BIOLABO

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BIO-TT Temps de Thrombine
FABRICANT :
BIOLABO SAS, Réactif pour la détermination du Temps de Thrombine sur plasmas humains
Les Hautes Rives
02160, Maizy, France
REF 13980 R1 12 x 2 mL

|
SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES USAGE IN VITRO
Tel : (33) 03 23 25 15 50
Fax : (33) 03 23 256 256

INTERET CLINIQUE (1) (2) STABILITE ET CONSERVATION

Le Temps de Thrombine (TT) est un test simple et rapide qui permet
d’explorer la fibrinoformation. Cependant, il n’est pas modifié lors des
déficits en facteur XIII (facteur stabilisant de la fibrine). Il est
recommandé de déterminer le TT avant tout dosage analytique lors
d’un allongement inexpliqué des tests globaux (TP, TCA).
Un allongement du TT peut signifier :
• Une anomalie du fibrinogène : qualitative (dysfibrinogènémie) ou
quantitative (hypofibrinogènémie sévère ou afibrinogènémie
congénitale, hypofibrinogènémie acquise – CIVD, fibrinolyse, atteinte
hépatique).
• La présence d’antithrombines qu’elles soient thérapeutiques
(héparine, hirudine, argatroban…) ou anormales (protéines
myélomateuses inhibitrices de la polymérisation des monomères de
fibrine…).
PRINCIPE (4)
En présence d’une quantité standardisée de Thrombine, un plasma
normal coagule en un temps défini et constant.
REACTIFS
flacon R1 THROMBINE
Thrombine calcique lyophilisée (Origine bovine)
Environ 1,5 NIH/mL après reconstitution
PRECAUTIONS
Les réactifs BIOLABO sont destinés à du personnel qualifié, pour un
usage in vitro.
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation.
• Utiliser des équipements de protection (blouse, gants, lunettes).
• Ne pas pipeter avec la bouche.
• En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment à
l’eau et consulter un médecin.
• Les réactifs peuvent contenir de l’azide de sodium (concentration
< 0,1%) qui peut réagir avec les métaux tel que le cuivre ou le plomb
des canalisations. Rincer abondamment.
• La fiche de données de sécurité peut être obtenue sur simple
demande.
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen ou réactif d’origine
biologique comme potentiellement infectieux. Respecter la législation
en vigueur.
Stocker à 2-8°C dans le flacon d’origine bien rebouché.
Avant ouverture :
• Utilisés et stockés comme indiqué, les réactifs sont stables jusqu'à la
date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret.
Après reconstitution :
• Le réactif (flacon R1) est stable : 2 jours à température ambiante
7 jours à 2-8°C.
Ne pas utiliser le réactif si les valeurs des contrôles se trouvent en
dehors des limites de confiance recommandées.
Ne pas utiliser le réactif reconstitué (flacon R1) après la date de
péremption indiquée sur l’étiquette du coffret.
Ce réactif doit être réfrigéré pendant le transport.
PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (3)
Prélever par ponction veineuse franche
• Anticoagulant (0,5 mL de citrate trisodique 2 H2O 0,109 M pour
4,5 mL de sang). Eviter les prélèvements à la seringue qui favorisent
la formation de micro-caillots. Centrifuger 10 minutes à 2500 g.
• Exécuter le test dans les 8 heures qui suivent le prélèvement en
gardant le plasma à température ambiante (18-25°C).
• Conserver les Plasmas héparinés au maximum :
2 heures à 15-25°C (prélèvement sur citrate)
4 heures à 15-25°C (prélèvement sur tube CTAD, tubes
disponibles auprès de Becton Dickinson)
INTERFERENCES (4)
• Rejeter tout prélèvement partiellement coagulé (micro-caillots)
• Rejeter tout spécimen contaminé par des traces d’héparine dans le
matériel de prélèvement.
• L’utilisation de thrombine d’origine bovine ne permet pas de détecter
des allongements de TT dus à des antithrombines immunologiques
ou des anticorps exceptionnels.
Essais réalisés sur BIO SOLEA 4 sur plasma humain (valeur
normale) :
Bilirubine: Interférence positive à partir de 22 mg/L
Hémolyse : Pas d’interférence jusqu’à 240 µmol/L
Lactescence : Pas d’interférence jusqu’à 2% Intralipides.
Young D.S. a publié une liste des substances interférant avec le
dosage.

PREPARATION DES REACTIFS

• Thrombine (flacon R1)
Reprendre le lyophilisat avec 2 mL d’eau déminéralisée. Laisser la
solution se stabiliser pendant 30 minutes à température ambiante
(18 -25°C). Bien homogénéiser avant l’emploi, en évitant la
formation de bulles.

Made in France Dernière version : www.biolabo.fr Version : 06/03/2013

 REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES MODE OPERATOIRE
1. Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales. Technique manuelle
2. Plasma de contrôle REF 13961 Amener le réactif à température ambiante. Homogénéiser avant
l’emploi.
CALIBRATION
Dans un tube à hémolyse au bain marie à 37°C
Les résultats dépendent de la méthode utilisée. La validité des
résultats dépend du juste décompte du temps, du respect du rapport Plasma : 0,150 mL
volume réactif / volume spécimen et du contrôle de la température.
Incuber 2 minutes à 37°C.
CONTRÔLE DE QUALITE Thrombine (flacon R1) : 0,150 mL

Plasma de Contrôle Taux 1 6 x 1 mL Déclencher le chronomètre simultanément et noter le temps de

REF 13961
coagulation.
• ou tout autre plasma de contrôle titré pour cette méthode.
Faire une double détermination par plasma.
• programme externe de contrôle de la qualité.
En ajoutant la Thrombine, agiter et rechercher le moment de la
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants :
• Au moins un contrôle par série. coagulation en remuant le tube de façon à l’amener presque à
• Au moins un contrôle par 24 heures. l’horizontale, sous un bon éclairage.
• Changement de flacon de réactif. Technique automatique
• Après opération de maintenance sur l’analyseur.
Les caractéristiques de sédimentation ainsi que la qualité optique de
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de
confiance recommandées, appliquer les actions correctives suivantes : cette thrombine permettent une détection optique ou mécanique de la
1. Refaire une mesure en utilisant le même contrôle. formation du caillot. Se référer aux manuels d'emploi des fabricants.
2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, préparer un
plasma de contrôle fraîchement reconstitué et répéter le test.
CALCUL
3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, vérifier à
nouveau en utilisant un autre flacon de réactif et répéter le test. Noter les temps de coagulation des plasmas testés et du plasma de
4. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le contrôle.
service technique BIOLABO ou le revendeur local.
Vérifier que le résultat obtenu pour le plasma de contrôle se situe dans
l’intervalle de confiance indiqué dans le tableau spécifique du lot (Cf :
PERFORMANCES notice technique REF 13961 du lot de plasma utilisé).
Les études de répétabilité et reproductibilité ont été réalisées avec Si ce résultat est en dehors des fourchettes, s’assurer du bon
des plasmas normaux et anormaux sur coagulomètre BIO SOLEA. Les fonctionnement du système : conditions opératoires, réactifs, plasmas
résultats obtenus sont résumés dans le tableau suivant : à tester (voir § Contrôle de Qualité) et si besoin, recommencer le test.
Intra-série Plasma Plasma Inter-série Plasma Plasma
N = 20 normal élevé N = 20 normal élevé
REFERENCES
Moyenne (sec) 16,7 28,9 Moyenne (sec) 16,3 32,8
S.D. (sec) 0,21 1,24 S.D. (sec) 0,62 1,41 (1) Caen J., Larrieu MJ, Samama M : « L’hémostase. Méthodes d’exploration
C.V. % 1,3% 4,3% C.V. % 3,8% 4,3% et diagnostic pratique » Paris : L’Expension Scientfique, p.208-209, p.348-
351 (1975).
(2) Samama M., Conard J., Horellou M.H., Lecompte T.: “Physiologie et
Comparaison avec réactif du commerce (même méthode) : exploration de l’hémostase”Paris : Doin, p.155-156 (1990)
23 plasmas situés entre 15 et 40 sec ont été testés avec les 2 (3) Clinical Guide to Laboratory Test, 4th Ed., N.W. TIETZ (2006) p.1028-1029
(4) YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995)
réactifs sur coagulomètre BIO SOLEA4 : p.3-554 à 3-555
y = 0.8535 x + 2.1038 r= 0,9809

INTERVALLES DE REFERENCE (3)

TT normaux : entre 16 et 23 secondes en général.

(variable en fonction du couple réactif-instrument utilisé)

Il est recommandé à chaque laboratoire de définir ses propres valeurs

de référence pour la population concernée.
A titre d’exemple, 55 plasmas humains normaux ont été testés. Le
temps moyen obtenu a été de 16,4 sec avec un écart type de 0,98 sec
(98% des résultats étaient inférieurs à 18,5 sec).

IVD REF LOT →

Fabricant Date de péremption Usage “In vitro” Température de conservation Référence Produit Consulter la notice Numéro de lot Conserver à l’abri de la lumière Suffisant pour diluer avec

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