MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS | PROF.

PEDRO BARZOLA

Practica:

CONTROL MICROBIOLÓGICO DE SUPERFICIES VIVAS E

INERTES

I. INTRODUCCION

La limpieza y la desinfección son procedimientos de gran

importancia, ya que permiten controlar la presencia de
microorganismos sobre las superficies. La desinfección es un
proceso que implica la destrucción de microorganismos
perjudiciales (formas vegetativas), a través del uso de sustancias
químicas o agentes físicos aplicados sobre superficies inertes. La
limpieza debe ser un paso previo a la desinfección ya que con este
proceso, además de eliminar muchas sustancias que pueden servir
como nutrientes para los microorganismos, se eliminan sustancias
que pueden impedir que las soluciones desinfectantes actúen
eficientemente. En el Laboratorio de Microbiología estos procesos
deben realizarse de rutina, ya que el trabajar con microorganismos
exige que se tomen medidas para evitar la contaminación del
ambiente, del material de trabajo y del personal. Es por ello que se
debe conocer y controlar la calidad microbiológica del aire y de las
superficies de trabajo posterior a estos procesos, ya que los
microorganismos podrían ser fuente de contaminación para el
material con el que estamos trabajando. La evaluación de la calidad
microbiológica del ambiente nos indica la cantidad de
microorganismos que están presentes en un área determinada. Los
microorganismos generalmente no están flotando en el aire sino que
se encuentran sobre partículas inertes, por ejemplo polvo, gotas de
agua, etc. que le sirven como medio de transporte, las cuales
pueden depositarse sobre las superficies; es por ello que mientras
más limpia es un área, menor será el número de microorganismos
presentes en el aire de la misma. Las personas también son una
fuente de contaminación, ya que liberan gran cantidad de partículas
al moverse, toser, estornudar, por exfoliación de la piel, etc.
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Algunas de estas partículas llevan microorganismos que podrían

contaminar el material con el que estamos trabajando; en este
sentido los antisépticos, deben ser usados por el personal para
descontaminar la piel y los tejidos expuestos antes de entrar a las
áreas.
CONTROL MICROBIOLÓGICO DEL AIRE: El método utilizado es
el de sedimentación en placas de agar, que consiste en exponer
placas con un medio nutritivo sólido al ambiente durante un periodo
determinado, incubar las placas y hacer el recuento de las colonias
obtenidas. Con este método se detectan los microorganismos que
caen sobre la superficie de la placa, lo cual simula lo que ocurre
normalmente cuando estamos trabajando en el laboratorio. Como
las condiciones ambientales influyen en la sedimentación de los
microorganismos es necesario que, cuando se realiza este método,
las placas se expongan siempre en el mismo lugar y bajo las mismas
condiciones para poder comparar los resultados obtenidos.

CONTROL MICROBIOLÓGICO DE SUPERFICIES: El control

microbiológico de superficie nos proporciona información sobre la
cantidad de microorganismos presentes sobre una superficie, la
cual puede ser un equipo, mesón, ropa, etc.

II. OBJETIVO

Conocer la metodología para el análisis microbiológico de

superficies vivas e inertes.

III. MATERIALES Y EQUIPOS

Pipetero metálico
Pipetas de 2 ml
Pipetas de 10 ml
4 bolsas de plástico transparente
2 esponjas estériles
Benzol
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Agua peptonada 0.1%

Placas de agar bilis rojo violeta
Placas de agar cuenta estándar
Hisopos estériles.
Guantes desechables
Autoclave u Horno a 180°C
Balanza digital
Cuenta colonias
Refrigerador
Incubadora a 35°±2°C

IV. PROCEDIMIENTO

4.1 SUPERFICIES VIVAS: MANOS SUCIAS

a) Vaciar 100 ml de agua peptonada al 0.1 % en una bolsa de

plástico nueva.
b) Introducir y lavar las manos de la persona en la bolsa que
contiene el agua peptonada al 0.1 %.
c) Regresar el agua peptonada al frasco de dilución siendo esta
la dilución 10-1 después realizar la dilución 10-2 en un tubo que
contiene 9 ml de agua peptonada al 0.1 %.
d) Sembrar por duplicado la dilución 10-2 para organismos
mesofílicos y para organismos coliformes.
e) Determinar organismos coliformes y organismos mesofílicos
aerobios en UFC/cm2.
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4.2 SUPERFICIES VIVAS: MANOS LIMPIAS

a) La misma persona ahora se lava las manos con jabón y agua

de la llave, después se vuelve a lavar las manos en la bolsa de
plástico que contiene 100 ml de agua peptonada al 0.1%.
b) Regresar el agua peptonada al 0.1 % al frasco siendo esta la
dilución 10-1.
c) Sembrar por duplicado la dilución 10-1 para organismos
mesofílicos y para organismo coliformes.
d) Determinar organismos coliformes y organismos mesofílicos
aerobios en UFC/cm2.

4.3 SUPERFICIES INERTES: SUPERFICIES SUCIAS

a) Medir 25 X 25 cm2 de la superficie de la mesa.

b) Limpiar el área con una esponja estéril humedecida con agua
peptonada al 0.1 %.
c) Lavar la esponja dentro de la bolsa que contiene 100 ml de
agua peptonada al 0.1 %, el agua se regresa al frasco, siendo
ésta la dilución 10-1 y realizar la dilución 10-2.
d) Sembrar por duplicado la dilución 10-2 para organismos
mesofílicos y para organismos coliformes.
e) Determinar organismos coliformes y organismos mesofílicos
aerobios en UFC/cm2.

4.4 SUPERFICIES INERTES: SUPERFICIES LIMPIAS

a) Limpiar el área seleccionada con benzol, después limpiar con

una esponja estéril humedecida con agua peptonada dejar
secar y lavarla dentro de la bolsa que contiene 100 ml de agua
peptonada al 0.1%.
b) Regresar el agua peptonada al 0.1 % al frasco, siendo ésta la
dilución 10-1.
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c) Sembrar por duplicado la dilución 10-1 para organismos

mesofílicos y para organismos coliformes.
d) Determinar organismos coliformes y organismos mesofílicos
aerobios en UFC/cm2

V. BIBLIOGRAFIA

1. Luna Fontalvo, Jorge. Manual de prácticas de laboratorio de

Microbiología. Editorial Unimagdalena.España.2012
2. Madigan Michael, Martinko John: Brock–Biología de los
Microorganismos.10a Ed. Editorial Prentice Hall-Iberia. España 2004