CINETICA ENZIMATICA

• MG.MARLENI GONZALES IQUIRA

 CINÉTICA ENZIMÁTICA

•Las reacciones químicas en las células son

producidas por enzimas

•Las mediciones cinéticas determinan los

mecanismos enzimáticos que informan :
especificidad de la reacción y las
características físicas de la enzima.
La reacción enzimática global
Dos reacciones:
1) La concentración de sustrato (S) es suficientemente alta captura toda la
enzima (E) y forma el complejo ES
2) La reacción es limitante , es insensibles aumentos adicionales de sustrato

• la velocidad de catálisis (v) depende de la concentración del

producto final por unidad de tiempo y se representa por:
CURVA DE EVOLUCION

La evolución de los compuestos

en una simple reacción de
Michaelis-Menten a excepción
de la fase transitoria (rectángulo
sombreado) donde las
pendientes de las curvas [E] y
[ES] = 0 siempre que [S] >> [E]
 ECUACIÓN MICHAELIS REPRESENTACION GRÁFICA
MENTEN

KM Constante de Michaelis
 CONSTANTE DE MICHAELIS MENTEN : KM
Km bajo:
• La enzima tiene una gran afinidad por el
sustrato.
• la enzima se satura rápidamente
• la enzima está poco influenciada por los
cambios en las concentraciones.
Km alto:
• La enzima tiene una baja afinidad por su
sustrato.
• La enzima se satura solo a altas
concentraciones
• La enzima es susceptible a cambios en las
concentraciones
Para determinar gráficamente los valores de KM y Vmax

1) Representación de Lineweaver-Burk
o doble recíproca (1/v0 frente a 1/[S]0),

• La pendiente es KM/Vmax
• La abscisa en el origen (1/v0 = 0) es -
1/KM
• La ordenada en el origen (1/[S]0 = 0)
es 1/Vmax
Représentacion Eadie-Hofstee
Problema

La caña de azúcar puede hidrolizarse

en presencia de levadura. A partir de
los datos tabulados de concentración y
velocidad de reacción, determine los
parámetros de la ecuación cinética del
proceso
FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

1. Efecto de la temperatura.

Un aumento de la temperatura:
Aumenta la velocidad de la reacción
química - aumenta la tasa de
desnaturalización de la enzima (una
proteína), disminuyendo así su
actividad catalítica.

La suma de estos dos efectos da una

curva característica de la actividad
enzimática de la temperatura que pasa
a través de un máximo, mostrando así
la existencia de una temperatura
óptima.
2. Efecto del pH
Las enzimas son muy sensibles a las
variaciones en el pH y funcionan en un rango
limitado

Las mediciones de numerosas actividades

enzimáticas en función del pH dan curvas que
pasan a través de un máximo, un pH óptimo.

El pH puede actuar sobre varios factores:

• La ionización de los residuos de la enzima y del
sustrato y / o del producto
• La estructura terciaria de las proteínas y la
estabilidad de la enzima (A)
(B)
Actividad catalítica vs. pH.
Actividad medida a pH 7,4 después de la
• La unión del sustrato a la enzima incubación de la enzima durante 1 h a pH
diferente
• La actividad catalítica de la enzima;
 3. Efecto de la concentración del sustrato
Para una cantidad fija de enzima:

• A baja concentración
La velocidad de la reacción es proporcional a la
concentración del sustrato.
• A altas concentraciones
La velocidad de reacción es independiente de la
concentración de sustrato y tiende hacia un
valor constante (velocidad máxima).

La elección de la concentración de sustrato

es importante en el desarrollo de ensayos
enzimáticos.
 LA ENZIMA
• Todas las enzimas son proteínas (15,000 <M enz <varios millones de
daltons);

• Las enzimas son catalizadores "bio" para reacciones;

• Una enzima dada es específica de una reacción, es decir, siempre cataliza la

misma transformación, que ocurre en los mismos cuerpos químicos iniciales;

• Las proteínas enzimáticas son sintetizadas por los seres vivos. Esta síntesis
está determinada genéticamente: su conservación en el genoma es
fomentada por la necesidad de este ser vivo de hacer esta reacción.
Ecuación enzimatica
• SUSTRATO ENZIMÁTICO: Todas las moléculas que
entran en una reacción enzimática y se modifican
permanentemente se llaman sustratos.
• PRODUCTO: Producto resultante de la catálisis.
• COFACTOR: o efector positivo, son átomos ( Mg, Zn,
Mn, Fe ...), moléculas (no proteicas: NAD, FAD, CoA)
y coenzimas que intervienen como un activador,
no son transformados al final de la reacción.
Intervienen para transportar el sustrato, para recibir
el producto o participante en la estructura de la
enzima.
• INHIBIDOR: o efector negativo es un átomo o
molécula que puede inhibir la reacción catalítica. Su
acción puede ubicarse en la enzima como en su
sustrato. Son irreversibles, reversibles competitivos
no competitivos, efecto mixto, exceso de sustrato
BENEFICIOS DE USAR ENZIMAS
• Reacción en condiciones "leves"
• Pequeñas cantidades de catalizadores (enzimas) asegura la
obtención de los productos de reacción;
• Biorecurso renovable y biodegradabilidad de las enzimas;
• Diversidad de enzimas: investigación continua;
• Muy alta especificidad de la reacción a catalizar.
• Posibilidad de reciclar enzimas;
• Procesos no contaminantes;
• pocos coproductos o subproductos;
• Riesgo de casi no toxicidad;