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DOGMA CENTRAL DE

10
LA BIOLOGÍA

ESTRATEGIAS DE ENSEÑANZA-APRENDIZAJE PARA DESARROLLAR LA PRÁCTICA

Fase de apertura. Tiempo: 10 min

1. Toma la asistencia en aula virtual.


2. El docente declara las capacidades a desarrollar:
a. Realizar un modelo de ADN de la molécula de insulina.
b. Reconocer las etapas de la expresión génica de la insulina.
3. Explicación de la práctica por parte del docente.

Fase de Desarrollo. Tiempo: 65 min

Realización de la práctica.
I. Introducción
El Dogma Central de la Biología Molecular explica el flujo o procesamiento de la información genética
en la mayoría de los organismos conocidos. En el Dogma se distinguen tres etapas:
1. La replicación del ADN, en la cual se copia el ADN progenitor en moléculas hijas idénticas al ADN
progenitor.
2. La transcripción, que es el proceso mediante el cual se transcribe la información genética del ADN al
ARNtm, para ser llevado al lugar de síntesis de las proteínas; los ribosomas.
3. La traducción, es el proceso mediante el cual el mensaje cifrado en el idioma de los tripletes de bases
(código genético) es descifrado por los ARNt , sintetizándose una proteína
Ciertos virus, como el de la inmunodeficiencia humana (VIH), guardan su información genética en
forma de ARN y la duplican utilizando ADN (con la ayuda de enzimas transcriptasas reversas). Cuando estos
virus se introducen en una célula huésped convierten su ARN, de cadena simple, en ADN, de cadena doble,
y este segmento se inserta en el genoma de la célula. El ADN modificado es transcripto por enzimas
celulares y luego es traducido. Las proteínas generadas junto con el ARN viral, se ensamblan y forman una
nueva partícula viral capaz de infectar nuevas células.

REPLICACIÓN DEL ADN


La replicación del ADN es un proceso semiconservativo en el que cada cadena parental sirve como
molde para síntesis de una nueva cadena hija complementaria. La replicación de una molécula de ADN
comienza en sitios especiales llamados orígenes de replicación. El cromosoma bacteriano, que es circular,
tiene un único origen de replicación (monofocal). Las proteínas que inician la replicación del ADN
reconocen ésta secuencia y se fijan al ADN separando las dos cadenas, formando una “burbuja” de
replicación. La replicación del ADN avanza entonces en ambas direcciones (bidireccional) hasta que se
replique la molécula entera. En cambio el cromosoma eucariótico tiene cientos o miles de orígenes de
replicación (multifocal).
En cada extremo de una burbuja de replicación hay una horquilla de replicación, una región en forma
de “Y” donde están creciendo nuevas cadenas de ADN. La helicasa es la enzima que desenrolla la doble
hélice en la horquilla de replicación y separa las dos cadenas parentales para que estén disponibles como
cadena molde. La elongación de la cadena nueva de ADN en la horquilla de replicación se cataliza por
enzimas denominadas ADN polimerasas. A medida que los nucleótidos individuales se alinean con

1 Actividades de Práctica
P.C.
nucleótidos complementarios a lo largo de la cadena molde de ADN, la ADN polimerasa los añade, uno a
uno, al extremo en crecimiento de la nueva cadena de ADN.
Cada nucleótido que se añade a una cadena de ADN en crecimiento es un nucleótido trifosfato, que al
momento de la unión se separan dos grupos fosfato de manera que cada nucleótido del ADN posee un
solo grupo fosfato. La ADN polimerasa agrega nucleótidos solo al extremo 3’ libre de una cadena de ADN
en crecimiento, nunca al extremo 5’. De este modo una cadena de ADN nueva se puede alargar solo en la
dirección 5’→3’.
En bacterias la ADN polimerasa III (ADN Pol III) agrega nucleótidos de forma continua a la cadena
complementaria a medida que la horquilla progresa. La cadena de ADN sintetizada por medio de ese
mecanismo se llama cadena líder. Para elongar la otra cadena nueva de ADN en la dirección 5’→3’, la ADN
Pol III debe actuar a lo largo de otra cadena molde en dirección contraria a la horquilla de replicación. La
cadena de ADN sintetizada en esta dirección se denomina cadena retrasada, esta cadena se sintetiza con
una serie de segmentos llamados fragmentos de Okazaki, que tienen de 1000 a 2000 nucleótidos de
longitud en E. coli y de 100 a 200 en eucariotas. Otra enzima, la ADN ligasa, finalmente une o liga los
fragmentos de Okazaki y forma una cadena de ADN nueva.
Las ADN polimerasas no pueden iniciar la síntesis de un polinucleótido; solo puede añadir nucleótidos
al extremo 3’ de una cadena ya existente. La cadena de nucleótidos inicial es un segmento corto llamado
cebador o primer, que es un segmento corto de ARN con un extremo 3’ disponible sintetizada por la
primasa. Una vez formado el cebador la ADN pol III añade un nucleótido de ADN al extremo 3’ y continúa
agregando nucleótidos a la cadena de ADN en crecimiento según el apareamiento de bases
Otra enzima llamada la ADN polimerasa I, sustituye los nucleótidos de ARN de los cebadores con
versiones de ADN añadiendo uno a uno sobre el extremo 3’ del fragmento de Okasaki adyacente;
posteriormente la ADN ligasa une los esqueletos de azúcar-fosfato de todos los fragmentos de Okazaki en
una cadena continua de ADN.
TRANSCRIPCIÓN
La transcripción es el proceso mediante el cual se copia en el ARN la información contenida en el DNA.
El ARNm es sintetizado tendrá una secuencia de nucleótidos complementaria a una de las cadenas de ADN
(3’ → 5’). Las enzimas denominados ARN polimerasas son las principales responsables del proceso.
Las células procariotas tiene solo una polimerasa, mientras que las eucariotas tiene tres tipos de
polimerasas (I, II y III) que transcriben distintos tipos de RNA; la RNA pol II es la única que transcribe genes
que codifican proteínas. Se trata de complejos proteicos con varios centros catalíticos. En procariotas la
RNA pol tiene cuatro subunidades catalíticas (núcleo enzimático) y una reguladora (sigma) que puede
separarse del complejo.
Las ARN polimerasas funcionan de una forma semejante a las DNA polimerasas y son capaces de unir
nucleótidos exclusivamente en el extremo 3' (dirección de transcripción 5'→ 3'), pero, a diferencia de ellas,
no requieren de un cebador. Para realizar el proceso, la polimerasa requiere la presencia de nucleótidos
activados (trifosfatos) y diversos factores proteicos. También es necesaria el cofactor enzimático Mg 2+
En las eucariotas la ARN polimerasa responsable de la síntesis del ARNm es la ARN Pol II. Las moléculas
de ARNm sintetizadas por la ARN polimerasa en el interior del núcleo de la célula se denominan transcritos
primarios o inmaduros. Estos transcritos primarios sufren dos modificaciones antes de salir del núcleo
celular. La primera modificación de la etapa de maduración consiste en la adición de un nucleótido uracilo
modificado en el extremo 5’ (cap), seguido de la unión de una cola de poliadeninas (poli A) en el extremo
3’. Estos cambios aportan estabilidad estructural al ARNm inmaduro.
Posteriormente, las hebras de ARNm inmaduras sufrirán un proceso de eliminación (“splicing”) de las
regiones no codificantes (intrones) y empalme de las regiones codificantes (exones), mediante un complejo
proteico denominado espliceosoma(ayustosoma). El splicing da forma al transcrito maduro, que saldrá al
citoplasma, donde generará una proteína a través del proceso de traducción.

2 Actividades de Práctica
P.C.
TRADUCCIÓN
La traducción es el paso final de la expresión génica, por el que la información contenida en el ARNm
se traduce a proteína. Para la traducción proteica se requiere del código genético.
El código genético está constituido únicamente por las cuatro bases presentes en el ARN: A, U, G y C.
Las palabras de este código sólo pueden contener tres letras que se le denomina codon. Por tanto, el
numero de tripletes o codones totales posibles únicamente puede ser de 64. De estos 64 codones, 3 de
ellos se corresponden con señales de finalización de la traducción o señal stop (UAA, UAG y UGA) y los
otros 61 tripletes o codones se corresponden con 1 de los 20 aminoácidos esenciales que componen las
proteínas. Obviamente hay tripletes redundantes, es decir, existen diferentes tripletes que codifican para
el mismo aminoácido.
Por esta característica, se dice que el código genético es degenerado. La traducción la llevan a cabo los
ribosomas presentes en el citoplasma celular. El proceso consiste en la lectura de los tripletes o codones
de la secuencia de ribonucleótidos que componen el ARNm y en la unión ordenada de los diferentes
aminoácidos que se corresponden con la lectura de los tripletes. El proceso de la traducción se inicia con la
señal de inicio de traducción (triplete AUG, codificante para el aminoácido metionina) y finaliza cuando el
ribosoma identifica cualquiera de los tres tripletes stop. El resultado final de la traducción es una secuencia
lineal de aminoácidos que siempre comienza con una metionina, y es esta secuencia de aminoácidos la que
aporta la funcionalidad específica de cada proteína.
La síntesis de una proteína, sin embargo, no significa que la proteína sea funcional. Para ser activos, las
proteínas deben plegarse en conformaciones tridimensionales características y, en muchos casos, varias
cadenas polipeptídicas se agregan para dar lugar a un complejo funcional. Además, muchas proteínas
experimentan modificaciones adicionales, incluyendo escisión y la unión covalente de carbohidratos y
lípidos, que son necesarios para la correcta función y localización de las proteínas en la célula.
La insulina es una hormona polipeptídica que es secretada por las células β de los islotes pancreáticos.
Se sintetiza como una sola cadena polipeptídica en el retículo endoplásmico rugoso: la preproinsulina. Esta
proteína en el retículo endoplásmico rugoso sufre algunas modificaciones en su estructura, como la
pérdida del péptido señal, el plegamiento de la cadena y la formación de puentes disulfuro. Se forma así la
molécula de proinsulina que mediante transporte evsicular se transporta al aparato de Golgi, donde se
empaqueta en gránulos de secreción.
Durante la maduración de estos gránulos, la proinsulina es escindida por enzimas proteolíticas que
liberan la molécula de insulina y el péptido C. Estos gránulos que contienen cantidades equimolares de
insulina y péptido C, además de una pequeña proporción de proinsulina sin modificar, son expulsados
hacia la periferia de las células β. Cuando se fusiona la membrana del gránulo con la membrana celular se
produce la exocitosis del contenido del gránulo.

II. Material.

Biológico Laboratorio Reactivos y soluciones


Cartulina, papel de colores *
Tijera *
Pegamento *
Con (*) material a traer por el estudiante el día del TP.

III. Instrucciones.

1. Se presenta la secuencia de las cadenas A y B del gen de: insulina humana ( Homo sapiens), chimpancé
(Pan troglodytes), orangután (Pongo pygmaeus) y perro (Canis familiaris).
2. Por grupos de trabajo conformado por dos estudiantes, deberán escoger una de las secuencias, y en

3 Actividades de Práctica
P.C.
la hoja en blanco realizar la replicación, transcripción y traducción de la secuencia de ADN elegida.
 Péptido A: desde Glicina 1 hasta Asparragina 21
 Péptido B: desde Fenilalanina 1 hasta Treonina 30
3. Represente la secuencia de ADN ARN de la cadena A de insulina elegida. Use cartulinas de colores.
Para hacer las cadenas de ADN puede utilizar los moldes de nucleótidos del anexo 1 o 2.
Corte los nucleótidos que son necesarios (21 de la cadena A) y los va uniendo según indica la figura.
Primero forma la cadena del lado derecho y luego completa la del lado izquierdo apareando los
nucleótidos respetando la complementaridad de bases hasta obtener la secuencia completa.
El color de los nucleótidos se indican debajo:
o Adenina = naranja Timina = azul Citosina = amarilla
o Guanina = verde Acido fosfórico = púrpura Deoxyribose = blanco

4. Represente la secuencia de ARN de la cadena A de insulina. Use cartulinas de colores. Para hacer las
cadenas de ADN puede utilizar los moldes de nucleótidos del anexo 3 o 4. Corte los nucleótidos que
son necesarios (21 de la cadena A) y los va uniendo hasta obtener la secuencia completa.

Aminoácidos

Símbolo Abreviatura
Aminoácido primario Codones
1 letra 3 letras
A Ala Alanine Alanina GCA, GCC, GCG, GCU
C Cys Cysteine Cisteina UGC, UGU
D Asp Aspartic acid Acido aspártico GAC, GAU
E Glu Glutamic acid Acido glutámico GAA, GAG
F Phe Phenylalanine Fenilalanina UUC, UUU
G Gly Glycine Glicina GGA, GGC, GGG, GGU
H His Histidine Histidina CAC, CAU
I IIe Isoleucine Isoleucina AUA, AUC, AUU
K Lys Lysine Lisina AAA, AAG
L Leu Leucine Leucina UUA, UUG, CUA, CUC, CUG; CUU
M Met Methionine Metionina AUG
N Asn Asparagine Asparagina AAC, AAU
P Pro Proline Prolina CCA, CCC, CCG, CCU
Q Gln Glutamine Glutamina CAA, CAG
R Arg Arginine Arginina AGA, AGG, CGA, CGC, CGG, CGU
S Ser Serine Serina AGC, AGU, UCA, UCC, UCG, UCU
T Thr Threonine Treonina ACA, ACC, ACG, ACU
V Val Valine Valina GUA. GUC, GUG, GUU
W Trp Tyrosine Tirosina UAC, UAU
Y Tyr Tryptophan Triptófano UGG

4 Actividades de Práctica
P.C.
ANEXO 1 : SECUENCIAS DE INSULINA

Secuencia de ADN de Insulina Humana (Homo sapiens)


Cadena A: GGC ATT GTG GAA CAA TGC TGT ACC AGC ATC TGC TCC CTC TAC CAG CTG GAG AAC TAC TGC AAC
Cadena B: TTT GTG AAC CAA CAC CTG TGC GGC TCA CAC CTG GTG GAA GCT CTC TAC CTA GTG TGC GGG
GAA CGA GGC TTC TTC TAC ACA CCC AAG ACC

Molécula 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
5’
ADN

ARN 5’
aa NH2

11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21

5’

COOH

Secuencia de ADN de Pan troglodytes (Chimpancé)


Cadena A: GGT ATC GTG GAA CAA TGC TGT ACC AGC ATC TGC TCC CTC TAC CAG CTG GAG AAC TAC TGC AAC
Cadena B: TTT GTG AAC CAA CAC CTG TGC GGC TCC CAC CTG GTG GAA GCT CTC TAC CTA GTG TGC GGG
GAA CGA GGC TTC TTC TAC ACA CCC AAG ACC

Molécula 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
5’
ADN

ARN 5’
aa NH2

11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21

5’

COOH

Secuencia de ADN de Pongo pygmaeus (orangutan)


Cadena A: GGT ATC GTG GAA CAA TGC TGT ACC AGC ATC TGC TCC CTC TAC CAG CTG GAG AAC TAC TGC AAC
Cadena B: TTT GTG AAC CAG CAC CTG TGC GGC TCC CAC CTG GTG GAA GCT CTC TAC CTA GTG TGC GGG
GAA CGA GGC TTC TTCTAC ACA CCC AAG ACC

Molécula 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
5’
ADN

ARN 5’
aa NH2

11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21

5’

COOH

5 Actividades de Práctica
P.C.
Canis familiaris (perro)

Cadena A: GGC ATC GTG GAG CAG TGC TGC ACC AGC ATC TGC TCC CTC TAC CAG CTG GAG AAT TAC TGC AAC

Cadena B: TTCG TTA ACC AGC ACC TGT GTG GCT CCC ACC TGG TAG AGG CTC TG TAC CTG GTG TGC GGG
GAG CGC GGC TTC TTC TAC ACG CCT AAG GCC

Molécula 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
5’
ADN

ARN 5’
aa NH2

11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21

5’

COOH

CADENAS DE ADN

6 Actividades de Práctica
P.C.
IV. Resultados.
Represente la secuencia de la insulina

7 Actividades de Práctica
P.C.
Fase de cierre. Tiempo: 25 min

 Se concluye la práctica con una retroalimentación docente-alumno y el docente refuerza cualquier duda
de los estudiantes.
 El docente evalúa la práctica desarrollada mediante una prueba escrita.
 El docente señala que la siguiente clase se desarrollará la práctica relacionada a observación de núcleos,
recomienda a los estudiantes descargar de aula virtual el material de apoyo sobre dicho seminario.
Evidencia. Instrumento de evaluación.
- Informe de la práctica, resumen o mapa - Asistencia
- Sustentación del tema desarrollado - Rúbricas para evaluar el informe.

Fuentes de Consulta

Páginas WEB de apoyo.

 ALBERTS B., et al. Biología Molecular de la Célula. 5ª ed. Cápitulo 4: DNA, cromososomas y genomas;
Capítulo 5: replicación, reparación y recombinación del DNA; Capítulo 6: Cómo leen las células el
genoma- del DNA a la proteína. Editorial Médica Panamericana S.A. 2010: 1728p.
 BEAS C. ORTUÑO D., ARMENDARIZ, J.S. Biología Molecular: Fundamentos y Aplicaciones. México:
Editorial Mc Graw Hill-Interamericana. 2009:181p. Código: 571.6/B29 Biblioteca Central.
 BECKER W. HARDIN J. KLEINSMITH L. El Mundo de la Célula. Capítulo 19: Ciclo celular, replicación del
DNA y mitosis; Capítulo 21: Expresión Génica I: El código genético y la transcripción. Capítulo 22
Expresión Génica II: Síntesis y Clasificación de Proteínas. 6ª ed. Editorial Pearson Prentice Hall.
 KARP G. Biología Celular y Molecular. 7ª ed. México: Editorial Mc Graw-Hill, 2014: 899p.
 LUQUE J; HERRAEZ A. Texto ilustrado de Biología Molecular e Ingeniería Genética. 2° ed. Elsevier.
 SALAZAR A.; SANDOVAL, A.; ARMENDARIZ, J. Biología Molecular. Fundamentos y Aplicaciones en
Ciencias de la Salud. 1° ed. Editorial Mc Graw-Hill, 2013.

ANIMACIONES
ÁCIDOS NUCLEICOS Y REPLICACIÓN DEL ADN
http://www.bionova.org.es/animbio/anim/dnareplicacion/menu.swf
http://www.mhhe.com/biosci/bio_animations/04_MH_DNAReplication_Web/index.html
http://fd.valenciacollege.edu/file/mlocascio/DNAReplication.mpg
http://www.courseweb.uottawa.ca/BIO3124/microbiology/Animations/Bacterial%20DNA%20replication.swf
http://highered.mheducation.com/sites/9834092339/student_view0/chapter14/dna_replication__e__coli_.html

TRANSCRIPCIÓN DEL ARN


http://www.mhhe.com/biosci/bio_animations/03_MH_MolBioGene_Web/SwfVideoPlayer.swf
http://www.auburn.edu/academic/classes/biol/3020/VIDEOS/05_ani_RNA_biosynthesis.swf
http://www.uniraj.ac.in/cct/swarnkar-pl/public_html/Promotor.swf
http://www.radio.cuci.udg.mx/bch/ES/Didaktik0/TranscriptionBact.swf
http://www2.stvr-gym.dk/TN/21_transkription/Transmenu/RNAprocess_s.swf

TRADUCCIÓN: SÍNTESIS DE PROTEÍNAS Y MUTACIÓN


http://media.wwnorton.com/college/microbiology/process_animations/main.asp?chno=ch08a01
http://www.radio.cuci.udg.mx/bch/ES/Didaktik0/Translation.swf
http://www.radio.cuci.udg.mx/bch/ES/Didaktik0/Translation2.swf
http://www.radio.cuci.udg.mx/bch/ES/Didaktik0/Translation3.swf
http://sites.sinauer.com/cooper6e/animation0801.html
http://highered.mheducation.com/sites/dl/free/0072556781/192785/anim0044.swf

8 Actividades de Práctica
P.C.
MOLDE 1 ELEMENTOS DEL ADN

9 Actividades de Práctica
P.C.
10 Actividades de Práctica
P.C.
BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

MOLDE 3 ELEMENTOS DEL ADN

11 Actividades de Práctica
P.C.

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