Multiplicarea pe termen lung la ceapă

(Allium cepa L.) prin lăstari regeneraţi ciclic in vitro

Principiul metodei: multiplicarea pe termen lung la ceapă (Allium cepa

L.) prin lăstari regeneraţi ciclic in vitro se bazează
atât pe capacitatea structurilor tisulare de la
nivelul bulbilor de a genera primordii caulogene
de novo pe termen nelimitat cât şi pe posibilitatea
de a utiliza o parte din vitroplantele obţinute ca o
nouă sursă de explante.

Scopuri:
a) micropropagare unor linii androsterile, menţinătoare şi
consangvinizate de Allium cepa L.;
b) cercetare fundamentală.

Protocolul de lucru
1. sursa de material biologic vegetal: bulbi de Allium cepa L.
2. sterilizarea de suprafaţă se realizează cu o soluţie de NaClO 0,5%,
timp de 30 minute
3. îndepărtarea agentului de sterilizare: se face prin clătirea cu H2O
ds de 3x 10’
5. tipurile de explante:
a) - lăstari cu o porţiune de 2-3 mm din zona
discului bazal (tulpina turtită);
b) - lăstari obţinuţi in vitro
6. medii nutritive:
a) mediu nutritiv inductiv
- MS (1962), modificat prin adăugarea de agar 8.000 mg/l,
sucroză 30.000 mg/l, BAP 5,0mg/l şi ANA 0,5mg/l;
b) mediu proliferativ
- MS (1962), modificat prin adăugarea de agar 8.000 mg/l,
sucroză 30.000 mg/l, cărbune activ 1.000 mg/l şi ANA
0,30 mg/l
7. parametri fizici de incubare:
- t° = +25°C ± 2°C şi
- fotoperioada de 16 h
8. transferuri periodice pe medii nutritive proaspete la intervale de 3 –
4 săptămâni