Sunteți pe pagina 1din 45

Lucrări practice

Igiena apei
Apa potabilă
INDICATORII BACTERIOLOGICI
22 martie = Ziua Mondială a Apei
Este sarbătorită din anul 1993!
Apa potabilă

Apa potabilă este apa destinată consumului uman (Legea 458):

a) orice tip de apă în stare naturală sau după tratare, folosită


pentru băut, la prepararea hranei ori pentru alte scopuri casnice,

§ indiferent de originea ei
§ indiferent dacă este furnizată prin reţea de distribuţie, din rezervor
sau este distribuită în sticle ori în alte recipiente.
Apa potabilă
Apa potabilă este apa destinată consumului uman (Legea 458):

b) toate tipurile de apă folosită ca sursă în industria alimentară


pentru fabricarea, procesarea, conservarea sau comercializarea
produselor ori substanţelor destinate consumului uman,

§ cu excepţia cazului în care Ministerul Sănătăţii, Ministerul


Agriculturii şi Dezvoltării Rurale aprobă folosirea apei şi este
demonstrat că apa utilizată nu afectează calitatea şi salubritatea
produsului alimentar în forma lui finită.
Apa potabilă

Apa potabilă este apa destinată consumului uman (Legea 458):

c) apa provenind din surse locale, precum fântâni, izvoare etc.,


folosită pentru băut, gătit sau în alte scopuri casnice;

în funcţie de condiţiile locale specifice, autorităţile de sănătate


publică judeţene, respectiv a municipiului Bucureşti, pot face
excepţie de la valorile parametrilor de calitate, dar fără să fie pusă în
pericol sănătatea consumatorilor.
APA POTABILĂ

PARAMETRII DE CALITATE
AI APEI POTABILE

INDICATORII BACTERIOLOGICI
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
Germenii identificați:

• Numărul total germeni la 22˚ C = germenii psihrofili


• Numărul total germeni la 37˚ C = germenii mezofili
• Numărul bacterii coliforme
• Escherichia Coli
• Enterococi

Toate sunt obligatorii pentru a stabili dacă apa e potabilă sau nu!!!
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
În apă există
Ø Germeni de proveniență naturală, din sol (germeni psihrofili) - se dezvoltă la 22˚C
Ø Germenii supraadăugați - de proveniență umană/animală (germenii mezofili), care se
dezvoltă la 37˚C – sunt majoritatea saprofiți, dar pot fi și patogeni
=> dau boli infecțioase și parazitare.
Pentru a fi potabilă, apa nu trebuie să conțină germeni patogeni!!!
Ø Germenii saprofiți sunt prezenți în anumite limite.
Numărul germenilor saprofiți la om și la animale este mult mai mare,
=> s-au ales ca INDICATORI DE POLUARE.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici

Germenii mezofili și psihrofili


• Germenii mezofili intră în competiție cu germenii proprii apei, care sunt
germeni saprofiți și se dezvoltă la 22°C - germeni psihrofili.
• În apă se realizează
un raport numeric de 1 la 3 în favoarea germenilor psihrofili - pot fi
maxim 1000/cm3, iar flora mezofila maxim 300/cm3.
• Micșorarea sau inversarea acestui raport indică o contaminare a apei!!!
• Importanta sanitară a acestui indicator este mică.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
Germenii cu rol de indicator de contaminare a apei:

Germenii saprofiți intestinali care se găsesc în mod normal în număr mare în


organismul uman sănătos

Condiții germeni saprofiți:

1. Să nu fie prezenți – când apar este risc mai mare să fie și germeni patogeni

2. Ajunși în mediu exogen (sol, apă) nu trebuie să își modifice caracterele


tulpinii de proveniență intestinală (variabilitate intestinală) – teste speciale

3. Să poată fi evidentiați prin teste rapide


Apa potabilă
• Numărul total germeni la 22° C si 37˚ C
Ø Plăcile se incubează la temperatura necesară germenilor:
22˚C pentru germenii psihrofili, respectiv 37˚C pentru germenii mezofili.
Ø Mediile de cultură folosite:
• Pentru deteterminarea numărului total de germeni la 22°C si 37°C se
utilizeaza geloza nutritivă 3-5%.
• Se numără coloniile rezultate.
• În apa potabilă, se admit:
• maxim 100 germeni/mL apă la 22˚C
• maxim 20 germeni/mL apă la 37˚C
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
Germenii coliformi
• Au habitat intestinul uman și animal ~90% din flora intestinală saprofită
(există și tulpini patogene de coli, enterotoxic, enteroinvaziv,
enterohemoragic).

• Există 2 indicatori din acest grup cu semnificație sanitară:

Ø Organismele coliforme (coliformii totali)


Ø Escherichia coli termorezistente
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
Organismele coliforme (coliformii totali)
• Sunt tulpini care se întâlnesc și în intestin, dar și în mediul extern
(pe sol și în ape bogate în nutrienți și vegetale în descompunere)
• Sunt indicatori de contaminare fecală a apei.
• Indică eficiența tratării apei
• Indică integritatea sistemului de distribuție.
• Fiind incertă proveniența intestinală a lor s-a găsit un indicator mult mai bun,
care evidențiază doar tulpinile intestinale.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici

Coliformii fecali – termormotoleranți și Escherichia coli

• Se referă la Coliformii fecali și tulpinile de Escherichia coli, care au


capacitatea de a se dezvolta la temperaturi de 44-45°C, prin fermentarea
lactozei.

• Indică în mod cert o contaminare intestinala recentă a apei, cu


risc de transmitere al bacteriozelor.
Apa potabilă

Numărul bacterii coliforme & Escherichia Coli

***Importanta det. E. Coli

o Prezența tulpinilor termorezistente indică o contaminare recentă a apei

Þrisc epidemiologic crescut, deoarece pot exista și alți germeni patogeni

(dacă ar fi o contaminare mai veche ~ risc mai mic pentru că nu rezistă toți germenii)

o Apa are o contaminare fecală


Apa potabilă

Numărul bacterii coliforme & Escherichia Coli


Determinarea Escherichia coli la apa potabila se efectueaza cu
ajutorul sistemului de filtrare prin membrana folosind drept mediu de cultura
lactose TTC agar si confirmare prin reacția indolului (cu reactiv Kovacs).

• Prezența bacteriilor coliforme trebuie confirmată prin:


Ø testul OXIDAZEI
Ø testul INDOLULUI
• Bacteriile coliforme sunt oxidazo-negative și indol-negative;
• Escherichia Coli este oxidazo-negativă și indol-pozitivă
Apa potabilă

TESTUL OXIDAZEI
• Se ia cu ansa o colonie și se pune pe o hârtie de filtru imbibată cu reactiv.

• Dacă nu se produce reacție de culoare => test negativ => bacteriile


coliforme confirmate

• Dacă se colorează violet => test pozitiv => bacteriile coliforme


infirmate
Apa potabilă
TESTUL INDOLULUI
• De pe geloza nutritivă însămânțăm pe bulion-triptofan (un mediu lichid
transparent-gălbui) și incubăm la 44˚C pentru 24 h.
• Ulterior, adăugăm reactiv Kovacs.
• Dacă se colorează în roșu => test indol pozitiv => confirmare E. Coli
• Important: confirmarea pentru E. Coli se face la 44°C!
• E. Coli sunt tulpini termorezistente => păstrează aceasta proprietate 2-3 zile,
după care o pierd și nu se mai pot pune în evidență => proba devine indol - =>
• Îi putem pune în evidență doar prin testul coliformilor pe Agar Lactoza TTC
(*TTC= trifenil-tetrazoli-clotid)
Apa potabilă
Determinarea numărului de bacterii coliforme și a
Escherichia coli din probele de apă,
Metoda membranei filtrante pe mediu Chromogenic
coliform agar (CCA)
• Metoda de determinare a numarului de bacterii coliforme si
Escherichia coli, are la baza filtrarea unor volume dintr-o proba de
apa si/sau dilutiile acesteia, printr-o membrana, si incubarea
membranelor pe un mediu selectiv, diferential, solid (mediu agar
cromogen pentru bacterii coliforme) ceea ce conduce la numararea
coloniilor β-D-galactozidaza si β-D-glucuronidaza pozitive (de la
albastru inchis pana la violet) ca Escherichia coli si numararea
coloniilor β-D-galactozidaza pozitive (de la roz pana la rosu) ca
bacterii coliforme prezumtive.
Apa potabilă
Mediile de cultură folosite

• Medii de cultura pentru izolare: Mediu Chromogenic coliform agar


(CCA) pentru bacterii coliforme
• Medii de cultura pentru confirmare:
-Mediu agar triptona soia (TSA)
- Reactiv pentru reactia oxidazei
Apa potabilă
Identificarea și numărarea coloniilor
• Dupa expirarea timpului de incubare se examineaza membrana si se numara ca
Escherichia coli toate coloniile de culoare albastru inchis pana la violet iar
coloniile de culoare roz pana la rosu ca bacterii coliforme prezumtive.
• Când numarul coloniilor dezvoltate pe suprafata membranei este mic, se
confirma toate coloniile prezumtive suspecte din fiecare din plăcile reţinute
pentru numărarea coloniilor.
• Când, insă, numarul coloniilor dezvoltate pe suprafata membrane este
mare, nu se pot confirma toate, si in acest caz dupa numararea tuturor coloniile
suspecte, se confirma toate coloniile dintr-un sector al membranei.
• Confirmarea coloniilor suspecte se face prin testul oxidazei.
Apa potabilă
Testul de confirmare – testul oxidazei
• Pentru testele oxidazei se fac subculturi, de preferat din toate coloniile
caracteristice sau dintr-un numar reprezentativ.
• Placile cu agar neselectiv se impart in sectoare, in fiecare sector se
insamanteaza cate o colonie suspecta. Placile astfel insamintate se incubeaza la 36
º C ± 2 º C, timp de 21 ± 2 ore dupa care se efectueaza testul oxidazei astfel: o
hirtie de filtru se impregneaza cu 3 picaturi de reactiv pentru testul oxidazei. Cu un
aplicator steril din sticla se ia o colonie si se descarca pe hirtia de filtru impregnata
in prealabil cu reactiv. Aparitia unei culori albastru spre mov in 30 de secunde
inseamna reactie pozitiva. Lipsa coloratiei sau aparitia ei dupa un timp mai
indelungat inseamna reactie negativa.
• Toate coloniile care dau reactia oxidazei negativă sunt bacterii coliforme.
• Bacteriile coliforme totale sunt suma coloniilor oxidazo-negative, de culoare
de la roz la rosu si toate coloniile de culoare de la albastru inchis pana la violet
(date de E.coli).
Escherichia coli

Bacterii coliforme
prezumtive
Apa potabilă

Enterococii
Ø Se pun în evidență pe mediu Slanetz = mediu solid roz transparent.
Ø Se incubează la 37°C pentru 48 h.
Ø colonii roșii = testul de prezumție.
• Confirmare: însămânțarea cu ansa de colonii roșii pe mediu de cultura Agar,
incubare la 44°C pentru 2 h. Apare un halou neagră în jurul unei colonii roșii.
Importanța determinării:
• Dacă se identifică și se confirmă prezența enterococilor => contaminare
fecală => apa nu este potabilă
• Enterococii aduc informații suplimentare: enterococii sunt tot intestinali,
termorezistenți, dar rezistă mai mult timp în apă decât E. Coli
Apa potabilă

Enterococii

• Dacă sunt prezenți și enterococi pe lângă E. Coli în probă


=> boli infecțioase bacteriene transmise hidric + boli virale
• ~ Enterovirusurile rezistă în apă mult mai mult decât enterobacteriile
• Ex.: are loc o epidemie de dizenterie și, ulterior, la o distanță apare o
epidemie de hepatită, atât forme icterice, cât și formele anicterice.
• E. Coli si enterococii trebuie să fie absenți pentru ca apa să fie potabilă!!!
• Determinările de mai sus se fac in mod curent.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
Streptococii fecali

• Cuprind toți streptococii prezenți în intestinul omului și al animalelor și care


prezintă antigenul de grup D.
• Rezistă mai mult în apă decât germenii coli și se pot diferenția tulpinile
umane de cele animale.
• Indică o contaminare recentă, masivă.
• Au devenit și ei, alături de germenii coli si mezofili, indicatori de
rutină în analiza bacteriologică a apei.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
Germenii sulfito – reducători

• Sunt anaerobi sporulați, de proveniență intestinală sau tulpini care se găsesc


și pe sol în mod natural.
• Prezența lor în apă indică o contaminare foarte veche și riscul
existenței și altor germeni patogeni rezistenți la clorinare
(cryptosporidium).
• S-au introdus recent în monitorizarea de rutină a sistemului de distribuție,
când sursa de apă este de suprafață.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici

Pseudomonas aeruginosa

• Este folosit ca indicator de contaminare a apei in condiţiile


îmbutelierii în recipiente insalubre.

• Fiind un germene rezistent la clor, prezența lui în apă indică, condiţii


insalubre ale piscinelor.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
Bacteriofagii enterici

• Sunt particule virale care se dezvoltă pe seama bacteriilor omoloage,


multiplicându-se pe baza genomului bacterian, după care bacteria este
distrusă.
• Este o analiză complementară, căutându-se în apă bacteriofagul anti –
Escherichia coli și bacteriofagul anti – Salmonella typhi.
• Prezența lor în apă indică o contaminare intestinală cu risc de
transmitere a enterovirusilor, care rezistă în apă mai mult decât
bacteriile și la dezinfecția cu clor.
Apa potabilă
Parametrii indicatori, bacteriologici de potabilitate,
conform Legii nr. 458/2002

Parametrul/unitate de măsură Valoarea admisă

Număr de colonii la 22°C/ml Nedetectabili la 100 ml


Număr de colonii la 37°C/ml 20
Bacterii coliforme/100ml 0
Escherichia coli/100ml 0
Enterococi (streptococci fecali)/100ml 0
Clostridium perfringens/100ml 0
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici

• Timpul de la recoltare până la analiza bacteriană:

o Pentru numărul total germeni la 22˚C și 37˚C: maxim 8 h

o Pentru germeni intestinali: maxim 12 h

o Pentru analiza parazitologică (ex. Giardia, Criptosporidium): maxim 24 h


PARAMETRII DE CALITATE
AI APEI POTABILE

BOLILE INFECȚIOASE ȘI PARAZITARE


TRANSMISE HIDRIC
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici

Bolile infecțioase și parazitare transmise hidric –


se pot manifesta sub formă de:

A) cazurile sporadice (izolate)


B) boli endemice
C) epidemia hidrică
PARAMETRII DE CALITATE
AI APEI POTABILE

BOLILE INFECȚIOASE ȘI PARAZITARE


TRANSMISE HIDRIC
CAZURILE SPORADICE
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici

a) CAZURILE SPORADICE (IZOLATE)

Ø apar la persoane cu sensibilitate crescută la respectivul patogen


Ø apar frecvent la sugari, copii mici, vârstnici, persoane cu tare digestive,
Ø în condiții în care NU se atinge doza infectantă sau sunt factori favorizanți
legați de unele zone insalubre cu rol în apariția diareei turistilor, foarte greu
se corelează cu calitatea apei consumate.
Ø apar tulburări gastrointestinale nespecifice doar la persoanele sensibile.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
Cazurile sporadice (izolate) - pentru apariția bolii sunt necesare urm. condiții:
• sursa de contaminare (omul sau animalul) - există situații când organisme
din apa, care nu sunt patogene, se multiplică în exces în apă caldă (amibe de
apă dulce) și penetrează prin pedunculii olfactivi, cauzând o meningită fatală.
• atingerea unei doze infectante în apă - variază între sute, mii și milioane de
germeni.
• viabilitatea germenilor patogeni în apa - dependentă de suportul nutritiv,
antagonismul microbian determinat de flora autohtonă, proprietățile fizico-
chimice ale apei.
• existența unei căi de transmitere (în acest caz apa).
• organismul receptor.
PARAMETRII DE CALITATE
AI APEI POTABILE

BOLILE INFECȚIOASE ȘI PARAZITARE


TRANSMISE HIDRIC
BOLILE ENDEMICE
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici

b) BOLI ENDEMICE – dizenteria/parazitozele

Ø Endemia hidrică este definită ca un nivel de morbiditate mai crescut prin


afecțiuni cu poartă de intrare digestivă, care apare permanent într-o zonă
geografică, legată de aprovizionarea cu apă.

Ø Acest fenomen apare în zone în care se folosește apa care nu corespunde


condițiilor de potabilitate (în special, apa de suprafață incorect dezinfectată/
nedezinfectată) = zone endemice.
PARAMETRII DE CALITATE
AI APEI POTABILE

BOLILE INFECȚIOASE ȘI PARAZITARE


TRANSMISE HIDRIC
EPIDEMIA HIDRICĂ
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
c) EPIDEMIA HIDRICĂ – cea mai gravă formă

• Apare un număr crescut de cazuri de un anumit tip (ex. dizenterie,


salmoneloză) la toate persoanele care au consumat apă dintr-o sursă
contaminată.

Particularitate: Cazurile apar într-un interval de timp mai scurt decât durata de
incubație a bolii (spre deosebire de alte căi de transmitere)

• Cauza epidemiilor hidrice este dată tot de dezinfecția incorectă/accidente


în sistemul de distribuție a apei.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
c) EPIDEMIA HIDRICĂ –

Pentru a preveni transmiterea acestor boli infecțioase este monitorizată


calitatea apei potabile prin

ANALIZE BACTERIOLOGICE, care se fac:

§ într-un număr de puncte permanente

§ la un anumit interval de timp calculat în funcție de numărul de


consumatori de apă

(crește numărul de consumatori => se scurtează intervalul).


Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
c) EPIDEMIA HIDRICĂ –

Epidemiile hidrice reprezintă din totdeauna o forma gravă de manifestare a


bolilor infecțioase datorită numărului mare de cazuri și a măsurilor, care
vizează toți consumatorii de apă, indiferent de vârstă, sex, ocupație.

• După precizarea diagnosticului, trebuie stabilită CALEA DE TRANSMITERE -


aceleași afecțiuni se pot transmite și pe cale alimentară, iar măsurile de
combatere sunt diferite.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
Elemente de diagnostic într-o epidemie hidrică - obligatoriu:
Caractere principale
Ø Debutul exploziv – apariția unui număr foarte mare de cazuri într-un
interval de timp mai scurt decât perioada de incubație a bolii.
Ø Populația receptivă - sunt cuprinse toate persoanele receptive (care nu au
imunitate specifică și au consumat apa contaminată), indiferent de vârstă,
sex sau profesie. Receptivitatea populației față de enteroviroze este mai mică
și mult mai mare față de enterobacteriacee.
Ø Caracterul topografic – cazurile de boală se suprapun pe aria de alimentare
cu apa din aceeași sursă sau într-o zonă a sistemului de distribuție, unde sunt
probleme în aprovizionarea populației.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici

Caractere principale
• Lipsa sezonalității naturale a bolii - se referă la bolile transmise pe cale
digestivă (toxiinfecții alimentare), care apar cu o frecvență mai mare vara,
dar pe cale hidrică pot apare în orice sezon și mai ales iarna, când viabilitatea
germenilor în apă este mai mare, iar eficiența dezinfecției este mai mică.
• Încetarea epidemiei este bruscă - cu scăderea numărului cazurilor de boală,
după oprirea procesului de contaminare, însă mai apare un număr mic de
cazuri transmise prin contact direct, interuman, pe cale fecal-orală,
reprezentând coada epidemică.
Apa potabilă
Indicatorii bacteriologici
Caractere secundare:
• Creșterea frecvenței bolilor diareice acute, nespecifice, într-o colectivitate
poate anunța izbucnirea unei epidemii hidrice de hepatită. Aceste cazuri
sunt date de flora intestinală asociată germenilor patogeni, la persoane cu
apărare imunitară scazută.
• Identificarea germenilor patogeni în apă NU este obligatorie, dar
modificarea indicatorilor de poluare fecală este evidentă.
• Apariția unei defecțiuni în sistemul de aprovizionare cu apă este de cele
mai multe ori decelată, dar sunt situații când contaminarea se produce la
distanță, sau prin infiltrare în conducte foarte vechi, distribuție cu
intermitente.
Lucrări practice
2019

MULȚUMESC!

S-ar putea să vă placă și