UNIVERSIDAD TÉCNICA ESTATAL DE QUEVEDO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA INGENIERÍA

CARRERA DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

ASIGNATURA:
BIOTECNOLOGÍA AGROINDUSTRIAL
MODULO VI

NOMBRE DEL TRABAJO:

ADN RECOMBINANTE

NOMBRE:

Villegas Baquero Christian Alberto

christian.villegas2017@uteq.edu.ec

DOCENTE:
Ing. ALDERETE RENDON ABELARDO JERONIMO.

Quevedo – Los Ríos –Ecuador

2020 - 2021
INTRODUCCIÓN

La célula, es considerada como la unidad estructural básica de la vida constituye a todos los
organismos vivos, el organismo depende de la coordinación del metabolismo de millones de
células, las cuales individualmente llevan a cabo funciones específicas tales como:

 Nutrición.
 Relación intercelular.
 Reproducción.

En los años 1960 se establecieron las dos líneas celulares CHO (Chinese Hamster Ovarium) y la
línea BHK21 (Baby Hamster Kidney), para la producción de biofármacos, sin embargo existía
una posible contaminación cruzada con las células. A partir de los años 1970, se realizaron los
primeros ensayos de transferencia de ADN en células animales y también se desarrolló el primer
linaje celular “artificial” proveniente de células murinas denominado hibridoma.

En los años 1980 se dio por primera vez, la producción de la primer proteína recombinante en
células de mamífero constituyendo el primer biofármacos dado por la ingeniería genética, A
partir de la década de 1990 se manifestó algunas ventajas fundamentales en los biofármacos
como son ; plegamiento correcto de la proteína ( adquiriendo una estructura tridimensional), la
glicosilación compleja ( agregan cadenas complejas de azucares) y, la secreción del producto
al me dio de cultivo ( purificación a la proteína).

Así también existen desventajas importantes en biofármacos tales como en bacterias y

levaduras recombinante, dando un limitante como es en el tiempo de cultivo provocando bajo
crecimiento, uso de suplementos como el suero de mamíferos.

 CLASIFICACIÓN DEL CULTIVO CELULAR

Es un conjunto de técnicas que permiten el mantenimiento, supervivencia y
multiplicación in vitro de las células provenientes de órganos específicos pasa si
conservar al máximo sus propiedades fisiológicas, bioquímicas y genéticas.
 Cultivos en monocapa (adherente) se da en cultivos primarios o de líneas
celulares dependientes de anclaje, se desarrollan de mejor manera dando una
estabilidad genética y dando una división diploide normal. El objetivo es que
la monocapa crezca (confluencia) cubriendo la superficie de soporte hasta
establezca un contacto entre las células, causando el descrecimiento
(quiescencia).

 Crecimiento en suspensión se presenta en células que han perdido o

disminuido la síntesis de proteínas de anclaje y sin desarrollar el proceso de
quiescencia, ejemplo la células hematopoyéticas (células sanguíneas). Este
método pueden ser adaptadas a un crecimiento en suspensión después de ser
sometidas a una serie de cultivos dando así una ventaja económica al aumentar
la escala de operación de células en suspensión.

 Cultivos tridimensionales el objetivo es mantener los tipos de células

diferenciadas, dando así una buena réplica del tejido de origen, permitiendo
estudiar la morfología, proliferación e interacciones intra y extracelulares en
un entornó tridimensional.
El cultivo de estas células de animales presentan tres morfologías, las cuales son
linfoblástica, fibroblática y epitelial (poliédrica). La linfoblástica crece en forma
suspensión mientras que las dos últimas en adherente, tomando en cuenta que la célula
siempre va depender de las características del soporte, es decir si se despegan tienen a
formar esferas, mientras que en el momento que se adhieren vuelven a su forma
específica.
 CULTIVO PRIMARIO Y SUBCULTIVO.- es cuando el cultivo proviene de células que han
sido disgregadas de un tejido original tomado de un órgano, se caracterizan por tener
diferentes tipos de células, su cromosoma tiene un numero diploide, su crecimiento in
vitro es limitado. Sé utilizaban para producción de vacunas, ya que tenía una baja
probabilidad de transformarse en malignos.
 CULTIVO SECUNDARIO.- se da cuando existe un cultivo exitoso a partir de un cultivo
primario, formando así un monocapa que puede llegar a cubrir el soporte en el que
crecen. El subcultivo implica el desprendimiento de las células adheridas, la dilución de
la densidad celular y reinoculacion en un medio fresco.
 CULTIVO CELULAR.- Es aquel que tiene una alta capacidad de multiplicarse in vitro, lo
cual es establecido a partir de un primer subcultivo teniendo una característica limitada
de posibles subcultivos, generalmente entre 60 y 70 pases.
 LÍNEA CELULAR CONTINUA.- Consiste de células que se diferencia genéticamente y
morfológicamente de las células que se originaron , demostrando que pueden ser
subcultivadas in vitro por lo menos en 70 pases indefinidamente , presentado
características genotípicas diferentes al tejido del cual fueron originadas.

 PRODUCCIÓN DE VACUNAS VIRALES

En 1930 fueron producidas las primeras vacunas en cultivos de células mamíferas, tal es en
el caso de la viruela, la fiebre amarilla o poliomielitis ya que solamente se pudo lograr
gracias a cultivos in vitro, al control de la contaminación de antibióticos y a construcción de
equipos de limpieza de aire.
Una aplicación actual del cultivo de virus es el diagnostico de infecciones virales, que
consiste en buscar señales de cambios degenerativos conocidos como efecto citopático en
cultivos en monocapa de diferentes líneas celulares emitiendo un diagnóstico preliminar
basándose en el tiempo de incubación y en la magnitud del efecto citopático.

 PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS

Son moléculas proteicas cuya función es de reconocer al antígeno y otra fracción

cristalizable que mide funciones efectoras como la respuesta citotoxica dependiente del
anticuerpo. Los anticuerpos son producidos por células B del sistema inmune y responde
a un solo determinante antigénico.
La mayoría de anticuerpos comercializados son producidos por dos vías, usando tecnología
de ADN recombinante en células de mamíferos (como CHO) o células linfoides murinas
(como NSO, Sp2/0-Ag14).
 PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES

Son las únicas células que pueden realizar una serie de modificaciones complejas que las
proteínas de interés terapéutico requieren, un ejemplo de estas proteínas es la producción
de factores de coagulación, de mayor importancia en pacientes hemolíticos. La tina (EPO),
la cual es ampliamente glicosilada ha tenido un gran éxito comercial al ser la citocina de
mayor uso en el mundo para el tratamiento de anemias y las células CHO son las empleadas
a nivel industrial.

PREGUNTAS

1. Cite las 2 líneas celulares importantes para la producción de biofármacos

CHO (Chinese Hamster Ovarium) y la línea BHK21 (Baby Hamster Kidney).

2. Cuáles son las ventajas s fundamentales en los biofármacos

 Plegamiento correcto de la proteína ( adquiriendo una estructura tridimensional),

 Glicosilación compleja (agregan cadenas complejas de azucares).
 Secreción del producto al me dio de cultivo (purificación a la proteína).

3. Complete:
Los Cultivos en monocapa se dan en cultivos primarios o de líneas celulares
dependientes de anclaje, se desarrollan de mejor manera dando una estabilidad
genética y dando una división diploide normal.

4. Conteste con V (verdadero) y F (falso) según corresponda.

Es aquel que tiene una alta capacidad de multiplicarse in vitro. (V)

5. ¿En qué tipo de células se producen los anticuerpos?

Los anticuerpos son producidos por células B del sistema inmune y responde a un solo
determinante antigénico.