Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
LUCRĂRI PRACTICE
BIOFIZICĂ MEDICALĂ
Teren Ovidiu
Petcu Lucian Cristian
Vasile Monica
-2009-
„Ovidius” University Press, 2009
Facultatea de Medicină
Disciplina Biofizică
Aleea Universitatii nr. 2
Constanţa
Romania
Tel/Fax: 0241-605000
Copyright©2004
Toate drepturile sunt rezervate Editurii Universităţii Constanţa
„Ovidius” University Press
2
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
PREFAŢĂ
3
„Ovidius” University Press, 2009
4
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
CUPRINS
5
„Ovidius” University Press, 2009
6
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
I. Noţiuni teoretice
A. Indicatori de tendinţă centrală
Indicatorii de tendinţă centrală sunt valori ce localizează într-un
fel oarecare mijlocul setului de date. Dintre indicatorii de tendinţă
centrală menţionăm:
Modul - valoarea care apare cel mai frecvent.
Un set de date poate fi non-modal (dacă toate valorile posibile au
aceeaşi frecvenţă), mono-modal (o singură valoare maximală), multi-
modal (cu mai multe valori ce apar cu aceeaşi frcvenţă maximală).
Mijlocul - media aritmetică a valorilor extreme ale setului de
date.
Mediana - valoarea ce împarte setul de date în două grupe egal
populate.
Pentru setul de date S={X1,..., Xn}, ordonat crescător, când
n=2k+1 (număr impar de date), mediana este Me=Xk+1. În cazul aceluiaşi
set dar pentru n=2k (număr par de date), mediana este:
X k X k 1
Me
2
Media - cele mai folosite sunt: media aritmetică (Xma),
geometrică (XG), armonică (XH) şi cuadratică (XQ). Se poate arăta uşor că
aceste medii se află în relaţia:
X H X G X ma X Q
7
„Ovidius” University Press, 2009
B. Indicatori de poziţie
Indicatorii de poziţie sunt folosiţi pentru localizarea unui anumit
subgrup de date în relaţie cu restul eşantionului. Se numesc -cuantile
acei indicatori ce împart eşantionul în părţi egal populate. Cele mai
utilizate sunt: cvartila (qk), decila şi percentila (pk), valori ce împart
datele în părţi conţinând o pătrime, o zecime, sau o sutime din elemente.
Să considerăm un set de date ordonat crescător unde L este
valoarea cea mai mică din set iar H valoarea cea mai mare.
9
„Ovidius” University Press, 2009
m3
ac SKEW ( x )
3
Funcţie de valorile acestui coeficient există trei tipuri de
distribuţii: cu înclinare pozitivă, nulă şi negativă, aşa cum reiese din
cazurile prezentate mai jos, unde Mo=modul, Me=mediana, <x>=media.
10
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
- deviaţia standard: n 1
1
n 1
12 ... 2n
Rezultatul determinărilor (R) în urma prelucrărilor statistice a
datelor, se prezintă sub forma:
11
„Ovidius” University Press, 2009
R X med n 1
După efectuarea acestor calcule, putem trage concluzia că
valoarea reală X a mărimii cătuate se află în intervalul:
I (X med n 1 , X med n 1 )
Acest interval se numeşte interval de confidenţă sau interval de
încredere.
Problemă: Pentru etalonarea unui colorimetru s-au realizat un
număr de n = 5 determinări, iar valorile transmisiei au fost următoarele:
50.2, 49.1, 49.6, 50.3, 48.9. Să se calculeze rezultatul determinărilor (R)
şi intervalul de confidenţă (I).
B. Reprezentarea grafică a datelor
Procesele fizice, chimice, biologice, etc., procese ce depind de
mai mulţi parametrii, pot fi reprezentate folosind un sistem de referinţă
format din două drepte concurente în plan, sau trei drepte concurente în
spaţiu, numite axe. Dacă axele sunt perpendiculare câte două, atunci
sistemul se numeşte rectangular.
Coordonatele (xa, ya) ale unui punct A într-un sitem rectangular
având originea O măsoară proiecţiile segmentului OA pe axă.
x
r x 2 y 2 , arctg
y
Pentru ca reprezentarea grafică a datelor în coordonate
rectangulare să fie cât mai clară, se recomandă să se ţină cont de
următoatele indicaţii:
-asigurarea unei reprezentări grafice cât mai intuitive constă în
alegerea scării corespunzătoare atât pe scara absciselor cât şi pe scara
ordonatelor (atunci când valorile variabilelor x sau y încep de la un
număr oarecare, acest număr se recomandă să fie reprezentat cât mai
aproape de originea axei respective).
-indicaţiile de pe axele x şi y trebuie să fie cât mai simple, adică
cu cât mai puţine cifre (de regulă indicaţiile de pe axe nu trebuie să
conţină numere cu mai mult de două cifre; dacă numerele sunt mai mari
trebuie indicat un factor de multiplicare la sfârşitul axei alături de
unităţile de măsură).
-pe fiecare axă trebuie să se indice denumirea sau simbolul
mărimii reprezentate pe axa respectivă şi în mod obligatoriu unităţile de
măsură.
13
„Ovidius” University Press, 2009
Tabelul 1
Timp
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
(ore)
Temp.
37,1 37,5 37,9 38 38,2 38,4 38,8 39 39,2 39,5
(C0)
40
39,5
Tem peratura (grd C)
39
38,5
38
37,5
37
36,5
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Tim p (ore)
14
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
15
„Ovidius” University Press, 2009
40
39,5
38,5
38
37,5
37
36,5
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Tim p (ore)
16
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
I. Noţiuni teoretice
Microscopul reprezintă un instrument optic alcătuit dintr-un
ansamblu de dioptrii (sferici) şi centraţi ce are rolul de a forma imagini
mult mărite ale unor obiecte de dimensiuni mici.
Microscopul este alcătuit din :
- sistemul mecanic
- sistemul electric
- sistemul optic
18
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
19
„Ovidius” University Press, 2009
.
Figura 2.3. Eritrocitele văzute la microscop prin micrometrul ocular.
21
„Ovidius” University Press, 2009
I. Noţiuni teoretice
Metodele clasice de microscopie nu pot pune în evidenţă detaliile
preparatelor atunci când acestea au dimensiuni foarte mici (sub 1 m) sau
nu prezintă un contrast bun (detaliile au aceeaşi culoare ca şi restul
preparatului). În această situaţie, la dispoziţia observatorului stau
metodele de colorare a preparatului sau tehnicile speciale de microscopie.
Tehnicile de colorare (ce se vor studia în cadrul disciplinei de
Histologie) prezintă în anumite situaţii câteva dezavantaje: necesită o
cantitate mare de timp, manopera şi substanţe chimice; nu pot fi
observate celule sau organisme vii; imaginea obţinută diferă mai mult sau
mai puţin de structura reală.
Pentru înlăturarea acestor deficienţe pot fi utilizate tehnicile
speciale de microscopie. Dintre acestea amintim:
- Microscopia de imersie
- Microscopia în ultraviolet (UV)
- Microscopia de câmp întunecat
- Microscopia de polarizare
- Microscopia de fluorescenţă
22
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
1. Microscopia de imersie
Cele două tehnici de microscopie prezentate (transmisie şi
reflexie) nu permit o mărire mai mare de 1000 de ori deoarece apare
fenomenul de difracţie a luminii pe detaliile preparatului.
Pentru a permite observarea unor detalii mai fine una din soluţii
este introducerea între obiect şi obiectiv a unui lichid omogen,
transparent şi izotrop cu indice de refracţie cât mai mare, numit lichid de
imersie. De obicei, se utilizează ulei de cedru (n=1.3-1.5) sau compuşi
sintetici (n=1.3-1.6). În acest mod se poate creşte mărirea până la cca.
2000 de ori fără să apară fenomenul de difracţie. Un alt avantaj al
folosirii imersiei este mărirea luminozitatii imaginii:
2h
(1 )
E d h
E0 n2 1
unde:
E - iluminarea imaginii cu lichid de imersie
E0 - iluminarea imaginii în absenţa lichidului
h - distanţa obiectiv-obiect
d - diametrul obiectivului
n - indicele de refracţie al lichidului de imersie
E=(1.2-4)·E0
În cazul utilizării tehnicii de imersie este necesar ca preparatul să
fie acoperit cu o lamelă pentru ca lichidul de imersie să nu modifice
23
„Ovidius” University Press, 2009
2. Microscopia de ultraviolet
O altă modalitate de a creşte puterea separatoare este micşorarea
lungimii de undă a radiaţiei folosite până în domeniul ultraviolet UV
(6·10-10, 3.8·10-7)m. În acest mod s-au putut distinge obiecte de
dimensiuni de 0,15m, atingându-se o mărire de 6000-7000 de ori.
În cazul folosirii radiaţiei UV este necesar ca toate componentele
optice ale microscopului să fie realizate din cuartz deoarece sticla
comună este opacă la acest tip de radiaţii.
Imaginea finală va fi obţinută pe un ecran de proiecţie acoperit
cu o substanţa fluorescentă. În cazul folosirii radiaţiei UV este obligatorie
folosirea ochelarilor şi a ecranelor de protecţie deoarece retina este foarte
sensibilă în acest domeniu de lungimi de undă.
24
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
4. Microscopia de polarizare
Microscopia de polarizare se utilizează în evidenţierea şi
observarea substanţelor optic active ce se găsesc în preparat. Substanţele
optic active au proprietatea de a roti planul luminii polarizate.
25
„Ovidius” University Press, 2009
5. Microscopia de fluorescenţă
Fluorescenţa este proprietatea anumitor substanţe de a emite
lumină (radiaţie vizibilă) atunci când sunt excitate cu radiaţie UV.
Deoarece multe substanţe de interes medical prezintă fluorescenţă (acizi
nucleici, proteine) această tehnică este foarte utilizată în practica de
laborator şi de cercetare medicală.
Fiecare substanţă ce prezintă fluorescenţă este caracterizată de o
lungime de undă de excitaţie (în UV) şi de o lungime de undă de emisie
26
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
(în vizibil), astfel încât tehnica poate nu doar pune în evidentă dar şi
identifica substanţele respective. În acest scop, se utilizează filtre optice
şi de UV pentru selectarea radiaţiei de excitaţie şi de emisie a substanţei
ce urmează a fi observată. Filtrele se dispun ca în figura 3.3.
27
„Ovidius” University Press, 2009
28
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Modul de lucru:
A. Observarea nucleilor celulelor
-se aşează lama cu preparat pe masuţa microscopului şi se
fixează cu ajutorul călăreţilor;
-se aduce pe axul optic obiectivul x40 (sau x25) şi se localizează
zona cu preparat;
-se coboară măsuţa microscopului fără a deplasa preparatul;
-se aduce pe axul optic obiectivul Apo xl00;
-se aplică o picătură de lichid de imersie pe preparat (în dreptul
obiectivului);
-cu foarte mare atenţie se coboară obiectivul pâna ce se imer-
sează în lichid;
-privind prin ocular se pune la punct imaginea.
29
„Ovidius” University Press, 2009
30
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Cromatografia si electroforeza
I. Noţiuni teoretice
1. Cromatografia
Cromatografia reprezintă o tehnică de separare a componentelor
unui amestec, între două faze: una mobilă şi alta staţionară, ca urmare a
deplasării fazei mobile de-a lungul celei staţionare şi a antrenării compo-
nentelor amestecului în mişcare, cu viteze diferite, ocupând astfel poziţii
diferite de-a lungul fazei staţionare. În acest mod componentele sunt
separate şi apoi identificate.
În funcţie de natura fazelor se disting următoarele tipuri de
cromatografie:
Faza mobila Faza staţionara Denumire
lichid lichid lichid - lichid (LL)
lichid solid lichid - solid (LS)
gaz solid gaz - solid (GS)
gaz lichid gaz - lichid (GL)
31
„Ovidius” University Press, 2009
32
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
33
„Ovidius” University Press, 2009
2. Electroforeza
Reprezintă metoda de separare bazată pe migrarea sub influenţa
câmpului electric a substanţelor încărcate cu sarcină electrică.
Eletroforeza poate fi folosită atât în scop analitic (separarea
componenţilor şi dozarea lor), preparativ (obţinerea unor componenţi în
stare pură) dar şi ca metodă de studiu a proprietăţilor superficiale ale unor
celule sau organite celulare.
O particulă încărcata electric, când este dizolvată sau suspendată
într-un mediu lichid, sub influenţa unui câmp electric uniform, atinge o
viteză constantă de migrare. Speciile încărcate pozitiv se vor îndrepta
către catod, iar speciile încărcate negativ către anod. Viteza de migrare a
ambelor specii va fi determinată de forţele care acţionează asupra lor.
Aceste forte sunt:
- forţa de atracţie electroforetică: F1 Q E
Figura 4.3. Forţele ce acţionează asupra unei particule încărcate cu sarcină electrică
suspendată într-un mediu lichid. Distribuţia ionilor în stratul dublu electric de la suprafaţa
unei particule scufundate într-un electrolit.
35
„Ovidius” University Press, 2009
36
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
38
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Figura 4.8. Tipuri de disproteinemie: (A) Inflamaţie acută, (B) Inflamaţie cronică, (C)
Sindrom nefrotic, (D) Enteropatie exudativă, (E) Ciroză hepatică, (F) Mielom multiplu,
(G) Hipogamaglobulinemie.
39
„Ovidius” University Press, 2009
40
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
D m
v
t s
Să se calculeze intervalul de confidenţă şi să se compare valorile
obţinute cu cele din literatură.
m
v (vmed n 1, vmed n 1 )
s
41
„Ovidius” University Press, 2009
Sedimentarea si centrifugarea
I. Noţiuni teoretice
1. Sedimentarea
Sedimentarea - Este o tehnică de separare ce se bazează pe
diferenţa de densitate dintre componentele amestecului. În practica
medicală se utilizează nu numai ca tehnică de separare dar şi ca o metoda de
analiză (VSH - viteza de sedimentare a sângelui).
Pentru o înţelegere mai bună a procesului se poate modela
comportarea unei hematii în câmp gravitaţional.
Să consideram o suspensie de particule sferice de rază R şi
densitate aflate într-un lichid de densitate 0 (0). Asupra particulelor
acţionează următoarele forte:
4
- forţa de greutate: G m g R3 g
3
4
- forţa Arhimedică: FA m 0 g R 3 0 g
3
- forţa de frecare cu moleculele lichidului - forţa de vâscozitate;
pentru particule sferice şi viteze mici de deplasare, forţa de vâscozitate
este dată de legea lui Stokes: FV 6 R v
42
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
4 4
R 3 g R 3 0 g 6 R v
3 3
L R 2 g 1 0
9 1
t
2
După cum se constată din relaţia (1) viteza de sedimentare
depinde atât de mărimea particulelor (R) cât şi de interacţiunea acestora
cu lichidul în care se află, prin coeficientul de vâscozitate .
Sedimentarea poate fi deci folosită nu numai ca tehnică de
separare a unor particule de interes dar şi ca metodă de cercetare în
vederea obţinerii unor informaţii legate de aceste particule.
De mare importanţă clinică este determinarea vitezei de
sedimentare a eritrocitelor. În tabelul următor sunt prezentate valorile
normale obţinute prin metoda Westergreen.
43
„Ovidius” University Press, 2009
2. Centrifugarea
Centrifugarea - reprezintă o tehnică de separare a componentelor
unui amestec cu densităţi diferite sub influenţa unui câmp centrifugal.
Deoarece viteza de sedimentare pentru particule de mărimea
hematiilor, sau mai mici, este deosebit de scăzută, este necesară o metodă
care să crească forţa activă (greutatea în cazul sedimentarii). Astfel, în
cazul centrifugării, rolul forţei de greutate îl joacă forţa centrifugă.
16 3 3 2
Fcf m a c R x
3
Neglijând forţa de greutate şi considerând că migrarea duce la
creşterea razei traiectoriei circulare, avem următoarele relaţii:
Fa Fv Fcf
44
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
dx
Fv 6 R
dt
16 3 3 2
Fa R 0 x
3
dt 2 R 2 2 0
9 1 dx
8 x
Prin integrare obţinem timpul necesar separării:
t c ( R ) 2 0 ln f .
9 1 x
8 xi
Ultracentrifugarea - Pentru particule foarte mici cum ar fi
proteinele plasmatice sedimentarea prin centrifugarea obişnuită este
practic nerealizabilă din cauza fenomenelor de difuzie. Sunt necesare în
acest caz turaţii deosebit de mari 15000rot/min.
Ultracentrifugele ce realizează aceste turaţii trebuie să fie bine
stabilizate mecanic (pentru a evita fenomenul de „bătăi‟ care ar duce la
ruperea axului) şi bine termostatate (pentru a împiedica degradarea
termică).
Când sistemul este monodispers apare o limită netă de separaţie
între solvent şi particulele dispuse la fundul eprubetei.
Când sistemul este polidispers apar mai multe câmpuri şi este
necesară o ultracentrifugare fracţionată. Se centrifughează pe rând la
fiecare turaţie de interes şi se recoltează sau sedimentul sau super-
natantul.
45
„Ovidius” University Press, 2009
46
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
B. Centrifugarea sângelui
Materiale necesare:
- seringă şi ac pentru puncţie venoasă
- eprubete de hemoliză
- stativ
- pipete gradate
- citrat trisodic 3,8%
- balanţă de echilibrare
- ser fiziologic
- eprubete de centrifugare
Mod de lucru:
-se recoltează o cantitate de 5-6 ml sânge după metoda descrisă
anterior;
-se introduce în eprubeta de centrifugare 1ml citrat trisodic 3,8%,
4ml ser fiziologic şi 5ml sânge după care se asează eprubeta pe balanţa
de echilibrare;
-pe platanul opus se asează o eprubetă identică în care se
introduce apă distilată până la echilibrarea balanţei;
-se aşează cele două eprubete în centrifugă în poziţii diametral
opuse una faţă de alta, se închide capacul centrifugii şi se reglează la
2000rotatii/min, după care se centrifughează 2minute;
-se scoate eprubeta şi se masoară deplasarea frontului eritrocitar,
apoi se continuă centrifugarea.
47
„Ovidius” University Press, 2009
Probleme:
1._Cunoscând valorile fiziologice ale coeficientului de vâscozitate
la bărbat ηB=0,047Kg/ms şi la femeie ηF=0,043Kg/ms, densitatea
eritrocitului ρ=1095Kg/m3 şi a plasmei ρo=1027Kg/m3 calculaţi din formula
vitezei de sedimentare cât ar trebui să fie raza eritrocitului presupus sferic.
2._Determinaţi viteza de sedimentare a unor particule de cretă
suspendate într-un lichid şi raza acestor particule presupuse sferice
cunoscând ρapa=1 g/cm3, ηapa=1.05 10-3Kg/ms, ρcreta=1,545 g/cm3.
3._Cunoscând raza particulei de cretă determinată anterior, evaluaţi
folosind modelul matematic al centrifugării, timpul de centrifugare pentru
aceste particule suspendate într-un mediu vâscos (glicerină). Se cunosc:
- ν=1000rot/min, (500rot/min)
- ηglicerina=13,93 10-3Kg/ms
- ρglicerina=1,26 g/cm3
- ln(x2/x1)=0,143
Verificaţi experimental rezultatul obţinut.
48
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
I. Noţiuni teoretice
În această lucrare încercăm să prezentăm aplicaţiile spectro-
fotometriei în ultraviolet şi vizibil pentru substanţe în stare lichidă,
lichide pure, amestecuri şi în special soluţii. Spectrele urmărite sunt
spectre moleculere electronice la care structura de rotaţie nu mai apare iar
cea de vibraţie se manifestă numai în anumite cazuri printr-o structurare a
benzilor de absorbţie care, în general, sunt largi şi nerezolvate în linii.
Benzile de absorbţie din aceste domenii spectrale corespund
tranziţiilor de pe nivelul electronic fndamental pe cele mai joase nivele
electronice excitate, pentru care tranziţiile sunt permise conform legilor
de selecţie. În aceste condiţii tranziţiile electronice implică cele mai mari
variaţii de energie, iar frecvenţele cuantelor absorbite se situează atât în
domeniul vizibil cât şi de ultraviolet al spectrului.
La aceste tranziţii electronice participă electronii unor anumite
grupări structurale ale moleculelor numite cromofori. În cazul substan-
ţelor organice asemenea grupări structurale sunt reprezentate de legătura
simplă, dublă şi triplă, gruparea bazică, etc.
Interacţia cromoforilor între ei sau cu alte grupări atomice
provoacă importante modificari ale spectru1ui de absorbţie atribuit
cromoforului singur. În aceste condiţii pot apare următoarele efecte:
- efectul batocromic - de deplasare a maximului de absorbţie spre
lungimi de undă mai mari (deplasarea spre rosu),
49
„Ovidius” University Press, 2009
50
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
51
„Ovidius” University Press, 2009
52
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
53
„Ovidius” University Press, 2009
54
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
55
„Ovidius” University Press, 2009
56
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Potenţialul de acţiune
I. Noţiuni teoretice
În starea normală (numită stare de repaus) membrana celulară
este polarizată, având faţa internă mai negativă decât cea externă. În mod
uzual se ia faţa internă drept referinţă.
Potenţialul de membrana, Vm numit potenţial de repaus, ia valori
de la minus câţiva milivolţi, pentru majoritatea celulelor, pana la –60mV
pentru axo1ema, –90mV pentru sarcolema si chiar –200mV pentru
membranele, celulelor din organul electric al peştelui torpila, Torpedo
californicum.
Figura 7.1 prezintă ceea ce se întâmplă când axolema este
excitată de un stimul electric depolarizant. Dacă depolarizarea depăşeste
o valoare critică (sau liminară), atunci membrana se depolarizează în
continuare din proprie iniţiativa (pana la 0mV) şi chiar se repolarizează
dar în sens contrar pana pe la +50mV. Apoi potenţialul iniţial este
restaurat.
Aceasta oscilaţie de tensiune de circa 120mV în amplitudine şi
1ms durată se numeşte potenţial de acţiune. Depolarizarea externă este
de fapt doar un declanşator (trigger) al fenomenului întrucât energia
răspunsului specific al membranei provine de la metabolismul celular şi
nu de la stimul.
57
„Ovidius” University Press, 2009
59
„Ovidius” University Press, 2009
60
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Efectul TTX
Adăugarea de tetrodotoxină, TTX (o neurotoxină puternica
extrasă din ficatul şi ovarele unui peste din Marea Japoniei, Sphoeroides
rubripes, şi unii tritoni), în soluţia de imersie a axonului, blochează
transportul de sodiu şi nu are efecte directe notabile asupra transportului
de potasiu.
Figura 7.4 prezintă efectul TTX asupra probabilităţilor n, m, h, a
conductanţelor de sodiu şi potasiu, a potenţialului de acţiune. Toxina are
nevoie de ceva timp pentru a difuza în structură şi a da efect. Când
conductanţa maximă a sodiului scade sub o valoare critică, membrana nu
mai răspunde.
62
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
63
„Ovidius” University Press, 2009
Efectul cesiului
Datorită competiţiei la legarea de componentele proteice ale
membranei cu ceilalţi cationi monovalenţi (în special cu ionii de K+)
prezenta cesiului în soluţia de imersie afectează dinamica probabilitatilor
n, m si h şi duce la o scădere semnificativă a conductanţei superficiale a
potasiului şi la o foarte mică creştere a conductanţei de sodiu. Aceste
schimbări modifică potenţialul de acţiune, crescându-i puţin durata după
cum se observa în figura 7.5.
64
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Fenomene de transport
I. Noţiuni teoretice
1. Difuzia
Difuzia pasivă reprezintă fenomenul de transport pasiv, datorat
agitatiei termice, a unor particule din zonele de concentratie, densitate
mai ridicate, spre zonele cu valori mai mici ale acestor mărimi, printr-un
mediu suport omogen.
Fenomenul de difuzie pasivă este cel mai intens la gaze, unde
viteza termică este foarte mare şi cel mai lent în cazul solidelor, unde
moleculele (sau ionii) au poziţii relativ fixe în spaţiu.
Înainte de a prezenta legile difuziei, vom face unele precizări în
legatură cu anumiţi termeni folosiţi: flux şi gradient.
Fluxul reprezintă cantitatea de substanţă, sarcină, energie
transportată printr-o suprafaţă în unitatea de timp.
Prin gradient se întelege variaţia unei mărimi (concentraţie,
densitate, potenţial electric etc.) între două puncte ale spaţiului, raportată
la distanţa dintre cele două puncte.
În aceste condiţii definim difuzia ca cel mai general tip de
transport pasiv (spontan), produs de gradientul de concentraţie (pentru
gaze), sau de gradientul de activatate chimică (pentru materia conden-
sată).
Difuzia pasivă într-un mediu omogen se supune la două legi,
cunoscute sub numele de legile lui Fick:
65
„Ovidius” University Press, 2009
66
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
67
„Ovidius” University Press, 2009
C1 V1
P
V V2
S C0 1 C1 t
V2
Problema în aceasta situatie o reprezintă determinarea
concentraţiei C1. Pentru aceasta se foloseşte metoda conductometrică
deoarece pentru substanţele ionice, între anumite limite ale concentraţiei,
aceasta este proportională cu conductivitatea solutiei (σ).
Conductanţa este inverul rezistenţei şi se măsoară în -1 (mho):
1
G
R
2. Osmoza
În unele situaţii solvitul este împiedicat să difuzeze între
compatimente datorită existenţei unei membrane semipermeabile. În
această situaţie sistemul tinde spre o stare stationară (steady state) şi nu
spre o stare de echilibru, prin difuzia solventului prin membrană.
Osmoza duce la apariţia unei asimetrii a presiunii hidrostatice în
sistemul considerat. Diferenţa de presiune hidrostatică ce blochează
difuzia solvitului se numeşte presiune osmotică.
68
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Pentru soluţii diluate presiunea este dată de legea lui Van't Hoff:
V nR T
unde: = presiunea osmotică
n = numărul de moli de substanţă osmotic activă dizolvaţi
R = constanta universală a gazelor
T = temperatura absolută
În cazul soluţiilor de electroliţi se introduce un factor de corecţie (i)
dependent de gradul de disociere al electrolitului:
V in R T
69
„Ovidius” University Press, 2009
Figura 8.4. (1) sursă de tensiune, (2) punte Wheastone, (3) cuvă cu electrozi.
70
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Figura 8.5. (1) sursă de tensiune, (2) punte Wheastone, (3) vas de difuzie.
72
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
I. Noţiuni teoretice
Vâscozitatea este fenomenul de frecare internă ce apare în
sistemele lichide. Fenomenul de vâscozitate se manifestă în două
ipostaze: când o particulă se mişcă în raport cu un lichid staţionar –
vâscozitate statică şi când straturile adiacente de lichid se mişca unele în
raport cu altele – vâscozitate dinamica.
Vâscozitatea statică – face obiectul unei alte lucrări practice de
tehnici de separare (sedimentarea).
Vâscozitatea dinamică – În cazul lichidelor reale care curg se
constată că acest proces are loc în straturi subţiri vecine, moleculele din
acelaşi strat având aceeaşi viteză, în timp ce moleculele din straturile
vecine au viteze diferite.
Între moleculele straturilor vecine (ca şi între moleculele
aceluiaşi strat) se exercită forţe de atracţie, forte ce se opun deplasării
relative a acestor straturi, determinând apariţia unei frecări interne în
lichide numită vâscozitate.
Dacă în timpul curgerii straturile de lichid rămân paralele,
curgerea este cunoscută sub numele de curgere laminară. Pentru
curgerea laminară, forţa de vâscozitate este dată de legea lui Newton:
dv
Fv S
dx
unde: = coeficientul de vâscozitate dinamica a lichidului
73
„Ovidius” University Press, 2009
dv
= gradientul de viteză
dx
S = aria comună a celor doua straturi
Coeficientul de vâscozitate depinde de natura lichidului şi de
temperatură (scăzând cu creşterea temperaturii). Lichidele pentru care
este valabilă relaţia de mai sus se numesc lichide Newtoniene. Marea
majoritate a lichidelor de interes medical (lichidul cefalorahidian, plasma
sangvină, serul sangvin, urina) sunt lichide Newtoniene.
Vâscozitatea dinamică este un fenomen foarte important în
circulaţia sângelui.
Să consideram un vas de sânge de lungime L şi raza R la capetele
căruia acţionează o diferenţă, de presiune p=p1–p2>0 (unde p1 este
proiecţia presiunii sistolice până în acel teritoriu iar p2 rezistenţa
periferică). La peretele vasului aderă o peliculă fină de lichid ce rămâne
în repaus. Dacă diferenţa de presiune nu este foarte mare, atunci curgerea
are loc în pături cilindrice paralele, cu viteze din ce în ce mai mari de la
periferie spre axă (figura 9.1).
Figura 9.1. Curgerea unui fluid printr-un tub cilindric de lungime L şi raza R; p1, p2 sunt
presiunile ce acţionează la capetele tubului (p = p1 – p2>0)
74
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
R 4 (p1 p 2 )
(1)
8 L
Pentru lichidele care curg în conducte se introduce aşa numitul
număr Reynolds:
vr
Re
unde: r = raza conductei
= densitatea fluidului
v = viteza de curgere
= coeficientul de vâscozitate dinamică a lichidului
Pentru sângele din arterele mari există o valoare critică a
numărului Reynolds (ReCR) egală cu 1000. În funcţie de această valoare
există mai multe regimuri de curgere a sângelui :
a) pentru Re< 1000, curgerea este laminară
b) pentru 1000< Re<2000, curgerea este nestabilă
c) pentru Re > 2000, curgerea devine turbulentă (cu vârtejuri)
În sistemul cardiovascular uman, curgerea turbulentă poate să
apară în aorta, imediat deasupra valvulelor sigmoide, în perioada de
expulzie a sângelui (când viteza sângelui atinge cea mai mare valoare).
Această curgere turbulentă este caracterizată prin zgomote caracteristice.
Turbulenţa (consumatoare de energie) poate să apară şi în alte vase, în
stări patologice, când vâscozitatea sângelui este mult mai scăzută
(anemie, sau în cazul scăderii CO2 din sânge).
75
„Ovidius” University Press, 2009
Vâscozitatea sângelui
Vâscozitatea sângelui, la temperatura de 37oC, este de
aproximativ 4 ori mai mare decât cea a apei, sângele fiind un lichid
nenewtonian. Mai mult, sângele nu constituie o fază omogenă, ci un
sistem dispers heterogen, mai precis, o suspensie de elemente figurate în
plasmă.
Tot lichidele nenewtoniene sunt şi soluţiile coloidale şi
macromoleculare, pentru care coeficientul de vâscozitate depinde de
concentraţia particulelor dispersate, conform legii lui Einstein:
η=ηd(1+KV)
unde: ηd = coeficientul de vâscozitate dinamică al mediului respectiv,
V = volumul fazei dispersate din unitatea de volum a suspensiei,
K = constantă ce depinde mărimea şi natura particulelor
dispersate (pentru proteine globulare K=4-10)
76
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Dispozitivul experimental:
Pentru determinarea vâscozităţii unor lichide se foloseşte
dispozitivul Ostwald. Acesta este confecţionat dintr-un tub de sticlă în
forma literei "U" având o ramură (A) cu un diametru de aproximativ 2cm
prevăzută cu un rezervor de 3ml capacitate şi respectiv o ramură (B)
având un diametru de aproximativ 0.8cm cu un rezervor de 2ml
capacitate situat în partea superioară. Acest rezervor este delimitat de
două tuburi capilare şi este prevăzut cu două repere R1 si R2.
Ramura (B) continuă cu sistemul de aspiraţie alcătuit dintr-un tub
de cauciuc, un tub de sticlă prevăzut cu un orificiu lateral şi o pompă de
cauciuc.
77
„Ovidius” University Press, 2009
Mod de lucru:
Se introduce apa distilată în ramura A. Cu ajutorul sistemului de
aspiraţie se ridică apa în ramura B undeva deasupra reperului R1. Se
eliberează pompa iar în momentul când suprafaţa lichidului se află în
dreptul reperului R1 se porneşte cronometrul şi se măsoară intervalul de
timp necesar apei să curgă între R1 si R2.
Se înlocuieşte lichidul de referinţa (apă distilată) cu lichidul de
studiu şi se repetă procedeul prezentat mai sus. Pentru calcul
coeficientului de vâscozitate se va folosi relaţia (2).
Se vor efectua 15 determinări pentru fiecare lichid în parte iar
datele experimentale se vor introduce în tabelul de mai jos.
78
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
I. Noţiuni teoretice
_O substanţă lichidă este separată de atmosfera înconjurătoare
(în care se găsesc şi vaporii săi) printr-o pătură superficială. Moleculele
din pătura superficială se găsesc în condiţii care se deosebesc de cele din
interiorul lichidului astfel:
Figura 10.1. Moleculele din pătura superficială se găsesc în condiţii diferite dată de
moleculele din interiorul lichidului: (a1) moleculă situată în interiorul lichidului,
(a2) moleculă situată în stratul superficial.
79
„Ovidius” University Press, 2009
80
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Figura 10.2. Forma pe care o ia o picătură de lichid, pentru un lichid care nu udă pereţii
vasului şi pentru un lichid care udă pereţii vasului.
82
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
F = 2r V
FG 2 r g
G = m g = v g n
Vg
2r n
K (1)
n
unde: K = constantă ce depinde de tipul stalagmometrului utilizat
ρ = densitatea lichidului
n = număr de picături
Dispozitivul experimental folosit (stalagmometrul) este prezentat
în figura 10.5. Este alcătuit dintr-un tub de sticlă prevăzut cu două
porţiuni capilare, una verticală (A) şi una orizontală (B), un tub vertical
(C) ce prezintă un rezervor de volum V şi un sistem de aspiraţie (D)
alcătuit dintr-un tub de cauciuc, un tub de sticlă prevăzut cu un orificiu
lateral şi o pară de cauciuc.
83
„Ovidius” University Press, 2009
84
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
85
„Ovidius” University Press, 2009
I. Noţiuni teoretice
Densitatea unei substanţe este o mărime fizică caracteristică
substanţei respective. Densitatea absolută se defineşte ca fiind masa
unităţii de volum.
m
(1)
V
având ca unitate de măsură g/cm3 şi kg/m3.
Mărimile prin care se defineşte densitatea, respectiv masa şi
volumul, sunt dependente de presiune şi temperatură, aceşti factori
influenţând valoarea densităţii. De aceea, determinarea densităţii
corpurilor solide şi lichide se va face la temperatură constantă în tot
timpul determinării, iar pentru gaze trebuie respectată şi condiţia
menţinerii constante a presiunii.
Deoarece determinarea densităţii presupune măsurarea masei şi a
volumului, în practică se determină densitatea prin comparatie cu
densitatea unui corp de referinţă (densitatea relativă), de obicei apa
distilată pentru solide şi lichide şi aerul atmosferic uscat pentru gaze.
Astfel, densitatea relativă se defineşte ca fiind raportul dintre
densitatea ρ a unui corp şi ρ0 densitatea corpului de referintă:
d (2)
0
86
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
87
„Ovidius” University Press, 2009
88
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
89
„Ovidius” University Press, 2009
Masa
Soluţia picnometrului d
m1 m2 m3
1
2
90
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
I. Noţiuni teoretice
Prin refracţie se înţelege schimbarea direcţiei unei raze de lumină
la trecerea prin suprafaţa de separaţie a două medii transparente cu indici
de refracţie diferiţi.
Fie o rază de lumină care cade pe suprafaţa de separaţie a două
medii sub un unghi de incidenţă (i). Raza suferă fenomenul de refracţie
(figura 12.1) şi intră în al doilea mediu sub unghiul de refracţie (r). Între
cele două unghiuri există relaţia:
sin i n 2 v1
n 21 (1)
sin r n1 v 2
unde:
v1 = viteza de propagare a luminii în mediul cu indice de refracţie n1
v2 = viteza de propagare a luminii în mediul cu indice de refracţie n2
n21 = indice de refractie relativ (al mediului 2 faţă de mediul 1)
91
„Ovidius” University Press, 2009
92
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
93
„Ovidius” University Press, 2009
95
„Ovidius” University Press, 2009
96
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
97
„Ovidius” University Press, 2009
I. Noţiuni teoretice
Lumina, ca orice undă electromagnetică, constă dintr-un câmp
electric (E) şi un câmp magnetic (B). Cele două câmpuri oscilează în
fază, perpendicular pe direcţia de propagare (figura 13.1), fiind perpen-
diculare şi între ele. Lumina este o unda transversală.
98
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Figura 13.2. Diferenţa dintre lumina naturală, lumina total polarizată şi lumina parţial
polarizată din punctul de vedere al direcţiei de oscilaţie a vectorului câmp electric.
99
„Ovidius” University Press, 2009
100
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
unde:
c = concentraţia procentuală a substanţei (g la 100ml soluţie);
l = lungimea stratului de substanţă străbătut (l = 0.19014m);
α = unghiul de rotaţie determinat;
101
„Ovidius” University Press, 2009
Mod de lucru:
- privind prin ocular se potriveşte sursa de lumină (dacă este
cazul) prin mişcarea stânga dreapta a suportului becului;
- pentru a obţine α0 se luczează cu tubul gol;
- prin rotirea plăcii interioare se observă o imagine divizată net în
trei cămpuri (o bandă întunecată mărginită de două câmpuri luminoase
(figura 13.6a); rotind în continuare se caută imaginea în care banda
luminoasă este mărginită de două cămpuri întunecate (figura 13.6b); între
cele două imagini extreme se caută obţinerea unui câmp cu luminozitate
uniformă şi minimă (figura 13.6c).
103
„Ovidius” University Press, 2009
α0 α1 α2
Soluţia 1
Soluţia 2
Soluţia 3
Media (αi)
σn-1
α -
C -
104
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
Telecobaltoterapia
I. Noţiuni teoretice
Radiaţia Cobalt-60 este considerată ca o radiaţie de energie mult
mai scăzută decât cea obţinută cu acceleratoare liniare. Fascicolul de
radiaţii al Cobalt-60 prezintă o serie de particularităţi de ordin calitativ,
geometric şi cantitativ.
1. Calitatea fascicolului
Izotopul radioactiv artificial Cobalt-60 se obţine prin reacţia
(n, γ), din elementul natural Cobalt-59.
27 Co 0 n 27 Co
59 1 60
Dezintegrarea 60
27 Co are loc în cascadă: fiecare atom emite o
radiaţie beta cu energia E=0.31MeV şi doi fotoni gamma de 1.17 MeV şi
60
1.33MeV, trecând în elementul 28 Ni .
105
„Ovidius” University Press, 2009
106
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
107
„Ovidius” University Press, 2009
108
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
2. Geometria fascicolului
Fascicolul de radiaţii este definit prin mai mulţi parametrii care
se utilizează în calcule dozimetrice:
a)_Distanţa F faţă de sursă, exprimată ca:
- distanţa sursă-piele (DSP), respectiv distanţa dintre planul
frontal al sursei şi suprafaţa de intrare în mediul iradiat, măsurată în axul
central al fascicolului;
- distanţa sursă-ax (DSA), care la aparatele cu montaj izocentric
corespunde distanţei dintre planul frontal şi axul de rotaţie.
109
„Ovidius” University Press, 2009
110
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
unde:
- D med A,DSP debitul dozei absorbite în mediul iradiat, pentru un
111
„Ovidius” University Press, 2009
unde:
- D med A,DSP,p = debitul dozei absorbite în mediu, pentru câmpul
distanţa DSP
- RPA,DSP,p = randamentul în profunzime pentru câmpul A,
D cGy
Timp expunere =
D med ( A ,DSP,p ) cGy
min
b) Calculul cu raportul ţesut-aer: tehnica de iradiere cu DSA
(DTS) fixă se utilizează la aparatele cu montaj izocentric, dimensiunea
câmpului de iradiere fiind luată în axul de iradiere sau centrul volumului
tumoral. Debitul dozei în punctul p se calculează după formula:
cGy
DA, DSA, p Exp( DSA) C f RTA( A, p)
min
unde:
- D A,DSA,p = debitul dozei absorbite pentru câmpul de secţiune
113
„Ovidius” University Press, 2009
D cGy
Timpul de expunere =
D ( A ,DSA,p ) cGy
min
114
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
116
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
117
„Ovidius” University Press, 2009
118
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
119
„Ovidius” University Press, 2009
120
Lucrări Practice de Biofizică Medicală
121
„Ovidius” University Press, 2009
BIBLIOGRAFIE SELECTIVĂ
122