TALLER DE MEDIOS DE CULTIVO

Nombres y Apellidos JOSE DURFAY CLAVIJO SILVA

Fecha 15 de mayo de 2020

1. Realice los cálculos para preparar 270ml de agar EMB, siguiendo las
instrucciones del proveedor que dice que; 36 g del medio en un litro de
agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando
frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para
disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lb de presión)
durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45ºC. Vaciar en cajas de
Petri estériles.

 270ml
 36gr

36 gr 1000 ml 36 gr x 270 ml 9720

X = = 9,72gr
x 270 ml 1000 ml 1000

2. ¿Por qué el medio Mc. Conkey puede ser considerado un medio selectivo y
diferencial? ¿Para el aislamiento de qué tipo de bacterias se lo emplea?
Anote la composición y diga qué función cumple el rojo neutro.

- Es un medio selectivo diferencial utilizado para el aislamiento y

diferenciación de bacilos Gram negativo fermentadores y no fermentadores
de lactosa.
- Se utiliza con frecuencia para el aislamiento de coliformes.

- COMPOSICION

Digerido pancreático de gelatina 17,0 g

Digerido pancreático de caseína 1,5 g
Digerido péptico de tejido animal 1,5 g
Lactosa 10,0 g
Mezcla de sales biliares 1,5 g
Cloruro de sodio 5,0 g
Agar 13,5 g
Rojo neutro 30,0 mg
Cristal violeta 1,0 mg
Agua destilada 1.000 ml
 - COLORANTE: ROJO NEUTRO

Toluidina o rojo básico, se utiliza como colorante de contraste en tinciones

generales. Es uno de los colorantes más usados en experimentos de citotoxicidad
puesto que solo las células vivas lo incorporan, pero no aquellas que están
muertas o están muriendo.

3. ¿Cuál es el medio de cultivo elegido para el aislamiento de Staphylococcus

aureus? Diga la composición y clasifíquelo de acuerdo a su origen,
composición y consistencia.

- Para apreciarla debemos contar con un aislamiento de la cepa a estudiar en

una placa de Petri. El aislamiento nos permitirá observar las características de
las colonias. En medios no selectivos, S. aureus presenta colonias de 1 a 3
mm de diámetro, lisas, levemente elevadas, de bordes enteros, levemente
convexas y generalmente pigmentadas con un color que puede ir desde la
crema al amarillo.
- COMPOSICION: El género Staphylococcus está formado por cocos Gram
positivos, con un diámetro de 0.5 a 1.5 μm, agrupados como células únicas,
en pares, tétradas, cadenas cortas o formando racimos de uvas.

ESTRUCTURA

 Pared celular
 Membrana celular
 Capsula

- CLASIFICADOS: Los estafilococos fueron clasificados inicialmente en un

género común en la familia Micrococacea además de los géneros
Micrococcus, Stomacoccus y Planococcus.

- CONSISTENCIA: Se caracterizan por colonias lisas, brillantes y convexas.

Poseer un endopigmento color amarillo-naranja a lanco porcelana color
dorado al cual se le conoce como “aureus”. Fermenta glucosa, lactosa y
maltosa.

4. ¿Cuál es el medio de cultivo que se emplea para el aislamiento de hongos y

levaduras?

- Los hongos crecen fácilmente en la gran mayoría de medios de cultivo; por

ello los medios de cultivo que se utilizan para hongos y levaduras
generalmente tienen como objetivo la purificación (selectivo) o caracterización
(diferenciales) de dicho microorganismo.
El agar más utilizado para el cultivo de hongos es el agar Sabouraund, tanto
para hongos filamentosos como para levaduras.
5. Calcule cuántos gramos de agar-agar que se necesitan para preparar 125 ml
de medio de cultivo sólido. ¿Qué porcentaje P/V se utilizó?

 125gr
 15gr

se debe preparar añadiendo agar a razón de 15 g por litro

1000 15g 125 1,87

15gr ml r gr 5 1,875
X = =
100 gr
x 125gr 1000ml 0

1,875g
%P/V r X100 = 1.5%
125gr
El porcentaje que se utilizo fue del 1.5% P/V

6. Prepare 0.08L de solución de NaCl al 0.85% P/V

 0,08lt = 80ml
 0,85% m/v = 0,85 gr

0,85 100 0,85 80

gr ml gr ml 68 0,68
X = =
100 gr
x 80ml 100ml ml

0,68 gr de NaCL

7. Según su medio fisico, clasifique el caldo verde brillante al 2%,

seguidamente calcule cuántos gramos se necesitan para preparar 9 tubos
de ensayo (cada uno va con 9ml del medio). Las intrucciones de
preparación son las siguientes: Disolver 40g del polvo en 1 Litro de agua
destilada. Distribuir en tubos con campana de Durham y esterilizar durante
15 minutos a 121ºC.

40gr 1000ml 40gr 9ml 360

x 9ml
X
1000ml
= 1000ml
= 0,36gr

Se necesitan 0,36 gramos

para 9 tubos de ensayo.
 8. Prepare 10 cajas de Petri con Agar Oxford, el fabricante sugiere pesar 27.75g en un litro de
Agua destilada. Llevar a ebullición. Esterilizar en Autoclave a 121ºC, 15 minutos. Enfriar a
50ºC y agregar asépticamente el contenido de un vial (El vial se econstituye con 5ml de
70% etanol y es para 500 ml de agar oxford). Mezclar bien y distribuir en placas de Petri
estéril.

27,75gr 1000ml 27,75gr 500ml 13875

X = = 13,875gr
x 500ml 1000ml 1000ml