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CÓDIGO: FO-DOC-112

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS PÁGINA: 1 de


VERSIÓN: 01
6
PROCESO GESTION DE APOYO A LA ACADEMIA FECHA: 02/09/2016
FORMATO GUÍA PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO VIGENCIA: 2016

LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR


UNIDAD ACADEMICA: Programa de Medicina Veterinaria y Zootecnia.
CURSO: Biología Celular
PRACTICA Nº 3: Macromeleculas

1. OBJETIVOS
1. Identificar los compuestos orgánicos (biomoléculas).
2. Reconocer las biomoléculas por métodos químicos.
3. Identificar compuestos orgánicos presentes en frutas y alimentos.

2. CONSULTA PREVIA - PREINFORME


¿Para qué le sirven a la planta los tubérculos como la papa o la yuca?
¿Por qué las dietas para adelgazar recomiendan aumentar el consumo de proteínas?
¿Por qué el contenido de azúcar de las frutas es diferente dependiendo del tipo de planta?

3. FUNDAMENTO TEORICO
Lo que para los científicos de comienzos del siglo XX era una empresa sin esperanza, es hoy en día un hecho:
la inmensa variedad de moléculas orgánicas se reduce a una simplicidad básica. Esto se debe a que todas las
biomoléculas de las células están constituidas por moléculas sencillas y simples encadenadas en miles de
unidades. Los seres vivos están compuestos por moléculas, las cuales, si se examinan individualmente,
cumplen con todas las leyes físicas y químicas que describen el comportamiento de la materia. La mayor parte
de los componentes químicos de los organismos vivos son compuestos orgánicos, constituidos por carbono e
hidrógeno. Sin embargo las moléculas de importancia biológica además poseen oxígenos, nitrógenos, fósforo y
azufre. Estos elementos se combinan para formar cuatro moléculas orgánicas que son constituyentes
fundamentales de las células: carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos.

Los Carbohidratos, se llaman también glúcidos o hidratos de carbono. Son biomoléculas formadas por C – H –
O en una proporción de Cn H2n On. Para la clasificación más simple de los hidratos de carbono es tomando
como criterio, el número de unidades básicas que lo forman: Monosacáridos: corresponde sólo a la unidad
básica, destacándose aquí la glucosa, la fructosa, la ribosa, la galactosa, etc. Disacáridos: Formados por dos
moléculas de monosacáridos, como la lactosa (glucosa + galactosa), sacarosa (glucosa + fructosa), maltosa
(Glucosa + glucosa). Polisacáridos: Formados por largas cadenas de monosacáridos como el almidón, el
glicógeno, la celulosa. Entre sus principales funciones están producir energía, formar parte de estructuras como
la membrana celular, hormonal, o inmunológica.

Las proteínas, son compuestos formados básicamente por C – H – O – N – S. Las proteínas son
macromoléculas formadas por unidades básicas o monómeros llamadas aminoácidos. Estos se caracterizan por
poseer un grupo carboxilo “COOH” y un grupo amino “NH2”, unido a un radical que varía. Sus propiedades son:
Compuestos sólidos solubles en agua, tienen un elevado punto de fusión. Existen 20 aminoácidos en la
naturaleza. La mayor parte del cuerpo está formado de proteínas y las necesitas para crecer, moverte y
defenderte de las enfermedades, entre otras funciones.

Los lípidos, son compuestos formados por C – H – O al igual que los hidratos de carbono, pero con la diferencia
que el O2 se encuentra en menor cantidad. Son compuestos insolubles en agua y solubles en solventes
orgánicos como el éter, cloroformo, etc. Los lípidos se clasifican en: 1. Ácidos grasos: moléculas formadas por
cadenas hidrocarbonadas lineales con un número par de átomos de C que se caracterizan por tener un grupo

ELABORADO POR: ACTUALIZADO POR: CARGO: FECHA:


Elizabeth Aya*, Gloria Victoria Andrea Morales Rozo* Docente Ocasional 23 agosto 2017
Castro R.*, Martha Lucia Ortiz M.*, Gloria Victoria Castro R.* Docente Ocasional 17 marzo 2020
Hernando Ramírez Gil*
*Docentes FCBeI
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carboxílico (COOH). Por ejemplo, ácido palmítico, esteárico, oleico. 2. Lípidos saponificables: son aquellos con
los que se puede fabricar jabón ya que contienen ácidos grasos. Ejemplo de ellos son las ceras, los triglicéridos,
la colina, etc. 3. Lípidos insaponificables: son aquellos que no poseen ácidos grasos, por lo que no originan
jabones. Por ejemplo, el colesterol, ácidos biliares, hormonas sexuales (progesterona y testosterona), etc. Sus
principales funciones son: segunda fuente de energía (reserva), térmica, como aislante térmico y estructural,
forma parte de las membranas celulares.

Los Ácidos Nucleicos son compuestos químicos formados por C – H – O – N y P. La molécula básica se llama
nucleótido y está formada por: 1 monosacárido de 5 carbonos (pentosa), 1 base nitrogenada, 1 molécula de
ácido fosfórico o grupo fosfato. Una de las biomoléculas más importante que conoceremos es la molécula de
ADN, construida sobre la base de 4 nucleótidos dispuestos en diferente orden y número para cada especie. Sus
principales funciones son: almacenamiento, transmisión y expresión de la información genética (ADN ácido
desoxirribonucleico). Control de la síntesis y la secuencia de todas las proteínas, enviando un mensaje desde el
núcleo al citoplasma (ARN ácido ribonucleico).

4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS


Se debe listar los equipos, materiales y reactivos requeridos para el desarrollo de la práctica.

Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos


Aceite de cocina
Huevo
Uvas
Tomate
-Gradilla/9 Tubos Naranja -Fehling A
-Mortero (1grupo) Banano -Fehling B
-7 pipetas 5 ml Mantequilla -Lugol
-6 goteros Carne -Biuret
Leche -Sudan III
-6 Beaker 5 onz Tinta roja
Cuchillo o minora
Laminas y laminillas
Papel secante
Jabon antibacterial

5. PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA
1. Determinación de azúcares reductores
Los monosacáridos y la mayoría de los disacáridos poseen poder reductor, debido al grupo carbonilo que tienen
en su molécula. Este carácter reductor puede ponerse de manifiesto por medio de una reacción redox, llevada a
cabo entre ellos y el sulfato de cobre (II). Las soluciones de esta sal tienen color azul. Tras la reacción con el
glúcido reductor se forma óxido de cobre (I) de color rojo. De este modo, el cambio de color indica que se ha
producido la citada reacción y que, por lo tanto, el glúcido presente es reductor.

BLANCO (TUBO 1): Colocar 3ml de agua, adicionar 1 ml de solución de Fehling A (contiene CuSO4) y 1ml de
Fehling B (lleva NaOH para alcalinizar el medio y permitir la reacción).

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REACCIÓN (TUBO 2): Poner 3ml de solución de glucosa, adicionar 1ml de solución de Fehling A y 1ml de
Fehling B

Estos tubos deben calentarse al baño maría o en la llama del mechero hasta que hiervan.

2. Determinación de polisacaridos
El almidón es un polisacárido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la amilopectina. La primera se
colorea de azul en presencia de yodo debido no a una reacción
química sino a la adsorción o fijación de yodo en la superficie de la molécula de amilosa, lo cual sólo ocurre en
frío. Como reactivo se usa una solución denominada lugol que contiene yodo y yoduro potásico. Como los
polisacáridos no tienen poder reductor, la reacción de Fehling da negativa.

BLANCO (TUBO 3): Colocar 3ml de agua, adicionar 3 gotas de lugol.

REACCIÓN (TUBO 4): Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solución de almidón. Adicionar 3 gotas de solución
de lugol. Registrar los resultados.

Calentar suavemente, sin dejar hervir, hasta que pierda el color y luego enfriar el tubo de ensayo en agua
corriente por 3 minutos.

3. Reacción coloreada de Biuret específica para proteínas


Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su identificación,
destaca la reacción de Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas. El reactivo de Biuret lleva
Sulfato de cobre (II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos
formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de
proteínas.

BLANCO (TUBO 5): Colocar 3ml de agua y añadir 4-5 gotas de solución de Biuret, agitar para homogenizar.

REACCIÓN (TUBO 6): Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solución de albúmina al 2%, adicionar 5 gotas de
solución de Biuret. Agitar para mezclar bien.

4. Reconocimiento de lípidos

Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III.

BLANCO (TUBO 7): Colocar 2 ml de agua y adicionar 5 gotas de Sudan III.

PATRÓN (TUBO 8): Poner 2ml de aceite y añadir 4 a 5 gotas de tinta roja.

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REACCIÓN (TUBO 9): Colocar 2 ml de aceite y añadir 5 gotas de Sudan III. Agitar los tubos y dejar reposar por
5 minutos.

NOTA: Los tubos 1, 3, 5 y 7 son los controles negativos.

Compare la coloración de los tubos versus sus controles negativos e identifique las diferencias. Describa los
resultados.
Conserve los tubos 2, 4, 6 y 9 como testigos, úselos como referencia para analizar las muestras problema.
Los tubos 1, 3, 5 y 7 son los controles negativos.

6. RESULTADOS

1. Determinación de azúcares reductores


Compare la coloración de los tubos versus sus controles negativos e identifique las diferencias. Describa los
resultados.

2. Determinación de polisacaridos
Observar y registrar el resultado. ¿El azul que aparece tras calentar y enfriar es igual de intenso? ¿Por qué?

3. Reacción coloreada de Biuret específica para proteínas


Porque reacciona la albumina?. Observar y registrar el resultado.

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4. Reconocimiento de lípidos

Registre los resultados y diga porque reacciona el aceite con el Sudan?

Tome cada uno de alimentos y pruebe en ellos la existencia de biomoleculas. Con sus resultados complete la
siguiente tabla:

ALIMENTO FELLING LUGOL BIURET SUDAN III


AYB
UVA

TOMATE

NARANJA

BANANO

PAN

MANTEQUILLA

HUEVO

CARNE

LECHE

Explique los resultados obtenidos para cada alimento y compárelos con los reportes de la bibliografía.
¿De acuerdo a estos resultados cuál es el alimento más completo nutricionalmente?

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7. INFORME FINAL
Nombres:
Códigos:

Utilice al menos dos referencias bibliográficas para responder las siguientes preguntas, recuerde citar
adecuadamente:

1. Establezca que biomoléculas se encuentran en los alimentos utilizados en la práctica.


2. Explique como funcionan los reactivos utilizados en la práctica.
3. Responda las siguientes preguntas, con base en artículos científicos (poner citas):
 ¿Qué son los azúcares reductores? De ejemplos.
 ¿Qué otros métodos se utilizan para identificar carbohidratos, proteínas y lípidos?
 ¿Qué compuestos orgánicos se consideran como fuente de energía a corto y largo plazo?
 ¿Cuál es la importancia biológica y composición química de las hormonas?
 ¿Qué son los compuestos orgánicos biológicos: plásticos, reguladores y energéticos?
 ¿El almidón daría positivo a la reacción de Fehling?
 ¿La celulosa daría positiva la prueba del Lugol?
 ¿Cómo se prepara la NaOH al 20% en agua?

8. BIBLIOGRAFÍA
Harper, M., 2001, Bioquímica manual moderno, Mc Graw Hill, México D.F.
Horton, H., Hidalgo, M., 1995, Bioquímica, Prentice Hall, Madrid.
López, C., 1999, Bioquímica y biología molecular, Mc Graw Hill, México D.F.
Robinson, D., 1991, Bioquímica y valor nutritivo de los alimentos, Editorial Acribia, Zaragosa.

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