa

Grupo F, glucopiranosil-N-acetilgalactosamina.
 Factores de virulencia de Streptococcus pyogenes

Factores de virulencia Efectos biológicos

Capsula antifagocitica

Proteína M Adhesina; interviene en la internalización por las células del

anfitrión; antifagocítica; degrada el componente C3b del
complemento
Proteína F Media en la adherencia a las células epiteliales e internalización.

Exotoxinas pirogenicas Median la pirogenicidad, el aumento de la hipersensibilidad

retardada y la susceptibilidad a la endotoxina, la citotoxicidad, la
mitogenicidad inespecífica de los linfocitos T, la inmunosupresión
de la función de los linfocitos B y la producción de un exantema
escarlatiniforme

Estreptolisina O Lisa leucocitos, plaquetas y hematíes; estimula la liberación de

enzimas lisosomales; inmunogénica.

Estreptolisina S Lisa leucocitos, plaquetas y hematíes; estimula la liberación de

enzimas lisosomales; no inmunogénica.

Estreptocinasa. Lisa los coágulos sanguíneos; facilita la diseminación de las

bacterias a los tejidos
Enfermedades causadas por S. pyogenes

Enfermedades estreptocócicas supurativas:

 Faringitis.
 Escarlatina.
 Pioderma.
 Erisipela.
 Celulitis.
 Fascitis necrosante.
 Síndrome del shock tóxico, estreptococia.

Enfermedades estreptocócicas no supurativas:

 Fiebre reumática.
 Glomerulonefritis aguda.
 Erisipela Fascitis
necrosante.

Fiebre reumatica Escarlatina

La afectación cardíaca se
manifiesta con una
pancardias (endocarditis,
pericarditis, miocarditis).
Microorganismo Sensibilidad Sensibilidad Hidrólisis de Prueba de Solubilidad en
hipurato CAMP Bilis.

Bacitracina Optoquina

S. pyogenes. S R - - -

S. agalactiae. R R + + -

S. R S - - +
pneumoniae
Grupo R R - - -
viridans
Solubilidad en Bilis

Algunos microorganismos se lisan en presencia de bilis. Se inocula un caldo

nutritivo sin glucosa y con pH alrededor de 7 con el microorganismo durante 24 h
y se le añade la solución de bilis al 10% (generalmente desoxicolato de sodio).

Se incuba a 35-37°C y si antes de 3 h se produce un aclaramiento en el contenido

del tubo se identifica Streptococcus pneumoniae.
 Reacción de CAMP
(Christie, Atkins,
Munch-Petersen).

con estreptococos del grupo B. Los estreptococos del grupo B producen una proteína
difusible y termoestable (factor CAMP) que aumenta la B-hemólisis de
Staphylococcus aureus. S. aureus (sembrado desde taparte superior hacia la parte
inferior de la placa) produce esfingomielinasa C, la cual se puede unir a las
membranas de los hematíes. Cuando son expuestas al factor CAMP del grupo B, las
células sufren hemolisis (compárense las dos reacciones positivas con aumento de la
hemolisis a la izquierda de la siembra de S. aureus con las dos reacciones negativas
de la derecha). (Tomado de Howard BJ: Clinical and pathogenetic microbiology, St
Louis, 1987, Mosby.)
 Espectro antibacteriano: rango de actividad de una sustancia contra los
microorganismos. Existen fármacos antibacterianos de amplio espectro y de
espectro reducido.

 Actividad bacteriostática.

 Actividad bactericida.

 Combinaciones antibióticas, combinación de antibióticos que se puede usar

para: 1) ampliar el espectro antibacteriano en el tratamiento, 2) prevenir la
aparición de microorganismos resistentes en el tratamiento, 3) obtener un efecto
bactericida sinérgico.

 Sinergismo antibiótico, combinación de dos antibióticos que hace que tenga un

efecto mayor juntos que lo que se obtendría por separado.

 Antagonismo antibiótico, combinación de dos antibióticos en el que la

actividad de uno interfiere con la actividad del otro.
Mecanismos básicos de la acción de los antibióticos
 Inhibidores de la síntesis de la pared
• Penicilinas
• Cefalosporinas
• Monobactamas
• Carbapenemes
• Peptídicos

Alteración de la permeabilidad de la membrana

celular
• Polienos
• Polimixinas
• Imidazoles
antimicrobianos
Inhibidores de la síntesis de Ac. nucleicos
•Quinolonas
•Ansamicinas
•Sulfonamidas
•Diaminopirimidinas

Inhibidores de la síntesis de proteínas

•Tetraciclinas
•Aminoglucósidos
•Anfenicoles
•Lincosamidas
•Macrólidos
Aminoglucósidos Betalactamicos

Amikacina

Ampicilina

Eritromicina Oxacilina
Método de Kirby-Bauer

En este método se emplean discos de papel absorbente

impregnados con una concentración conocida de antibiótico. Estos
discos se colocan es una placa de agar de Müeller-Hinton de 4 mm
de espesos, en las que se acaba de inocular una suspensión de la
cepa a probar con una turbidez equivalente al 0.5 de nefelómetro
de McFarland. Cuando el disco se humedece difunde radialmente
hacia fuera y crea un gradiente de concentración por disco, así el
antimicrobiano está en concentración alta cerca del disco y a una
concentración mas baja a medida que se aleja den mismo. El
diámetro del anillo de inhibición dependerá de dos factores, la
sensibilidad del microorganismo y la difusión del antimicrobiano en
el medio.
 La turbidez puede ser
ajustada en solución
salina o en caldo.

Turbidez de 0.5 en la escala

de McFarland = 108 UFC/ml.
Método de E-test

Representación esquemática del

método del E-test. La flecha indica la
zona donde se lee la Concentración
Inhibitoria Mínima.
Acción de las betalactamasas en los anillos betalactamicos.

Ampicilina-Sulbactam
El Nitrocefin en una cefalosporina cromogenica cuya solución acuosa es de
color amarillo y cuando es hidrolizado por las betalactamasas adquiere un
color rojo. Al practicar una solución espesa de una bacteria, en un tubo o
un pocillo con solución de Nitrocefin, si la bacteria es productora de
betalactamasas, a los pocos minutos se observará la aparición de del color
rojo.
Referencias:

 Koneman. Diagnostico Microbiologico/ Microbiological diagnosis, Elmer

Koneman,Stephen Allen, editorial panamericana.

 Microbiología Clínica Escrito por Guillermo Prats Pastor.

 BacteriologÍa General: Principios Y PrÁcticas de Laboratorio , Evelyn Rodríguez

Cavallini. Editorial Universidad de Costa Rica, 2005.

Introducción a la microbiología, Gerard J. Tortora,Berdell R. Funke,Christine L. Case.

Editorial panamericana.

 Biología de los Microorganismos (Brock), Madigan, Martinko, Parker. Edicion 10.

Editorial Panamericana.

 Microbiología Médica de Jawetz, Melnick y Adelberg. Manual moderno, edicion 24,

Publución 2008.

 Microbiología Medica. Patríck R. Murray, PhD Chief, Microbiology Service

Department of Laboratory Medicine Natiorial Institutes of Health Bethesda,
Ma.ryland. Quinta edicion.
 Clinical bacteriology. Escrito por J. Keith Struthers,Roger P. Westran. Editorial MASSON.

 Manual Practico de Microbiología, Carlos Gamazo, Ignacio Lopez-Goñi, Ramón Díaz,

tercera edición, Masson.

Microbiología Clínica Practica, segunda edición, P.Garcia Martos, M.T. Fernandez del
Barrio, F. Paredes Salido.

Manual de Practicas de Microbiología Básica, Hermando A. Valencia Z. Universidad

Nacional de Colombia.