Química de los alimentos 266 (2018) 47–55

Listas de contenidos disponibles en ScienceDirect

Química de Alimentos

revista Página de inicio: www.elsevier.com/locate/foodchem

Herramientas analíticas utilizadas para la identificación fi catión y cuanti fi catión de pectina extraída de matrices
de alimentos vegetales, desechos y subproductos: una revisión

Antonela Nin C evi C Grassino una , Francisco J. Barba si , • , Mladen Brn C yo C una , • , Jose M. Lorenzo C ,
Luigi Lucini re , Suzana Rimac Brn C yo C una
una Facultad de Tecnología de Alimentos y Biotecnología, Universidad de Zagreb, Croacia.

si Área de Nutrición y Ciencias de los Alimentos, Medicina Preventiva y Salud Pública, Departamento de Ciencias de los Alimentos, Toxicología y Medicina Forense, Facultad de Farmacia, Universitat de València, Avda. Vicent Andrés

Estellés, s / n, 46100 Burjassot, València, España

C Centro Tecnológico de la Carne de Galicia, c / Galicia, 4, San Ciprián de Viñas, Ourense, España
re Departamento de Procesos Alimenticios Sostenibles, Università Cattolica del Sacro Cuore, Via Emilia Parmense 84, 29122 Piacenza, Italia

INFORMACIÓN DEL ARTÍCULO RESUMEN

Palabras clave: La pectina es el éster metilado del ácido poligalacturónico y tiene una amplia gama de aplicaciones. Se puede utilizar en alimentos y piensos, así como
Pectina en productos farmacéuticos y cosméticos. La pectina se usa tradicionalmente como agente gelificante en productos a base de frutas, como
Herramientas analíticas estabilizador en algunos jugos de frutas y bebidas lácteas y frutas. fi Lling para productos de panadería y confitería, pero sus posibles aplicaciones
Identi fi catión Quanti fi catión
difieren ff er según su composición química. Por lo tanto, en esta etapa de desarrollo, es de gran importancia fi Encuentre métodos rápidos y confiables
HPLC
para no solo identificar y cuantificar la pectina, sino también para determinar su estructura química y composición cuando se extrae de las matrices de
plantas, desechos y subproductos. La presente revisión se centrará en las herramientas analíticas utilizadas para identificar y cuantificar la cantidad de
Dispersión de luz por evaporación

espectrometría de masas
pectina obtenida de las matrices de plantas, desechos y subproductos, así como para determinar su composición química y estructural.

1. Introducción
La pectina es un heteropolisacárido estructural presente dentro de la pared celular primaria y las
regiones intercelulares de las plantas superiores ( Chen et al., 2013 ) La pectina se compone
principalmente de polímeros de α- ácido galacturónico (al menos 65%) con un número variable de
grupos éster metílico ( Liu, Shi y Langrish, 2006 ) Hoy en día, los procesos industriales de extracción
de pectina se basan en la cáscara de fruta (un producto de desecho de la industria de los jugos) ya
que cada año se procesan mil toneladas de cítricos (limón, naranja y lima) en todo el mundo ( Kaya,
Sousa, Crépeau, Sørensen y Ralet, 2014; Putnik et al., 2017 ) Comercialmente, la pectina se extrae
de las cáscaras de cítricos y el orujo de manzana ( Willats, Knox y Mikkelsen, 2006 ) Sin embargo,
algunos subproductos agrícolas como el orujo de oliva, la pulpa de remolacha azucarera, el orujo de
bayas y la pulpa de papa también contienen altas cantidades de pectina ( Babbar, Dejonghe, Gatti,
Sforza y ​Elst, 2016; Lama-Muñoz, Rodríguez Gutiérrez, Rubio-Senent y Fernández-Bolaños, 2012;
Martínez, Yáñez, Alonsó y Parajó, 2010 ) Además, la pectina se puede obtener de la cáscara de
cacao ( Chan y Choo, 2013 ), corteza de rama de morera ( Liu, Jiang y Yao, 2011 ),
2008 ), plátano ( Oliveira et al., 2016 ) y cáscara de mango ( Parniakov, Barba, Grimi, Lebovka y
Vorobiev, 2016 ), entre otras fuentes. En la industria alimentaria, la pectina se ha aplicado
ampliamente como espesante, texturizador, emulsi fi er y estabilizador en refrescos, mermeladas,
zumos de frutas y productos lácteos ( Ralet et al., 2005 ) Además, la pectina se puede utilizar como
polímero portador para la encapsulación de ingredientes alimentarios, lo que ayuda a proteger y
promover la liberación controlada de biomoléculas ( Perussello, Zhang, Marzocchella y Tiwari, 2017 )
La pectina también se puede usar como sustituto de grasas en productos para untar, aderezos para
ensaladas, helados y emulsi fi ed productos cárnicos ( Hawthorne, Grabanski, Martin y Miller, 2000 )
Aparte de eso, en el sector farmacéutico y médico. fi campos, la pectina se usa comúnmente para
disminuir los niveles de colesterol en la sangre y las fracciones de colesterol de lipoproteína de baja
densidad sin cambiar el colesterol o los triglicéridos de lipoproteína de alta densidad, que son
buenos para la salud humana ( Behall y Reiser, 1986 ) Estas aplicaciones representan directamente el
consumo sustancial de pectina en todo el mundo.

El proceso de obtención de pectina comprende los siguientes pasos: extracción, puri fi catión /
concentración y secado. El uso de un método adecuado para la extracción de pectina es significativo fi
cáscaras de frijol faba Korish, 2015 ), cascos de verde pistacho no puede maximizar su rendimiento y calidad. En este sentido, factores como las condiciones de
extracción (temperatura, presión, etc.), relación sólido / líquido, tipo de solvente y polaridad,
( Chaharbaghi, Khodaiyan y Hosseini, 2017 ), cáscaras de granada ( Pereira et al., 2016 ), calabaza ( Ptichkina,
Markina y Rumyantseva,

• Autores correspondientes.

Correos electrónicos: francisco.barba@uv.es (FJ Barba) mbrncic@pbf.hr (M. Brn C yo C).

https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2018.05.105
Recibido el 10 de febrero de 2018; Recibido en forma revisada el 9 de mayo de 2018; Aceptado el 23 de mayo de 2018

Disponible en línea el 23 de mayo de 2018

0308-8146 / © 2018 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados.

AN Grassino y col.
métodos analíticos
Volumétrico UV / vis
Cromatografía
(titulación ácido-base) Espectrofotometria
HPAECPAD
HPSEC
Figura 1. Métodos analíticos utilizados para el análisis de pectina. HPAEC-PAD: cromatografía de intercambio aniónico de alta presión junto con detección amperométrica pulsada. HPSEC: cromatografía de exclusión por tamaño
de alto rendimiento. GC-FID: cromatrografía de gases fl Un detector de ionización. GC - MS: masa de cromatografía de gases.
el tamaño de partícula es conocido por un ff ect la cinética de extracción ( Perussello et al., 2017 ) En
base a sus características de solubilidad (la pectina es soluble en agua), la pectina se extrae en
solventes acuosos y luego se recupera por precipitación usando solventes orgánicos. A nivel
industrial, la pectina se obtiene químicamente usando extracción de ácido convencional, pero
algunas tecnologías de extracción novedosas (extracción asistida por enzimas, microondas,
electricidad fi el campo, la ecografía o la extracción de agua supercrítica) podrían ser una alternativa
útil, ya que se han desarrollado para reducir o eliminar el uso de solventes y proporcionar un mayor
rendimiento y un tiempo de extracción reducido para varios compuestos de alto valor agregado ( Barba,
Zhu, Koubaa, Sant ' Ana y Orlien, 2016; Perussello et al., 2017; Roselló-Soto y col.
2015, 2018; Zhu et al., 2016 ) Por ejemplo, los métodos óptimos y las condiciones de extracción para
recuperar la pectina se revisaron recientemente ( Mari C
et al., 2018 )
Masa molecular de pectina, grado de esteri fi El catión, el porcentaje de ácido galacturónico, el
contenido fenólico total, la proteína, el color, la composición neutra del azúcar y las propiedades
reológicas pueden usarse para determinar la calidad de la pectina extraída. Sin embargo, debe
tenerse en cuenta que las propiedades estructurales de la pectina determinarán sus propiedades
funcionales y sus usos potenciales posteriores. Por lo tanto, en esta etapa de desarrollo existe la
necesidad de contar con métodos rápidos, confiables y reproducibles que permitan no solo cuanti fi catión
de la cantidad de pectina pero también la determinación de sus cambios estructurales después de la
extracción, para obtener la mayor calidad de pectina. En la presente revisión, se discutirán los
métodos más utilizados y las nuevas técnicas desarrolladas en los últimos años para identificar y
cuantificar la pectina.
2. Análisis de pectina
Durante el procesamiento térmico del material vegetal a través de reacciones catalizadas por productos
químicos o enzimas, di ff Modi diferente fi pueden ocurrir cationes, cambiando así la solubilidad de la pectina, el
tamaño del polímero y el grado de metil-éster fi catión. Estos cambios pueden tener consecuencias importantes
en la calidad y pureza de la pectina.
Se debe tener especial cuidado para cuanti fi catión de ácido galacturónico (GalA) y grado de
metil esteri fi catión (DM). De acuerdo con el reglamento de la UE n. ° 231/2012 ( Anónimo, 2012 ), el
contenido de ácido galacturónico de pectina de grado alimenticio debe ser al menos del 65%,
mientras que no hay especi fi c se establecen normas para el uso de piensos ( Anónimo, 2013 )
RE- Ácido galacturónico ( RE- GalA), un isómero de RE- ácido glucurónico ( RE-
GlcA) se descubrió que es un componente básico de todas las pectinas. Es
Química de los alimentos 266 (2018) 47–55
Espectroscopia
GC-FID GC-MS
Transformada Resonancia
de Fourier magnética
Infrarroja nuclear
(FTIR) (RMN)
presente en tres formas poliméricas, es decir, homogalacturonano (HG), un polímero lineal de α- Ácido
galacturónico 1-4 ligado, rhamnogalacturonan I (RG-
I), un disacárido repetitivo de ácido galacturónico y ramnosa y ramnogalacturnona II (RG-II), un
esqueleto homogalacturónico con numerosas cadenas laterales complejas que contienen ramnosa y
otros azúcares neutros ( California ff todos y Mohnen, 2009; Mohnen, 2008; Yapo, 2010 ) Hasta la
fecha, se cree que las pectinas están compuestas de al menos 17 tipos de monosacáridos de los
cuales RE- GalA es el predominante, seguido de RE- galactosa o L- arabinosa ( Yapo, 2011 ) HG es el más
abundante entre los tres polímeros, en el que RE- Las unidades GalA pueden ser parcialmente ésteres
metílicos fi ed en C-6 y acetil-esteri fi ed en las posiciones O-2 y / o O-3, lo que tiene un mayor impacto
en las propiedades funcionales de la pectina ( Anthon y Barrett, 2008; Mohnen, 2008; California ff todos
y Mohnen, 2009; Shpigelman, Kyomugasho, Christiaens, Van Loey y Hendrickx, 2015 ) Cuando más
del 50% de los grupos carboxilo de RE- Las unidades GalA en pectina son esteri fi ed con grupos metilo
(o metoxilo), esta categoría de pectina se llama convencionalmente éster metílico alto fi ed, con grado
de esteri fi catión (DE)> 50% ( Yapo, 2011 ) De lo contrario, la pectina se conoce como bajo éster
metílico fi ed, con DE <50% ( Yapo, 2011 ) La estructura y composición de las sustancias de pectina o
pectinas aisladas de materiales vegetales dependen de la fuente, los métodos de preparación del
tejido, el protocolo de extracción, el método utilizado para separar la pectina extraída y otro material
soluble, tipo y extensión de puri. fi catión antes del análisis y los procedimientos analíticos utilizados
para el ensayo y la caracterización ( Anthon y Barrett, 2008; Garna et al., 2007 ) Además de utilizar el
contenido de ácido galacturónico como una medida de la pureza de la pectina, un rango de
parámetros, como los grados de metilación y acetilación, el peso molecular y la viscosidad intrínseca
son importantes para determinar la funcionalidad y aplicabilidad de la pectina en la industria de
procesamiento de alimentos como gelificación y espesamiento. agentes, así como estabilizadores en
mermeladas, jaleas, productos de confitería y jugos de frutas.
2.1. métodos analíticos
La titulación volumétrica de ácido-base ha sido el método preferido para cuantificar la pectina fi catión
Ranganna, 1995 ), debido al hecho de que proporciona la determinación simultánea de los contenidos
de metoxilo (MeO) y ácido anhidrourónico (AUA) y el grado de esteri fi catión (DE). En Figura 1 Se
muestran algunos de los métodos más utilizados para identificar y cuantificar la pectina a partir de
materiales alimenticios vegetales, desechos y subproductos. queso Brie fl y, en 0,5 g de pectina, 5 ml
de etanol (96%), 1 g de cloruro de sodio y 100 ml de
48
AN Grassino y col.
Titulación volumétrica ácido-base
Figura 2. Una representación esquemática de los protocolos más utilizados para la valoración volumétrica de ácido-base y la cuantificación de espectrofotometría UV / vis fi catión de pectina de materiales alimenticios
vegetales, desechos y subproductos ( Anthon y Barrett, 2008; Koubala et al., 2014; Kumar y Chauhan, 2010; Kurita et al., 2008; Min et al., 2011; Mollea et al., 2008; Ranganna, 1995; Rubio-Senent et al., 2015 )
se añadieron agua desionizada. La mezcla se agitó hasta que la pectina se disolvió completamente y
se tituló con NaOH 0,1 M con rojo fenol como indicador. Luego, se añadieron 25 ml de NaOH 0,25 M
mientras se agitaba, para desesterificar la pectina. Después de 30 minutos, se agregaron 25 ml de
HCl 0.25 M para neutralizar NaOH y la solución se tituló nuevamente con NaOH 0.1 M hasta que el
color cambió ( Ranganna, 1995 ) Una representación esquemática del método volumétrico de
titulación ácido-base para la cantidad de pectina fi catión se muestra en Figura 2 .
Debido al hecho de que este quanti fi El método catiónico es barato y fácil de llevar a cabo,
todavía se usa en la producción comercial de pectina. La revisión de la literatura ha demostrado que
el método titrimétrico se usa con frecuencia, no solo para la cuantificación fi catión del contenido de
pectina de orujo de manzana ( Kumar y Chauhan, 2010; Min et al., 2011 ), pero también para las hojas
de Krueo Ma Noy ( Singthong, Cui, Ningsanond y Douglas Go ff, 2004 ), cáscaras de cacao ( Mollea,
Chiampo y Conti, 2008 ), piel de maracuyá ( Kulkarni y Vijayanand, 2010 ), cáscara de papaya ( Koubala,
Christiaens, Kansci, Van Loey y Hendrickx, 2014 ), Dom fl ower head Kang, Hua, Yang, Chen y Yang,
2015 ), cáscara de Chaunsa de cultivar de mango ( Kauser, Saeed e Iqbal, 2015 ) y cáscara de tomate
( Grassino et al., 2016 ), entre otras fuentes de pectina. Los aislamientos obtenidos se caracterizaron
en términos de grado de esteri fi catión Grassino et al., 2016; Hosseini, Khodaiyan y Yarmand, 2016a,
2016b; Kumar y Chauhan, 2010; Singthong et al., 2004 ), contenido de éster metoxilo o contenido de
metoxilo ( Grassino et al., 2016; Kauser et al., 2015; Kumar y Chauhan, 2010; Mollea et al., 2008 ),
peso equivalente ( Kauser et al., 2015; Kulkarni y Vijayanand, 2010; Kumar y Chauhan, 2010 ) y ácido
anhidrourónico ( Grassino et al., 2016; Kulkarni y Vijayanand, 2010; Kumar y Chauhan, 2010 ) Sin
embargo, esta técnica requiere que la muestra de pectina sea altamente puri fi ed por acid-
49
Química de los alimentos 266 (2018) 47–55
Espectrofotometría UV / VIS
lavado con alcohol para eliminar los disolventes o sales de extracción y convertir la pectina en forma
de ácido libre antes de la valoración. Además, el problema más común del método titrimétrico es la
no distinción de RE-
ácido galacturónico entre otros ácidos urónicos, a menos que estos últimos estén separados
principalmente por varios puri fi procedimientos catiónicos. El grado de metilación (DM), que
corresponde al porcentaje de ésteres de grupos carboxilo fi ed con metanol a C-6 y el grado de
acetilación (DA) es de fi ned como el porcentaje de ésteres de ácido galacturónico fi ed con ácido
acético (suponiendo que solo los grupos hidroxilo en el C-2 y / o C-3 del anillo de carbohidratos estén
acetilados) pueden examinarse mediante otros métodos analíticos, como la espectrofotometría UV /
VIS ( Figura 2 ), Espectroscopía de HPLC y RMN ( Fig. 3 )
La determinación de DM y DA se basó en los contenidos estimados de metanol y ácido acético
liberados por saponi. fi catión a través de soluciones alcalinas fuertes (NaOH 1 y 2M). La cantidad de
metanol y ácidos acéticos liberados de las muestras de pectina se puede medir por HPLC ( Chan y
Choo, 2013; Rubio-Senent, Rodríguez-Gutiérrez, Lama-Muñoz, García y Fernández-Bolaños, 2015 )
y espectroscopía de RMN ( MüllerMaatsch et al., 2016 ) ( Fig. 3 ) Además, la liberación de metanol por
hidrólisis alcalina se puede realizar también mediante un ensayo espectrofotométrico UV / VIS
enzimático (alcohol oxidasa) ( Anthon y Barrett, 2008; Koubala et al., 2014; Kurita, Fujiwara y
Yamazaki, 2008; Min et al., 2011; Mollea et al., 2008; Rubio-Senent et al., 2015 ) Además de los
métodos titrimétricos, di ff También se aplicaron diferentes variantes de la técnica colorimétrica para la
cuantificación. fi catión de ácidos urónicos en la pectina aislada del desperdicio de alimentos. Se
basan en la hidrólisis total de sustancias pécticas en ácido galacturónico y también en hexosas y
pentosas en soluciones de ácido concentrado. Estos compuestos son
AN Grassino y col. Química de los alimentos 266 (2018) 47–55

Fig. 3. HPLC (cromatografía líquida de alto rendimiento), HPSEC (cromatografía de exclusión por tamaño de alto rendimiento), protocolos de espectroscopía de RMN (resonancia magnética nuclear) e IR (infrarrojo)
utilizados para la identificación de pectina fi catión y cuanti fi catión de materiales alimenticios vegetales, desechos y subproductos ( Chan y Choo, 2013; Christiaens et al., 2015; Fishman et al., 2006; Geerkens et al., 2015;
Georgiev et al., 2012; Gopi et al., 2014; Grassino et al., 2016; Grassino et al., 2016; Hosseini et al., 2016a, 2016b; Kang et al., 2015; Kaya et al., 2014; Koubala et al., 2014; Kumar y Chauhan, 2010; Kurita et al., 2008;
Min et al., 2011; Müller-Maatsch et al., 2016; RubioSenent et al., 2015; Singthong et al., 2004 )

Fig.4. Ilustración esquemática del patrón de fragmentación espectrométrica de masas de pectina, según la nomenclatura de Domon y Costello (1988) . La escisión del enlace glucosídico se informa a la izquierda (los iones de fragmentos B y
C incluyen el extremo no reductor, mientras que los iones Y y Z contienen el extremo reductor). La división del anillo cruzado se informa a la derecha.

capaz de formar complejos coloreados con reactivos cromogénicos. La coloración obtenida es ácido anhidrourónico, ácido galacturónico (GlaA), ácido galacturónico total y galacturonano, como se evidencia en los

proporcional a la cantidad de ácidos urónicos presentes en las muestras de pectina. Sobre la base de documentos a los que se hace referencia a continuación.

los reactivos cromogénicos utilizados, se pueden distinguir varios métodos colorimétricos, es decir,
carbazol ( McComb y McCready, 1952 ), método meta-hidroxidifenilo ( Blumenkrantz y Asboe-Hansen,
1973 ), 3,5-dimetilfenol o xilenol ( Scott, 1979; Walter, Fleming y McFeeters, 1993 ),
sulfamato-metahidroxidifenilo ( Filisetti-Cozzi y Carpita, 1991 ), cobre-Folin-Ciocalteau ( Anthon y
Barrett, 2008 ) y ácido tioglicólico ( Yapo, 2011 ) Además, debe mencionarse que el contenido de ácido
urónico se expresa en términos de anhidrogalacturónico, anhidrogalacturonato,
El modi fi La reacción de carbazol de ácido urónico ed se utilizó para cuanti fi-
catión de ácido galacturónico en la pectina extraída de la cáscara de maracuyá bajo las siguientes
condiciones, es decir, temperatura (70, 80, 90 y 98.7 ° C), tiempo (30, 45, 60 y 90 min), pH del ácido
clorhídrico (1.0, 1.5, 2.0 , 2.5 y
3.0) y relación de pelado a extractante (1:10, 1:15, 1:20, 1:30 y 1:40) ( Kulkarni y Vijayanand, 2010 ) El
método colorimétrico de carbazol también se aplicó para la determinación del contenido de ácido
urónico en el sol.
fl pectinas de cabeza de aceite extraídas con solución de citrato de sodio (0, 0.2, 0.4,
0.6 y 0.8 w / v), a temperaturas de 55, 65, 75, 85 y 95 ° C y tiempos

50
AN Grassino y col. Química de los alimentos 266 (2018) 47–55

de 2.0, 2.5, 3.0, 3.5 y 4.0, así como relaciones sólido a líquido de 1: 20, 1:25, 1:30, 1:35 y 1:40 ( Kang
et al., 2015 ) El reactivo de carbazol también se usó para la determinación del contenido de ácido
galacturónico a partir de la cáscara Chaunsa del cultivar de mango mediante extracción con ácido
caliente por agua y ultrasonidos ( Kauser et al., 2015 ) Se descubrió que la pectina aislada por
métodos convencionales y no convencionales es de alta calidad ( Anónimo, 2012 ) con respecto al

( Geerkens et al., 2015; Georgiev et al., 2012; Kang et al., 2015; Rubio-Senent et al., 2015 )
contenido de ácido galacturónico (62.72 - 70,87%).

Garna, Mabon, Nott, Wathelet y Paquot (2006) utilizó el método de metahidroxidifenilo para la
( Christiaens et al., 2015; Fishman et al., 2006; Geerkens et al., 2015 )

determinación del contenido de ácido galacturónico en pectinas obtenidas de manzana, cítricos,

( Christiaens et al., 2015; Garna et al., 2006; Geerkens et al., 2015 )

( Leijdekkers et al., 2011; Ralet et al., 2009; Remoroza et al., 2012 )

azúcar de remolacha y achicoria. Estos autores con fi Afirmó que la hidrólisis enzimática y química /
( Garna et al., 2007; Müller-Maatsch et al., 2016; Yapo, 2011 )

enzimática combinada de pectina dio mayores recuperaciones de ácido galacturónico. Además, se

demostró que el uso de tri fl El ácido uoroacético para la hidrólisis de las cadenas de ácido pectina
( Leijdekkers et al., 2011; Muñoz-Almagro et al., 2018 )

galacturónico causó menos daño al ácido galacturónico en comparación con los ácidos sulfúrico e
clorhídrico.

En otro estudio Mollea y col. (2008) utilizó el método colorimétrico de fenilfenol

(metahidroxidifenilo) para la determinación del contenido de ácido anhidrogalacturónico en pectinas
( Leijdekkers, et al., 2011 )

obtenidas después de la extracción de cáscaras de cacao enteras y picadas con agua y ácido
( Westphal, et al., 2010 )

( Geerkens et al., 2015 )

( Garna et al., 2006 )

clorhídrico a pH de 1.0, 1.5, 2.5 y 4.0 por 1, 2 y 3 h . El método del metahidroxidifenilo también se
utilizó para la determinación del ácido anhidrourónico en las pectinas de cáscara de naranja y limón ( Georgiev,
Referencias

Ognyanov, Yanakieva, Kussovski y Kratchanova, 2012 ) En la pectina de naranja, los contenidos de

ácido anhidrourónico fueron 69,23 y 74,81% para las cáscaras extraídas con agua y ácido,
respectivamente. Las muestras de pectina de limón contenían 74,60 y 81,17% de ácido
anhidrourónico para las exfoliaciones extraídas con ácido y agua, respectivamente. En el trabajo
desarrollado por Chan y Choo (2013) , la determinación del contenido de ácido urónico a partir de la
pectina de cáscara de cacao se basó en el método de metahidroxidifenilo propuesto por Blumenkrantz
y Asboe-Hansen (1973) . Los autores mostraron que el contenido de ácido urónico varió de
Información estructural (enlace, ramificación, posición de grupos éster)
Largo tiempo de equilibrio, sin información estructural.

31.19 a 65.20% dependiendo de las condiciones de extracción, es decir, temperatura (50 y 95 ° C),
Sin información estructural, solo enfoques objetivo
Sin información estructural, solo enfoques objetivo

Sin información estructural, solo enfoques objetivo

tiempo (1.5 y 3 h), extracción de solventes (agua, ácido cítrico e clorhídrico), pH de los ácidos (2.5 y
4.0) y sustrato / relación extractante (1:10 y 1:25). El mismo método fue utilizado por Koubala y col.
Solo con detección de índice de refracción

(2014) para la determinación del contenido de ácido galacturónico en el residuo insoluble en alcohol
(AIRE) de la cáscara de papaya de dos di ff Variedades diferentes (Solo y Local) y sus fracciones
secuenciales, es decir, soluble en agua (WSP), quelante soluble (CSP) y carbonato de sodio soluble
Requiere derivatización

(NSP). El contenido de GalA observado en AIR fue mayor (268.40 y 292.62mg / g), en comparación
con WSP (15.30 y 17.66mg / g), CSP (103.84 y
Resumen de la di ff Diferentes enfoques de detección y separación cromatográfica adecuados para el análisis de pectina.

119,23 mg / g) y NSP (75,29 y 90,10 mg / g) fracciones aisladas de las variedades Solo y Local,
Esteri fi Notas de cationes

respectivamente. Hosseini y col. (2016a, 2016b)

También se utilizó el ensayo de metahidroxidifenilo para la determinación del contenido de ácido
galacturónico en la pectina obtenida después de la extracción asistida por microondas de cáscaras
de naranja agria con solución acuosa de ácido cítrico (valores de pH de 1.5, 2.25 y 3), tiempo de
+
-

irradiación de 1, 2 y 3 min. y potencias de microondas de 300, 500 y 700W. En las condiciones

Neutro y ácido - / +

Neutro y ácido - / +
Neutro y ácido ++

óptimas de extracción (tiempo de 3 minutos, potencia de 700 W y pH de 1,5), el contenido de ácido

Neutro y ácido +

Neutro y ácido -
Neutro y ácido -
Neutro y ácido -

galacturónico fue del 71,0%. El reactivo metahidroxidifenilo se aplicó para la determinación de GalA
Hidrólisis, fracción de azúcar

en las fracciones AIR y WSP, CSP y NSP obtenidas de diversas corrientes de residuos vegetales ( Christiaens
Neutral
Ácido

et al., 2015 ) Se encontró que los contenidos de GalA di ff no solo entre desechos vegetales, sino
también entre fracciones de polisacáridos dentro de una corriente de desechos. El reactivo
metahidroxidifenilo también fue utilizado por Rubio-Senent y col. (2015) para la estimación de
galacturonano (polímero de ácido anhidrogalacturónico, GalA) en pectina aislada de aguas
+ +
+

+
+

residuales semisólidas de almazara.

-

Índice de refracción - / +
Matriz de fotodiodos +
Fase inversa de LC.

ALMOHADILLA

El contenido de anhidrogalacturonato en la pectina aislada de tres di ff fracciones diferentes de

LC PGC
HPAEC

ELS

cal, es decir, albedo, fl avedo y pulpa ( Fishman, Chau, Hoagland y Hotchkiss, 2006 ), se caracterizó
em
GC

por el método sulfamato / 3-fenilfenol (sulfamato-meta-hidroxidifenilo) propuesto por

Cromatografía HPSEC

Filisetti-Cozzi y Carpita (1991) . Este procedimiento colorimétrico también fue utilizado por Min y col.
(2011) para determinar la pectina extraída por químicos (ácido oxálico / oxalato de amonio) y
Detección
tabla 1

tratamientos combinados físico / enzimáticos. La pectina extraída químicamente mostró un contenido

de GalA de

51
AN Grassino y col.
853.5mg / g, mientras que los tratamientos físicos / enzimáticos produjeron pectina con menor
cantidad de GalA (693.2mg / g). El contenido de ácido urónico en fracciones enriquecidas con pectina
aisladas de remolacha roja por citrato bu ff er (pH
5.20) o citrato bu ff er con la adición de hemicelulosa y enzimas de celulosa también se examinaron
por el método sulfamato-meta-hidroxidifenilo ( Fissore et al., 2011 ) Se encontró que el uso de citrato
bu ff er como extractante resultó en una mayor recuperación de los ácidos urónicos (555 g / kg), en
comparación con la enzima hemicelulosa (198 - 213 g / kg) y celulosa (210 - 493 g / kg) en citrato bu ff er.
El método de sulfamato / metahidroxidifenilo para la cantidad de ácido urónico fi El catión en las
pectinas obtenidas de diversos desperdicios de alimentos fue utilizado Müller-Maatsch y col. (2016) .
Los mayores contenidos de ácido urónico se obtuvieron del casco de cebolla (1146 mg / g), piel de
naranja (1099 mg / g), pulpa de espino amarillo (1002 mg / g), endibia (993 - 1033 mg / g), repollo
fresco (934 mg / g) y puerro (890 mg / g) extraídos con agentes quelantes
(trans-1,2-diaminociclohexano. N, N, N, ácido tetraacético en acetato de potasio bu ff er) Del mismo
modo, la mayor cantidad de ácido urónico se encontró en el orujo de manzana (1066 mg / g), pulpa
de espino amarillo (968 mg / g), cebolla (958 mg / g) y vaina de guisante (949 mg / g) cuando las
soluciones alcalinas diluidas (Na 2 CO 3 / NaBH 4) fueron utilizados como solventes de extracción.
El método xylenol fue utilizado por Kurita y col. (2008) para la determinación del ácido
anhidrourónico total en pectina de cáscara de cítricos. Los resultados mostraron una disminución
considerable del ácido galacturónico (26,6%) en la pectina después de tratar la cáscara con ácido
cítrico 0,5 M, a pH 7,0 y temperatura de 65 ° C durante 2 h, en comparación con la obtenida de
muestras no tratadas, es decir, sin ácido cítrico. (34,3%).
A pesar de su uso ampliado, los métodos colorimétricos no pueden discriminar di ff Ácidos
urónicos diferentes. Por lo tanto, la medición cuantitativa se realiza en términos de contenido total de
ácido urónico. Además, con las técnicas colorimétricas, otro problema grave que puede ocurrir es el
desarrollo de azúcares neutros y sus productos de degradación después de la hidrólisis del ácido
sulfúrico, lo que dificulta el análisis. Sin embargo, el reemplazo de carbazol con metahidroxidifenilo
mejora en gran medida la determinación de los ácidos urónicos en presencia de azúcares neutros
debido al hecho de que el metahidroxidifenilo es más específico fi c para los uronatos y menos
sensible para la interferencia de azúcares neutros no uronatos, en comparación con el reactivo de
carbazol. Aunque el metahidroxidifenilo se ha usado ampliamente para la cantidad de pectina fi catión
por muchos investigadores, este reactivo cromogénico también ha demostrado estar en fl influido por
azúcares neutros a un alto nivel. Por lo tanto, el modi fi El método ed meta-hidroxidifenilo mediante la
adición de sulfamato a la mezcla de reacción eliminó las interferencias neutras de azúcar ( Filisetti-Cozzi
y Carpita, 1991 ) Las pequeñas cantidades de sulfamato suprimen la producción de color por un
exceso de 20 veces de algunos azúcares neutros, sin sacrificios sustanciales. fi ce de la detección
sensible del ácido urónico por el reactivo difenilo. Para superar el problema de nondi ff Los ácidos
iónicos, el tetraborato de sodio, el ácido bórico o los iones de borato se añaden al ácido sulfúrico
concentrado para convertir los ácidos urónicos en los derivados furfurales correspondientes.
Además, el manejo del ácido sulfúrico concentrado caliente utilizado en el ensayo colorimétrico
necesita precauciones especiales para la seguridad personal y el equipo de laboratorio. En
consecuencia, son di ffi Culto para aplicar de forma rutinaria y no es fácil de usar para un gran número
de muestras.
Aunque los métodos colorimétricos y titrimétricos se han utilizado con frecuencia hasta ahora,
se han desarrollado otros métodos analíticos para evitar el error en la cantidad de ácido
galacturónico. fi catión, debido a la presencia de galacturonatos en formas libres y conjugadas, o una
alta concentración de azúcares neutros o proteínas ( Figura 1 ) En varios trabajos, se utilizó la
cromatografía de intercambio aniónico de alta presión junto con la detección amperométrica pulsada
(HPAEC-PAD) para la cuantificación del ácido galacturónico. fi catión. En el trabajo realizado por Garna
y col. (2006) , la determinación del ácido galacturónico se realizó mediante HPAEC-PAD, después de
la hidrólisis química, enzimática y química-enzimática combinada de pectina de manzana, cítricos,
azúcares de remolacha y pectinas de achicoria. Estos autores mostraron el significado fi no puedo
entrar fl La influencia del tipo de ácido, la molaridad ácida (0.2, 1 y 2M) y la temperatura de la hidrólisis
de pectina (80 y 100 ° C) en la liberación de ácido galacturónico del polímero de pectina. Una menor
recuperación de ácidos galacturónicos fue
52
Química de los alimentos 266 (2018) 47–55
obtenido por una hidrólisis química de pectina, en comparación con los métodos enzimático y
químico-enzimático combinado. Aunque el método químico-enzimático combinado lleva más tiempo
para la hidrólisis de pectina y puri fi catión de las soluciones enzimáticas (Viscozyme L9) para eliminar
contaminantes como los carbohidratos de bajo peso molecular presentes en la solución, ambos
procedimientos permitieron el análisis simultáneo de ácido galacturónico y monosacáridos con alta
selectividad y sensibilidad. Después, Garna y col. (2007) estudió el en fl La influencia de las
condiciones de extracción, como el pH del ácido sulfúrico (1.5 y 2), la temperatura (80 y 90 ° C) y el
tiempo (1, 2 y 3 h), sobre la pureza de la pectina de orujo de manzana precipitada, pero no lavada
con etanol para eliminar las impurezas Estos autores demostraron que la extracción de ácido no era
selectiva para la determinación de pectina y que el etanol utilizado para precipitar la pectina da como
resultado una coprecipitación de otros compuestos. En consecuencia, el rendimiento del precipitado
se incrementó en condiciones drásticas de extracción (pH 1.5), mientras que el contenido de ácido
galacturónico disminuyó, es decir, los valores obtenidos son más altos a pH 2 (43.3 - 58.4%) que a pH
1.5 (24.9 - 30,3%). HPAEC-PAD también fue utilizado por Geerkens y col. (2015) para el quanti fi catión
de ácido galacturónico en pectinas de cáscara de mango extraídas en solución acuosa de ácido
sulfúrico 2 N (pH 1,5) durante 2,5 ha 90 ° C. Se ha demostrado que los cultivares (Tommy Atkins,
Kent, Palmer y Nam Dokmai), el grado de madurez, los procesos de conservación (secado en horno
y liofilización con y sin blanqueo) y el pelado fi débilmente en fl influyó en la calidad de la pectina, en
términos de contenido de ácido galcturónico para uso alimentario.
En pectina aislada del sol fl Cabezal con soluciones de citrato de sodio (0.2 - 0,8%, p / v), a una
especi fi c temperaturas, tiempo y relación sólido a líquido, los contenidos de ácido galacturónico, así
como el azúcar neutro, como fructosa, ramnosa, galactosa, glucosa, xilosa, manosa y arabinosa,
fueron examinados por HPAEC-PAD ( Kang et al., 2015 ) Antes de cuanti fi-
catión, los extractos de pectina fueron puri fi ed por ultra fi Filtración para eliminar impurezas, es decir,
sales, ácidos, sacáridos y pigmentos. Se descubrió que el puri fi los extractos ed tenían un significado fi Contenido
de ácido galacturónico muy inferior (49,35%), en comparación con el obtenido por extracción con
oxalato de amonio (81,1%). Entre los monosacáridos, la ramnosa y la galactosa ocurrieron en ambos
rayos solares. fl Los extractos de pectina de la cabeza son más altos, pero con mayores cantidades que
los obtenidos por el citrato de sodio como extractantes. Por lo tanto, los valores observados sugirieron
que el modo de extracción, así como también fi catión considerablemente en fl composición química de
pectina uenciada.
Debido al hecho de que los azúcares neutros constituyen una parte esencial de la pectina, se
puede incorporar una cierta cantidad de estos compuestos en extractos de pectina obtenidos de
diversos materiales vegetales durante el aislamiento, precipitación y purificación. fi procedimientos
catiónicos. En este contexto, la eliminación de azúcares neutros de los extractos de pectina cruda
proporciona información valiosa sobre su pureza adecuada y, por consiguiente, su aplicabilidad
como aditivo alimentario. Aparte de HPAEC-PAD ( Christiaens et al., 2015; Garna et al., 2006;
Geerkens et al., 2015; Kang et al., 2015; Koubala et al., 2014; Yapo, 2010 ), la composición de
azúcares neutros se puede examinar mediante GC / FID ( Garna et al., 2007 ), GC ( Yapo, 2010 ), GC /
MS ( Müller-Maatsch et al., 2016 ) y HPLC con índice de refracción ( Georgiev et al., 2012 ) y matriz de
fotodiodos ( Kurita et al., 2008 ) detecciones. Entre las técnicas cromatográficas, se utilizó la
cromatografía de exclusión por tamaño de alto rendimiento (HPSEC) para la caracterización
molecular de muestras de pectina, como el peso molecular, la distribución del peso molecular, el
radio de giro y la viscosidad intrínseca ( Christiaens et al., 2015; Fishman et al., 2006; Geerkens et
al., 2015; Georgiev et al., 2012; Kang et al., 2015; Kaya et al., 2014; Koubala et al., 2014; Kurita et
al., 2008; Min et al., 2011; Singthong et al., 2004 ) Además, la espectroscopía infrarroja por
transformada de Fourier (FTIR) y la espectroscopía de resonancia magnética nuclear (RMN) se han
propuesto como técnicas espectrales útiles para la caracterización de la estructura de la pectina,
después de su aislamiento de diversos materiales vegetales. FTIR proporcionó análisis de grupo
funcional con picos característicos en 3390.6, 2939.0, 1749.0 y
1052,1 cm - 1, que están relacionados con mi OH, mi CH, C] O grupo de éster y ácido, y mi COC mi estiramiento
del ácido galacturónico ( Gopi, Kanimozhi,
AN Grassino y col.
Bhuvaneshwari, Indira y Kavitha, 2014; Grassino et al., 2016; Hosseini et al., 2016a, 2016b; Kumar y
Chauhan, 2010; Kurita et al., 2008; Min et al., 2011 ) En el fi región de huella digital (1200 - 900 cm - 1) de
espectros de pectina, bandas a 1140 y 1040 cm - 1 fueron atribuidos al estiramiento de las vibraciones
de los enlaces glucosídicos mi O) y anillos piranoides (C mi C) ( Kpodo et al., 2017 )
Además, la espectroscopía FTIR se puede utilizar para determinar el grado de esteri fi catión Gnanasambandam
& Proctor, 2000; Singthong et al., 2004 ) Para cuantificar la DE de las pectinas, se estableció una
curva de calibración basada en el estándar de pectina (DE conocida) a partir de la relación de A1730
/ (A1730 + A1600), donde 1760 - 1730 cm - 1
y 1630 - 1600 cm - 1 las bandas representan grupos éster carbonilo y carboxilato libre, respectivamente.
Espectroscopía de RMN, es decir, protón -1 ( 1 H NMR) y carbono-13 ( 13 C NMR) se puede utilizar
para la identidad fi catión de átomos de H y C en pectinas extraídas, respectivamente ( Gopi et al.,
2014; Grassino et al., 2016; Kumar y Chauhan, 2010 ) 1 H RMN mostró picos amplios alrededor
3.75 - 3,84 ppm (ésteres metílicos de ácido galacturónico), 2,05 - 2,13 ppm (sustituyente O-acetilo),
1,23 a 1,27 ppm (1/2 ramnosa unida), así como 3,70 - 5,28 ppm (ácido galacturónico). Similar, 13 Las
señales de C NMR fueron muy informativas: picos 173 - 173,6 ppm identi fi grupos carbonilo ed de
ácido galacturónico, aquellos a 50 - 53 ppm de los grupos metil esther y los de 20.6 - 20,8 ppm de los
grupos acetilo ( Kpodo et al., 2017 ) Por lo tanto, la información estructural relacionada con la pureza
de la pectina (principalmente en términos de ácido galacturónico) se puede establecer sobre la base
de los picos (señales) característicos que se encuentran en los espectros de RMN y / o FTIR de los
extractos de pectina.
3. Desafíos y perspectivas de futuro.
Dada la diversidad de estructura en di ff diferentes fuentes vegetales y di ff Con diferentes métodos
de extracción, la caracterización integral no dirigida (cualitativa y cuantitativa) de las pectinas es una
tarea muy difícil. Idealmente, los enfoques no dirigidos deberían ser capaces de caracterizar los
cuatro dominios estructurales principales de este polisacárido, a saber (i) homogalacturonan, (ii)
xylogalacturonan, (iii) rhamnogalacturonan I y (iv) rhamnogalacturonan II. Al mirar a sus
fi En una estructura, el análisis de macromoléculas enteras no es factible y, por lo tanto, la pectina se
hidroliza comúnmente en oligosacáridos por medios químicos y / o enzimáticos. De hecho, los
elementos estructurales obtenidos por la hidrólisis caen dentro del rango de masa típico de un
conjunto de técnicas analíticas ( Ralet, Lerouge y Quéméner, 2009 ) En lo que respecta a la
separación cromatográfica, es importante señalar que tanto las unidades neutras como las ácidas
(es decir, cargadas negativamente) están presentes en un extracto de pectina. La cromatografía
líquida de fase inversa ha demostrado ser e ff Ective para la separación de xilo-oligosacáridos neutros,
conservando intacto O- sustituyentes acetilo ( Leijdekkers, Sanders, Schols y Gruppen, 2011 ) Sin
embargo, la cromatografía de fase inversa no puede retener los analitos cargados, lo que da como
resultado una resolución pobre de las unidades cargadas negativamente. Por otro lado, se ha
demostrado que las columnas LC de carbono grafito poroso (PGC) son e ff eficaz para separar una
amplia gama de oligosacáridos que incluyen oligómeros de ácido (1,4) -galacturónico ( Westphal,
Schols, Voragen y Gruppen, 2010 ) Además, el uso de la cromatografía de intercambio aniónico sería
adecuado para unidades ácidas, aunque sería necesario un paso de desalación de fase móvil en
línea para acoplar la cromatografía con varios detectores. La cromatografía de exclusión por tamaño
de alto rendimiento (HPSEC) funciona bien para polímeros intactos, pero no se puede acoplar a
detectores que no sean el índice de refracción y se utiliza principalmente para estimar la masa
molecular de la pectina en un amplio rango (hasta 800 kDa).
Siempre que sea extremadamente di ffi culto a fi nd una separación cromatográfica completa de
las unidades de pectina, la detección posterior de los analitos que finalmente se separan también es
complicada. La ausencia de estándares hace que el quanti fi catión de metil esteri fi ed y residuos
acetilados PAD di ffi culto incluso para enfoques específicos ( Remoroza et al., 2012 ) El índice de
refracción es una detección simple y universal, pero
53
Química de los alimentos 266 (2018) 47–55
Esta opción necesita mucho tiempo para estabilizar la línea base, lo que puede conducir a una
sensibilidad y especificidad deficientes. fi ciudad, y no proporciona información estructural. Estas
limitaciones han desencadenado la implementación del Detector de dispersión de luz por
evaporación (ELSD), un detector semiuniversal, con fines cuantitativos en el análisis de pectina ( Leijdekkers
et al., 2011; Muñoz-Almagro, Rico-Rodríguez, Villamiel y Montilla, 2018; Westphal et al., 2010 )
Teniendo en cuenta que los detectores antes mencionados no proporcionan información
estructural, y teniendo en cuenta la diversidad química de la pectina, el resultado de PAD en lugar de
ELSD debe integrarse mediante enfoques estructuralmente informativos como la RMN. Sin embargo,
los principales inconvenientes de la RMN están relacionados con la necesidad de pureza de la
muestra y los requisitos de concentración ( Ralet et al., 2009 ) Por lo tanto, la EM ha resurgido como
un enfoque clave en el análisis de pectina, solo o en combinación con los detectores mencionados
anteriormente. Su alta sensibilidad, alto rendimiento y posibilidad de caracterización estructural de
oligosacáridos permitieron implementar MS en análisis de pectina no dirigida ( Ralet et al., 2009 )
El uso de técnicas de ionización suave (como MALDI o electrospray) permitió la adquisición de
iones cuasimoleculares, mientras que la MS / MS o MS norte La capacidad de los recientes
analizadores de masas hizo posible la siguiente caracterización estructural de los carbohidratos. La
aducción de metal en lugar de la electropulverización de iones negativos, en combinación con la
disociación inducida por colisión (CID), se puede utilizar para fi En la secuencia, enlace y ramificación
de oligosacáridos ( Ralet et al., 2009 ) No obstante, MS norte
se demostró que era adecuado para identificar la ubicación de los residuos de ésteres metílicos en
los residuos de ácido galacturónico ( Ralet et al., 2009 ) Típicamente, estos enfoques de MS se
aplicaron a oligómeros hasta un grado de polimerización de 10. Desorción láser asistida por matriz /
tiempo de ionización de fl La espectrometría de masa de luz (MALDI-TOF MS) se ha utilizado para
determinar las masas moleculares de oligosacáridos, pero no puede distinguir directamente la
anomeridad o la ramificación. fi Guración. Sin embargo, la trampa de iones de ionización por
electrospray MS puede proporcionar una mayor información estructural gracias a múltiples etapas de
aislamiento y disociación (MS norte)
( Leijdekkers et al., 2011 ) No obstante, el uso de movilidad iónica con EM permitió discriminar
oligosacáridos isoméricos que tienen la misma EM norte patrones de fragmentación separando
oligómeros con proporciones idénticas de masa a carga gracias a su di ff diferentes secciones
transversales de colisión ( Leijdekkers et al., 2011 )
El patrón de fragmentación de las pectinas ha sido reportado por Ralet y col. (2009) , utilizando
la nomenclatura de Domon y Costello (1988) . queso Brie fl y, se producen cuatro series de iones a
partir de la división de los enlaces glicosídicos: (i) dos de ellas contienen el extremo reductor (series
Y y Z), mientras que (ii) dos de ellas incluyen el extremo no reductor (B- y Cseries). A partir de la
carga individual [M - H] - El ion que predomina en la electropulverización negativa, la fragmentación
estuvo dominada por los iones C y Z ( Fig. 4 ) Además, una especi fi c ion de corte de anillo cruzado ( - 60
Da) también se observó ( Ralet et al., 2009 ) La fragmentación a través de la escisión glucosídica se
ha utilizado con éxito para asignar la posición de los grupos éster metílico y acetilo en los oligómeros
de ácido galacturónico, mientras que los fragmentos de escisión cruzada permitieron anotar grupos
acetilo en las posiciones O-2 y / u O-3 Remoroza et al., 2012 ) Se proporciona un resumen de las
diferentes combinaciones entre la separación cromatográfica y los métodos de detección en tabla 1 ,
donde las características principales y di ff Las conclusiones se informan comparativamente.
4. Conclusiones
En conclusión, se ha observado que di ff Se pueden utilizar diferentes técnicas analíticas para
análisis cualitativos y cuantitativos de pectina extraída de diversas matrices, desechos y
subproductos de alimentos vegetales. Dada la naturaleza y la diversidad química de las unidades
estructurales en la pectina, los analistas enfrentan separaciones cromatográficas desafiantes, así
como largos sistemas de detección. En consecuencia, el conjunto de enfoques analíticos adecuados
para el análisis de pectina varía ampliamente desde enfoques clásicos como la titulación o ensayos
colorimétricos, hasta la movilidad iónica
AN Grassino y col. Química de los alimentos 266 (2018) 47–55

seguido por MS norte caracterización, dependiendo de los fines previstos. Una caracterización
profunda de la estructura de pectina señaló mediante la cual se llevó a cabo la extracción, es decir, el
tiempo de extracción adecuado, la temperatura, el pH, el origen del material extraído, la relación
material / disolvente y el número de extracciones. La estructura real de la pectina podría
en matriz de muestra. Revista de cromatografía A, 892 ( 1 - 2) 421 - 433 .
Hosseini, SS, Khodaiyan, F. y Yarmand, MS (2016b). Optimización de microondas
extracción asistida de pectina de cáscara de naranja agria y sus propiedades fisicoquímicas. Polímeros de carbohidratos,
140, 59 - sesenta y cinco .
Hosseini, SS, Khodaiyan, F. y Yarmand, MS (2016a). Extracción acuosa de pectina

dramáticamente ff Efectúe el uso potencial de este polisacárido, ya que determina las propiedades de la cáscara de naranja agria y sus propiedades fisicoquímicas preliminares. Revista Internacional de
Macromoléculas Biológicas, 82, 920 - 926 .
tecnológicas. Por lo tanto, estos métodos indican que el protocolo de extracción podría modificarse
Kang, J., Hua, X., Yang, R., Chen, Y. y Yang, H. (2015). Caracterización de baja natural
de acuerdo con el uso final de pectina. metoxil pectina del sol fl Cabezal extraído por citrato de sodio y puri fi ed por ultra fi ltración Química de
Alimentos, 180, 98 - 105 .
Kauser, S., Saeed, A. e Iqbal, M. (2015). Estudios comparativos sobre convencional (agua caliente
ácido) y procedimientos no convencionales (ultrasonidos) para extracción y caracterización química de pectina a
Referencias partir de residuos de cáscara de cultivar de mango Chaunsa. Pakistan Journal of Botany, 47 ( 4), 1527 - 1533 .

Kaya, M., Sousa, AG, Crépeau, M.-J., Sørensen, SO, y Ralet, M.-C. (2014)
Anónimo. (2012) Reglamento (UE) n. ° 231/2012 por el que se establecen fi cationes para comida
Caracterización de muestras de pectina cítrica extraídas bajo di ff Condiciones diferentes: en fl Influencia del tipo de
aditivos enumerados en los anexos II y III del Reglamento (CE) no 1333/2008 del Parlamento Europeo y del
ácido y pH de extracción. Anales de Botánica, 114 ( 6), 1319 - 1326 .
Consejo 1, Comisión Europea, 9 de marzo de 2012. Anónimo. (2013) Reglamento (UE) n.o 68/2013 sobre el
Korish, M. (2015). Las cáscaras de frijol Faba como fuente potencial de pectina. Journal of Food Science
catálogo de materias primas para piensos 1
y tecnología, 52 ( 9), 6061 - 6066 .
Comisión Europea, 16 de enero de 2013.
Koubala, BB, Christiaens, S., Kansci, G., Van Loey, AM y Hendrickx, ME (2014).
Anthon, GE y Barrett, DM (2008). Método combinado enzimático y colorimétrico para
Aislamiento y caracterización estructural de la pectina de cáscara de papaya. Food Research International, 55 años, 215
determinación del contenido de ácido urónico y metiléster de la pectina: aplicación a productos de tomate. Química de
- 221 .
Alimentos, 110 ( 1), 239 - 247 .
Kpodo, FM, Agbenorhevi, JK, Alba, K., Bingham, RJ, Oduro, IN, Morris, GA, y
Babbar, N., Dejonghe, W., Gatti, M., Sforza, S. y Elst, K. (2016). Oligosacáridos pécticos
Kontogiorgos, V. (2017). Aislamiento de pectina y caracterización de seis genotipos de quingombó. Hidrocoloides
de subproductos agrícolas: producción, caracterización y beneficios para la salud fi ts.
alimenticios, 72, 323 - 330 .
Revisiones críticas en biotecnología, 36 ( 4) 594 - 606 .
Kulkarni, SG y Vijayanand, P. (2010). mi ff ect de condiciones de extracción en la calidad
Barba, FJ, Zhu, Z., Koubaa, M., Sant ' Ana, AS y Orlien, V. (2016). Alternativa verde
características de la pectina de la cáscara de maracuyá ( Passi fl ora edulis F. fl avicarpa L.). LWT
Métodos para la extracción de compuestos bioactivos antioxidantes de los desechos y subproductos de la bodega: una
- Ciencia y Tecnología de Alimentos, 43 ( 7), 1026 - 1031 .
revisión. Tendencias en Ciencia y Tecnología de Alimentos, 49, 96 - 109 .
Kumar, A. y Chauhan, GS (2010). Extracción y caracterización de pectina de manzana
Behall, K. y Reiser, S. (1986). Química y función de la pectina. En K. Behall y S. Reiser
orujo y su evaluación como inhibidor de la lipasa (esteapsina). Polímeros de carbohidratos, 82 ( 2), 454 - 459 .
(Eds.), (P. 248-266). Sociedad Americana de Química, Washington, DC.
Blumenkrantz, N. y Asboe-Hansen, G. (1973). Nuevo método para la determinación cuantitativa
Kurita, O., Fujiwara, T. y Yamazaki, E. (2008). Caracterización de la pectina extraída.
ción de ácidos urónicos. Bioquímica analítica, 54 ( 2), 484 - 489 .
de cáscara de cítricos en presencia de ácido cítrico. Polímeros de carbohidratos, 74 ( 3), 725 - 730 .
California ff todos, KH y Mohnen, D. (2009). La estructura, función y biosíntesis de la célula vegetal.
Lama-Muñoz, A., Rodríguez-Gutiérrez, G., Rubio-Senent, F., y Fernández-Bolaños, J.
polisacáridos pécticos de pared. Investigación de carbohidratos, 344 ( 14), 1879 - 1900 .
(2012) Producción, caracterización y aislamiento de oligosacáridos neutrales y pécticos con bajo peso
Chaharbaghi, E., Khodaiyan, F. y Hosseini, SS (2017). Optimización de extractos de pectina
molecular a partir de subproductos de oliva tratados térmicamente.
ción del casco verde pistacho como nueva fuente. Polímeros de carbohidratos, 173, 107 - 113 .
Hidrocoloides alimenticios, 28 ( 1), 92 - 104 .
Chan, S.-Y., y Choo, W.-S. (2013) mi ff El efecto de las condiciones de extracción sobre el rendimiento y el rendimiento
Leijdekkers, AGM, Sanders, MG, Schols, HA, y Gruppen, H. (2011). Caracterizando
Propiedades físicas de la pectina de las cáscaras de cacao. Química de Alimentos, 141 ( 4), 3752 - 3758 .
oligosacáridos derivados de la pared celular vegetal mediante cromatografía de interacción hidrófila con detección
Chen, J., Liang, R.-H., Liu, W., Li, T., Liu, C.-M., Wu, S.-S., y Wang, Z.-J. (2013) Péctico
por espectrometría de masas. Revista de cromatografía A, 1218 ( 51), 9227 - 9235 .
oligosacáridos preparados por micro dinámica de alta presión fl uidización y sus propiedades de fermentación in
vitro. Polímeros de carbohidratos, 91 ( 1), 175 - 182 .
Liu, L., Jiang, T. y Yao, J. (2011). Un proceso químico de dos pasos para la extracción de
Christiaens, S., Uwibambe, D., Uyttebroek, M., Van Droogenbroeck, B., Van Loey, AM, y
celulosa fi ber y pectina de corteza de rama de morera e ffi cientificamente Journal of Polymers and the Environment,
Hendrickx, ME (2015). Caracterización de pectina en flujos de residuos vegetales: un punto de partida para la
19 ( 3), 568 - 573 .
valorización de residuos en la industria alimentaria. LWT - Ciencia y Tecnología de Alimentos, 61 ( 2), 275 - 282 .
Liu, Y., Shi, J. y Langrish, TAG (2006). Extracción a base de agua de pectina de fl avedo
y albedo de cáscaras de naranja. Revista de Ingeniería Química, 120 ( 3) 203 - 209 .
Domon, B. y Costello, CE (1988). Una nomenclatura sistemática para la fragmentación de carbohidratos.
Mari C, M., Nin C evi C Grassino, A., Zhu, Z., Barba, FJ, Brn C yo C, M. y Rimac Brn C yo C, S. (2018). Una visión general de los
mentaciones en espectros FAB-MS / MS de glicoconjugados. Diario de glicoconjugado, 5 ( 4) 397 - 409 .
enfoques tradicionales e innovadores para la extracción de pectina a partir de desechos de alimentos y subproductos
vegetales: extracción asistida por ultrasonidos, microondas y enzimas. Tendencias en Ciencia y Tecnología de
Filisetti-Cozzi, TMCC y Carpita, NC (1991). Medición de ácidos urónicos sin
Alimentos, 76, 28 - 37 .
interferencia de azúcares neutros. Bioquímica analítica, 197 ( 1), 157 - 162 .
Martínez, M., Yáñez, R., Alonsó, JL y Parajó, JC (2010). Producción química de
Fishman, ML, Chau, HK, Hoagland, PD y Hotchkiss, AT (2006). Microonda-
oligosacáridos pécticos de desechos de cáscara de naranja. Investigación de Química Industrial y de Ingeniería, 49 ( 18),
extracción asistida de pectina de cal. Hidrocoloides alimenticios, 20 ( 8), 1170 - 1177 .
8470 - 8476 .
Fissore, EN, Ponce, NMA, Matkovic, L., Stortz, CA, Rojas, AM y Gerschenson, L.
McComb, EA y McCready, RM (1952). Determinación colorimétrica de subpécticos
N. (2011). Aislamiento de productos enriquecidos con pectina a partir de remolacha roja ( Beta vulgaris L. var.
posturas. Química analítica, 24 ( 10), 1630 - 1632 .
Residuos): composición y propiedades funcionales. Food Science and Technology International, 17 ( 6), 517 - 527 .
Min, B., Lim, J., Ko, S., Lee, K.-G., Lee, SH y Lee, S. (2011). Amigable con el medio ambiente
preparación de pectinas a partir de subproductos agrícolas y su caracterización estructural / reológica. Tecnología
Garna, H., Mabon, N., Nott, K., Wathelet, B. y Paquot, M. (2006). Cinética del hy-
Bioresource, 102 ( 4) 3855 - 3860 .
drólisis de las cadenas de ácido galacturónico de pectina y cuanti fi catión por cromatografía iónica. Química de
Mohnen, D. (2008). Estructura de pectina y biosíntesis. Opinión actual en biología vegetal,
Alimentos, 96 ( 3) 477 - 484 .
11 ( 3) 266 - 277 .
Garna, H., Mabon, N., Robert, C., Cornet, C., Nott, K., Legros, H., ... Paquot, M. (2007).
Mollea, C., Chiampo, F. y Conti, R. (2008). Extracción y caracterización de pectinas.
mi ff El efecto de las condiciones de extracción sobre el rendimiento y la pureza de la pectina de orujo de manzana precipitó
de la cáscara de cacao: un estudio preliminar. Química de Alimentos, 107 ( 3), 1353 - 1356 .
pero no se lavó con alcohol. Journal of Food Science, 72 ( 1), C1 - C9 .
Müller-Maatsch, J., Bencivenni, M., Caligiani, A., Tedeschi, T., Bruggeman, G., Bosch, M.,
Geerkens, CH, Nagel, A., Just, KM, Miller-Rostek, P., Kammerer, DR, Schweiggert, R.
... Sforza, S. (2016). Contenido de pectina y composición de di ff diferentes corrientes de desperdicio de alimentos. Química
M. y Carle, R. (2015). Calidad de pectina de mango como en fl uenciado por cultivar, madurez, tamaño de partícula de pelado,
de Alimentos, 201 ( Suplemento C), 37 - 45 .
blanqueo, secado e irradiación. Hidrocoloides Alimentarios, 51, 241 - 251 .
Muñoz-Almagro, N., Rico-Rodriguez, F., Villamiel, M., y Montilla, A. (2018). Pectina
Georgiev, Y., Ognyanov, M., Yanakieva, I., Kussovski, V. y Kratchanova, M. (2012).
caracterización mediante cromatografía de exclusión por tamaño: una comparación de detección de ELS y RI. Química de
Aislamiento, caracterización y modi. fi catión de pectinas cítricas. Revista de Biociencia y Biotecnología, 1, 223 - 233
Alimentos, 252, 271 - 276 .
.
Oliveira, TIS, Rosa, MF, Cavalcante, FL, Pereira, PHF, Moates, GK, Wellner, N.,
Gnanasambandam, R., y Proctor, A. (2000). Determinación del grado de pectina del éster
... Azeredo, HMC (2016). Optimización de la extracción de pectina de las cáscaras de plátano con ácido cítrico mediante el uso
yo fi catión por di ff usar re fl Ectancia transformada de Fourier espectroscopía infrarroja. Química de Alimentos, 68 ( 3)
de la metodología de superficie de respuesta. Química de Alimentos, 198,
327 - 332 .
113 - 118 .
Gopi, D., Kanimozhi, K., Bhuvaneshwari, N., Indira, J. y Kavitha, L. (2014). Novela ba-
Parniakov, O., Barba, FJ, Grimi, N., Lebovka, N. y Vorobiev, E. (2016). Extracción
ruta verde mediada por pectina de cáscara de nana para la síntesis de nanopartículas de hidroxiapatita y su
asistido por energía eléctrica pulsada como una herramienta potencial para la recuperación verde y sostenible de compuestos
caracterización espectral. Spectrochimica Acta - Parte A: Espectroscopía molecular y biomolecular, 118, 589 - 597 .
nutricionalmente valiosos de las cáscaras de mango. Química de Alimentos, 192,
842 - 848 .
Grassino, AN, Brnci C, M., Viki C- Topi C, D., Roca, S., Dent, M. y Brnci C, SR (2016). Extracción asistida por ultrasonido
Pereira, PHF, Oliveira, TIS, Rosa, MF, Cavalcante, FL, Moates, GK, Wellner, N.,
y caracterización de pectina a partir de residuos de tomate.
... Azeredo, HMC (2016). Extracción de pectina de cáscaras de granada con ácido cítrico. Revista
Química de Alimentos, 198, 93 - 100 .
Internacional de Macromoléculas Biológicas, 88, 373 - 379 .
Grassino, AN, Halambek, J., Djakovi C, S., Rimac Brnci C, S., Dent, M. y Grabari C, Z. (2016). Utilización de los residuos de la cáscara
Perussello, CA, Zhang, Z., Marzocchella, A. y Tiwari, BK (2017). Valorización de manzana
de tomate de la fábrica de conservas como fuente potencial para la producción y aplicación de pectina como inhibidor de la
orujo por extracción de compuestos valiosos. Revisiones integrales en ciencia de los alimentos y seguridad alimentaria, 16
corrosión del estaño. Hidrocoloides alimentarios,
( 5), 776 - 796 .
52, 265 - 274 .
Ptichkina, NM, Markina, OA y Rumyantseva, GN (2008). Extracción de pectina de
Hawthorne, SB, Grabanski, CB, Martin, E. y Miller, DJ (2000). Comparaciones de
calabaza con la ayuda de enzimas microbianas. Hidrocoloides alimenticios, 22 ( 1) 192 - 195 .
Extracción de Soxhlet, extracción de líquido a presión, supercrítico fl extracción de líquidos y extracción de agua
Putnik, P., Bursa C Kovacevi C, D., Re ž ek Jambrak, A., Barba, FJ, Cravotto, G., Binello, A.,
subcrítica para sólidos ambientales: recuperación, selectividad y e ff ects
... Shpigelman, A. (2017). Innovador " verde " y estrategias novedosas para la extracción

54
AN Grassino y col.
de compuestos bioactivos de valor agregado de desechos cítricos - Una revisión. Moléculas, 22 ( 5) .
Ralet, M.-C., Cabrera, JC, Bonnin, E., Quéméner, B., Hellén, P., y Thibault, J.-F. (2005)
Mapeo del patrón de acetilación de pectina de remolacha azucarera. Fitoquímica, 66 ( 15), 1832 - 1843 .
Ralet, M.-C., Lerouge, P. y Quéméner, B. (2009). Espectrometría de masas para estructura de pectina
análisis. Investigación de carbohidratos, 344 ( 14), 1798 - 1807 .
Ranganna, S. (1995). Manual de análisis y control de calidad para frutas y verduras.
(2da ed.). (S. Ranganna, Ed.). Mc Graw Hill Editores: Nueva Delhi.
Remoroza, C., Cord-Landwehr, S., Leijdekkers, AGM, Moerschbacher, BM, Schols, H.
A. y Gruppen, H. (2012). Combinado HILIC-ELSD / ESI-MS norte permite la separación, identi fi catión y cuanti fi catión de
oligómeros derivados de pectina de remolacha azucarera. Polímeros de carbohidratos, 90 ( 1), 41 - 48 .
Roselló-Soto, E., Galanakis, CM, Brn C yo C, M., Orlien, V., Trujillo, FJ, Mawson, R., ... Barba, FJ (2015). Recuperación limpia de
compuestos antioxidantes de alimentos vegetales, subproductos y algas asistidos por el procesamiento de ultrasonidos.
Enfoques de modelado para optimizar las condiciones de procesamiento. Tendencias en Ciencia y Tecnología de
Alimentos, 42 ( 2), 134 - 149 .
Roselló-Soto, E., Poojary, MM, Barba, FJ, Lorenzo, JM, Mañes, J., y Moltó, JC
(2018) La nuez de tigre y la valorización de sus subproductos: desde la extracción de aceite y compuestos valiosos hasta el
desarrollo de nuevos productos saludables. Ciencia innovadora de los alimentos y tecnologías emergentes, 45, 306 - 312 .
Rubio-Senent, F., Rodríguez-Gutiérrez, G., Lama-Muñoz, A., García, A., y Fernández-
Bolaños, J. (2015). Novedosa pectina presente en las nuevas aguas residuales del molino de oliva con emulsionantes similares y
mejores propiedades biológicas que la pectina cítrica. Hidrocoloides Alimentarios, 50,
237 - 246 .
Scott, RW (1979). Determinación colorimétrica de ácidos hexurónicos en materiales vegetales.
55
Química de los alimentos 266 (2018) 47–55
Química analítica, 51 ( 7), 936 - 941 .
Shpigelman, A., Kyomugasho, C., Christiaens, S., Van Loey, AM y Hendrickx, ME
(2015) El e ff Efecto de homogeneización a alta presión sobre pectina: importancia de la fuente de pectina y el pH. Hidrocoloides
alimenticios, 43 ( 2015), 189 - 198 .
Singthong, J., Cui, SW, Ningsanond, S. y Douglas Go ff, H. (2004). Caracterización estructural, grado de esteri. fi catión
y algunas propiedades gelificantes de Krueo Ma Noy ( Cissampelos pareira) pectina. Polímeros de
carbohidratos, 58 ( 4) 391 - 400 .
Walter, WM, Fleming, HP y McFeeters, RF (1993). Mediada por base fi rmness re-
tienda de productos de camote. Journal of Food Science, 58 ( 4), 813 - 816 .
Westphal, Y., Schols, HA, Voragen, AGJ y Gruppen, H. (2010). Introduciendo poroso
cromatografía líquida de carbono grafitada con dispersión de luz por evaporación y detección de espectrometría de
masas en análisis de oligosacáridos de la pared celular. Revista de cromatografía A, 1217 ( 5), 689 - 695 .
Willats, WGT, Knox, JP y Mikkelsen, JD (2006). Pectina: nuevas ideas sobre un viejo
El polímero comienza a gelificarse. Tendencias en Ciencia y Tecnología de Alimentos, 17 ( 3) 97 - 104 .
Yapo, BM (2010). Mejora de la calidad compositiva de los extractos de pectina monocotiledónea
contaminado con componentes que contienen ácido glucurónico utilizando un puri gradual fi procedimiento catiónico. Procesamiento
de alimentos y bioproductos, 88 ( 2 - 3), 283 - 290 .
Yapo, BM (2011). Sustancias pécticas: desde polisacáridos pécticos simples hasta complejos
pectinas - Un nuevo modelo hipotético. Polímeros de carbohidratos, 86 ( 2), 373 - 385 .
Zhu, Z., Él, J., Liu, G., Barba, FJ, Koubaa, M., Ding, L., ... Vorobiev, E. (2016). Reciente
ideas para la recuperación ecológica de la inulina a partir de materiales alimenticios vegetales utilizando tecnologías de extracción
no convencionales: una revisión. Ciencia innovadora de alimentos y tecnologías emergentes, 33, 1 - 9 .