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Tecnología de Gel

y su
Control de Calidad

QFB Rocío Castillo Trigueros


Asesor Científico

Laboratorios Licon, S.A.


¿Que es la Tecnología de Gel?

Es un sistema utilizado en
inmunohematología para
investigar e identificar antígenos
y anticuerpos propios de los
eritrocitos.
¿Que es la Tecnología de Gel?

La metodología de Tarjetas de Gel


permite estandarizar el uso de
reactivos, tiempos y lecturas
disminuyendo sustancialmente
la influencia de la mano de
operador.
Historia de la Tecnología de Gel:
1900 Landsteiner Sistema AB0
1939 Levine Factor Rh
1945 Coombs Pba. de la Antiglobulina Humana
Pba. en tubo
1951 Pollak Pba. de la Antiglobulina Humana
Pba. con enzimas
1960 Compatibilidad en 3 fases
1961 Hässing Albúmina
1980 LISS
1984 Lapierre Pruebas en gel
1986 Normas de transfusión sanguínea
2005 Nueva generación en tarjetas de gel
Historia de la Tecnología de Gel:
Nació en 1984 el Dr. Ives Lapierre en el Centro
Regional de Transfusión Sanguínea de Lyon,
Francia desarrolla la TG

1988
Primer kit comercial, la prueba en gel fue
utilizada en el laboratorio del Dr. Lapierre y
allí se probó su calidad y eficiencia.
Fundamento de las Tarjetas de Gel

La tecnología de microtipificación
en gel se basa en la separación
por tamaño de los eritrocitos
aglutinados, durante un proceso
de centrifugación en un gel
poroso.
Fundamento del Sistema de Gel

Los eritrocitos van perdiendo


elasticidad en sus membranas de forma
que los aglutinados grandes quedan
atrapados en la zona superior y los
pequeños quedan distribuidos a lo
largo de la columna.
¿Cómo está compuesto?

Conjunto de Reactivos e Instrumentos.


Tarjetas compuestas por un soporte plástico
con 8 ó 6 micropozos que contienen gel en su
interior.

Cámara de reacción

Sobrenadante

Gel de
sephadex
Lectura de Resultados
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

Inspección visual

En la tarjeta se deberá de
observar un volumen
uniforme en todos los
pocillos y no se deben de
observar gotas de gel en la
cámara de reacción.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

Se debe observar claramente la


diferencia entre el Gel y el
sobrenadante.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

No se debe
observar ningún
cambio de
coloración en el
Gel.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

El Gel debe tener


una consistencia
uniforme libre de
burbujas y/o
partículas
extrañas.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

¾ Consideraciones importantes

z Leer el inserto.

z Centrifugar todas las tarjetas en cuanto


lleguen al Banco de Sangre.
Tarjetas Grupos Sanguíneos y Tarjetas de Coombs
Fenotipo de Rh
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

En lo que se refiere a los reactivos


contenidos en las Tarjetas de Gel las
especificaciones están contenidas en:

NOM-222-SSA1-2002
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

Avidez
Es la medida de la velocidad con la
cual el anticuerpo se combina con su
correspondiente antígeno
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

Especificidad

Es la capacidad que tiene un


anticuerpo de reaccionar
solamente con su correspondiente
antígeno
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

Preparación de eritrocitos para AB0 y Rh.

Preparar la suspensión
de eritrocitos al 5.0 %

Suspender 50μl de
células en 1ml de
diluyente.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel AB0

1. Preparar suspensión celular al 5% de las


siguientes células:

¾ A1
¾ A2
¾ B
¾ 0
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel AB0

Dosificar 10 μl de la suspensión de
eritrocitos al 5.0% en los pocillos con los
antisueros correspondientes
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel AB0

Sistema ABO
Antísueros
Pocillo Células A1 y A2 Células B Células AB Células 0
Anti-A Positivo Negativo Positivo Negativo

Pocillo Células A1 y A2 Células B Células AB Células 0


Anti-B Negativo Positivo Positivo Negativo

Pocillo Células A1 y A2 Células B Células AB Células 0


Anti-AB Positivo Positivo Positivo Negativo
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel AB0

Células para grupo inverso

Enfrentar las células A


y B a los pocillos con
antisueros Anti-A,
Anti-B y Anti-AB
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel AB0

Anti-A Anti-B Anti-A,B

Células A1 Positivo Negativo Positivo

Células B Negativo Positivo Positivo


Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

Anti-D

7.5.2.1 Preparar no menos de 8 muestras


de eritrocitos R1, R2, R0, r´, r”, r, Arr y
Brr…
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel Rh

1. Preparar suspensión celular al 5% de las


siguientes células:

¾ R1r
¾ rr
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel Rh

Dosificar 10 μl de la suspensión de
eritrocitos al 5.0% en los pocillos con
Anti-D, Anti-D´ y control
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel Rh
z Centrifugar 9 min a 1500 rpm
z Leer
LECTURA PARA CONTROL DE CALIDAD

POSITIVO NEGATIVO
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel Rh

Anti-D

Pocillo Células R1r Células rr


Anti-D Positivo Negativo
Pocillo
Anti-D´ Positivo Negativo
Pocillo
Control Negativo Negativo
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

Tarjetas de Fenotipo Rh
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel Fenotipo Rh

De los eritrocitos del panel o semipanel


elegir las siguientes células:

1.- rr (c y e)
2.- Rzry (CyE)
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel Fenotipo Rh

1. Dispensar 1 gota de las


células rr (c y e) en los 4
primeros pocillos.
2. Dispensar 1 gota de las
células Rzry (C y E) en los
siguientes 4 pocillos
3. Centrifugar y leer
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel Fenotipo Rh

Anti-C Anti-c Anti-E Anti- e


rr Neg Pos Neg Pos
Rzry Pos Neg Pos Neg
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

Antíglobulina humana
Tarjetas de Coombs
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

Lavar eritrocitos
sensibilizados y no
sensibilizados
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

¾Preparar una suspensión al 0.8-1.0 %


de eritrocitos sensibilizados

¾Preparar una suspensión al 0.8-1.0 %


de eritrocitos no sensibilizados

10ml de eritrocitos
1ml de Diluyente
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

Dosificar 50 μl de la
suspensión de eritrocitos
sensibilizados en un pocillo
Y 50 μl de la suspensión de
eritrocitos no sensibilizados
en otro pocillo.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel
z Centrifugar 9 min a 1500 rpm
z Leer
LECTURA PARA CONTROL DE CALIDAD

Eritrocitos Eritrocitos no
Sensibilizados Sensibilizados
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel

Titulación

Es la prueba para medir la máxima


dilución un la cual un antisuero
reacciona con su correspondiente
antígeno.
No aplica en Tarjetas de Gel.
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel AB0 y Rh

Preparar la suspensión de Dispensar 10 µl de cada Dispensar 10 µl de cada una


eritrocitos al 5.0 % una de las células de las células R1r y rr a
Células A1, A2, B y 0 y R1r AB0 a los pocillos los pocillos conteniendo
y rr. conteniendo -D, -D´ y control.
-A. -B -A-B .

Centrifugar y leer

Patrón de lectura sólo para


Grupo Inverso
Control de Calidad

Dispensar 1 gota de las


células A1 y B a los Centrifugar y leer
pocillos conteniendo
-A. -B -A-B .
Control de Calidad en las
Tarjetas de Gel Coombs

Lavar eritrocitos Preparar la suspensión Dispensar 50 µl de cada una


sensibilizados y no de E S y E no S al de las células en 2
sensibilizados 0.8-1.0 % (10 µl de diferentes pocillos de
células en 1ml de una tarjeta de Coombs
diluyente).

Centrifugar y leer

Patrón de lectura sólo para


Si se trata de una tarjeta DC Scan en los
Control de Calidad
primeros 4 pocillos se dispensan
eritrocitos sensibilizados y en el resto
de la tarjeta se dispensan eritrocitos no
sensibilizados.

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