Ingeniero en Gestión Ambiental: Minor "LENTEJIT A"

-r MO &AI..
a·A
~15.9 DOMICtLfO
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA
FACULTAD DE AGRONOMIA
ESCUELA DE FORMACIÓN PROFESIONAL DE INGENIERIA EN

GESTION AMBIENTAL
DETERMINACION DE LA TOLERANCIA A PLOMO (Pb),

CADMIO (Cd) Y MERCURIO (Hg) DE Pistia stratiotes
"HUAMA", Eichhornia crassipes "PUTU. PUTU" Y Lemna
minor "LENTEJITA".
TESIS
Para Optar el Título Profesional de:
INGENIERO EN GESTIÓN AMBIENTAL

Presentado por el Bachiller en lng. en Gestión Ambiental
CRISTHIAN BENJAMIN GOMEZ RIOS

Promoción: 2007-2011
!quitos - Perú
l)t_)N.,\UU POR: -~ 2013
Oll<;$J,'b!J /.3 .. ~oHQ ~
,~, ZL. t:f) J • <)_~ L"1
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA
FACULTAO DE AGRONOMIA
Tesis aprobada en sustentación publica eJ dia 31 de agosto

del 20121 por el jurado Ad-hoc nombrado por la eecuela de
formacf6n profesional ingenierfa en gestión ambiental, para
optar el titulo de:
INGENIERO EN GESnON AMBIENTAL
DEDICATORIA
~ A Dios por estar presente en todo momento de mi vida, por darme
fuerza, sabiduría, inteligencia, y sobre todo por cuidarme y ser mí
gura en el camino del éxito.
~ A mis abuelos y tíos, por brindarme el apoyo, en lo moral,
económico, y por estar presente en toda la trayectoria de mí existir,
y por brindarme toda la confianza hacia mí persona.
~ A Eurídice Maria Tuesta Bardales,la felicidad que le faltaba a mi
vida, por ayudarme a terminar este presente trabajo de
investigación, por el gran apoyo, dedicación, y paciencia, dándome
fuerzas todos los dfas para no darme por vencido .
./ A mi Tía Socorro Gómez Alvesmilho; y a mi Abuela Florinda
Alvesmilho de Gómez por el gran apoyo moral, y sobre todo
económico, y por la gran confianza que tiene hacia mi persona y
hacerme entender que todo se puede en esta vida, con dedicación
y voluntad, y amor de· Dios todo se es posible~

AGRADECIMIE.NTO
./ Mi agradecimiento a los profesores de la Universidad Nacional de
la Amazonia Peruana-Facultad de Agronomía, por sus sabias
enseñanzas que nos brindaron, para hacer de cada uno de
nosotros profesionales al servicio de nuestra Región .
./ Mi agradecimiento al Blgo. Pedro Adrianzén Julca, por su valiosa
participación en el asesoramiento, con orientaciones específicas y
precisas para culminar el presente trabajo de tesis.

INDICE GENERAL
INTRODUCCIÓN 14
CAPITULO 1: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 18
1.1 Problema, hipótesis y variable 18
1.1.1 Problema 18
1. 1. 2 Hipótesis de la investigación 19
1.1.3 Identificación de las variables 19
1.1.3.1 Variable dependiente 19
1.1.3.2 Variable independiente 19
1.1.4 Operacionalidad de las variables 19
1.2 Objetivos de la Investigación 21
1.2.1 Objetivo general 21
1.2.2 Objetivos especfficos 21
1.3 Justificación e importancia 21

CÁPifui.ó íi: METODOLOGTA 22
2.1 Ubicación del área de estudio 2~
2.2 Recolección del Material Biológico 22
2.3 Aclimatación de las macrófitas 23
2.4 Preparación de Diluciones 23
2.5 Estandarización del Control Negativo o testigo 24
2.8 Ensayo de toxicidad aguda de macrófitas 24
2. 7 Variables, promedio de ralees y número de fronc:lts 25
2.8 Aiiillsls y procesamiento de datos 26
2.9 Análisis de los metales pesados 26
CAPITULO 111: REVISIÓN DE LITERATURA 32
3.1 Marco teórico t2
:í.2 Marco conceptual :íS

eAPITüLO IV: ANALISIS Y PRESENTACION DE LOS RESULTACOS 43
4.1 Resultados de controles
A Control negativo
4.2 Resultados y discusión de los ensayos de toxicidad
A. Para Lemna minor
S. Para Pistia sfratiotes 55
C. Para Eichhomia crassipes 67
4,3 Análisis de metales pesados 78
CAPITULO V: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 86
5.1 Conclusiones 85
5.2 Recomendaciones 86
lndice de cuadros
Cuadro 1 Análisis de varianza para número frondes de L. minar con
Mercurio 44
Cuadro 2 F'rueba de Tukey para número de frondes de L. minar con
Mercurio 45
Cuadro 3 Análisis de varianza paralongitud de rafees de L. minar con

46
Mercurio
Cuadro 4 Prueba de Cunean para longitud de rafees de L. minar con

46
Mercurio
Cuadro 5 Análisis de varianza para números frondes de L. minar con

47
Cadmio
Cuadro aPrueba de Tukey para números frondes de L. minar con

48
Cadmio
Cuadro 7 Análisis de varianza para longitud de raíces de L. minar con

49
Cadmio
Cuadro 8 Prueba de Cunean para longitud de raíces de L minar con

49
Cadmio
Cuadro 9 Análisis de varianza para números de frondes de L. minar

50
con Plomo
Cuadro 1OPrueba de Tukey para números de frondes de L minar

51
con Plomo
Cuadro 11 Análisis de varianza para longitud de rafees de L. minar

52
con Plomo
Cuadro 1~ Prueba de Ouncan para longitud de rafees de L. minor con
Plomo 52
Cuadro 13 Análisis de varianza para numeros frondes de P. strafiofes

56
con Mercurio
Cuadro 14 Prueba de Tukey para números frondes de P. stratiotes

56
con Mercurio
Cuadro 15 Análisis de varianza para longitud de raiees de P.

57
stratiotes con Mercurio
Cuadro 16 Prueba de Ouncan para longjtud de rarees de P. stratiotes

58
con Mercurio
Cuadro 17 Análisis de varianza para números de frondes de P.

59
stratiotes con Plomo
Cuadro 18 Prueba de Tukey para.números de frondes de P: stratiotes

59
con Plomo
Cuadro 19 Análisis de varianza para longitud de raices de P.

60
stratiotes con Plomo
Cuadro 20 Prueba de Ouncan para longitud de rafees de P. stratiotes

61
con Plomo
Cuadro21 Análisis de varianza para números frondes de P. stratiotes

62
con Cadmio
Cuadro 22 Prueba de Tukey para numeros frondes de- P. stratiotes

62
con Cadmio
Cuadro 2~Análisis de varianza para longitud de raiees de P. stratiotes S~

con Cadmio
Cuadro 24 Prueba de Cunean para longitud de rarees de Pistia
stratiotes con Cadmio
Cuadro 25 Análisis de varianza para nümeros de frondes de E.
crassipes con Mercurio 67
Cuadro 26 Prueba de Tukey para numero de frondes de E crassipes
con Mercurio 68
Cuadro 27 Análisis de varianza para longitud de rafees de E
crassipes con Mercurio 69
Cuadro 28 Prueba de Cunean para longitud de rafees de E. crassipes
con Mercurio 69
Cuadro 29 Análisis de varianza para nümeros frondes de E. crassipes
con Cadmio 70
Cuadro 30 Prueba de Tukey para nümeros frondes de E. crassipes
con Cadmio 71
Cuadro 31 Análisis de varianza para longitud de rafees de E.
crassipes con Cadmio 72
Cuadro 32 Prueba de Cunean para longitud de rafees de E. crassipes
con Cadmio 72
Cuadro 33 Análisis de varianza para números de frondes de E.
crassipes con Plomo 73
Cuadro 34 Prueba de Tukey para números de frondes de E. crassipes
con Plomo 74
Cuadro 35 Análisis de varianza para longitud de rafees de E.
crassipes con Plomo 75
Cuadro 36 Prueba de Ouncan para longitud de raíces de E. crassipes
con Plomo 75
Cuadro '!J7. Evaluación deLemna minorcon Mercurio
78
GLJadra 38 EvaiLJaGión de l.:emna minor Gon Gadmio
78
Cuadro 39 Evaluación de Lemna minar con Plomo 78
Cuadro 40 Evaluación de Pistia stratiotes con Cadmio

19
Cuadro 41 Evaluación de Pistia stratiotes con Mercurio 79
Cuadro 42 Evaluación de Plstia strafiotes con Plomo 79
Cuadro 43 Evaluación de Eichhornia crassipes con Cadmio 80
Cuadro 44 Evaluación de Eichhornia crassipes con Mercurio

eo
Cuadro 45 Evaluación de Eichhornia crassipes con Plomo 80
Cuadro 46 i olerancia de las macr6fitas a los metales
Mercurio, Plomo y Cadmio (mg/1) 81

indice de figuras
Grafico 1 Número de frondes de Lemna minor por tratamientos con
Mercurio 44
Grafico 2 Longitud de rafees de Lemna minor por tratamientos con
Mercurio 45
Grafico 3 Número de frondes de Lemna minor por tratamientos con

Cadmio 47
Grafico 4 Longitud de rafees de Lemna minor por tratamientos con
Cadmio 48
Graflco 5 Número de frondes de Lemna minor por tratamientos con
Plomo 50
Grafico GLongitud de rafees de Lemna minor por tratamientos con
Plomo 51
Grafico 7Número de frondes de Pistia stratiotes por tratamientos
con Mercurio 55
Grafico 8 Número de frondes de Pistia stratiotes por tratamientos
con Mercurio 57
Grafico 9 Longitud de raíces de Pistia stratiotes por tratamientos con
Plomo 58
Grafico 10Número de frondes de·Pistia stratiotes por tratamientos
con Plomo 60
Grafico 11 .Longitud de rafees de Pistia stratiotes por tratamientos
con Cadmio 61
~raflco 12 Número de frondes de Pistia stratiotes por tratamientos
con Cadmio 63
Grafico 13 Longitud de rafees de Eichhomia crassipes por

tratamientos con Mercurio 67
Grafico 14 Numero defrondesde Eichhomia crassipes por
tratamientos con Mercurio 68
Grafico 15 Longitud de rafees de Eichhomia crassipes por
tratamientos con Cadmio 70
Grafico 16 Numero de, frondes de Eichhomia crassipes por
tratamientos con Cadmio 71
Grafico 17 longitud de rafees Eichhomia crassipes por
tratamientos con Plomo 73
G"rafico 1S Numero de frondes de Eichhomia crassipes por
tratamientos con Plomo 74

INTRODUCCION
Durante siglos el hombre ha explotado metales como oro, plata, cobre,
cinc, cadmio, entre otros, que se extraen y refinan en más de 7000
compañías mineras y refinadoras del mundo entero. Por este mismo
motivo, el agua es considerada con mucha razón la víctima más
común del mal manejo de los residuos tóxicos generados por dicha
industria (Torres et al, 2007).
En nuestros ríos amazónicos existe una gran contaminación por
metates pesados como mercurio, (de manera directa en el proceso de
separación del oro) Cadmio y plomo, (de manera indirecta en
combustibles y aceites liberados al rio) a causa de la minería acuífera
informal. tstos constituyen un riesgo serio para el ecosistema
acuático, ya que son sustancias con una gran estabilidad química ante
los procesos de biodegradación, por lo que los seres vivos son
incapaces de metabolizarlos, generándose una contaminación por
bioacumutación y un efecto multiplicador en la concentración del
contaminante en la cadena trófica
La capacidad de acumular metales no es caracterfstica común en la
mayoría de las plantas, por el contrario es fruto de una respuesta
evolutiva, ya que la ocurrencia en forma natural de niveles altos de

15
metales en la biosfera es esporádica. Particularmente entre las plantas
acumuladoras de metales, se han encontrado especies que poseen la
capacidad de acumular cantidades extraordinarias que se elevan
notablemente sobre ·los índices considerados como tóxicos para el
reino vegetal. A este tipo de plantas se le ha denominado
hiperacumuladoras de metales (Torres et al, 2007), Estos metates
pesados pueden ser absorbidos por plantas y animales, hasta
concentrarse en sus tejidos a niveles tóxicos. Tal situación puede ser
una posible vía de entrada de estos metales en la cadena trófica,
directa o indirectamente. (Mortvedt, 1996; Chien et al., 2003).
Experiencias de otros países (bahía de Minamata - Japón) nos
enseña lo catastrófico que puede ser estos elementos inorgánicos.
La región Loreto no está exenta de estos problemas de
contaminación, (en particular la ciudad de lquitos), sobre todo
considerando que su población se ha venido incrementando en el
tiempo, y por ende sus actividades comerciales, industriales, etc.,
trayendo consigo la contaminación de sus recursos hidricos. Por lo
que, es de suma importancia buscar alternativas no solo para mitigar
el problema, sino también para remediar lugares o medios que ya
están contaminados.
16
Una de esas alternativas es la fitorremediación que puede definirse
como una tecnología sustentable que se basa en el uso de plantas
para reducir in situ la concentración o peligrosidad de contaminantes
orgánicos e inorgánicos de suelos, sedimentos, agua, y aire, a partir
de procesos bioquímicos realizados por las plantas y microorganismos
asociados a su sistema de raíz que conducen a la reducción,
mineralización, degradación, volatilización y estabilización de los
diversos tipos de contaminantes.
Debido a las ventajas que ofrece, en los países desarrollados ha
dejado de ser una opción potencial de tratamiento para convertirse en
una tecnología aplicable, eficiente para remover, transformar o
degradar diversos tipos de contaminantes. Particularmente la
fitoextracción y rizofiltración son las estrategias de fitorremediación
más desarrolladas, tanto que actualmente son comercializadas por
algunas compañias de remediación ambiental en Europa y Estados
Unidos.
El éxito de cualquier estrategia de fitorremediación depende de la
identificación de especies de plantas adecuadas (tolerantes}, que
acumulen altas concentraciones de metales y produzcan grandes
cantidades de biomasa. Pocas son las especies de plantas adaptadas

17
para sobrevivir en ecosistemas contaminados con altas
concentraciones de metales.
Por lo antes mencionado, es que este trabajo de investigación busca
determinar la tolerancia de tres especies vegetales amazónicas con
potenciales cualidades para la retención de metales pesados (Cd, Hg,
Pb) lo cual no solo servirá como información cientifica para posteriores
trabajos sino también servirá como una alternativa de tecnologfa
limpia.
CAPITULO 1
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
1.1 Problema, hipótesis y variables
1.1.1 Problema
El desarrollo regional en las últimas décadas ha estado caracterizado
por un incremento rápido en la utilización de sustancias químicas
asociadas con diferentes tipos de actividades: industrial, urbana,
comercial y agrícola. Los estimados de compuestos orgánicos y de
metales liberados en el ambiente son del orden de algunos miles de
toneladas por año. No hay dudas de que estas sustancias y en estas
cantidades deben tener algún efecto sobre el ambiente y los seres
humanos.
El creciente desarrollo urbano y las actividades extractivas en la
ciudad de !quitos han traído consigo la aparición de una cantidad
apreciable de sustancias químicas tóxicas, (entre ellos Jo metales
pesados) lo cual afecta tanto a la población como al ambiente en el
que se encuentra inmerso, particularmente los suelos y cuerpos de
agua.
19
Entonces nos planteamos la interrogante ¿Qué especies de plantas
amazónicas acuáticas son eficientes para biomonitoreo y/o
fitorremediación de cuerpos aguas contaminados con Hg, Pb, Cd?
1.1.2 Hipótesis de la investigación
• Las especies acuáticas Pistia stratiotes "huama", Eichhomia-
crassipes "putu putu" y Lemna minor "lentejita" son tolerantes a la
presencia de metales pesados.
1.1.31dentificación de las variables
1.1.3.1 Variable Dependiente:
• Concentración de Hg, Pb, y Cd en las macrófitas.
• Efectos fitotóxicos en las macrófitas.
1.1.3.2 Variables Independientes:
• Concentración de Hg, Pb, y Cd de la solución problema
1.1.4 Operacionalidad de las variables
la presencia de una macrófrta acuática, y los diferentes procesos
biológicos que esta manifiesta durante su desarrollo contribuye a la

20
disminución de la concentración de metales pesados en aguas
contaminadas.
Variables Independientes:
• Concentración de Cadmio, Mercurio, plomo en las soluciones
Cadmiomg/1
Mercurio mgll
Plomo mgll
Variable Dependiente:
• Estado de la especie vegetal
Mortandad
• Efectos fitotóxicos.
Inhibición de la raíz
Inhibición de la cantidad de frondas
• Concentración de metales en las macrófitas
Análisis de cadmio mg/1
Análisis de mercurio mgll
Análisis de plomo mgll

21
1.2 Objetivos de la investigación
1.2.1 Objetivo general:
• Determinar la tolerancia fitotóxica a Hg, Pb, y Cd de Pistia
stratiotes, Eichhomia crassipes y Lemna minor
1.2.2 Objetivos especificas
• Evaluar los efectos fitotóxicos de tres macrófitas que crezcan
espontáneamente en aguas contaminadas.
• Evaluar el efecto de diferentes concentraciones de metales
pesados (Hg, Pb, y Cd) sobre el crecimiento, tolerancia y
capacidad de acumulación de 3 macrófitas.
1.3 Justificación e importancia
La fJtorremediación representa una tecnología limpia, sustentable y de
bajo costo para la restauración de ambientes y efluentes
contaminados.La finalidad de este proyecto es determinar la
capacidad de tolerar· cadmio, plomo y mercurio de tres macrófitas con
cualidades potenciales para la fitorremediación, no solo para la
aplicación como tecnologia limpia, sino como información básica para
otras aplicaciones como la de ingeniería genética, biomonitores, etc.

CAPITULO 11.
METODOLOGIA
2.1 Ubicación del área de estudio
La presente práctica se realizó en las instalaciones del Centro de
Investigación de Recursos Naturales de la Amazonía (CIRNA) de la
Universidad Nacional de la Amazonia Peruana (UNAP); situada en el
AA.HH. Nuevo San Lorenzo. Psje. los paujiles S/N, San Juan -
Maynas -loreto.
2.2 Recolección del Material Biológico
Se hizo una evaluación de los posibles lugares de donde se podía
extraer numerosos ejemplares para los diferentes tratamientos. Las
macrófitas, fueron recolectadas de los estanques de la Piscigranja
Experimental Quistococha, UNAP, ubicado en el kilómetro 6 de la
carretera !quitos- Nauta, con 14 hectáreas de terreno y 5 hectáreas
de espejo de agua. Estas muestras se recolectaron teniendo en
cuenta su buen aspecto, similitud en tamano y color de hojas, así
como también el aspecto de las raíces. Estas posteriormente fueron
trasladadas al invernadero del CIRNA- UNAP.

23
2.3 Aclimatación de las macrófitas
Las macrófitas recolectadas fueron lavadas con agua destilada,
aisladas y transferidas a baldes con agua de grifo, y luego sometidas a
24 horas de aclimatación en el invernadero.
2.4 Preparación de Diluciones
Para Ja obtención de las concentraciones de Mercurio (Hg), Cadmio
(Cd) y Plomo (Pb) seleccionadas se preparó soluciones patrones, a
partir de las sales de; cloruro de mercurio, nitrato de plomo y sulfato
de cadmio, los cualesfueron diluidos en agua destilada, con el fin de
obtener las concentraciones propuestas para los ensayos.
El objetivo de haber realizados los ensayos preliminares fue de
evaluar si las concentraciones de los metales elegidos inicialmente
fueron las correctas para un ensayo de este tipo, puesto que la
concentración uno (C1) debe ser tat que casi ningún organismo se
afecte, y la última concentración (C5) sea tal que casi todos los
organismos se vean afectados.

24
2.5 Estandarización del Control Negativo o testigo
La estandarización del control negativo se hizo teniendo como
referencia el medio de Hutner, aparte de la solución de nutrientes se
tuvo también una evaluación con agua destilada y agua de cano, para
observar la diferencia del crecimiento de Jas macrófitas con respecto a
la solución de nutrientes. No hubo diferencias significativas entre agua
destilada y el medio nutritivo. Por lo cual se utilizó agua destilada
como testigo.
2.6 Ensayo de toxicidad aguda de macrófitas
Para la preparación de los bioensayos se usó las soluciones patrones,
El efecto del cadmio (CdS04, 80% de pureza), mercurio (HgCI2,
99.55% de pureza,) y plomo (PbN2, 99% de pureza,) de Jos cuales se
prepararon las soluciones.
Para las concentraciones que se empleó en los ensayos preliminares
se tomó de referencia el Decreto Supremo No 010~2011-MINAM, como
punto de partida. Sin embargo es bueno mencionar que muchas
macrófrtas no respondieron sino a concentraciones más elevadas.
Las macrófrtas fueron adquiridas un dfa antes de Ja realización de los
bioensayos. Se empleó una serie de 5 diluciones por tratamiento,
seleccionados del ensayo preliminar, con su respectivo control

25
negativo, cada uno con 3 réplicas el cual permitió establecer el
intervalo de concentración conveniente para la determinación.Para los
tratamientos con Lemna minor se empleó una bandeja de 30 x 30 cm,
se diseñó una separación de 3 espacios, permitiendo alojar 3
individuos por bandeja, con dos frondas cada uno.
Para los tratamientos con Eichhomia crassipes y Pistia stratiotes se
empleó un balde de 15 litros por tratamiento, todos los tratamientos se
colocaron a- nivel del suelo, bajo condiciones ambientales del
invernadero. Las evaluaciones fueron cada 48 horas (cada 2 días),
dentro de las cuales se evaluó los efectos fitotóxicos, y al término de la
evaluación (alavo día). Dos veces al día durante el periodo de prueba,
se examinaron los recipientes para determinar si se evidenciaban
signos de fitotoxicidad y/o pérdida de solución por evaporación.
2.7 Variables, promedio de raices y número de frondes
Se registró con ayuda de un vernier el número de tos frondes y
longitud de las raíces de cada uno de los ejemplares. Esta evaluación
se llevó a cabo al finalizar los ensayos, registrándose tos datos en la
respectiva ficha. Además se registró a cada uno de los ejemplares que
muestren ciertos daños fisiológicos como por ejemplo cambio de
coloración en las hojas y desprendimiento de raíces.

26
2.8 -Análisis y procesamiento de datos
Los datos se analizaron estadfsticamente con el programa PAWS 19.,
donde se aplicó fa prueba deanálisis de varianza (ANOVA), luego se
sacó el coeficiente de variación lo cual determino la posterior prueba a
utilizar, se utilizó la prueba de rangos múltiples de Duncan o tukey.
2.9 Análisis de los metales pesados
La capacidad de retención de las macrófitas se determinó en las
siguientes condiciones: a cada tratamiento se le practicó la
cuantificación de los metales por un periodo de 8 días. Primero se tuvo
que secar la biomasa, para ello, las macrófitas se separaron y se
llevaron a estufa a una temperatura de 75-80 °C hasta peso constante,
luego fue sometida a la mufla a 700 co durante tres horas, para
transformar en cenizas las muestras. Luego se realizó la digestión
ácida asistida (HCI 2M) durante 30 minutos para la previa extracción
de los metales; la determinación de Cd se realizó por espectrometría
UV lo mismo se aplicó para pJomo y Hg. Los análisis de metales
pesados se realizaron según los métodos de la USEPA.

27
A. MERCURIO
A.1 Reactivos
• Solución estándar de mercurio (10 mg/1) Se disolvió 0.1354 g de
cloruro de mercurio, HgCI2, en 700ml de agua destilada, se añade
1.5ml de ácido nítrico concentrado y se diluye a 1 litro.
• Solución de, permanganato de potasio al 5%. Se disolvió 5 g de
permanganato de potasio KMn04 en 100 mi de agua destilada.
• Ácido sulfúrico concentrado
• Solución de peroxidisulfato de potasio al 5%a Se disolvió 5 g de
peroxidisulfato de potasio K2S208, en 100 mi de agua destilada.
• Solución de clorhidrato de hidroxilamina. Se disolvió 50 g de
clorhidrato de hidroxilamina NH20H-HCL, en 100 mi de agua
destilada.
• Solución de ditizona. Se disolvió ditizona en 1 litro de cloroformo
grado reactivo CHCL3
• Ácido sulfúrico 0.25N. Se añadió 7 mi de ácido sulfúrico concentrado
a 700 mi de agua destilada. Se enraza a un 1 litro.
• Solución de bromuro de potasio. Se disolvió 40 g de bromuro de
potasio, Kbr, en 100 mi de agua destilada.
• Cloroformo, CHCL.
28
• Solución buffer de fosfato - carbonato. Se disolvió 150 g de fosfato
dibasicododecahidratado, Na2HP04 Y 38 g de carbonato de potasio
anhidro, K2C03, en 1 litro de agua destilada.
• Sulfato de sodio anhidro. NaS04
A.2 Procedimiento.
Se preparó 6 vasos precipitados de soluciones estándares (0, 2, 4, 6, 8
y 1O mi) de mercurio, luego a cada uno se agregó 1mi de solución de
K2Mn04 y 1O mi de H2S04, concentrado. Se mescla y se lleva a
ebullición. Luego de enfriar se añaden 5 mi de solución de 2S208.
Luego se reduce el residual de KMn04 adicionando gotas de NH20H-
HCL (hasta que desaparecer el color rosado).
Luego se transvasaron las muestras y se agregaron 25ml de ditizona y
se agito. Luego se transvaso la capa de CHCL3 que se presentaron de
cada muestra a un envase de 250ml. En ese envase se añadió 50 mi
de H2S04 0.25N Y 1Oml de solución de KBr. Se agito y se descarta la
fase inferior de CHCI3.
Luego se añadió 20 mi de la solución de fosfato-carbonato, 1O mi de la
solución de ditizona y se agita. Luego se transfirió a los envases para el
respectivo análisis a 490nm y se preparó la curva de calibración.

29
B. CADMIO
8.1 Reactivos
• ácido tartárico al 2%,
• solución de NaOH al 40 %
• clorhidrato de hidroxilamina al 2%
• ditizona en cloroformo
8.2 Procedimiento
Se pipeteo 25 mi de muestra de O, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1 mg de cadmio
en vasos precipitados y se ajustó su pH a 3 aprox. Se afíadió 1mi de
una solución de ácido tartárico al 2%, 5 mi de solución de NaOH al 40
% KCN al 1%, 1 mi de clorhidrato de hidroxilamina al 2% y 15 mi de una
solución que contenga tOO mg de difeniltiocarbazona (ditizona) en
cloroformo, luego se agito. Posteriormente se dreno la capa de
cloroformo en un segundo vaso precipitado con 25 mi de áddo tartárico,
se extrajo ta solución del primer vaso y se agregó 10 mi de cloroformo,
lo cual se añado al segundo vaso.
Después de agitar se descartó la capa de cloroformo. Se añadió 0.25 mi
de ácido tartárico al 2%, luego 15 mi de una solución de 1O mg ditizona
en 1 litro de cloroformo, además 5ml de solución de NaOH al40% -KCN

30
al 0.05% e inmediatamente se procedió a agitar. Se Midió la
absorbencia a 518 nm.
C. PLOMO
C.1 Reactivos
• Solución alcalina de cianuro. Se disolvió3 gr de sulfito de sodio,
(Na2S03) en una mezcla de 340 mi de hidróxido de amonio, y 680 mi
de agua destilada. Se at'íadió 30 mi de cianuro de potasio de 1O gr/1.
• Hexametafosfato de sodio. 100gr/l, se disolvió 10 gr de
hexametafosfato de sodio en 100 mi de agua destilada.
• Hidróxido de amonio0.5N, Se Diluyo 3.5 mi de hidróxido de amonio a
100 mi con agua.
• Ácido clorhídrico
• Cloroformo
• Solución stock de ditizona 1g/1 en cloroformo.
• Solución de trabajo de ditizona. Se transfirió 6ml de solución stock
de ditizona en cloroformo a un vaso precipitado de 1OOml. Se añadió
1O mi de hidroxico de amonio y se agita. Se rechaza la capa inferior
de cloroformo y se filtra la capa acuosa.
• Solución de clorhidrato de hidroxilamina. Se disolvió 1O gr de
clorhidrato de hidroxalamina en 1 litro de agua destilada.

31
• Solución stock de plomo, Se disolvió 1.599 gr de nitrato de plomo
Pb (N03), en agua destilada, se anaden 1Oml de ácido nJtrico y luego
se enraza a 1 litro.
• Solución de trabajo de plomo, Se diluyen 1O mi de solución stock a
un litro.
C.2 Procedimiento
Se añadió 20 mi de la solución stock de ditizona en cloroformo, se
agito y se dejó que las fases se separen, para luego desechar la capa
de cloroformo. Se procedió a repetir la extracción con 5 mt más de
solución stock de ditizona.
A la solución acuosa se añadió 1 mi de solución de hexametafosfato de
sodio, 1 mi de solución de clorhidrato de hidroxilamina, 30 mi de
solución alcalina de cianuro, 0.5 mi de solución de trabajo de ditizona, y
1O mi de cloroformo. Luego se agito y se dejó que las fases se separen,
para posteriormente medir la absorbencia de la solución a 51 O nm

CAPITULO 111
REVISIÓN DE LITERATURA
3.1 Marco teórico
FAO, (1981); mencionan para regular las descargas de aguas
residuales tóxicas hay que utilizar datos de ensayos de toxicidad
hechos con organismos vivos y confiar en estos datos, además de
efectuar estudios detallados de las características físicas y químicas
de los contaminantes y de los cambios que ocurren después de su
descarga en el medio. Cuando se puedan describir con precisión en
términos químicos y físicos Jos componentes tóxicos de un
contaminante y se disponga de técnicas analiticas pertinentes y de
suficiente información acerca de la toxicidad de esos componentes
para los organismos acuáticos, se podrán establecer normas para
tales contaminantes en valores numéricos para los componentes
tóxicos
Ctaret et al. (2003); entienden por metales pesados a cualquier
elemento químico metálico que tenga una relativa alta densidad y sea
tóxico o venenoso en concentraciones bajas y que no se pueden
degradar por medios naturales, además que son peligrosos porque

33
tienden a bioacumularse en el organismo pudiendo causar daños
severos.
Torres et al. (2007) sostienen que la necesidad y la capacidad de
tolerancia de las distintas especies vegetales es variada, ocasionando
que por cada especie se pueda establecer un rango de valores sobre
los cuales comienzan a darse signos de toxicidad y la posibilidad que
estos varíen con el desarrollo de la planta, su nutrición, las
características de su entorno, etc. Es por ·ello que cuando se trata de
indicar valores de concentraciones de rnetales tóxicos para las
plantas, cada autor cita valores diferentes, pero por lo general
cercanos.
Romero, (2002); afirma que los metales pesados son frecuentemente
añadidos al agua residual en el curso de ciertas actividades
comerciales e industriales. Debido a su toxicidad, la presencia de
cualquiera de ellos en cantidades excesivas interferirá con gTan
número de usos del agua, por lo que deberán separarse si se
pretende reutilizar.
Baird, (2004); manifiesta que la acumulación de contaminantes en los
tejidos de las plantas, la liberación de oxigeno al suelo, y la
intensificación de la biodegradación por los hongos y microbios

34
localizados -en la interfase suelo-raiz logran extraer los contaminantes
del suelo o sedimentos e incorporarlos a sus estructuras, las mismas
que posterior a un tiempo determinado son desechados a sitios
convenientes para este propósito. Las ventajas de la fitorremediación
incluyen su relativo bajo costo, los beneficios estéticos que provee y
su naturaleza no intrusiva.
Novotny y Olem, (1994); sostienen que la utilización de plantas
acuáticas ha sido desarrollada como un tratamiento secundario o
terciario alternativo de aguas residuales, y ha demostrado ser eficiente
en la remoción de una amplia gama de sustancias, orgánicas así
como nutrientes y metales pesados.
Burk& et al. (2000); mencionan que las plantas acuáticas acumulan
gran cantidad de metales pesados en sus tejidos como mercurio (Hg),
cadmio (Cd), plomo (Pb), arsénico(As), cromo (Cr), los cuales son
liberados posteriormente al medio pudiendo causar problemas en el
suelo y en la cadena alimentaria de los humedales. Esto implica la
remoción de estas plantas después de un cierto tiempo a fin de no
provocar problemas de contaminación en estos ecosistemas, no
afectando de este modo la recuperación del humedal.
Paris et al. (2005); evaluaron la eficiencia de absorción de metales
pesados de Salviniaherzogii de la Sota (Salviniaceae) y Pistia
stratiotes L (Araceae), cultivando conjuntamente ambas especies en

35
soluciones de Cr, Cd, Pb y Cr + Cd + Pb (1 ppm de cada metal). El
proceso de absorción se produjo fundamentalmente durante las
primeras 24 horas. S. herzogii presentó una. mayor bioacumulación
total (raices + hojas) de tos metales. Para ambas especies, el
contenido de metales en raíces fue superior al de las hojas. En raíces
el contenido fue Pb > Cd > Cr, en hojas fue Cd > Pb > Cr y en
vegetales totales (raíces+ hojas) fue Pb > Cd > Cr (metales aislados)
y Cd > Pb > Cr (metales combinados). Los metales combinados
disminuyeron el crecimiento de las dos especies, debido
probablemente a un efecto de sinergismo, pero sin afectar el proceso
de absorción .. El Cr afectó la TPR de S. herzogii, mientras que el Cd y
la combinación de metales afectaron la TPR de P. stratiotes.
Posada et al. (2006); describieron los efectos del mercurio sobre
algunas plantas acuáticas tropicales y sobre los ecosistemas donde
habitan, resultando que la biodisponibilidad del mercurio depende de
factores que facilitan ia disolución del elemento en el agua. Algunas
plantas actúan como bioindicadores de 1a presencia de este metal en
el medio al retenerlo selectivamente; mientras que otras se comportan
como bioacumuladoras al tolerar su presencia y acumularlo en su
estructura, y pueden dar paso a la bioconcentración a través de la
cadena trófica.
36
Odjegba et al. (2007); experimentaron en Eichhomia crassipes y
Pistia stratiotes con concentraciones diversas de 8 metales pesados
(Ag, Cd, Cr, Cu, Hg, Ni, Pb y Zn) además evaluaron la actividad de
catalasa, peroxidasa en las hojas de las ·especies estudiadas. Al final
de·l período experimental, los datos obtenidos de las plantas tratadas
fueron comparados a los datos de las plantas no tratados (el control).
Los metales pesados aumentaron la actividad de la catalasa,
peroxidasa en ambas especies siendo el Hg quien tuvo los valores
más altos; además de las dos especies estudiadas Eíchhomia
crassipes tolera concentraciones más altas de metales pesados.
3.2 Marco conceptual
Ecotoxicologia
Estudia los efectos tóxicos provocados por los contaminantes sobre
los ecosistemas, provee un significado de la valoración del riesgo de
las poblaciones naturales de organismos cuando son expuestas a un
estrés ambiental tal como la presencia de un contaminante o la mezcla
de ellos y la jnfluencia que las condiciones ambientales tienen sobre el
comportamiento del tóxico (Holloway y col., 1997; Skot, 1997).

37
Bioensayo
Un bioensayo o prueba de toxicidad es una técnica empleada para
determinar si un residuo quimico presente en el ambiente está en
cantidades suficientemente altas para afectar adversamente algunos
aspectos del espectro normal de actividades de animales y plantas.
Los bioensayos en Ecotoxicología se realizan con el supuesto de que
los organismos probados son "sucedáneos" o "claves" de organismos
"superiores" presentes en su ambiente natural (Colín, 1993)
Metales pesados
Por metales pesados se entiende a cualquier elemento quimico
metálico quetenga una relativa alta densidad y sea tóxico o venenoso
en concentracionesbajas y que no se pueden degradar por medios
naturales, además que sonpeligrosos porque tienden a bioacumularse
en el organismo pudiendo causar daños severos (Ciaret et al. 2003).
Son frecuentementeañadidos al agua residual en el curso de ciertas
actividades comerciales eindustriales. Debido a su toxicidad, la
presencia de cualquiera de ellos encantidades excesivas interferirá
con gran número de usos del agua, por lo quedeberán separarse si se
pretende reutilizar (Romero 2002).

38
Plomo (Pb)
Es un elemento metálico, denso, de color gris azulado, es uno de los
primerosmetales conocidos y está fundamentalmente relacionada con
los diferentes tipos de actividades humanas en su desarrollo reacciona
con el ácido nítrico, pero a temperatura ambiente apenas le afectan
los ácidos sulfúrico y clorhídrico, en presencia de aire, reacciona
Jentamente con el agua , formando hidróxido de plomo que es
ligeramente soluble; los compuestos solubles de plomo son
venenosos (Orozco et al 2005). El plomo ingerido en cualquiera de sus
fonnas es altamente tóxico, los efectos adversos del plomo que tiene
la capacidad de bioacumulación y afecta a todos los órganos y
sistemas en el ser humano especialmente el nervioso, hematopoyético
y el cardiovascular (Albert 1997).
Cadmio (Cd)
Es un elemento metálico, blanco, plateado que se puede moldear
fácilmente y es resistente a la corrosión; este metal puede depositarse
electroliticamente en los metales para recubrirlos, principalmente en el
hierro o el acero,. en los que fonna capas quimicamente resistentes
(Baird 2004). La fuente más importante deliberación de cadmio al
ambiente es el empleo de combustibles fósiles como carbón y

39
petróleo, aunque también puede ser liberado durante el refinado de
zinc, plomo o cobre. (Orozco et al. 2005). Produce efectos adversos al
ser humano por ingestión o inhalación causando daño en arterias y
riñones (Albert 1997).
Mercurio (Hg).- El mercurio es uno de los metales pesados que
mayor preocupación está causando en el mundo por su acción
sumamente tóxica para los organismos y para el hombre. Se
considera poco peligroso en forma metálica y en sales minerales, pero
en compuestos orgánicos su acción se toma muy tóxica para el
hombre como último consumidor de pescados y mariscos, que tienen
la propiedad de acumularlo en sus tejidos (RoJdán, 1992).La
exposición al mercurio antes del nacimiento y durante la infancia
puede causar retraso mental, parálisis cerebral, sordera y ceguera.
Incluso en dosis pequeñas, el mercurio puede afectar el desarrollo de1
niño, puesto que causa déficit de atención y problemas de
aprendizaje. En los adultos, el envenenamiento por mercurio puede
afectar adversamente la fertilidad y la regulación de la presión an~rial,
a más de causar pérdida de la memoria, temblores, pérdida de .la
visión y entumecimiento de los dedos de manos y pies (Posada et al.
2006).
40
DESCRIPCIÓN DE LA ESPECIE Lemna mlnor "lenteja de agua"
Las plantas del género Lemna son conocidas comúnmente como
"lentejilla de agua" por su forma discoide, poseen frondas pequeñas
que rara vez llegan a medir 5 mm de longitud (Weldon y cols., 1973).
Su cuerpo vegetativo corresponde a una fo.rma taloide, es decir,. en la
que no se diferencian el tallo y las hojas. Consiste en una estructura
plana y verde y una sola raiz delgada de color blanco. Según (Cook y
Gut1974) el talo ha sido interpretado de diversas maneras: un taUo
modificado, una hoja o como parcialmente tallo y hoja. Otros autores
consideran que el tato corresponde a una hoja modificada que cumple
las funciones del tallo, la hoja y el eje florifero (Instituto Gallach 1984).
La lenteja de agua es una planta monoica, con flores unisexuales. La
forma más común de reproducción es la asexual por gemación. En los
bordes basales se desarrolla una yema pequeña que origina una
planta nueva que se separa de fa planta progenitora (Instituto Gallach
1984). Sin embargo, es común encontrar las plantas agregadas
formando grupos de 2· a 4 individuos.
la planta puede desarrollarse en un rango amplio de temperaturas,
que varía entre 5° y 30°C, con un crecimiento óptimo entre los 15° y
18°C. Se adapta bien a cualquier condición de iluminación. Crece

41
rápidamente en partes calmadas y ricas en nutrientes, con altos
niveles de nitrógeno y fosfatos. Con frecuencia el hierro es un
elemento limitante para su adecuado desarrollo. Pueden además
tolerar un rango de pH amplio, siendo ,el óptimo entre 4,5 y 7,5.
(Arroyave, 2004).
Descripción de Pistia stratiotes 1'huama"
Son hierbas acuáticas, flotantes en aguas lénticas, acaudales; flotan
en la superficie del agua con sus raíces que cuelgan sumergidas
debajo de las hojas flotantes. Es una planta perennemonocotitedónea
con las hojas gruesas, suaves que forman una roseta.
Las hojas pueden, tener hasta 15 centímetros de largo y tener algún
vástago, son de márgenes verdes, con las venas paralelas
prominente, onduladas ligeras y se cubren con pelos cortos que
forman como la estructura de una cesta que atrapan burbujas de aire,
aumentando la flotabilidad de la planta. Sus inflorescencias son
pequeñas e inconspicuas, subsésiles; espata foliácea, blanquecina,
pilosa exteriormente, ± constricta hacia ta mitad; espádice más corta
que la espata y adnada a ésta, heterogénea, formada por únicamente
2 flores, una pistiliada abajo y una estaminada arriba. Las flores son
dioicas, y se ocultan en el centro de la planta entre las hojas, las
bayas verdes pequeñas se forman después de la fertilización.

42
DESCRIPCIÓN DE LA Eichhomla cra$Sipes "putu putu"
Esta especie de planta flota libremente, posee tallos vegetativos muy
cortos, peciolos cortos, inflados, bulbosos. Cuando el crecimiento se
da en poblaciones densas, las hojas son ascendentes con pecfolos
más largos y menos inflados. El tamaño de las láminas oscila entre 2.,5
cm y 16 cm. La inflorescencia es espigada con flores vistosas con
colores que van de azul a azul claro con una mancha amarilla ubicada
en el lóbulo superior. Los lóbulos del perianto tienen una dimensión de
16 mm a 37 mm y los frutos miden de 1,2 cm a 1,5 cm. Esta planta
acuática puede ser encontrada en zonas de elevaciones de
moderadas a bajas (Crow, 2002). Es un pieustófrtoacaulescente con
brotamiento lateral de estolones que le dan características gregarias..
En aguas naturales presenta una tasa relativa de crecimiento de 7,9%
día-1, duplicando vegetativamente el núme.ro de plantas en 9 dias
(Rodríguez et al. 2000)

CAPiTULO IV
ANÁLISIS Y PRESENTACIÓN DE LOS RESULTADOS
4.1 Resultados de controles
A. Control negativo
De acuerdo a los ensayos se obtuvo que la dilución 1:2 fue la mejor
dilución para Lemna minar, y 1:1 para Eichhomia crassipes y Pistia
stratiotes donde las macrófrtas mostraron buen desarrollo con
respecto a las demás diluciones en base a la solución HUTNER, sin
embargo es bueno mencionar que adicionalmente se realizó ensayos
con agua de grifo y agua destilada, donde se pudo observar que no
hay una diferencia significativa.
Por lo antes mencionado se puede considerar al agua destilada como
un control negativo aceptable.

44
4.2 Resultados y discusión de los ensayos de toxicidad
A. Lemna minor
A.1 Mercurio
A.1.1 Número de Frondes
Grafico 1 Número de-frondes por tratamientos con Mercurio
7
6
5
"'Cll 4
-o
:2e: 3 • N" de frondes
:;) 2
1
o
Tratamientos
n 12 T3 T4 TS Testigo
Fuente: Tesis 2013
Cuadro 1 Análisis de varianza para números de frondes con Mercurio
Suma de cuadrados Gl Cuadrados medios F Sig_
Entre grupos 27,15 5 5,43 12,07 ..

Dentro de grupos 5,350 12 ,450
Total 32.,5 17
Fuente: Tes1s 2013
-Se obseJVa el ANVA donde existe una alta diferencia estadrstica
significativa. Dado que el coeficiente de variación es de 14.9 % se
procede a realizar la prueba de rango múltiples de tukey

45
Cuadro 2 Prueba de Tukey para número de frondas con Mercurio Hg•2
OM TRATAMIENTOS DESCRIPOÓN MEDIAS SIGNIRCANCIA

·-
1 VI-testigo Agua destilada 6.7 A
2 V 0.128 5.3 "
B
3 IV 0.256 4.6 B
4 111 0.512 3.7 e
S 11 1
-- -·------·- 3.6 e
e ·-----
----- -~-'-
6 1 2 3
Fuente: Tesis 2013
Los promedios con letras iguales no difieren estadlsticamente.
En el cuadro 2 se aprecia que el mayor promedio de números de
fronde lo obtuvo el tratamiento V con una media de 5.3 frondas y
ocupo el segundo lugar por debajo del testigo. Superando a los demás
tratamientos donde el tratamiento .1 obtuvo el más bajo número de
frondas con 3.
A.1.2 Longitud de raíces
Grafico 2 Longitud de ralees por tratamientos con mercurio
e s +----------
~ 6+--------
0:::
e 4 •X de ralees
~
2
o Tratamientos
T1 T2 T3 T4 TS Testigo
Fuente: Tesis 2013
46
Cuadro 3 Análisis de varianza paralongitud de rafcescon mercurio
Suma de cuadrados Gl Cuadrados medios F Sig.
Entre grupos 25,525 5 5,105 8,51 *
Dentro de grupos
7,200 12 ,600
Total 32,725 17
Fuente: TesJS 2013
Se observa una diferencia estadística significativa para tratamientos.
Por lo cual se acepta la diferencia de medias, para posteriormente
realizar la prueba de rangos múltiples de Duncan debido al bajo
coeficiente de variaciónde 5,9%.
Cuadro 4 Prueba de Duncanpara longitud de raíces con mercurio

- -
OM TRATAMIENTOS DESCRIPCIÓN MEDIAS SIGNIFICANCIA
1 VI-testigo Agua destilada 8 A
2 V 0.128 7.2 B
3 IV 0.256 6.4 e
4 111 0.512 6.3 o
S 11 1 5.5 o
6 1 2 4.8 E
Fuente. TesiS 2013
Los promedios con letras iguales no difieren estadlsticamente.
En el cuadro 4 se aprecia que el mayor promedio de longitud de rafees
lo obtuvo el tratamiento V con una media de 7.2 cm y ocupo el
segundo lugar por debajo del testigo. Superando a los demás
tratamientos donde el tratamiento 1 obtuvo el más bajo promedio de
longitud de rafees con 4.8 cm.

47
A.2 Cadmio
A.2.1 Numero de frondes
Grafico 3 Número de frondes por tratamientos con Cadmio
7~---------------------
6-t------------------l
"' 5 - t - - - - - - - - - - - - - - - 1
-g 4 -t------------------; e N" de frondes
~ 3 -t---------------i
:;:, 2 +-r-r---.-....--~-r--rl--1
1
T1 T2 T3 T4 T5 Testigo
Fuente: Tesis 2013 ~--------'
Cuadro 5 Análisis de varianza para números de frondes con cadmio
Suma de ruadrados Gl Cuadrados medios F Sig.
Entre grupos
Dentro de grupos
43,71 5 8,742 5,501 -
19,07 12 1,589
Total 67,78 17
Fuente: TesiS 2013
-Como se observa existe una diferencia estadística significativa, se
acepta ta diferencia de medias. Siendo el coeficiente de variación igual
a 43 % y para una comparación más exigente se procedió a realizar la
prueba de ran.gos múltiples de tukey.

48
Cuadro 6 Prueba de Tukey para números de frondas con cadmio

2 V 0.008mg/l 2.6 B
3 IV 0.016 mg/1 2.3 B
4 111 0.032 mg/1 2 8
S 11 0.064mg/l 2 8
6 1 0.128 mg/1 2 8
Fuente: Tesis 2013
En el cuadro 6 se aprecia que eJ mayor número de frondas lo obtuvo el
testigo con una media de 6.6 frondas y los demás tratamientos no
tuvieron una diferencia estadfstica significativa, dando a entender que
el metal fue muy toxico al inhibir el crecimiento de los frondas.
A.2.2 Longitud de Ralees
Grafico 4 Longitud de rafees por tratamientos con cadmio
s-.--------------
7+-----------....--
"' 6 + - - - - - - - - - - - 1
g S +-----------1
~ 4 +-----------1
eX de raíces
~ 3 +-----------1
a 2 -1--.o-r-----.--.---r...,_--r..,_-1
1
0+-'-_.__-,---"-_._-,---"-......_~....._~......_,,.............._,
Tratamientos
n T2 T3 T4 T5 Testigo
Fuente: Tesis 2013

49
Cuadro 7 Análisis de varianza para longitud de raíces con cadmio
Suma de cuadrados Gl CIJadrados medios F Sig.
Entre grupos
25,010 5 5,002 6,413 ..
Dentro de grupos ,78
9,300 12
Total
34,31 17
Fuente: TesiS 2013
-Como se observa en el cuadro anterior, existe una diferencia
estadística significativa para los tratamientos. El coeficiente de
variación es igual a 7 %. Por lo cual se procede a realizar la prueba de
rangos múltiples de Duncan.
Cuadro 8 Prueba de Duncan para longitud de rafees con cadmio
OM TRATAMIENTOS DESCRIPOON MEDIAS SIGNIFICANCIA

2 V 0.008 2.6 B
3 IV 0.016 2.3 B
4 111 0.032 2.3 B
5 11 0.064 2 B
6 1 0.128 2 B
Fuente: Tesis 2013
En e1 cuadro 8 se aprecia que la mayor longitud de raíces lo obtuvo el
testigo con una media de 7cms. Los demás medias no difieren
estadísticamente, dando a entender que las concentraciones son muy
toxicas.
so
A.3 Plomo
A.3.1 Numero de frondes
Grafico 5 Número de frondes por tratamientos con Plomo
¡....-----------
6 +----------l
"' 5 +-----------1
~ 4 +-----------1
~ 3 +-----------1 ll N" de frondes
:5 2 +-r-.....--.-,...--"T""T---,..-.---.-...,.---1
1
0+--'-....._,_._..__,._...........-,.-.J._._-.-'-...._,__._.._,
Tratamientos
Tl T2 T3 T4 T5 Testigo
Fuente: Tesis 2013
Cuadro 9 Análisis de varianza para números de frondes con Plomo
Entre grupos 40,00 5 8,000 18,00 ..

Dentro de grupos 12 ,500
8,000
Total 48,00 17
Fuente: Tests 2013
Como se observa el cuadro del ANVA para número de frondes, existe
una alta diferencia estadrstica significativa entre los tratamientos, por
lo que se acepta la diferencia de medias. El coeficiente de variación es
igual a 26.5 % por lo cual se procedió a realizar la prueba de rangos
múltiples de tukey.
51
Cuadro 10 Prueba de Tukey para números de frondes con Plomo

2 V 0.008 2 B
3 IV 0.016 2 B
4 111 0.032 2 8
S 11 0.064 2 B
6 1 0.128 2 8
Fuente: Tesis 2013
En et cuadro 1O se aprecia que el mayor número de frondes lo obtuvo
el testigo con una media de 6 frondas. Los demás medias no difieren
estadisticamente, dando a entender que las concentraciones son muy
toxicas para esta variable.
A.3.2 Longitud de, raíces
Grafico 6 Longitud de rafees por tratamientos con plomo
~ 6+-----------------,
e
~ 4+-----------------,
E
:¡:¡ ex de rafees
e
~ 2
n T2 T3 T4 TS Testigo
Fuente: Tesis 2013
52
Cuadro 11 Análisis de varianza para longitud de raíces con plomo
Entre grupos 20,295 5 4,059 1,61 ..

Dentro de grupos 30,11 12 2,509
Total 50,405 17
Fuente: Tesrs 2013
Como se observa el cuadro del ANVA para número de frondes, no
existe una diferencia estadística significativa entre los tratamientos,
por Jo que no se acepta la diferencia de medias. El coeficiente de
variación es igual a 12.2 % por lo cual se procedió a realizar la prueba
de rangos múltiples de tukey.
Cuadro 12 Prueba de Tukey para longitud de·raíces con plomo

2 V 0.008 2 B
3 IV 0.016 2.3 B
4 111 0.032 2.3 B
5 11 0.064 2.3 B
6 1 0.128 2.3 B
Fuente: Tesrs 2013
En el cuadro 12 se aprecia que el mayor promedio de longitud de
raíces lo obtuvo el testigo con una media de 7 cms. Los demás
medias no difieren estadísticamente, dando a entender que las
. concentraciones son muy toxicas.

Discusión para Lemna minor
-de acuerdo a los resultados obtenidos se puede decir que la especie
Lemna minor, resiste a la presencia elevada de mercurio (hasta 2
mgn), debido e que al desarrollo de numero de frondes y el promedio
de longitud de raíces, no son muy distante con respecto al testigo,
como se puede observar en los gráficos 1 y 2, además de una buena
acumulación de dicho metal. Es bueno mencionar que la especie no
presentó coloraciones ni marchitaciones, dando manifiesto a una
buena resistencia al metal, esto es corroborado por (Marcó 2009)
quien menciona que L. minor representa una alternativa sencilla y
adecuada para la remoción de mercurio en aguas contaminadas hasta
un nivel de 0.13 mg/l, sin embargo en cuanto a tolerancia, la especie
es resistente a concentraciones más altas (2mgll).
Se tiene que para el caso de plomo Lemna minores sensible, como
lo demuestra el bajo 'indice de la variable número de frondes, donde
ningún tratamiento con plomo pasó de dos frondes (En et gráfico 5) y
poca acumulación en la especie.. Además hubo un alto índice de
mortandad; pero hubo un buen desarrollo en cuanto a fongitud de
rafces.EI hecho de que dos variables (número de frondes y
acumulación del metal) presentaron diferencias significativas con
respecto al testigo, además del índice de mortandad dan a entender

54
que no es una especie tolerante a dicho metal; esto es ratificado por
(Zayed, 1998), que investigó el potencial de la lentejade agua para
acumular cadmio, cromo, cobre, niquel, plomo y selenio. Los
resultados demostraronque, en condiciones experimentales de
laboratorio, la planta resultó ser un buen acumulador de Cd, Se y Cu,
un acumulador moderado de Cr y pobre acumuladorde Ni y Pb.
Además en un estudio de (Zayed, 1998), se concluye que la lenteja de
agua tiene un buen potencial para la remoción de cadmio, selenio y
cobre de aguas residuales contaminadas con estos elementos, ya que
puede acumular concentraciones altas de ·ellos. Además su rápido
crecimiento lahace una planta apropiada para. actividades
defitorremediación. Sin embargo se le puede considerar un buen
monitor para el caso del plomo, debido a su sensibilidad a la
presencia de dicho metal.
Observando Jos gráficos 3 y 4, podemos decir que Lemna minor es
una especie resiste la presencia de ~dmio (0.128 a 0.64 mg/1), pues
eJ promedio de longitud de las raíces no son muy distantes del testigo.
Además presento una buena acumulación de dicho metal. Sin
embargo el número de frondas demuestra todo lo contrario debido a
que no pasaron de tres frondas por individuo. De tal manera que
habiendo dos variables que indican una tolerancia a bajas
concentraciones de cadmio se puede suponer que Lemna minor es

SS
tolerante a cadmio: Esto es ratificado por un estudio de (Fernández C.
et al. 2006), quienes sostienen que Pb y Cd fueron eficientemente
eliminados del agua por las 3 macrófltas (Lemna minor, Pistia
stratiotes, Spirodela intermedia), a pesar de .la presencia de otros
metales en el medio que competian por los sitios activos en la
superficie y la biomasa de Lemna minar presentó el mayor % de
remoción de cadmio.
B. Pistia stratiotes
8.1 Mercurio
8.1.1 Numero de frondes
Grafico 7 Numero de frondes por tratamientos con mercurio
8.-------------------
...
-gGJ 4 +---=-==----......-----1 e N" de frondes
"O
"22
::>
o -f--L-.....__,_._.__._-r--~_._r-'-.._,_...._._..,.--L......_,Tratamientos
T1 T2 T3 T4 15 Testigo
Fuente: Tesis 2013

56
Cuadro 13 Análisis de varianza para números de frondas con mercurio
Suma de cuadrados Gl Cuadrados medios F Slg.
Entre grupos
22,65 5 4,53 16,236 ..
Total 26,000 17
Fuente: Tesis 2013
-En el cuadro 13 se observa una alta diferencia estadística. Debido a
que el coeficiente de variación fue igual a 12,1 % se procedió a
realizar la prueba de rangos múltiples de tukey
Cuadro 14 Prueba de Tukey para números de frondas con mercurio
OM TRATAMIENTOS OfSGRIPOÓN MEDIAS SIGNIFICANCIA

2 V 0.008 4.6 B
3 IV 0.016 4 B
4 111 0.032 3.7 B
S 11 0.064 3.7 B
6 1 0.128 3.3 b
Fuente: Tests 2013
En el cuadro 14- se aprecia que el mayor promedio de número de
frondes lo obtuvo el testigo con una media de 6 frondes. Los demás
medias no difteren estadísticamente, dando a entender que las
concentraciones son muy toxicas.

57
8.1.2 Longitud de rarees
Grafico 8 Longitud de rafees por tratamientos con mercurio
•X de ralees
T1 T2 13 T4 TS Testigo "tratamientos
Fuente: Tesis 2013
Cuadro 15 Análisis de varianza paralongitud de rafees con mercurio
Entre grupos 18,170 5 3,034 9,902 ..

Total 22,580 17
Fuente: Tests 2013
·En el cuadro anterior muestra una alta diferencia estadistica
significativa para tos tratamientos. Siendo el coeficiente de variación
igual a 4.6% se procedió a realizar la prueba de rangos múltiples de
Duncan.
58
Cuadro 16 Prueba de Duncan para longitud de rafees con mercurio
OM TRATAMIENTOS DESCRIPCIÓN MEDIAS SIGNIFICANOA

2 V 0.008 13.5 B
3 IV 0.016 13 e
4 111 0.032 12.73 e
S 11 0.064 12.16 o
6 1 0.128 11.96 o
Fuente: Tesis 2013
En el cuadro 16 se aprecia que el mayor promedio de longitud de
rafees lo obtuvo eJ tratamiento V con una media de 13.5 cms. y ocupo
el segundo lugar por debajo del testigo. Superando a los demás
tratamientos donde el tratamiento 1 obtuvo el más bajo promedio de
longitud de raíces con11. 96 cms.
8.2. Plomo
8.2.1 Número de frondes
Grafico 9 Número de frondes por tratamientos con Plomo
7~------------------
6-t-----------
5+---------
Ql 4 + - - - - - - - = - -
iil3
:5!
• N" de frondes
e: 2
~ 1
o Tratamientos
T1 12 T3 T4 15 Testigo
Fuente: Tesis 2013
59
Cuadro 17 Análisis de varianza para números de frondas con Plomo
Suma de cuadrados Gl Cuadrados medios F Slg.
Entre grupos 25,54 S 5,108 10,098 ..

Total
31,61 17
Fuente: Tesis 2013
Se observa en el cuadro 17, que existe una alta diferencia estadística,
por to cual se acepta la diferencia entre los tratamientos. El coeficiente
de variación es igual a 16,6 % por lo cual se procedió a realizar la
prueba de rangos múltiples de tukey.
Cuadro 18 Prueba de Tukey para números de frondas con Plomo
OM TRATAMIENTOS DESCRIPOÓN MEDIAS SIGNlf.tCANCIA

1 VI-testigo _Agua destilada 6 A
2 V 1 4.6 8
3 IV 0.512 4 e
4 111 0.256 4 e
S 11 0.128 3.3 o
6 1 0.064 3 o
Fuente: Tesis 2013
En el cuadro 18 se aprecia que el mayor número de frondes lo obtuvo
el tratamiento V con una media de 4.6frondes y ocupo el segundo
lugar por debajo del testigo. Superando a los demás tratamientos
donde el tratamiento 1 obtuvo el más bajo promedio de longitud de
raíces con 3frondes.

60
8.2.2 Longitud de rafees
Grafico 1O Longitud de rafees por tratamientos con Plomo
...
gCll
13r-------------~
~ 12 +-.-.,..--.....,.....,.---,,.....--1 a X de ralees
t:
~11
10 +-'-...1-.r----'-'---,--J.........__,--J-"'-r...L..L-.---"""""-, Tratamientos
Fuente: Tesis 2013
Cuadro 19 Análisis de varianza paralongitud de raíces con Plomo
Suma de ouadrados Gl Cuadrados medios F Slg.
Entre grupos
21,720 5 4,344 9,589 ..
Dentro ele grupos 5,440 12 ,453
Total
27,16 17
Fuente: TesiS 2013
Se observa en el cuadro 19 que existe una diferencia estadística
significante, por lo cual se acepta la diferencia entre los tratamientos.
Además el coeficiente de variación fue de 5.2%, por lo cual se
procedió a realizar ta prueba de rangos múltiples de Duncan.

61
Cuadro 20 Prueba de Cunean paralongitud de ralees con Plomo
OM TRATAMIENTOS DESCRIPCIÓN MEDIAS SIGNl'flCANOA

2 V 0.064 13.4 8
3 IV 0.128 12.6 e
4 111 0.256 12.16 D
S 11 0.512 11.93 D
6 1 1 11.86 D
Fuente: Tesis 2013
En el cuadro 20 se aprecia que la mayor longitud de rafees lo obtuvo
e.l tratamiento V con una media de 13.4 cms. y ocupo el segundo lugar
por debajo del testigo. Superando a los demás tratamientos donde el
tratamiento 1 obtuvo el más bajo promedio de longitud de raíces con
11.86 cms.
8.3Cadmio
8.3.1 Numero Frondes
Grafico 11 Numero de frondes por tratamientos con Cadmio
7.------------------
fir---------------~~
sr-----------~~~
~
...
:S!
4 -f----,.--,-----1
3 o N" de frondes
:5 2
1
o
T1 T2 T3 T4
Fuente: Tesis 2013
62
Cuadro 21 Análisis de varianza para números de frondes con Cadmio
Entre grupos
Dentro de grupos
12,27 5 5,454 13,985 -
4,680 12 ,390
Total 16,95 17
Fuente: Tesis 2013
En el cuadro 21 se observa que existe una diferencia estadistica
significativa para los tratamientos. El coeficiente de variación fue de
12,6% por lo cual se procedió a realizar la prueba de rangos múltiples
de tukey.
Cuadro 22 Prueba de Tukey para números de frondas con Cadmio

1 VI-testigo' Agua destilada 6 A
2 V 0.064 S 8
~ 3 IV 0.128 4.6 e
4 111 0.256 4.6 e
S 11 0.512 4.6 e
6 1 1 4 D
Fuente: Tesis 2013
En el cuadro 22 se aprecia que el mayor número de frondas lo obtuvo
el tratamiento V con una media de 5 frondas y ocupo el segundo lugar
por debajo del testigo. Superando a los demás tratamientos donde el
tratamiento 1obtuvo el más bajo promedio de número de frondes con 4
frondas.
63
8.3.2 Longitud de raíces
Grafico 12 Longitud de rafees por tratamientos con Cadmio
14.4 , . - - - - - - - - - - -
14.2 + - - - - - - - - - - - - 1
14+----~~~~~~-----~
g"' 13.8 +----1

~ 13.6 +----t a X de ralees
~ 13.4
¿;j 13.2
13 +-'-.....__,..-'--'--.--''-'-,............._,__.__.-,-L...L.,Tratamientos
n 12 13 T4 15 Testigo
Fuente: Tesis 2013
Cuadro 23 Análisis de varianza para longitud de raíces con Cadmio
Entre grupos
Dentro de grupos
3,95 5 .790 2.831 -
3,350 12 .279
Total
7,3 17
Fuente: T&sls 2013
Se observa en el cuadro anterior existe una diferencia estadística
Además el coeficiente de variación fue de 3.7 %, por to cual se
procedió a realizar la prueba de rangos múltiples de Duncan.

64
Cuadro 24 Prueba de Duncan para longitudde raícescon Cadmio

2 V 0.064 12.46 B
3 IV 0.128 12.16 B
4 111 0.256 12.1 B
S 11 0.512 12.1 B
6 1 1 12 B
Fuente: Tes•s2013
En el cuadro 24 se aprecia que la mayor longitud de raíces lo obtuvo
el testigo con una media de 15 cms. Los demás medias no difieren
estadísticamente, dando a entender que las concentraciones son muy
toxicas.
Discusión para· Pistia stratiotes
Como se puede observar en los resultados,el mercurio es toxico,
incluso en e1 tratamiento de menor concentración (0.008mgll), esto
para la variable longitud de raíces, debido a que hay una diferencia
significante de todo los tratamientos con respecto al testigo. Además
no hubo una buena acumulación de dicho metal. Esto sugiere que
Pistia stratiotes no tolera al mercurio, por ser un metal sumamente
toxico Jo cual es afirmado por (Salt et al. 1995), quienes sostienen que
el reemplazo de cationes divalentescomo magnesio y calcio
intracelular por metales pesados isovalentes como cobre, plomo,
mercurio y cadmio causa desequilibrio en los sistemas vivos al

65
insertarse en los sistemas enzimáticos de forma irreversible causando
inhibiciones y otros efecto fitotóxicos.
-El Plomo es menos toxico para Pistia stratiotes, debido a que hay
desarrollo en las dos variables, además no presento mortandad, lo
cual sugiere una tolerancia de plomo hasta 1mg/l. Esto es confirmado
por (Fernández 2008) que en sus experiencias demostraron que en la
remoción simultanea de metales por biomasa de 3 macrófitas, (Lemna
minar, Pistia stratiotes, Spirodela intermedia) fas 3 se comportan
como intercambiadores catiónicos. Na+, K+, Ca, Mg 2+,Fe y Mn2+
fueron liberados aJa solución acuosa mientras que H+, Cd2+, Ni 2+,
Cu 2+, Zn 2+y Pb2+ fueron adsorbidos por la biomasa de Spirodela
intermedia, Lemna minar y Pistia stratiotes.
-Sepiensa que el ion cadmio posee mayor afinidad agrupas
funcionales con atta densidad electrónicadebido a su alta relación
masa-carga y acidez delewis, desplazando fácilmente a pequeños
cationesdivalentes (Navarro et al., 2006). De lo expuestose podrí~
concluir que los metales pesados sonabsorbidos en mayor proporción
y con mayorvelocidad que otros iones divalentes por la mismarazón,
absorbiéndose en sitios activos de enzimas ysistemas celulares.

66
En este caso la Pistia stratiotes fue moderadamente tolerante a la
presencia de cadmio, observándose que las tres variables no difieren
mucho del testigo esto sugiere que -es tolerante a la presencia de
cadmio, esto es corroborado por (Marrozzi et a/.2000), quien analizo
los efectos producidos por el Cadmio sobre la morfología de órganos
vegetativos de Pistia stratiotes. Su tasa de crecimiento y su capacidad
de reproducción. Con respecto a las rarees seobservó a los cuatro
días de agregado el contaminante un importante desprendimiento, sin
embargo se observó una rápida recuperación con crecimiento de
nuevas raíces; el número medio deJas hojas y la superficie foliar por
p!anta decreció más en fas ptantas testigo que en las tratadas aunque
ninguna de estas fueron significativas. Descendieron los valores de
peso seco, de cobertura y número de plantas, así como el número de
primordios foliares, demostraron que P. stratiotes es uno de las
macrófitas capaces de disminuir los niveles de Cadmio en los
ecosistemas acuáticos.
67
C. Eichhomia crassipes
C.1 Mercurio
C.1.1 Número de frondes
Grafico 13 Número de frondas por tratamientos con mercurio
"' 6 +----------ll-
QI
~ 4 +-----------1 e ~de frondes
:2
:5 2 +-r-....-----,--,--...,...,---,~--.-....-----1
o +--'-_.__,_._..__,_. . . . .-,--~'-'-,......_....~.-r_._._, Tratamientos
n T2 T3 T4 TS Testigo
Fuente: Tesis 2013
Cuadro 25 Análisis de varianza para números de frondes con mercurio
Suma de cuadrados Gf CUadrados medios F Sig.
Entre grupos
54,41 5 10,882 27,760 ...
total 59,11 17
Fuente: Tes1s 2013
El cuadro anterior muestra una alta diferencia estadística significativa
para los tratamientos. Siendo el coeficiente de variación igual a 22.6%
se procedió a realizar la prueba de rangos múltipfes de Tukey.

68
Cuadro 26 Prueba de Tukey para números de frondes con mercurio

2 V 0.008 2 8
3 IV 0.016 2 8
4 111 0.032 2 8
S 11 0.064 2 8
6 ··- ..1. . . .... 0.128 2 8
Fuente: TesiS 2013
el testigo con una media de 6.5 y 1os demás tratamientos no tuvieron
una diferencia estadística significativa, dando a entender que e! meta!
fue muy toxico al inhibir el crecimiento de frondes.
C.1.2 Longitud raíces
Grafico 14 Longitud raíces por tratamientos con mercurio
20
"'15
e
'lijlO
É
- f-- - r-- '""" - - r-- '""" - r- e X de rafees
ecu s :- r-- r-- r-- r-- - ¡-
u o
Tratamientos
T1 T2 l3 T4 TS Testigo
Fuente: Tesis 2013
69
Cuadro 27 Análisis de varianza para longitud raíces con mercurio
Entre grupos 20,44 5 4,088 6,693 ..

Dentro de grupos
8,620 12 ,718
Total 29,06 17
Fuente. TesiS 2013
En el cuadro se observa una diferencia estadfstica significativa, por lo
cual se acepta la diferencia para los tratamientos. El coeficiente de
variación fue de 6, 7 % por lo cual se procedió a realizar la prueba de
rangos múltiples de Duncan.
Cuadro 28 Prueba de Duncan para longitud rafees con mercurio
OM TRATAMIENTOS DESCRIPCIÓN MEDIAS SIGNiFICAkiCIA 1

2 V 0.008 12.46 B
3 IV 0.016 12.16 B
4 111 0.032 12.1 B
S 11 0.064 12.1 B
6 1 0.128 12 B
Fuente. TesiS 2013
En el cuadro 28 se aprecia que el mayor promedio de longitud ralees
lo obtuvo el testigo con una media de 15 cms. y los demás
tratamientos no tuvieron una diferencia estadistica significativa, dando
a entender que el metal fue muy toxico al inhibir el crecimiento de las
raíces.
70
C.2. Plomo
C.2.1 Número de frondas
Grafico 15 Número de frondas por tratamientos con Plomo
1
o ~·~~-··
ltllli,
1
Tratamientos
Fuente: Tesis 2013
Cuadro 29 Análisis de varianza para números de frondas con Plomo
Entre grupos 10,454

52,27 5 18,802 **
Dentro de grupos 6,68 ,556
12
Total
58,950 17
Fuente: TestS 2013
En el cuadro se observa una alta diferencia estad1stica. Debido a que
el coeficiente de variación fue igual a 18,3 % se procedió a realizar la
prueba de rangos múltiples de tukey

71
Cuadro 30 Prueba de Tukey para números de frondas con Plomo
OM TRATAMIENTOS OESCRIPOÓN MEDIAS SIGNIFICANOA

2 V 0.128 5.3 B
3 IV 0.256 4.6 B
4 111 0.512 3.7 e
S 11 1 2 e
6 1 2 2 e
Fuente: Tesis 2013
el tratamiento V con una media de 5.3 frondas y ocupo el segundo
donde el tratamiento 1 obtuvo el más bajo promedio de número de
frondas con 2.
C.2.2 Promedio de longitud de raíces
Grafico 161ongitud de raíces por tratamientos con plomo
•X de ralees
Tratamientos
T1 n T3 T4 T5 Testigo
Fuente: Tesis 2013

72
Cuadro 31 Análisis de varianza para longitud de raíces con Plomo
Entre grupos
Dentro de grupos
23,720 5 4,744 13,032 -
4,370 12 ,364
Total
28,090 17
Fuente: Tes1s 2013
En el cuadro anterior muestra una diferencia estadfstica significativa
para los tratamientos. Siendo el coeficiente de variación igual a 4.7%
se procedió a realizar la prueba de rangos múltiples de Ouncan.
Cuadro 32 Prueba de Ouncan para longitud de rafees con Plomo
OM TRATAMIENTOS DESCRIPCiÓN MEDIAS SIGNIFICANCiA

2 V 0.128 13.53 B
3 IV 0.256 12.6 e
4 111 0.512 12 e
S 11 1 11.83 e
6 1 2 11.83 e
Fuente: Tesis 2013
el tratamiento V con una media de 13.53 cms. y ocupo el segundo
donde el tratamiento 1 obtuvo el más bajo promedio de longitud de
ralees con 11.83cms.

73
C.3Cadmio
C.3.1 Número de frondes
Graftco 17 Número de frondes por tratamientos con Cadmio
7,-------------------
6+----------------4
"'
~ S +-------------n-----1
:9 4 +--------;.,.-----.-..---1
e: 3 D N• de frondes
::>2
1
o i-L-'L-.,-_L.L----.L-'--r-'-'-----r..L..I--r-'-.L......, Tratamientos
Fuente: Tesis 2013
Cuadro 33 Análisis de varianza para números de frondes con Cadmio
Entre grupos
23,82 5 4,764 21,363 -
Dentro de grupos
2,68 12 ,223
Total
31,61 17
Fuente: Tesrs 2013
.Se observa que existe una alta diferencia estadistica, por lo cual se
acepta la diferencia entre los tratamientos. El coeficiente de variación
es igual a 10,5 % por lo cual se procedió a realizar la prueba de
rangos múltiples de tukey.

74
Cuadro 34 Prueba de Tukey
OM TRATAMIENTOS DESCRIPCIÓN MEDIAS SIGNIFICAN CA

2 V 0.008 5.3 B
3 IV 0.016 4 e
4 111 0.032 4 e
S 11 0.064 3.7 e
6 1 0.128 3.3 o
Fuente: Tesis 2013
En el cuadro 34 se aprecia que el mayor número de frondes lo obtuvo
el tratamiento V con una media de 5.3 frondes y ocupo el segundo
donde ef tratamiento 1 obtuvo el más bajo promedio de números de
frondes con 3.3.
C.3.2longitud de raíces
Grafico 18 longitud de rafees por tratamientos con Cadmio
•X de ralees
Tratamientos
Tl T2 l3 T4 T5 Testigo
Fuente: Tesis 2013

75
Cuadro 35 Análisis de varianza para longitud de rafees con Cadmio
Entre grupos 22,400 5 44,8 52,24 ..

Dentro de grupos
10,290 12 ,8575
Total 32,69 17
Fuente. Tesis 2013
-Se observa en el cuadro que existe una alta diferencia estadistica
Además el coeficiente de variación fue de 7.3%, por lo cual se
procedió a realizar la prueba de rangos múltiples de Duncan.
Cuadro 36 Prueba de Duncan para longitud de raíces con Cadmio
1 OM TRATAMIENTOS DESCRIPCIÓN MEDIAS SIGNIFICANOA

t
2 V 0.008 12.5 B
u 3 IV 0.016 12.3 B
A
4 111 0.032 12.1 B
S 11 0.064 12.1 B
6 1 0.128 12 B
fuente: tesis 2013
el testigo con una media de 15cms. Los demás tratamientos no
tuvieron una diferencia estadistica significativa, dando a entender que
el metal fue muy toxico al inhibir el crecimiento de las rafees.

76
Discusión para Eichhomia crassipes;
Presento un buen desarrollo de longitudes de rafees en todos Jos
tratamientos en presencia de mercurio, sin embargo para el número
de frondas ningún tratamiento con dicho metal presento desarrollo.
Pero tuvo una buena acumulación. Por lo que se sugiere que es
tolerante a dicho metal, esto es confirmado por (Odjegba et al 2007).
Quienes experimentaron en Eichhomia crassipes y Pistia stratíotes
con concentraciones diversas de 8 metales pesados (Ag, Cd, Cr, Cu,
Hg, Ni, Pb y Zn) además evaluaron la actividad de catalasa,
peroxidasa en las hojas de las especies estudiadas. Los metales
pesados aumentaron la actividad de la catalasa, peroxidasa en ambas
especies siendo el Hg quien tuvo los valores más altos; además de las
dos especies estudiadas Eichhomia crassípes tolera concentraciones
más altas de metales pesados. Pero es bueno mencionar que
concentro mercurio, lo que demuestra que es de utilidad en la
captación de mercurio, esto es confirmado por (Riddle et al. 2002),
quienes encontraron que al hacer crecer esta planta en la solución de
Hoagland diluida con 1 ppm de mercurio acumula un máximo de 0,20
ppm de mercurio en los brotes y 16,0 ppm de mercurio en las rafees, y
alcanza las concentraciones máximas después de unos 16 dias. Pero
también es bueno indicar que no hubo desarrollo de número de
frondas en ningún tratamiento con mercurio (0. 128 a 0.008mg/1).

77
Como se observa el plomo solo afecta significativamente a Eichhomia
crassípes a partir de 1mg/1 en las concentraciones menores hay
desarrollo dando a entender que es el punto máximo de tolerancia
además de fa presencia considerable del metal dentro de la especie,
lo cual hace que esta macrófita se considerada tolerante a plomo,
como lo sostiene (Torres 2009), quiendeterminó la capacidad de
adsorción de Cr6• y Pb+ por la macrófita acuática muerta, Eichhomia
crassipes bajo diferentes condiciones experimentales, concluyendo
que la biomasa muerta de Eichhomia crassipes es una buena
alternativa para tratamiento de aguas residuales contaminadas con
Cr6+ y Pb+ debido a .su bajo costo y su alta eficiencia, siendo su
capacidad de adsorción de 102.66 JJg/g para Cr6+y 336.37 JJg/g para
Pb+ y su porcentaje de retención de 55% para Cr6• y 77% para Pb+. En
el caso del Cadmio la Eíchhomia crassipes, presenta un desarrollo
tanto en número de frondes como en longitudes de raíces, hasta una
concentración de 0.128mg/l. to que sugiere que es tolerante a dicho
metal. Aunque este metal no ha sido establecido como micronutriente,
estudios de (Cullen et al. 1999, Sunda y Huntsman 2000) han
considerado que puede actuar como tal cuando se encuentra en
concentraciones trazas y existe limitación de algunos micronutriente
esenciales; situación que probablemente fue establecida en los
cultivos ensayados.
78
4.3 Análisis de metales pesados
Cuadro 37. Evaluación de Lemna minor con Mercurio
Parámetro: Mercurio Hg•z

TRATAMIENTO
... . ·~ - UNIDAD MÉTODO CONCENTRACIÓN LMP
2.000 Mg/1 Espectrofotometría 1.698 0.0002
0.128 Mg/1 Esp~trofotometría 0.020 0.0002
Testigo Mg/1 Espectrofotometrfa 0.000 0.0002
Fuente: tes1s 2013
Cuadro 38 Evaluación de Lemna minor con Cadmio
Parámetro: Cadmio Cd·i--

1 1
TRATt~MIENTO UNIDAD MÉTODO CONCENTRACIÓN LMP
1 0.128
-- r----------
Mg/1 Espectrofotometría 0.098 0.003
0.064 Mg/1 _~_spe~ro!~tometría 0.022 0.003
0.032
--- -
Mg/t Espectrofotometría_
- --- 0.020
··-
0.003
~ . ·-
0.016 Mg/1
--
Espectrofotometría
.. ... -;--
0.008 ··-
0.003..
- -- ·---- ·---~~--
0.008 _Espectro~to~etria 0.005 .. ···-· ·-·
0.003
Testigo Mg/1 Espectrofotometría 0.000 0.003
Fuente: tesiS 2013
Cuadro 39 Evaluación de Lemna minor con Plomo
Parámetro: Plomo Pb+Z

TRATAMIENTO
---UNIDAD MflOOO CONCENTRACIÓN LMP
0.064 Esp~~':.~~otometrí~ 0.01
Mg/1
-- __
-~. ---0.022 ·-
0.032
0.016
Mg/1
Mg/1
Esp_ectrofotometría-
_~spectrofotometrí~
-- 0.020
0.015
0.01
-··-·
0.01
---
0.008 Mgfl_ ESJ>e_ctrofo!~m~ría_ 0.006 0.01
-- ·------
Testigo
-
Mg/1 Espectrofotometría
---~··.·····-· -·· ------
0.000
-- ·-
0.01
--·-
Fuente: tes1s 2013
79
Cuadro 40 Evaluación de Pistia stratiotes con Cadmio
Parámetro: Cadmio+z
TRATAMIENTO UNIDAD MÉTODO CONCENTRACIÓN LMP
0.512
---
0.256 Mg/1 Esp~ctrofotometría 0.110 0.003
-- ·-·- ~--
Testigo Mg/1 Espectrofotometría 0.000 0.003

Fuente: tests 2013
Cuadro 41 Evaluación de Pistia stratiotes con Mercurio
Parámetro: Mercurio Hg•2 .. __ -1

-- CONCENTRAC.lót-.1 ¡
TRATAMIENTO UNIDAD MÉTODO t.MP .
0.128 Mg/1 Espectrofotometría 0.039 0.003 1
0.064
-·----- ----~g/1 .. Espectrofotometría
-- 0.032 1 -~-----·
0.003
-- ·--· - -~~ ~
0.016
-- ----- 1-··Espectrofotometría
Mg/1 .. ---
0.008 0.003
0.008 -~_g/! .1--- .. - ..... -- -
Espectrofotometrfa 0.002 0.003
Testigo Mg/1 Espectrofotometría 0.000 0.003 ····j
Fuente: teSis 2013
Cuadro 42 Evaluación de Pistia stratiotes con Plomo
Parámetro: Plomc•2
TRATAMIENTO UNIDAD MÉTODO CONCENTRACIÓN- LMP
-----
1.000 Mg/1 , Espec.!!~fotometría 0.058 0.003
0.512 __ _ -~g[I___I-E_s_,_pe_ct_ro_f_ot_o_m_e_tr_ía-+----'-0.-'-0_42
_ _-+__0_.-'-00_3_----<
r---0_.1_2_8_ _-+---M-=g/.,-1_-+_Es_p,_e_ct_r_o~fo_t_om_et_rí~-1-- _0:012 ________ 0.003 __ _
1----0-'-.0-'-64:..____ . --- -~g/1_ - ~ee~rofotome!!f!. . - ---- 0.006____ 1-- o~_
'-=----:-_Te-=-s-=ti~go=-o-:::----'----M_,g/'-'--1_____ Espectrofo~~metría _Q.:QQ<?___ ____-º:_003
Fuente: testS 2013
80
Cuadro 43 Evaluación de Eichhomia crassipes con Cadmio
Parámetro: Cadmio•z
TRATAMIENTO UNIDAD MÉTODO CONCENTRACIÓN LMP 1
0.128 Mg/1 Espectrofotometrí~ 0.088 0.003
¡-·
0.064 -
Mg/1 Espectrofotometría ¡----0.022 0.003
0.032 Mgfi Espectrofotometría 0.020 0.003
l 0.016 Mg/1 Espectrofotometría -
0.008 -- 0.003
0.008
1-------~-
Testigo Mg/1_ _ Eseectrof()tom«;~ía 0.000 0.003
Fuente: tes1s 2013
-~----
---
Cuadro 44 Evaluación de Eichhomia crassipes con Mercurio

-
Parámetro: Mercurio Hg•2
-- -- -
TRATAMfENTO UNIDAD MtroDO 1 CONCENTRACIÓN ! Ut~P
0.128 Mg/1 _ ~spectrofotometría _ - 0.048--T-- 0.003
- - 0.064 -
0.032
Mg/1
M~l___
-- --- - --
Espectrofotometría · 0.012
------- 0.003
--- -
Espec:trofotometría O.Qll
---0.003
- o.oos --- Mg/1
- Espectro!<?_to~etrí~
~ t--
0.007
---
---· - --0.003-
Testigo Mg/1 - - ' - -
Espectrofotometría 0.000 0.003
--.-------
Fuente: tes1s 2013
- - - ·····• --~ --·--- ··- --
Cuadro 45 Evaluación de Eichhomia crassipes con Plomo
Parámetro: Plomo•2
TRATAMIENTO -UNIDAD ______MÉTODO _i_~NCENI_!tAtfóN ¡' LMP __ _
1----2_.0_00 _ _- f - - -Mg/1 Espectrofutometría __ _Q.098 0.003
.!:000 __ _ _ ~g[!__ _ Espect_!:ofot~etría _____ O.Q22 . 0.00_3_--t
O 512 _ _ Mg/1_ _ _Espectrofotometría _ 0.010 0.00_3_-1
__Mg/_1_ _ Espe~rofotometría 0.008 ___ -~-03_-----~
8
.2SG --
128 -~Pl' ___ EsP-_~~rofoto~etría _0.001___ _ _ 0.003
stigo _ Mg/1 _Espectrofotometría L_ 0.000 __ ... 0.003
Fuente: tesis 2013
81
Cuadro 46 Tolerancia de las macrófrtas a los metales
Mercurio, Plomo y Cadmio (mg/1)
Mercurio Cadmio Plomo

Macrófitas
mg/1 mg/1 mg/1
¡__ _____ Lemn~ ~~n-~~--- "~e-n~~j~~~~ -----~-----~·~~ _0.~~-j

Eichhomia crassipes "putu-putu" 0.008 0.128 0.512
~ Pislia stratlotes "huama" 0.008 0.512 0.256 l
Fuente: tesis 2013
En el cuadro anterior se puede observar los resultados generales de la
tolerancia, aquellos que -resisten concentraciones determinadas de un
metal, presentando un buen desarrollo asi como la retención del
mismo.
lo anterior mencionado es corroborado por (Posada et al. 2006),
quienes describieron. Que algunas plantas actúan como
bioindicadores de la presencia de este metal en el medio al retenerlo
se!ectivamente; mientras que otras se comportan como
bioacumuladoras al tolerar su presencia y acumularlo en su estructura,
y pueden dar paso a la bioconcentración a través de fa cadena trófica.

Estos r.esultados no solo .sirven como bas-e para otros estudios, sino
que también para tomar en <:uenta que Jos bjoensayos son

82
herramientas muy útiles para establecer parámetros de tolerancia a
tóxicos, tal como lo afirman (Persoone et al., 2003;) donde sostienen
que la legislación de varios países como Estados Unidos, Canadá y
los de ,fa Comunidad Europea, entre otros, se han incluido los ensayos
con organismos vivos para cuantificar el grado de toxicidad de
efluentes industriales, aguas residuales y/o residuos sólidos, para
determinar los límites de descarga y los efectos tóxicos sobre la biota.
Es bueno precisar que los efectos fitotóxicos se empezaron a notar a
las 24 horas, siendo el primero, el desprendimiento de las raíces de
las macrófttas, lo que sugiere que es la principal estructura de la
planta donde se encuentra el metal, esto es confirmado por (Arroyave,
M., 2004) quien sostiene que en las plantas, los .efectos de los metales
empiezan en la raíz, ya que este es el órgano responsable de asimilar
los nutrientes del medio, y afectan sucesivamente el resto de la planta.
En las hojas se producen graves daños en los cloroplastos y las
mitocondrias, lo que altera los procesos de fotosíntesis y de
respiración. En una fase más avanzada de alteración se producen
intensos cambios metabólicos y de regulación celular, y ocurre
finalmente el estímulo de la senescencia por acumulación crónica del
metal pesado, lo que puede resultar en la muerte de la planta. Otro
estudio de (GOthberg et al. 2004) Reportan que las plantas expuestas

83
a este metal retuvieron una mayor proporción en las rafees, las cuales
tuvieron una mayor tolerancia que los brotes a las altas concentracio-
nes de metal internas, y determinaron que los bajos niveles de
nutrientes promueven la acumulación de metales en las diferentes
partes de la planta.
Es bueno concluir que las variables número de fronde y promedio de
raíces son constantes y sostenidas en el tiempo por fo cual se le
considera como efectos frtotóxicos para ensayos de toxicidad con
macrófitas., esto lo confirma (Torres et al. 2007) quienes afirman el
primer efecto directo de tos metales cuando alcanzan las
concentraciones. tóxica~ en la planta es un cambio en el batanee iónico
de la célula. Este desbalance se puede dar en la superficie celular al
reemplazar el ión tóxico por otro ión de la célula o también puede
suceder que el ión ingrese dentro de la célula y reemplace otros iones
que son normalmente ce-factores de enzimas u otros componentes de
organelas celulares. Ante la posibilidad de estos desórdenes
fisiológicos, todas las plantas han desarrollado una serie de
respuestas para tolerar y por tanto sobrevivir hasta un cierto umbral de
concentración de metal. El conjunto de las respuestas visibles forman
lo que denominamos síntomas de estrés. los sintomas causados por
el exceso de metales en las plantas son muchas veces comunes a los

84
diversos metales. Los síntomas más comunes son una reducción del
crecimiento de las rafees y el número de frondes así como el
amarillamiento de las hojas.
Las macrófrtas son excelentes especies para ensayos de toxicidad, no
solo de metales pesados, sino también de sus modificaciones, por
ejemplo de mercurio orgánico (metilmercurio), que es más peligroso
por su proximidad a la cadena trófica, esto es reafirmado por (Ramos
et al. 2000) quienes estudiaron el nivel de contaminación por
metilmercurio en la región colombiana de La Mojana y determinaron
tos coeficientes de partición de mercurio total a metilmercurio para
cada tipo de muestra analizada con el fin de encontrar los porcentajes
de mercurio susceptibles de ser bioacumulables. En Eichhomia
crossipes los coeficientes indican una tendencia a bioacumular el 3%
del mercurio que contiene como metilmercurio; el 2% se bioacumula
en las hojas y tallos y el 1% se bioacumula en las raíces. Se encontró
además que el 40% del mercurio contenido en los peces y· el 12% del
contenido en los sedimentos se bioacumula. Este mercurio que se
bioacumula está disponible para bioconcentrarse hasta llegar al
hombre a través de la cadena trófica.

CAPiTULO V
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1 Conclusiones
-/ Según las evaluaciones de longitud de rafz, número de frondes y
retención del metal se detenninó que Lemna minor tuvo una tolerancia
de 1 mgll para Mercurio y una sensibilidad de 0.064 mgll a Cadmio y
0.008 mg/1 a Plomo. Además en los análisis de retención et mercurio
tuvo mayor concentración .
./ La tolerancia de Pistia stratiotes fue 0.512 mg/1 para Cadmio y una
sensibilidad de 0.256 mg/1 a Plomo y 0.008 a mercurio. La mayor
concentración en Pistia stratiotes fue de Cadmio
./ En el caso de· Eichhomia crassipes la tolerancia fue de 0.512mgll a
Plomo y una sensibilidad de 0.008 mg/1 a mercurio y 0.128mg/l a
Cadmio. Plomo tuvo mayor presencia en esta macrófita .
./ La longitud de ralees y numero de frondes, presentan una relación
dosjs-respuesta de tal manera que son excelentes variables para
evaluar efectos fltotóxicos en estas tres macrófitas.

86
5.2-Recomendaciones
·Se recomienda estudios a niveles moleculares sobre la retención de
los metales pesados en las macrófitas y de cómo se comporta dentro
de la especie vegetal.
-Realizar las pruebas de campo con la combinación de metales
pesados, y bajo condiciones ambientales, para poder recomendar el
uso de las macrófitas para biomonitores y/o como recuperadores de
cuerpos de agua contaminados.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFÍCAS
ALBERT L. 1997. Introducción a la Toxicología Ambiental. OMS. OPS. CPEHS.
México.
ARROYAVE, M., 2004. la lenteja de agua (Lemna minor): una planta acuática
promisoria. Revista EIA, ISSN 1794-1237 Número 1 p. 33-38. Febrero 2004.
Artículo recibido 31-X-2002. Aprobado con revisión 16-XII-2003. Revisado
BAIRD C. 2004. Qulmica Ambiental. Barcelona. Edit. Reverté. Segunda Edición.
BARBA L. E. 2002. Fitorremediación en el tratamiento de aguas residuales con
metales pesados. Universidad del Valle. Facultad de lngenierfa. Cali,
Colombia.
BLANCO 0., Llanos B., Cuizano NA., Maldonado H y Navarro AE. 2005.
Optimización de la Adsorción de Cadmio divatente en Lessoniatrabeculata
mediante-reticulación de CaCI2. Revista de la Sociedad Química del Perú,
BURKE O. Weis J.S. &Weis P. 2000. Release of metals by the leaves of the salt
marsh grasses Spartinaaltemiflora and Phragmitesaustrafis.
Estuarine.Coastal and Shelf Science.
CASTILLO G, Vila IC, Neild N. (2000y 2003) Ecotoxicity assessment of metals and
wastewater d using multitrophic assays. EnvironmentaiToxicology.
CARMONA E, R (2009) evaluación genotóxica de algunos metales pesados
drosophi/amelanogastermediante los ensayo SMART de alas y cometa.
Tesis doctoral, universidad autónoma de Barcelona

88
CHIEN, S. H.; CARMONA, G.; PROCHNOW, L. 1.; AUSTIN, E. R. 2003.Cadmium
availabilityfromgranulated and bulk-blendedphosphate- potassiumfertilizers.
J. Environ. Qual. 32: 1911-1914.
COOK, C.D. and B.J. GUT. 1974. Water plants of the world: A manual for the
identification of the genera of freshwater macrophytes. The Hague : Junk,
COOK, Ch. D. K. 1990. Aquatic plant book. SPB Academic Publishing, The Hague,
The Netherlands.
COUN, 1., Microorganism and their application to bioassay testing en Handbook
ofEcotoxicology, 1993. editadopor Peter Calow, Vol. 1, Ed. Blackweel
Scientific Publications, Gran Bretaña, pp. 315-330.
CLARET M, Urrutia R., Ortega R., Abarzua M. , .Pérez C. & Palacios M. 2003.
Estudio de ta contaminación en agua de pozo destinada a consumo humano
y su expresión espacial
CROW, G.E 2002. Plantas acuáticas del Parque Nacional Palo Verde y Valle
Tempisque, Costa Rica = Santo Domingo de Heredia, CR, Instituto
Nacional Biodiversidad (INBio).
CULLEN, J., T. Lane, F. Morel & A. Sherrel. 1999. Modulation of Cd uptake in
phytoplankton by seawater C02 concentration. Nature 402: 165
DELGADO, M., M. BIGERIEGO.& E. GUARDIOLA 1993. Uptake of Zn, Cr and Cd
by water hyacinths. Water Research, 27 (2): 26g..272.

89
DUTKA, B.J., 1996, Bioassays: a Historical Summary of those Used and Developed
in Our Laboratories at NWRI, National Water Research lnstitute, Environment
Canada, Burlington, ONT., 93 pp.
EPA (Environmental Protection Agency). 1996. Ecological effects test guidelines.
Aquatic plant toxicity test using Lemna spp. Tiers 1 and JI.
FAO. 1981. Manual de Métodos de Investigación del Medio Ambiente Acuático.
Parte 43 • Bases para la Elección de Ensayos Biológicos para Evaluar la
Contaminación Marina. FAO, Doc. Tec. Pesca. (164):
FERNÁNDEZ C. A. (2008) tecnologías económicas para remoción de arsénico en
aguas centro de estudios transdiscipllnanos del agua. UniVersidad de
buenosaires
FERNANDEZ M, RIVERA L, MACIAS M, PALMEROS 8, (2006). "Biomonitores:
desenmascarando a los tóxicos". Revista de divulgación científica y
tecnológica de la universidad veracruzana.
GOTHBERG, A., GREGER, M., HOLM, K. and BENGTSSON, R E. (2004).
lnfluence of nutrient levels on uptake and effects of mercury, cadmium, and
tead in water spinach. J. Enviran. Qua!. 33: 1247~1255 (Abstract).
GRANT W F (1999) higther· plant assays for the detection of cromosoma! aberrations
and genemutation~a brief historical background on theiruse for scrrening and
monitoring enviromental chemicals
GOMEZ G. R; (1995) Diagnostico sobre la contaminación ambiental en la amazonía
peruana. Documento técnico n° 15 .!quitos- Perú.

90
HOLLOWAY, G., Croker, H., Callaghan, A., 1997. The effects of novel and stressful
environments on trait distribution, Funttional Ecology, 11:579-584.
INSTITUTO GALLACH. 1984. Historia natural. Volumen V. Barcelona: Océano
JANA, S. y M. CHOUDHURI. 1984. Synergistic effects of heavy metal poflutants on
senescence in submerged aquatic plants. Water, Air, and Soil Pol/ut.,21:
LABRADA R,F. et al. 1979. Metodología sobre malas hierbas. Parte Ul. Instituto de
Investigaciones de Sanidad Vegetal. MINAG. La Habana.
lARRA! N, A 1995. Criterios ecotoxicológicos para evaluar alteraciones ambientales
y establecer parámetros de control: importancia de tos bioensayos de
toxicidad. Cienc. Tec. Mar, CONA
LENKA, M., PANDA, K. K. and PANDA, B. B. (1990).Studies on the abitity of water
hyacinth (Eichhomia crassipes) to bioconcentrate and biomonitoraquatic
mercury. EnvironPollut. 66 (1): 89-;99. (Abstract).
LONDOÑO O, (2006), Manejo integrado de plagas - insecticidas botánicos. Me'X!co
MARCÓ PARRA, LUÉ~ERÚ. 2009. Evaluación de .Lemna: la planta Lemna
minorcomobiorremediadora de aguas contaminadas con mercurio. Tesis de
grado. Biblioteca de Agronomfa. Universidad Centroccidental "Lisandro
Alvarado". [Revisado 03/08/20011 ).
MAROZZI, M.; Villalba, A.; Polla, W.; Hadad, H.&Devercelli M. 2000.Respuesta de
Pistia stratiotes L.(araceae) a la acción del Cadmio. Revista FABICIB.
MKANDAWIRE M., Tauber B., Oudel EG.(2004). Capacity of Lemnagibba
L. (duckweed) for uranium and arsenic phytaremediatiom jn mine taiting
waters. lntemational Joumal of Phytoremediation, 6, 4: 347

91
MOORE, J.N., Luoma S.N., 1990, Hazardous wastes from large-scale metal
extraction: Environment Science and Technology, 24, 1278-1284.
METCALF &Eddy . 1995. Ingeniería de aguas residuales. Tratamiento, vertido y
reutilización. McGraw-Hill/interamericana de España S.A.
MORTVEDT, J. J. 1996. Heavy metal contaminants in inorganic and organic
fertilizers.Fert. Res. 43: 55-61.
NAVARRO AE. BLANCO D. LLANOS 8; FLORES J Y MALDONADO H. 2004.
Biorremediación de cadmio (11) por desechos de algas marinas. Optimización
del equilibrio y propuesta de mecanismo. Revista de la sociedad química del
Perú.
NOVOTNY V & OLEM H. 1994 Water quality: prevention, identification and
management of diffuse pollution. Van Nostrand Reinhold New York.
ODJEGBA. V.J.; Fasidi, 1.0. Changes in antioxidant enzyme activities in
Eichhomiacrassipes (Pontederiaceae) and Pistia stratiotes (Araceae) under
heavy metal stress.
OPORTO C., ARCE 0., DE PAUW N., VEN DEN BROECKS E., 2001. Evaluación
del potencial de Lemna mínorpara la remoción de Cr (VI) de aguas
residuales.
OROZCO C, PÉREZ A, GONZALES M, VIDAL F & ALFAYATE J. 2005.
Contaminación Ambiental. Una visión desde la Química. Edit. Thompson.
PALACIOS, M. Y PEREIRA, G. 1997. Estudio sobre el cultivo de
Met!icyclopsmendocinus (Crustacea, Copepoda) y su utilización en ensayos
toxicológicos acuáticos. ActaCient.Venez

92
PANDA, B. B., DAS, B. L., LENKA, M. and PANDA, K.K. (1988). Waterhyacinth
(Eichhornia crassipes).
POSADA, Marta Isabel; Arroyave, María del Pilar. Efectos del mercurio sobre
algunas plantas acuáticas tropicales. Revista EIA, ISSN 1794-1237
PARIS1, H. Hadad1,2,3, M. A. Maine1,2 & N. Suñe1(2005), Eficiencia de dos
macrófrtas flotantes libres en la absorción de metales pesados Universidad
Nacional del Litoral. Santiago del Estero, Facultad de Ingeniería Química
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET),
Argentina.
PERSOONE, G., MARSALEK, B., BLINOVA,I., TOROKNE, A., ZARINA, 0.,
MANUSADZIANAS,L., NALECZ-JAWECKI,G., TOFAN.L., STEPANOVA,
N.,TOTHOVA, N. and KOLAR, B (2003).A practicaland user-friendly toxicity
classificationsystem with microbiotestsfor natural waters and
wastewaters.Environmental Toxico/ogy,, 18,395-402.
RAMOS, C. X., ESTBtEZ, S. L. y GIRALDO, E. (2000). Nivel de la contaminación
por metilmercurio en la región de La Mojana. Departamento de Ingeniería
Civil y AmbientaL Centro de Investigaciones en Ingeniería Ambiental (CIIA).
Universidad de los Andes. Bogotá. Colombia.
RIODLE, S. G., TRAN, H. H., DEWITT, J. G.. and ANDREWS, J. C. (2002). Field,
laboratory, and X-ray absorption spectroscopic studies of mercury
accumulation by water hyacinths. EnvironSciTechnol.1965-1970.
ROORIGUEZ R., J. C. y J. A. BETANCOURT L. 2000. Caracterización físico-
química de una laguna de inundación del Tramo Orinoco-Medio y su relación

93
con la biomasa de la cobertura de bora (Eichhomiacrassipes (Mart.) Sofms).
lnterciencia 24(4):243-250.
ROLDAN, G. (1992). Fundamentos de limnologia tropical. Medellin: Editorial
Universidad de Antioquia. 529 p.
ROMERO J. 2002. Tratamiento de Aguas Residuales. 2da Edición. Escuela
Colombiana de lngenierra. Bogotá.
RfOS M. 2005. Naturaleza y sostenibilidad. Maestría en Educación y desarrollo
social. CODEU-UTE. Quito.
SALOMONS, W., 1995, Environmental impact of metals derivad from mining a e t ivi
t i e s ; Proc e s s e s , predi e t ions , pr event ion: Jouma 1 of
Geochemical Exptoration, 52, 5-23.
SAN GABRIEL W, Ferrera-CerratoR,Trejo-Aguilar O, Mendoza-LopezMR,Cruz·
SanchezS,Lopez-Ortiz C, Delgadillo-Martinez J & Alarcón A. 2006. Rev. lnt.
Contam. Ambient.22. Tolerancia y capacidad de fltorremediaci6n de
combustóleo en el suelo por seis especies vegetales.
SUNDA, W. & S. Huntsman. 2000. Effect of .Zn, Mn and Fe on Cd accumulation in
phytoplankton: lmpfications for oceanic Cd cyclin. Limn. Oceanogr. 45: 1501-
SALT DE., Blaylock M., Kumar N., Dushenkov, V., Ensley 80., Chet l. and Raskin l.
(1995). Phytoremediation: A novel Strategy for the Removal of Toxic Metals
from the Environment Using Pfants. Biotechnology, 13:468-474.
SKOT,M., 1995. Ecotoxicological testing, Land contamination & reclamation.
SMITH R y Smith T. 2001. Ecología. 4ta edición. Pearson Educación. Madrid.

94
TERNEUS E &VASCONEZ J. 2005. Caracterización preliminar de los ecosistemas
acuáticos de las cuencas del Río Oyacachi y la laguna de Muertepung.
Fundación para la investigación y conservación de ecosistemas acuáticos
AGUA. Quito-Ecuador.
TORRES G, NAVARRO E, I.AN<3UASCO J,CAMPOS K YCUIZANO N (2007)
Estudio preliminar de la fttorremediación de cobre divalente mediante Pistia
stratiotes lechuga de agua) Departamento Académico de Qufmica
Universidad Peruana Cayetano Heredia, Urb. Ingeniería, Lima, Perú.
TORRES Abad, Sandra M. (2009).Estudio de Aprovechamiento del Lechuguin
Eichhomia crassipes, del embalse de la represa Daniel Palacios como
Biosorbente· de metales pesados en el Tratamiento de Aguas Reslduates.
Universidad Politécnica Salesiana Sede Cuenca. Facultad de Ciencias
Agropecuarias y Ambientales.
WELOON, L W., BLACKBORN, R. H. Y HARRISON S. D. (1973).Common aquatic
weeds. Dover Publications Jnc. New York., pp. 2-10.
VILLAMAR, F. 1996. Bioensayo de toxicidad (CL50) del dispersante de petróleo BP
1100 WO, con fttoplancton marino (Tetraselmissp). Acta Oceanográfica del
PacifiCO. INOOCAR; Ecuador, 8(1): 67,;.73
ZAYEO, A. (1998). Phytoaccumulation oftrace elementsbywetlands.JoumaJ of
Environmental Quality. 27(3):715-721 (Abstract);

ANEXOS·
Foto No 1 Lugar de recolección del material biológico (Quistococha)
.¡-
.. ~ . -. - .......
...
......·
'
.....1 ~... "t,.o
;;. .......~~'""'
Foto N° 2 Lugar de ejecución del trabajo (CIRNA)
Fuente: tesis 2013
Foto N° 3 Eichhomia crassipes con efectos fitotóxicos (necrosis)
---
Fuente: tesis 2013

96
Foto N° 4 Inhibición de numero de frondes de Pistia stratiotes 0.128mg/l de

Mercurio
·--
Foto N° 5 Lemna minorcon efectos fitotóxicos (necrosis)
Foto N° 6 Medición de las rafees de una macrófita

97
Foto N°8 Análisis de muestras en el espectrofotómetro UV.

98
i NORMAS LEGALES 377223

ANEXO 1
ESTÁNDARES NACIONALES DE CAUDAD AMBIENTAL PARA ACUA
CATEGORIA 1: POBLACIONAI. YRECREACJONAL
··~ dootiMtln ... orocflt<ciM · - pc>bMo ...........

Atau.._sdtlln--.....
"'""
_,..,.,......._
.............
-
Al A2 Al Bl Bl
~ UIIOAD
oerpdawtll..... ..,.,
....m..dio
" - Qtllpuetlon..,
P<Ooba""""'..,.
~iDNI ""'-·
"--"*'""
tnbM-.co avanz:ale
Conlocto
~
e--
VALOI! \'AlOII VALOR VWIIt VALOR
FÍSICOS V QuNcOS
Moftoatle
hcies yg•nt:o (Ml:IQ mJIL 1 1,00 ~.oo
OO:íck visile "
Conni.J>r.: m¡ll. (,005 0(2< (iQZ2 0022 0022
o.oa
CaMoWd
Clor.-ec
tn1ll
mJII.
Olll
2!W 250
001
25)
Of8
~ .."
Cob Cdo<- 1S 100 20J CÍ'ICIJn\)i)rMMI cilo c-ambie n)fña1 ~
C...Ñctn;.!od
6CIIIo PtiCo
""'""'" 1500 1 EOt " .. "
O B.O m¡ll. J ) lC 5 10
000
o.n..
l"!'lJtl
m¡ll.
10
50J
70
- ..
3li
..
3~
..
50
()a,_... ¡~Ui m,n O.S 05 .. 0,5

.. ~
A....,.,¡,
d>..,.,..
.. .
Fenele-~
~
m~'l.
moJI.
~.003
1 -
0,01 O,i
" .. ..
"
0191-P 01 015 o 15
fO<bto '""
floul1"'• A~.r.M~~
- .. A=n,;.«i< A.....,;, do
lll.mrilres
Ntrl!O< mgtN
!lo.....
1~ 10 10
na.'OI'.al~tc
10 ..
n".ortarÍI1fobn'l:l
....
1 ¡ 1
N<riz>< r.'lg't.)-1
.
1(1) "
N~af'lO'Ii<ca'
OO<
o . . ..,...... ~
pH
mgtH
......
Un~deFfl
I.S
Acool!bie
·-C
6,5-8.5
-
2
·- 5
5,5-9.0
1 (0(.
..
3,7
·-·
5.5-9.0
AC!D~
--5
6-9_(.!,!1
..
....
·- .
1000
..
1500
..
.....
O~~Tubdl:o n~
S.r..to; m~lt Z)) -
S.&.oc
Tll!titéat!
mtfl
UI\'T"
G,CS
S
"
liJO ..
" 0.~5
100
IIIORGÁIIKOS
Almír>o m¡ll. O.l 0,2 O.l 0,2 ..
Al!.timmW! ..,n f1,00G 0,(1)¡, O,OOG 0.006 "
AW.<o
B1tM
rnJ'l
m~n
oc~
O}
om
01
O,CS
1
OJI
0.7 ......
o.m.
8>1<
mtll
m\~l.
~.~»'
0.)
0,04
05
0,04
0,1!1
0.(>4
0.5 ..
c..tn;,
Catre
m¡ll
m¡ll.
~()J)
2
O.COj
2
0,01
2
0.(·1
< .."
o.cs 0,1)5 O,t!i 0.(·5
CmnoT.nl
Clono VI
~
m¡'l o,ro 0,1)5 O,CS O,C-5 ..
"
H.....,
Mow9oneso
m>n.
moJI.
Ol
0,1
¡
04
1
o.s
OJ
0,1 ..
"
MoiMo tn1ll U.001 0,(02 0.002 0.011 "

N'qvcl miL 0()2 O,C2S 0025 O,C2 "
O,Q1 O,C,1
Pioll m¡ll.
mtlt 0,01
0,1)!)
0,1)5
010
O,C!i 0,(•1 ....
(•,0)
""'""
5-.e ~'1. OUl 0,1)5 o.m 0(•1
u-;., mJ!l Oc> 0.07 0,07 o.~' (-,01
VdFid'tfQ
1~
m)ll
~fl
O,i 01 0,1 0,1
J
..
0,1
ORGÁ.~OS
1 I".OVPU~lOSOII!;ANI:OSVIIIÁlnfS
Hctt"""""""'""""' ce~tmf'
ITrih>l...........
m¡IL
m\fl
oro
0.1
02
0.1
0,2
0.1 .. ..
"""'•-t.. o...Hi<M V.Liiits
!=!JJ•
1,1.1-T~ . i1556 mJ/1. 2 2 ... ...." "
11~!!Nl-15-3~
1,2 o;¿.,._, -lOi--«;.1
mili.
mtfl·
003
0,(,3
003
0,03 .... ..
"
"
1,2-llldoDber.oeoo - !!5-S0-1
Ha~o-Rl..Q\.l
m~
'"Jn
1
00(01;
1
o,ooo; ..
..
.. ....
"
Tttr--121·16-4 m,lt O,fA 0,114

.... -·.. ...
0.(00
Te1r>donto de C•!loro - 5f>.2J.5
TriWf<<t..., - 79-Gl-6
m\fl
moJI.
(,())2
O,<i1 0,01 ..
BElX.

Ingeniero en Gestión Ambiental: Minor "LENTEJIT A"

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Ingeniero en Gestión Ambiental: Minor "LENTEJIT A"

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

-r MO &AI..

UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA

ESCUELA DE FORMACIÓN PROFESIONAL DE INGENIERIA EN

DETERMINACION DE LA TOLERANCIA A PLOMO (Pb),

INGENIERO EN GESTIÓN AMBIENTAL

CRISTHIAN BENJAMIN GOMEZ RIOS

Tesis aprobada en sustentación publica eJ dia 31 de agosto

~ A Dios por estar presente en todo momento de mi vida, por darme

fuerza, sabiduría, inteligencia, y sobre todo por cuidarme y ser mí

gura en el camino del éxito.

~ A mis abuelos y tíos, por brindarme el apoyo, en lo moral,

económico, y por estar presente en toda la trayectoria de mí existir,

y por brindarme toda la confianza hacia mí persona.

~ A Eurídice Maria Tuesta Bardales,la felicidad que le faltaba a mi

vida, por ayudarme a terminar este presente trabajo de

investigación, por el gran apoyo, dedicación, y paciencia, dándome

fuerzas todos los dfas para no darme por vencido .

./ A mi Tía Socorro Gómez Alvesmilho; y a mi Abuela Florinda

Alvesmilho de Gómez por el gran apoyo moral, y sobre todo

económico, y por la gran confianza que tiene hacia mi persona y

hacerme entender que todo se puede en esta vida, con dedicación

y voluntad, y amor de· Dios todo se es posible~

./ Mi agradecimiento a los profesores de la Universidad Nacional de

la Amazonia Peruana-Facultad de Agronomía, por sus sabias

enseñanzas que nos brindaron, para hacer de cada uno de

nosotros profesionales al servicio de nuestra Región .

./ Mi agradecimiento al Blgo. Pedro Adrianzén Julca, por su valiosa

participación en el asesoramiento, con orientaciones específicas y

precisas para culminar el presente trabajo de tesis.

CAPITULO 1: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 18

1.1 Problema, hipótesis y variable 18

1.1.3 Identificación de las variables 19

1.1.3.1 Variable dependiente 19

1.1.3.2 Variable independiente 19

1.1.4 Operacionalidad de las variables 19

1.2 Objetivos de la Investigación 21

1.2.1 Objetivo general 21

1.2.2 Objetivos especfficos 21

1.3 Justificación e importancia 21

2.1 Ubicación del área de estudio 2~

2.2 Recolección del Material Biológico 22

2.3 Aclimatación de las macrófitas 23

2.4 Preparación de Diluciones 23

2.5 Estandarización del Control Negativo o testigo 24

2.8 Ensayo de toxicidad aguda de macrófitas 24

2. 7 Variables, promedio de ralees y número de fronc:lts 25

2.8 Aiiillsls y procesamiento de datos 26

2.9 Análisis de los metales pesados 26

CAPITULO 111: REVISIÓN DE LITERATURA 32

3.1 Marco teórico t2

:í.2 Marco conceptual :íS

4.1 Resultados de controles

4.2 Resultados y discusión de los ensayos de toxicidad

A. Para Lemna minor

S. Para Pistia sfratiotes 55

C. Para Eichhomia crassipes 67

4,3 Análisis de metales pesados 78

CAPITULO V: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 86

Cuadro 1 Análisis de varianza para número frondes de L. minar con

Cuadro 2 F'rueba de Tukey para número de frondes de L. minar con

Cuadro 3 Análisis de varianza paralongitud de rafees de L. minar con

Cuadro 4 Prueba de Cunean para longitud de rafees de L. minar con

Cuadro 5 Análisis de varianza para números frondes de L. minar con