UNIVERSIDAD DEL ATALNTICO

PROGRAMA DE FARMACIA
ATALNTICO BARRANQUILLA

VALIDACIÓN DEL MÉTODO CROMATOGRÁFICO PARA CONTROL DE CALIDAD DE IBUPROFENO

EN SUSPENSIÓN ORAL

Por: Aldair De La Cruz Pertuz Y Luz Daniela Parejo

Doc.: Andrea Carolina Ramos Arrieta
 1. RESUMEN
El ibuprofeno es un antiinflamatorio no esteroideo, utilizado frecuentemente como
antipirético, analgésico y antiinflamatorio. Para que los laboratorios GM realicen el
respectivo control de calidad se requiere del método HPLC. El objetivo principal se
basa en validar un método por HPLC que se desarrollará en el laboratorio con el fin de
determinar cuantitativamente al ibuprofeno presente en una suspensión oral de uso
pediátrico a nivel nacional con el fin de aplicar los controles de calidad en esta
formulación. Básicamente: se utilizó un método por HPLC basado en la separación
isocrática en fase reversa, columna Lichrocart en una mezcla de Acetonitrilo/Buffer
KH2PO4 0,01 mol/L ajustado a pH 3,05 ± 0,05 con Ácido orto-fosfórico en una
proporción (70:30 v/v), velocidad de flujo de 1 mL/min, volumen de inyección de 10 µL
y detector UV a 220 nm. Se realizó la validación del método a través de los parámetros
linealidad, precisión, exactitud y especificidad frente a los componentes de la
formulación. El cumplimiento satisfactorio de toda la metodología utilizada permitió
demostrar la validez del método en estudio para el control de calidad en el rango de 50
a 150 % (0,04 - 0,12 mg/mL), de esta forma,  el método por HPLC resultó específico,
lineal, exacto y preciso para su aplicación al control de calidad de Ibuprofeno en la
suspensión oral.
 2. DETERMINACION DE LOS
PARAMETROS DE CALIDAD
2.1 Validación
Se prepararon placebos del producto y
se utilizaron los procedimientos y
criterios de aceptación vigentes.
2.2 Especificidad
Se evaluaron por triplicado placebos
del producto, materia prima y sustancia
de referencia (SR) química, aplicando
el método propuesto. Se compararon
los resultados obtenidos con los
resultantes del análisis de placebos
cargados con Ibuprofeno en cantidades
equivalentes al 100 %. Se determinó la
posible interferencia de los
componentes de la matriz mediante la
comparación de los tiempos de
retención (tr) en los cromatogramas del
placebo y de SR. Se calculó la
respuesta media obtenida de los
placebos cargados con 100 % de
analito por comparación con la SR y el
recobrado medio total. Se empleó la
prueba ANOVA con el objetivo de
determinar si existían diferencias
estadísticamente significativas para 99
% de confianza.
2.3 Linealidad del Sistema
Se realizaron cinco concentraciones de
Ibuprofeno SR, en un rango de 80-120
% de la cantidad teórica declarada
como 100 %. Se construyó una curva
de calibración de respuesta analítica:
área del pico (AUC) a 220 nm (Y) vs
concentración teórica de analito
expresada en % (X). Los resultados se
procesaron estadísticamente a través
del programa STATGRAPHICS versión
5.1 (opción regresión lineal múltiple) y
se determinó: r (coeficiente de
correlación lineal), r2 (coeficiente de
determinación), a (intercepto) y b
(pendiente), para el 99% de confianza.
2.3.1 Criterios de aceptación:
- r ≥ 0,99 y r2 ≥ 0,98
-Prueba de proporcionalidad del
método analítico o hipótesis nula de la
ordenada en el origen a= 0. Se empleó
la prueba estadística t de Student para
n-2 grados de libertad, al ser n, el
número total de valores donde: texp <
ttab
2.4 Linealidad del método y placebos del producto cargados con
exactitud Ibuprofeno materia prima (lote:
I980831). Los resultados fueron
Las curvas de calibración se procesados estadísticamente de igual
construyeron de la siguiente forma: 5 forma que la curva de calibración de la
puntos por triplicado de 50-150 % de linealidad del sistema. Además, se
AUC a 220 nm vs concentración en % y calculó el porciento de recobro (R), el
de recuperación; concentración real en recobrado medio ( ) y el C.V total. Se
% vs concentración teórica en % de los aplicó la prueba G de Cochran (para a=
puntos equivalentes al 50, 100 y 150 0,05; k= 3; n= 3)), para determinar si el
%. Se analizaron por triplicado
factor concentración tiene alguna
influencia en los resultados. Por último,
se aplicó la prueba t de Student para
demostrar que no existen diferencias
significativas entre el valor medio de
recobro obtenido () y 100 %.
2.4.1 Criterios de aceptación:
98 - 102 %; CV £2,0 %
2.5 Precisión
Para la repetitividad, se evaluaron por
triplicado placebos cargados con
analito en la concentración equivalente
al 100 % y un valor bajo y otro alto
comprendido dentro del rango de la
linealidad. Se calculó el C.V en estos 3
niveles de concentración y se comparó
con el criterio establecido. El analista
realizó las determinaciones en las
mismas condiciones de trabajo, realizó
la comparación de las respuestas con
la SR en cada caso.
En el estudio de precisión intermedia
participaron dos analistas, dos días
diferentes, en el mismo laboratorio. En
cada caso se analizaron por triplicado
muestras procedentes de un lote
industrial equivalentes al 100 %. Se
calculó el C.V total; además, se
realizaron las pruebas: F de Snedecor
para determinar si existen diferencias
significativas entre los resultados de los
analistas que emplearon el mismo
método y entre los días en que se
realizaron los análisis. Se realizó la
prueba de t de Student para comprobar
si los valores medios obtenidos entre
los analistas y entre los dos días en
que realizaron los análisis eran
homogéneos, para el nivel de Se estableció el intervalo en que se
significación a=0,05 y los grados de cumplieron los criterios de linealidad,
libertad seleccionados F= (n1 + n2) - 2. exactitud y precisión del método.

2.7 Comparación del método con el

2.5.1 Criterio de aceptación: normalizado

CV ≤ 2,0 % Por último se procedió a comparar los

resultados obtenidos al analizar por
2.6 Rango triplicado muestras de la suspensión
oral mediante el método desarrollado y
validado para control de calidad en este
trabajo, con los obtenidos al analizar
las mismas muestras por el método de
referencia propuesto en la Farmacopea
Británica, 20095 para el análisis de
suspensiones orales. Los resultados se
compararon estadísticamente mediante
un análisis de varianza empleando el
programa STATGRAPHICS Plus 5.1.
Discusión
La validación de métodos es un
requisito importante en los análisis
químicos, se busca la confirmación
objetiva de que se han cumplido los
requisitos de calidad mediante la
muestra de evidencia
Para esto se hace necesario la
utilización de métodos analíticos que
nos permiten demostrar científicamente
que el objeto de estudio cumple con las
características de desempeño optimo
adecuadas, como las utilizadas en la
validación cromatográfica del
ibuprofeno
Se realizaron un conjunto de pruebas a
determinadas muestras de placebo de
la materia prima del ibuprofeno
Uno de los métodos analíticos
utilizados fue la especifidad posee la
capacidad de medir específicamente el
analito en presencia de los
componentes presentes en la matriz
analítica inequívoca de las impurezas,
productos de degradación y o
excipientes , Si no se dispone de
estándares de impurezas o de los
productos de degradación, puede
demostrarse la especificidad
comparando los resultados de las
pruebas de muestras que contengan
impurezas o productos de degradación
con los de un segundo procedimiento
bien caracterizado (por ejemplo, un
procedimiento farmacopéico u otro
procedimiento validado). Es decir, es
un método muy útil y de hecho muy
común en este tipo de validaciones en
las cromatografías se registra un pico
cromatográfico que nos permite
identificar la identidad de la muestra
por lo tanto podríamos decir que este
método es sumamente útil en la
valoración
Otro método utilizado fue la linealidad y
exactitud que posee la capacidad de
reproducir resultados que son
directamente proporcionales a la
concentración del analito , examina que
tan exactas todas las mediciones en
todo el rango si el sistema tiene la
misma exactitud para todos los valores
de referencia , en forma matemática la
linealidad se representa con una línea
recta y las desviaciones en esa línea
pueden informarnos sobre la presencia
de errores en el procedimiento
realizado ya sean de tipo experimental
o humano
Los cálculos de linealidad y exactitud
son constantemente utilizados en la
industria farmacéutica además de ser
relativamente fáciles de realizar nos
proporcionan datos concisos y
confiables
Y por ultimo el rango que, aunque
Permite obtener una idea de la
dispersión de los datos, cuanto mayor
es el rango, aún más dispersos están
los datos (sin considerar la afectación
de los valores extremos). El rango,
también es llamado amplitud o
recorrido de medida
Pero existen métodos que pueden
llegar a ser más precisos que el rango
como la varianza o la desviación
estándar que, aunque son igualmente
medidas de dispersión son más
precisos
Por ultimo los resultados obtenidos son
comparadas en tablas que registran los
valores aceptados y en esto se basa la
comparación con los resultados
normalizados que es una parte
sumamente importante nos permite
fundamentar nuestros resultados y
determinar que si nuestro fármaco
cumple con los parámetros de calidad
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Recibido:29 de septiembre de 2015.

Aprobado:8 de julio de 2016.