Izolarea produşilor naturali

Schema simplificată a principalelor căi

metabolice pentru plante
 Izolarea produşilor naturali - date preliminare

● ?Ce? încercăm să izolăm

● un singur compus pur necunoscut

● cu activitate biologică

● fără legătură cu activitatea biologică

● un compus cunoscut produs de un anumit organism

● mai mulţi compuşi cu structură apropiată – cunoscuţi sau nu

● un amestec eterogen de compuşi cunoscuţi sau nu

● toţi metaboliţii produşi de un organism

● o serie de metaboliţi caracteristici pentru un scop bine definit – ex. în scop chemotaxonomic

● un amestec cu compoziţie nedeterminată pentru un scop definit

●?De ce?

● din punct de vedere al cantităţii de material

● pentru a obţine o cantitate ponderabilă în vederea caracterizării totale sau parţiale

● pentru a obţine o cantitate suficientă pentru confirmarea unei structuri cunoscute

● pentru a obţine cantitatea maximă accesibilă în vederea unor studii ulterioare

● din punct de vedere al destinaţiei şi al purităţii

● în scop analitic

● pentru teste ulterioare

● pentru uz medical

● pentru uz alimentar

● pentru uz industrial
 Izolarea produşilor naturali - metodologie (după caz)

● Pregătirea materialului brut

● recoltare

● selecţie

● mărunţire

● uscare

● liofilizare

● macerare

● maturare, etc.

● Extracţie

● Separare

● Purificare

● Confirmare structurală

● Confirmarea activităţii

● Analiză cantitativă
Exemplu de schemă analitică simplificată
Schemă pentru alegerea metodei de separare
Purificarea probei prin SFE
 Date esenţiale cu privire la probă

● Numărul de compuşi prezenţi

● Structura chimică a acestora
● Masa moleculară
● Spectrele UV ale compuşilor (de preferat şi
spectrele MS, FT-IR, RMN)
● Domeniul de concentraţii de interes
● Solubilitatea probei ! În condiţiile metodei
Determinarea modului de lucru
Purificarea probei
extracţia prin SPE
Extracţia prin SPE
Extracţia prin SPE

Suprafaţă nefuncţionalizată
Extracţia prin SPE
Seria eluotropă pentru trei f.s.

P' – parametru de polaritate

 Îmbunătăţirea selectivităţii
● modificarea polarităţii solventului din amestecul de solvenţi
● Avantaje – uşor de realizat

● Dezavantaje – control mai slab în special izocratic

● Schimbarea solventului

● Avantaje – se impune dacă prima metodă nu dă

rezultate
● Dezavantaje – necesită mai multe analize

● Amestec mai complex de solvenţi

● Avantaje – duce la separări mai bune

● Dezavantaje – număr mare de probe

● Schimbarea fazei staţionare

● Avantaje – poate îmbunătăţi mult separarea

● Dezavantaje – demontare, echilibrare

● Schimbarea temperaturii de separare

● Avantaje – scade viscozitatea, scade t

r
● Dezavantaje – necesită coloană termostatată,

modificarea selectivităţii este mai redusă decât în

cazul celorlalţi parametrii, uzează coloana
Faze staţionare Cn
Faze staţionare Cn
- faze staţionare – stabilitate în timp la pH 2 -

%k – rap.fact.de capacitate