FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

E.A.P. DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

PRÁCTICA: N° 1

TEMA: “TOMA DE MUESTRA DE SANGRE CAPILAR”

ASIGNATURA: Interpretación de análisis clínico

DOCENTE:
TURNO: MAÑANA
CICLO: VIII PRÁCTICA:
INTEGRANTES:
 I. INTRODUCCION

Se define como frotis o extendido, a la preparación microscópica delgada y

transparente, extendida entre dos cristales (porta o cubreobjetos), obtenida de
un líquido orgánico espeso o tejido semilíquido o pastoso (sangre, aspirados,
secreciones, exudados, etc.)

El frote periférico se utiliza para el estudio de las características citológicas de

las células de la sangre, lo cual permite valorar el funcionamiento general de la
médula ósea a través de sus componentes celulares, lo cual implica la
evaluación de las líneas eritrocíticas, leucocitaria y megacariocítica,
determinando anormalidades en forma, tamaño, color e inclusiones
citoplasmáticas, dando una medida cuantitativa y cualitativa de los elementos
que lo conforman.

La preparación y tinción de un extendido de sangre periférica o de médula

ósea es una técnica fundamental en hematología, ya que la información
obtenida puede conllevar a:

 El diagnóstico correcto de una enfermedad

 Orientar al clínico para brindar la terapéutica adecuada
 Monitorear el proceso de recuperación del paciente.

II. MARCO TEORICO

Sangre

Es una sustancia líquida que circula por las arterias y las venas del organismo.

La sangre es roja brillante o escarlata cuando ha sido oxigenada en los

pulmones y pasa a las arterias; adquiere una tonalidad más azulada cuando ha
cedido su oxígeno para nutrir los tejidos del organismo y regresa a los
pulmones a través de las venas y de los pequeños vasos denominados
capilares.
La cantidad de sangre de una persona está en relación con su edad, peso,
sexo y altura, una persona adulta se puede considerar que tiene entre 4,5 y 6
litros de sangre.
Todos los órganos del cuerpo humano funcionan gracias a la sangre que
circula por arterias, venas y capilares.

La sangre está formada por diversos componentes:

Entre las sustancias de importancia que transporta el plasma están las

siguientes: Albúmina Globulina Factores de Coagulación Otras proteínas.

Sangre venosa: varía según la actividad metabólica del órgano o tejido por lo
que el punto donde se extrae la muestra puede influir en la composición de la
sangre venosa. Esta tiene menos Oxigeno que la arterial también se diferencia
por el Ph, por su concentración en Dióxido de Carbono y su hematocrito.

 Rojo oscuro
 Fluye de manera continua
 No forma espuma
 Se utiliza para todo tipo de analítica

Sangre capilar: La sangre obtenida por punción de la piel, que a veces se

denomina sangre capilar incorrectamente, es una mezcla de sangre procedente
de arteriolas, vénulas y capilares por lo tanto es en parte arterial, y en parte
venosa. El aumento de presión en las arteriolas hace que la muestra sea más
rica en sangre arterial, pero contiene también líquido intersticial e intracelular.

Sangre arterial: Esta sangre arterial tiene prácticamente, una composición

uniforme en todo el cuerpo.

Fracciones Sanguíneas

Suero: Se obtiene recogiendo sangre venosa en un recipiente seco (sin

anticoagulante) dejándola reposar para que se forme el coágulo y
centrifugándola a una velocidad y tiempo definidos. Es la muestra básica para
las pruebas de bioquímica de Rutina y serología.
Plasma: Se obtiene igual que en el caso anterior recogiendo sangre venosa en
un recipiente con anticoagulante en una proporción definida, pero
centrifugándola a tiempo y velocidad definidos según el estudio a realizar. Es la
muestra utilizada en los estudios de Coagulación y Bioquímica urgente.

Sangre total: Se obtiene recogiendo sangre venosa en un recipiente que

contenga un anticoagulante en una proporción definida. Como ejemplo
podemos decir que es la muestra utilizada para realización del recuento
hematológico (Hematimetría)

Frotis Sanguíneo:

Es una técnica científica que consiste en la extensión de una gota de sangre

sobre la superficie de un portaobjetos o de un cubreobjetos, con el fin de
analizarla posteriormente al microscopio.

Técnica manual con dos portaobjetos en ángulo:

Es la técnica más conveniente y usada con mayor frecuencia para hacer

extendidos de sangre periférica.

1. Colocar una gota de sangre (de alrededor de 2-3 mm de diámetro) en un

extremo del portaobjetos. El tamaño de la gota es importante: si es
demasiado grande crea un extendido muy largo o muy grueso y si es
demasiado pequeña a menudo forma un extendido corto o delgado.
2. Sostener el portaobjetos extensor (frotadora) con firmeza con la mano
dominante a un ángulo de 30-45º y llevar hacia atrás hasta tocar la gota
de sangre, dejando que ésta se esparza en todo el ancho del
portaobjetos.
3. Empuja con rapidez y suavidad hacia delante hasta el final del
portaobjetos para crear el extendido. Es importante que toda la gota se
incluya en el extendido.
Tinción de frotis de sangre periférica: El objetivo de la tinción de frotis de
sangre periférica es identificar las células y reconocer con facilidad la
morfología a través del microscopio. La tinción de Wright o de Wright-Giemsa
es la utilizada con mayor frecuencia para los frotis de sangre periférica y de
médula ósea. Estas tinciones contienen eosina y azul de metileno y, en
consecuencia, se denominan tinciones policrómicas. Los colores presentan
variaciones ligeras entre los diferentes laboratorios según el método de tinción.

Principales tipos celulares que se observan en un frotis sanguíneo

humano.

III. OBJETIVO:

 Identificar las células sanguíneas y reconocer con facilidad la morfología

a través del microscopio de una toma de muestra de sangre capilar.

IV. MATERIALES Y EQUIPOS:

 1 gota de sangre capilar.

 Portaobjeto
 Lanceta
 Tinción Wright
 agua destilada
 Microscopio
 Alcohol de 70°, algodón.
 V. PROCEDIMIENTO

Se realizó la toma de
muestra de sangre capilar
del dedo anular izquierdo
de dos de nuestras
compañeras de grupo

Se extrajo una gota de sangre

Seguidamente se realizó el
frotis sanguíneo
extendiendo una gota de
sangre de muestra sobre
la lámina porta objeto
Gota de sangre listo para extender

Extendiendo la gota de sangre

Frotis sanguíneo realizado

Se esperó 5 min a que la
muestra seque y luego se
coloreó con 1 gota del
reactivo Wright

Se dejó secar con el reactivo

Wright 5 min

Luego se lavó con agua y

se dejó secar 15 min
aproximadamente

Seguidamente se llevó la
lámina portaobjetos seco al
microscopio.
 VI. RESULTADOS:
Vista al microscopio a 100x se pudo observar lo siguiente:

.
Eosinófilos: Presenta 2 núcleos ovalados,
se pinta de color anaranjado por la
presencia del reactivo de eosina. Tiene
función fagocitaria y su número aumenta en
alergias y enfermedades parasitarias.

Basófilos: Núcleo en forma de S se

pinta de color azul, son gruesos pero
escasos, función es poco conocida se
dice que impide la coagulación en
venas y arterias.

Monocito: tiene un
núcleo más pequeño
en forma de
arriñonada posee
más cantidad de
citoplasma.
Linfocitos: El núcleo ocupa casi toda la
célula, con poco citoplasma y da coloración
Neutrófilo: Tienen
azul por acción de núcleo
la tincióntrilobulado
con azul dey
metileno. Se encarga de la defensa
segmentados de
específica. coloración anaranjada.
Función fagocitaria.
Debido a la tinción con el colorante Wriaht se pudo observar y clasificar a los
leucocitos polimorfonucleares con base a sus propiedades tintoriales en
neutrófilos, eosinófilos y basófilos; diferenciar a los mononucleares (monocitos
y linfocitos) por la coloración de su citoplasma y además permiten observar con
mayor facilidad las anormalidades morfológicas en los mismos.

VII. CONCLUSIÓN:
 La finalidad de la práctica nos permitió aprender el procedimiento de
una correcta toma de muestra de sangre capilar, siguiendo un
procedimiento de operación estándar (POE) para no cometer errores.

 Aprendimos hacer un correcto frotis sanguíneo en una lámina

portaobjeto y conocer los diferentes reactivos específicos para cada
prueba que se utiliza en laboratorio.

 Determinar y saber diferenciar los elementos que se encuentran en la

sangre al observarlo al microscopio con un lente óptico de 100x como
son: Los eritrocitos, plaquetas, agranulocitos mononucleares (monocitos
y linfocitos) y granulocitos polimorfonucleares (neutrófilos, eosinófilos y
basófilos), cada uno de estas células tienes formas y funciones
específicas.

 Debido a que la eosina y el azul de metileno reaccionan a los cambios

de pH de los distintos componentes celulares, los que poseen carácter
básico fijan en mayor medida la eosina (colorante ácido), mientras que
los que poseen carácter ácido fijan mejor el azul de metileno (colorante
básico) y nos dan una gama de colores en las células hemáticas que
permiten clasificar a los leucocitos polimorfonucleares con base a sus
propiedades tintoriales

VIII. CUESTIONARIO
1. ¿Qué diferencia encuentra Ud. entre la sangre capilar, sangre
venosa y sangre arterial?

a. Sangre capilar:

Zona de vasos sanguíneos de diámetro muy

pequeño que tiene como función el intercambio de
sustancias entre la sangre y el espacio intercelular
de los tejidos. Estas sustancias son el oxígeno y
los nutrientes (van desde la sangre a los tejidos) y
el dióxido de carbono y los productos de desecho
del metabolismo celular (van desde los tejidos a la
sangre).

Tipos de capilares sanguíneos

1) Capilar arterial, en el que se aportan

sustancias vitales a los tejidos.
2) Capilar venoso, en el que se absorben
las sustancias de desecho de las
células.

b. Sangre venosa:

Sangre que queda desoxigenada y

cargada de dióxido de carbono después
de pasar por la circulación sistémica y
transitar por los órganos y tejidos del
cuerpo. La sangre venosa se dirige de
vuelta al corazón para ser enviada a los
pulmones, donde la sangre se vuelve a
oxigenar.
 c. Sangre arterial:

Una arteria es cada uno de los vasos que llevan la

sangre oxigenada (exceptuando las arterias
pulmonares) desde el corazón hacia los demás partes
del cuerpo. Nacen de un ventrículo; sus paredes son
muy resistentes y elásticas.

2. ¿Cómo se obtiene la sangre desfibrinada?

La muestra de sangre venosa obtenida con jeringa se vacía en un tubo con

tapón de rosca que contenga al menos el mismo número de perlas de vidrio
que mililitros de sangre se vaya a desfibrinar. A continuación se aplica un
movimiento de inversión suave del tubo constante. Al cabo de 2-3 minutos se
observara que el ruido que las perlas hacían al chocar contra las paredes del
tubo, deja de oírse, eso se debe a que la fibrina que se va formando en el
proceso de coagulación, se deposita sobre ellas, atrapándolas. A partir de ese
momento se prosigue el movimiento rotatorio durante 10 minutos.
Posteriormente se separan con mucho cuidado la sangre liquida en un tubo de
ensayo que se lleva a centrifugar y las perlas de vidrio en la tapa o base de una
caja Petri las cuales se lavan con agua destilada separando la fibrina que se
adhirió a ellas. La sangre liquida se centrifuga a 2500 rpm/5- 10 min.

La sangre con anticoagulante, o desfibrinada, se emplea mayormente para el

contaje de las células sanguíneas, eritrocitos, leucocitos y plaquetas, así como
el análisis de su morfología y capacidad funcional. Una prueba de
compatibilidad sanguínea (grupo y factor Rh) se realiza mediante el test de
Coombs, empleándose sangre desfibrinada, al igual que diversas pruebas para
determinar anomalías o patologías propias de las células sanguíneas.

3. ¿Cuál es la composición química del anticoagulante de Wintrobe y

cómo actúa en la sangre evitando la coagulación?
Es una mezcla de Oxalatos. También llamada anticoagulante de Wintrobe.
Contiene oxalato de amonio, oxalato de potasio, formol y agua.

Actúa por precipitación del calcio, el oxalato se une al ion calcio y lo desprende
de la sangre, formando oxalato de calcio, estando fuera de la sangre impide
que se forme la fibrina- fibrinógeno ;interfiriendo así el proceso de coagulación
y que esta se produzca.

Es fácil de preparar. Se emplea en forma de polvo en proporción de 2 de

oxalato de amonio por 1 de oxalato de potasio. La cantidad recomendada es de
2 mg x mL de sangre. Este anticoagulante no afecta el volumen globular medio
y puede usarse para determinaciones de hemoglobina, hematocrito y recuento
globular, pero para los extendidos queda limitada a los primeros minutos,
tampoco es útil para el recuento plaquetario porque produce formación de
agregados plaquetarios.

4. ¿Qué diferencias existen entre suero y plasma?

 Plasma: Se trata de la parte líquida y sin células de la sangre. Si a una

muestra de sangre, se le quitan los glóbulos rojos y los glóbulos blancos, lo que
queda sería el plasma. El plasma es el componente principal de la sangre,
representando hasta el 55% del volumen total. Es decir que el plasma es la
parte de la sangre que contiene ambas, el suero y los factores de coagulación

Suero: El Suero es un componente sanguíneo restante una vez que el proceso

de coagulación ha tenido lugar. Se puede decir que es el equivalente o el
restante del plasma, pero sin las sustancias que permiten que suceda la
coagulación. Es decir que el suero es la parte de la sangre que queda una vez
que se han eliminado los factores de coagulación como fibrina.

La diferencia entre ambos sería que el plasma contiene los factores de

coagulación y agua, mientras que el suero contiene proteínas como la albúmina
y las globulinas.

5.- . ¿Cómo se observan los elementos formes en sangre fresca y sangre

coloreada? Dibuje utilizando colores.
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Carr J. Rodak B. atlas de hematología clinica. 3ed. Buenos aires
Argentina: Medica Panamericana; 2010.

2. Manascero A. Atlas de morfología celular, alteraciones y enfermedades

relacionadas. 1ª ed. Bogotá: CEJA; 2003.

3. Campos Peon M. Manual de laboratorio de análisis Bioquímico clínicos I.

Primera Ed. México 2008 pag.9

4. Condori Vargas c. Anticoagulantes [.Internet][ Revisado 24 de agosto 2019].

Disponible desde: https://www.academia.edu/12152680/ANTICUAGULANTES