PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DEL ECUADOR

FACULTAD DE MEDICINA

CARRERA DE BIOQUÍMICA CLÍNICA

Laboratorio de Biología Molecular

Alumna: Tania Pinargote Grupo: 2

Fecha de entrega: martes, 24 de septiembre de 2019

PRACTICA NO3

DILUCIONES Y CONCENTRACIONES

Resumen
En la práctica de laboratorio de biología molecular, se aprendió y comprendió la importancia
de realizar correctamente varios cálculos para la determinación de la concentración de una
muestra, se observó la posibilidad de poder expresar las concentraciones de una disolución en
varias de las unidades por medio de los volúmenes de soluto y del solvente para la realización
de la práctica.

Se analizaron varios cálculos de variables que fueron analizadas con sus respectivas formulas
estequiométricas realizados con ayuda del instructor y la realización de la práctica, donde se
prepararon varias soluciones de una determinada concentración a partir de varias sustancias
sólidas en gramos de soluto o por diluciones concentradas donde se realizó la dilución
correspondiente para el análisis de la muestra, a partir de la realización de todos los ejercicios,
se halló las variables establecidas por medio de la estequiometría correspondiente.

Objetivos
Se pretende entender los conceptos necesarios en relación con el desarrollo de los cálculos de
concentraciones valorando las propiedades de las disoluciones para la seguida preparación de
disoluciones o diluciones a partir de sustancias sólidas o por medio de la realización de una
dilución de una muestra más concentrada.

Introducción
Para la medición de la concentración en soluciones de una muestra determinada, es necesaria
la preparación de soluciones donde se conozcan las concentraciones, donde en el análisis
cuantitativo se determine por medio de la cantidad de sustancia que se quiere analizar o el
analito de una muestra que será disuelta para reaccionar con otra concentración conocida, “la
determinación se lleva a cabo por peso gravimétricamente, o por la relación del volumen
gastado de reactivo”,[ CITATION IBE19 \l 2058 ] en el análisis cuantitativo para una disolución
requiere del conocimiento de sus unidades de concentración:
  Molaridad, es expresada por medio de una disolución que contiene una concentración
X, esto se sobreentiende que por un litro de disolución, se tienen X número de mol de
soluto.
 Molalidad se sobreentiende que por cada kilogramo del disolvente, se tienen X
número de mol de soluto.
 Porcentaje Masa-Masa se sobreentiende que al tener una concentración X % m/m,
significa que se tienen X número de gramos de la disolución
 Porcentaje Masa-Volumen se sobreentiende que al tener una concentración X % m/v,
significa que se tienen X número de gramos de soluto, contenidos en 100 mililitros de
disolución.
 Porcentaje Volumen-Volumen se sobreentiende que al tener una concentración X %
v/v, significa que se tienen X número de mililitros de soluto, contenidos en 100
mililitros de disolución.

[ CITATION Alf19 \l 2058 ]

Las concentraciones que se expresan en los solutos contenidas en soluciones son

expresadas por medio de factores para su Inter conversión.[ CITATION Jor02 \l 2058 ]

Procedimiento experimental

Equipos y materiales utilizados

• se utilizaron pipetas graduadas y una pera de succión

• se utilizaron tubos de vidrio Falcon

los compuestos químicos usados fueron:

• sulfato de cobre (CuSO4)

• cloruro de sodio (NaCl)

Procedimiento experimental

Inicialmente se realizaron los cálculos correspondientes a las fórmulas estequiométricas

indicadas por el instructor, seguido de la realización d ellos cálculos para la prueba
experimental de preparación de soluciones y diluciones.

Para la parte experimental, se preparó una solución con 0,2924 gramos de sal donde se calculó
por medio de la molaridad y los mililitros que correspondían a la guía; se preparó una solución
de sulfato de cobre (CuSO4) con los datos expuestos en la guía donde se utilizó la fórmula de p
%(m/v); finalmente se realizaron dos diluciones, una seriada y una dilución doble.

Cálculos

1. en una solución al 113% (m/v) de cloruro de sodio, cuantos gramos tendremos de

soluto, si el volumen es de 750 ml
gr soluto
P %(m/v): ×100
ml solución
 P % (m/ v) ×ml solución
gr soluto : =¿
100
113% × 750ml
gr soluto : =847,5 gr soluto
100

2. si disolvemos 31 gramos de bicarbonato de sodio en 71ml de agua destilada, cuál será

la concentración de la solución
gr soluto
P %(m/v): ×100
ml solución
m 31 gr
P% ( )
:
v 71ml
×100=43,66 %

3. utilizando sal común (58,48gr/mol), preparar 20ml de una suspensión stock 10X de
suero fisiológico para el laboratorio
concentración: 10 x 0,9(concentración de solución salina = 9g en 100ml
gr soluto
P %(m/v): ×100
ml solución
P % (m/ v) ×ml solución
gr soluto : =¿
100
9 g × 20 ml
gr soluto : =1,8 gr soluto
100
4. de la suspensión obtenida preparar 5ml de suspensión 0,5X
V 1C 1=V 2C 2
V 1(10)=(5 ml)(0,5)
5 ml ×0,5
V 1= =0,25ml
10
5 ml−0,25=4,75 se afora con H 2 O detsilada
5. Preparar 20ml de una solución 0,25M de NaCl
NaCl=0,25→20 ml
58,48 gr
=14,62 →1000 ml
mol
14,62× 20 ml
=0,2924 gr de sal
1000ml
6. Preparar 15ml de una solución de sal 3% de sulfato de cobre y rotular como tubo A
gr soluto
P %(m/v): ×100
ml solución
P % (m/ v) ×ml solución
gr soluto : =¿
100
3 % ×15 ml
gr soluto : =0,45 gr
100
7. Del tubo A realizar una serie de 6 tubos de diluciones 1:10 con volumen final de 3,6ml
1 parte equivale a 0,36 de 10 partes
8. Del tubo A realizar una serie de 6 tubos de diluciones 1:2 con volumen final 3ml
1:2 dilución
3 ml deagua destilada
3 ml deagua destilada
 9. Cual es la molaridad de 0,22 moles de solutos disueltos en 1.20 l de la solución
moles de soluto
Molaridad=
litros de solución
o ,22 moles
Molaridad= =0,18 moles
1,20 litros
10. Cuál es la molaridad de 28 gr de sulfato de cobre (159,609 g/mol) disueltos en 1,5 l de
agua destilada
gramos de soluto
Molaridad=
litros de solución × peso molecuar
28 gr
Molaridad= =0,117 moles
1,5 litros ×159,609 g/mol

Resultados y análisis.
A partir de los ejercicios realizados para la preparación de las soluciones, se analizó que está
compuesta en mayor cantidad de solvente y el de menor cantidad, el soluto. Por lo tanto, se
dice que el “soluto se encuentra disuelto en el solvente”[ CITATION Dan14 \l 2058 ] algunas
propiedades de las soluciones se encuentran clasifican de manera cualitativa que pueden ser
concentradas o diluidas y se necesita conocer de cuánto soluto está compuesto a lo que se lo
conoce como concentración.
Las unidades usadas para la determinación de la concentración de una muestra es la molaridad
con su unidad “M” se expresa como una cantidad de moles que contiene el soluto que se
encuentra contenido en un litro de una disolución determinada; ya que las concentraciones se
expresan en porcentajes de peso en peso, este se encuentra diferenciado de la molaridad ya
que se expresa por una medida del solvente; La concentración según Daniel Mauricio Polo
Muñoz “Se expresa como una propiedad intensiva” se refiere a que no cambia con la cantidad
de la disolución.

Conclusiones
Se entendieron los conceptos necesarios para la realización de los cálculos estequiométricos
de la práctica para poder determinar las concentraciones de las disoluciones o diluciones, se
comprendió el significado de las unidades de concentración y mecanismo de conversión
comúnmente usadas en el laboratorio de biología molecular en soluciones, se puede concluir
que en la realización de soluciones es necesaria la exactitud y habilidad de medición
recalcando la dependencia de los requerimientos en el procedimiento a realizar para así evitar
un mal cálculo que pueda afectar los resultados o concluir en resultados erróneos.[ CITATION
Dan14 \l 2058 ]

Cuestionario o consulta a realizar

1. Calcule las concentraciones y los volúmenes y complete los espacios en blanco

Reactivo Concentración Concentración Volumen 1 Volumen 15

stock reacción reacción reacciones
H2O 8,8 mL 132ul
Buffer TaqPol 10X 1X 2,5 mL 37,5ul
MgCl2 25Mm 167000 uM 1,2 uL 18ul
Mix dNTPs 2Mm 200 uM 2,5 mL 37,5ul
Primer Forward 5 uM 0,5 uM 2,5 uL 37,5ul
Primer Reverse 5 uM 0,5 uM 2,5 uL 37,5ul
 Taq DNA 5 unidades/ul 1 unidad/ul 5 unidad/ul 75 unidad/ul
Polymerase
Volumen final 25 ul 375 ul

Formula usada para todos los cálculos:

VIC 1=V 2 C 2

Ejemplo: MgCl2

( 0,25 mM ) ( 1,2ul )
=C 2
18 ul

C 2=1,67 mM →167000 uM

Bibliografía

García, J. (2002). Concentraciones en soluciones clínicas: teoría e interconversiones. Obtenido

de https://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0253-
29482002000100008

IBERO. (2019). Soluciones, Unidades de Concentración. Obtenido de

https://ibero.mx/campus/publicaciones/quimanal/pdf/2soluciones.pdf

Muñoz, D. (2014). Preparacion de soluciones y diluciones. Obtenido de

https://www.academia.edu/9354612/Preparacion_de_soluciones_y_diluciones

Velásquez, A. (2019). “UNIDADES DE CONCENTRACIÓN (II)”. Obtenido de

http://dcb.ingenieria.unam.mx/wp-content/themes/tempera-
child/CoordinacionesAcademicas/FQ/Q/Articulos/0a_udeconcentracion2.pdf