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DEPARTAMNENTO BIOMÉDICO NACIONAL Y DE REFERENCIA

Vigilancia de resistencia
antimicrobiana de
Neisseria gonorrohoeae

Laboratorio de Agentes de Infecciones


de Transmisión Sexual (ITS).
Sección Bacteriología
Subdepto. Enfermedades Infecciosas

Dr. Juan Carlos Hormazábal


TM. Alejandra Manríquez
Julio 2017
Instituto de Salud Pública de Chile
DEPARTAMNENTO BIOMÉDICO NACIONAL Y DE REFERENCIA
Imagen Referencial
Generalidades
• Diplococo gram negativo
Infecta diferentes tipos de mucosa:
Uretra en el hombre (uretritis)
Cuello uterino en la mujer (cervicitis).
Otras: rectal, conjuntival y faríngea.

• Manifestaciones clínicas: Secreción uretral purulenta o


muco purulenta en el hombre y cervical en la mujer
• Periodo de incubación de 3 a 5 días (rango de 1 a 20 días)
• Portadores asintomáticos a nivel anal, vaginal y faríngeo.

• El período de transmisibilidad puede durar meses o años,


especialmente en los casos asintomáticos. El tratamiento
adecuado interrumpe la transmisibilidad en sólo horas.

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Laboratorio
En hombres:
Tinción de Gram
• La presencia de diplococos gram-negativos intracelulares en secreción uretral o conjuntival es
evidencia de infección gonocócica aunque tiene una sensibilidad del 90 % y especificidad del
99%, se recomienda el cultivo en medio selectivo. El hallazgo de diplococos Gram-negativos
extracelulares también hace sospechar la presencia de infección gonocócica que debe ser
confirmada por cultivo.

En mujeres:
Tinción de Gram
• Sensibilidad del 50 % y especificidad del 95%, por ello para el diagnóstico requiere cultivo de
secreción endocervical en medio selectivo.

Cultivo:
• Es de importancia para el estudio de susceptibilidad antimicrobiana, se debe realizar en todo
paciente con sospecha diagnostica de infección.

Norma de Profilaxis, Diagnostico y Tratamiento de as Infecciones de Transmisión Sexual 2016

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Laboratorio: Identificación

 Recolección o Toma de muestra y transporte *


• Tórula de dacrón
• Traspaso inmediato a medio de cultivo o medio de
– transporte adecuado ; Amies carbón (12 horas)
• Transporte en el menor tiempo.
 Cultivo*
• Medio selectivo (Agar Thayer Martin modificado; Martin Lewis;New York)
VCN-T + 1% Isovitalex+ hemoglobina
• 18-24 hrs. de 35-37 °C, en ambiente húmedo y atmósfera con 5% CO2
 Enriquecimiento o Subcultivo*
• Traspaso a Agar chocolate (cada 18-24 hrs.) sobrevida en medios de 36-48 hrs.

Manual de Laboratorio; Gasp-Lac, 2012


* Manual para la identificación y pruebas de la
susceptibilidad a los antimicrobianos; OMS; CDC, 2012

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Laboratorio: Identificación
Identificación *
Identificación Presuntiva:
• Morfología colonias: Colonias color rosado-café, 0.5-1 mm de diámetro
• Tinción de gram: Diplococos gram(-), caras adyacentes aplanadas (granos de
café)
• Test de la Oxidasa: Positivo
• Test del Superoxol o Catalasa (peróxido de hidrógeno al 30%): Positivo 4+.
Prueba diferencial con otras especies de Neisseria.
• Prueba de la β-Lactamasa

Identificación Confirmatoria
• Test de utilización de Carbohidratos: Acidificación de Glucosa positiva (Agar CTA)
• API-NH, Crystal.
• Amplificación de ácidos nucleicos (PCR)

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Envío de cepa a Laboratorio de Referencia:
• Medio de transporte Amies carbón, cepa aislada, fresca (18-24 hrs).
• Placas de medios de cultivo. (Agar Thayer Martin, Agar Chocolate)
Ficha Técnica: http://www.ispch.cl/prestacion/2127029

Formulario B1 Envío de Cepas Sección Bacteriología.


Link: http://www.ispch.cl/prestacion/2127029

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Vigilancia de Resistencia Antimicrobiana

Published: July 7, 2017

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Vigilancia de Resistencia Antimicrobiana

Se puede concluir:
• Hay una alerta por la alta prevalencia de resistencia a los antibióticos usados
tradicionalmente (los que son mas económicos).
• El comienzo de la resistencia a las cefalosporinas de amplio espectro (drogas
más costosas).
• No existen aún drogas alternativas.
• Sus mecanismos de patogenicidad y virulencia
• Sus características de contagio.
Generan que Neisseria gonorrhoeae:

Sea actualmente un gran problema en Salud Pública.


Sea catalogada como “SUPERBUG” o “SUPERBACTERIA”

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Vigilancia de Resistencia Antimicrobiana en Chile

El ISP es el Laboratorio Nacional de


Referencia para Neisseria gonorrhoeae y le
corresponde según lo establece el
Reglamento sobre Notificación de
Enfermedades Transmisibles de Declaración
Obligatoria
D.S. Nº158/2004/art.11,
• La vigilancia para la resistencia de los
antimicrobianos.
• Deberá ser realizada en todos los
establecimientos hospitalarios, públicos
y privados, que efectúen aislamiento
microbiano.

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Vigilancia de Resistencia Antimicrobiana en Chile

Condiciones de Ensayo de estudio de Susceptibilidad*


Chile es parte de la red GASP-LAC, que es el Centro Coordinador para el
Programa de vigilancia de la susceptibilidad de los gonococos a los agentes
antimicrobianos (GASP) en América Latina y el Caribe (LAC), cuyo objetivo es
reforzar las redes de salud pública que investigan la emergencia de resistencia
antimicrobiana de aislamientos de N. gonorrhoeae en este territorio.

 La red de Vigilancia GASP-LAC es parte de la vigilancia organizada por


WHO.

 Para el estudio de susceptibilidad antimicrobiana, el GASP-LAC


recomienda a los centros de vigilancia la utilización los antibióticos:
Penicilina, Tetraciclina, Ciprofloxacino, Cefixime, Ceftriaxona,
Azitromicina, Espectinomicina.

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Condiciones de Ensayo de estudio de Susceptibilidad*
 Medio: Agar GC con 1% suplemento.
• Dilución en agar: Técnica gold standard
• Difusión en disco: No recomendado con algunos antibióticos como
Tetraciclina y Cefalosporinas.
• Tiras Epsilometricas : E-Test
 Inóculo:
• Suspensión directa de colonias incubada durante 20-24 hrs, ambiente
húmedo con 5% CO2 equivalente a un standard 0,5 McFarland en solución
suero fisiológico.
 Incubación: 36 +/- 1ºC, ambiente húmedo con 5% CO2, por 20 a 24 hrs.

*CLSI, Clinical and Laboratory Standards Institute; 2017


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Vigilancia de Resistencia Antimicrobiana en Chile

Se analizó la base de datos correspondiente a todas las cepas confirmadas


en el ISP como Neisseria gonorrhoeae, entre el 1 de enero de 2010 y el 30 de
junio de 2016.
Las bases se depuraron asegurando que cada registro corresponda a un
caso único y se procesaron de acuerdo a su procedencia y fecha de recepción
de la cepa.

http://www.ispch.cl/sites/default/files/Boletin%20Gono-Final.pdf

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Vigilancia de Resistencia Antimicrobiana en Chile

El año 2015 se confirmó el mayor número de cepas (1.640), con un aumento de un 208,3% en
relación al año 2010.
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El año 2016 se confirmaron 1897
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En el período 2010 – junio 2016 el mayor número de cepas confirmadas pertenecen a


Instituto de Salud Pública de Chile hombres, con un 90,2% (6.134/6.801)
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Boletín Vigilancia
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de Salud
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Se observa un 100% de cepas sensibles a Ceftriaxona, mientras que para Azitromicina como
Ciprofloxacino se observó una disminución en el porcentaje de sensibilidad.
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CLSI 2017: Resistente CIM 2 µg/mL


Intermedio CIM 0,12 -1,0 µg/mL
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Sensible CIM ≤ 0,06 µg/mL
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CLSI 2017: Resistente CIM 1,0 µg/mL


Intermedio CIM 0,12 -0,25 µg/mL
Instituto de Salud Pública de Chile
Sensible CIM ≤ 0,06 µg/mL
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EUCAST 2017: Resistente CIM > 0,50 µg/mL


Sensible CIM ≤ 0,25 µg/mL
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Vigilancia de Resistencia Antimicrobiana en Chile

CLSI 2017: Sensible CIM ≤ 0,25µg/mL

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Imagen Referencial

Muchas Gracias.

Laboratorio ITS
T.M. Rodrigo Colina M.
e-mail: rcolina@ispch.cl
T.M Alejandra Manríquez
e-mail: amanriquez@ispch.cl
Fono: 25755434
Red Minsal: 255434
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