JACK STEVEN FERNANDEZ LANGS

ANALITICA III

CROMATOGRAFIA

JACK STEVEN FERNANDEZ LANGS

SEM-6

DOC. EDINELDO LANS

UNIVERSIDAD DE CÒRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
DEPARTAMENTO DE QUÌMICA
ANALITICA III
MONTERÌA - CÓRDOBA
2020-2
JACK STEVEN FERNANDEZ LANGS

*Las respuestas de los problemas marcados con un asterisco se proporcionan al final del libro.
Los problemas que contienen este símbolo se resuelven mejor con hojas de cálculo.
26.1 DEFINA
a) elución:
Es un proceso en el que las especies se lavan a través de una columna cromatográfica.
Por el flujo o la adición de disolvente nuevo.
g) factor de selectividad:
El factor de selectividad α de una columna hacia las especies A y B viene dado por α = K B/KA, donde KB es la
constante de distribución de las especies más fuertemente mantenidas y KA es la distribución constante para las
especies menos sostenidas.
b) fase móvil:
La fase móvil en cromatografía es aquella en la que se mueve a través de una fase inmovilizada que se fija en su
lugar en una columna o en la superficie de una placa plana.
h) altura de plato:
La altura de la placa H de una columna cromatográfica se define por la relación
H = σ2/L
Donde σ2 es la varianza obtenida del pico cromatográfico de forma gaussiana y L es la longitud de la columna en
cm.
c) fase estacionaria:
La fase estacionaria en una columna cromatográfica es un sólido o líquido que se fija en un sitio. La fase móvil
luego pasa por encima o por la fase estacionaria.
i) difusión longitudinal:
La difusión longitudinal es una fuente de ensanchamiento de la banda en una columna en la que un soluto se
difunde desde el centro concentrado de la banda a las regiones más diluidas en cualquiera lado.
d) constante de distribución
La constante de distribución K en cromatografía es la relación de la concentración (estrictamente actividad) del
analito en la fase estacionaria a su concentración (actividad) en la fase móvil cuando existe equilibrio entre las dos
fases.
j) difusión en remolino:
La difusión de remolinos es un fenómeno en el que las moléculas de un analito llegan al final de una columna en
diferentes momentos como resultado de viajar a través de la columna por vías que difieren en longitud.
e) tiempo de retención
El tiempo de retención de un analito es el intervalo de tiempo entre su inyección en una columna y la aparición de
su pico en el otro extremo de la columna.
k) resolución de la columna:
La resolución Rs de una columna hacia dos especies A y B viene dada por la ecuación
Rs = 2ΔZ / (WA + WB)
Donde ΔZ es la distancia (en unidades de tiempo) entre los picos de las dos especies y WA y WB son los anchos
(también en unidades de tiempo) de los picos en sus bases.
f) factor de retención
El factor de retención k está definido por la cita
k = KAVS/VM
Donde KA es la constante de distribución para la especie A y VS y VM son los volúmenes de la fase estacionaria y
móvil respectivamente.
l) Eluyente:
El eluyente en cromatografía es la fase móvil fresca que transporta el analito a través de la columna

26.3 ENUMERE LAS VARIABLES QUE ORIGINAN EL ENSANCHAMIENTO DE BANDA EN

CROMATOGRAFÍA.
Las variables que conducen a la ampliación de la zona son:
 Diámetros de partículas grandes para fases estacionarias.
 Diámetros de columna grandes;
 Altas temperaturas (importante solo en GC)
 Para fases líquidas estacionarias, capas gruesas del líquido inmovilizado
 Caudales muy altos o muy bajos.
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26.6 ¿QUÉ VARIABLES TIENEN MÁS PROBABILIDAD DE AFECTAR AL FACTOR DE

SELECTIVIDAD A CORRESPONDIENTE A UN PAR DE ANALITOS?
Las variables que afectan el factor de selectividad α
 La composición de la fase móvil
 La temperatura de la columna
 La composición de la fase estacionaria
 Interacciones químicas entre la fase estacionaria y uno de los solutos que se separan.

26.13 ¿QUÉ EFECTO CAUSARÍA EN UN PICO CROMATOGRÁFICO INTRODUCIR LA MUESTRA A

UNA VELOCIDAD DEMASIADO BAJA?
La introducción lenta de la muestra produce la ampliación de la banda.

26.14 LOS SIGUIENTES DATOS CORRESPONDEN A UNA COLUMNA PARA CROMATOGRAFÍA DE

LÍQUIDOS:
Longitud del relleno 24.7 cm
Tasa de flujo 0.313 mL/min
VM 1.37 mL
VS 0.164 mL
Un cromatograma de una mezcla de las especies A, B, C y D proporciona los siguientes datos:
Tiempo retención min Anchura del pico en W(min)
No retenida 3,1
A 5,4 0,41
B 13,3 1,07
C 14,1 1,16
D 21,6 1.72
Calcule
a) El número de platos para cada pico.
N = 16(tR/W)2
A, N = 16 × (5.4/0.41)2 = 2775.49
B, N = 16 × (13.3/1.07)2 = 2472.04
C, N = 16 × (14.1/1.16)2 = 2363.97
D, N = 16 × (21.6/1.72)2 = 2523.31
b) La media y la desviación estándar de N.
N = (2775.49 + 2472.04 + 2363.97 + 2523.31)/4 = 2533.70
s = 174
c) La altura de plato de la columna.
H = L/N
H = 24.7 cm/ 2534platos= 9.749 × 10–3 cm = 0.0097 cm

*26.15 CON LOS DATOS DEL PROBLEMA 26.14 CALCULE PARA A, B, C Y D.

a) El factor de retención.
k = (tR – tM)/tM
A, kA = (5.4 – 3.1)/3.1 = 0.74
B, kB= (13.3 – 3.1)/3.1 = 3.3
C, kC = (14.1 – 3.1)/3.1 = 3.5
D, kD = (21.6 – 3.1)/3.1 = 6.0
b) La constante de distribución.
K = k(VM/VS)

K = [(tR – tM)/tM] × 1.37/0.164 = [(tR – tM)/tM] × 8.35

KA = (5.4 – 3.1)/3.1 × 8.35 = 6.2
KB = (13.3 – 3.1)/3.1 × 8.35 = 27
KC = (14.1 – 3.1)/3.1 × 8.35 = 30
KD = (21.6 – 3.1)/3.1 × 8.35 = 50
*26.16 CON LOS DATOS DEL PROBLEMA 26.14, CALCULE PARA LAS ESPECIES B Y C.
a) La resolución.
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2 [ ( t R ) c−( t R ) B ]
R s=
W B +W c
2 ( 14.1−13.3 )
R s= =0.72
1.07+1.16
b) El factor de selectividad a.
( t R ) c−t M
α C , B=
( t R ) B−t M
14.1−3.1
α C , B= =1.08
13.3−3.1

c) La longitud de columna necesaria para separar las dos especies con una resolución de 1.5.
(R¿¿ s)1 √ N 1 0.717 √ 2534
= = = ¿
( R s ) 2 √ N 2 1.5 √N2
N2 = 2534 × (1.5)2/(0.717)2 = 11090 platos.
L = HN
H = 9.749 × 10–3 cm/plato
L = 9.749 × 10–3 × 11090 = 108 cm
d) El tiempo necesario para separar las dos especies en la columna del inciso c).
2
( t R ) 1 ( t R ) 1 14.1 0.7172
= = =
( t R ) 2 ( t 2R ) 2 ( t R ) 2 1.52
( tR)2 = 14.1 × (1.5)2/(0.717)2 = 61.7 min

*26.17 CON LOS DATOS DEL PROBLEMA 26.14 CALCULE PARA LAS ESPECIES C Y D.
a) La resolución.
2 [ ( t R ) c−( t R ) B ]
R s=
W B +W c
Rs = 2(21.6 – 14.1)/(1.72 + 1.16) = 5.2
b) La longitud de columna necesaria para separar las dos especies con una resolución de 1.5.
( R2s ) 1 2534∗1.5 2
N 1=N 2 2 = =210 platos
( Rs ) 2 5.212
L = HN = 9.749 × 10–3 cm/plato × 210 platos = 2.0 cm

*26.18 LOS SIGUIENTES DATOS SE OBTUVIERON MEDIANTE CROMATÓGRAFO GAS-LÍQUIDO

CON UNA COLUMNA RELLENA DE 40 CM:
Compuesto TR, min W, min
Aire 1.9 -
Metilciclohexano 10,0 0,76
Metilcilohexeno 10,9 0,82
Tolueno 13,4 1,06
Calcule
  A B C D E
1 problema 26-18        
W 1/2 +
2 Compuesto T R + min min N  
3 Aire 1,9      
4 Metilciclohexano(cmpd 1) 10.0 0.76 2770.08  
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5 Metilciclohexano (2) 10.09 0.82 2827.13  

6 Tolueno (3) 13.4 1.06 2556.96  
7          
8 Promedio N     2718.04  
9 SD N     142  
10 Longitud de la columna,L     40  
11 Altura de la placa,H     0.0147  
Documentación de hoja de
12 cálculo        
13 D4=16*(B4/C4)*2        
14 D8=Promedio(D4:D6)        
15 D9=STDEV(D4:D6)        
16 D11=D10/D8        
17          
18 Problema 26-19        
19 solucion(2,1)     1.14  
20 solucion(3,2)     2.66  
21 solucion(3,1)     3.74  
Documentación de hoja de
22 cálculo        
23 D16=2*(B5-B4)/(C5+C4)        
24 D20=2*(B6-B5)/(C6+C5)        
25 D21=2*(B6-B4)/(C6+C4)        
26          
27 Problema 26-20        
28 Para obtener R , = 1,5,N2 =     471203  
29 Longitud de la columna,L     69.34  
30 Tiempo de retención, t R     18.90  
Documentación de hoja de
31 cálculo        
32 D28=D8*1.5 R 2/D19 R 2        
33 D29=D28*D11        
34 D30=B5*1.5R 2/D19*2        
TABLA 1.1 CALCULOS
a) El número de platos promedio a partir de los datos.
REEMPLAZANO EN LAS FORMULAS DADAS ANTERIORMENTE (TABLA 1.1)
N = 2.7 × 103
b) La desviación estándar para el promedio en a).
s = 100
c) La altura de plato promedio para la columna.
H = 0.015
*26.19 EN RELACIÓN CON EL PROBLEMA 26.18, CALCULE LA RESOLUCIÓN PARA
REEMPLAZANO EN LAS FORMULAS DADAS ANTERIORMENTE (OBSERVAR TABLA 1.1)
a) Metilciclohexeno y metilciclohexano.
Rs = 1.1
b) Metilciclohexeno y tolueno.
Rs = 2.7
c) Metilciclohexano y tolueno.
Rs = 3.7
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*26.20 SI FUERA NECESARIA UNA RESOLUCIÓN DE 1.5 PARA SEPARAR METILCICLOHEXANO

Y METILCICLOHEXENO EN EL PROBLEMA 26.18,
REEMPLAZANDO EN LAS ECUACIONES UTILIADAS ANTERIORMENTE. (OBSERVAR TABLA)
a) ¿Cuántos platos se necesitarían?
N = 4.7 × 103
b) ¿Qué longitud debería tener la columna si se utiliza el mismo relleno?
L = 69 cm
c) ¿Cuál sería el tiempo de retención del metilciclohexeno en la columna del inciso b)?
tR = 19 min

*26.21 SI VS Y VM PARA LA COLUMNA DEL PROBLEMA 26.18 SON 19.6 Y 62.6 ML

RESPECTIVAMENTE Y EL PICO DE AIRE NO RETENIDO APARECE DESPUÉS DE 1.9 MIN,
CALCULE
  A B
1 Problema 26-21  
2 V S,ml 19.6
3 V M,ml 62.6
4 Compuesto TR, min
5 Aire 1.9
Metilciclohexano( cmp
6 d 1) 10.0
7 Metilciclohexano(2) 10.9
8 Tolueno (3) 13.4
9 K1 4.26
1
0 K2 4.74
1
1 K3 6.05
1
2 K1 13.62
1
3 K2 15.13
1
4 K3 19.33
1
5 a2,1 1.11
1
6 a2,3 1.28
1 Documentación de
7 hoja de cálculo  
1
8 B9=(B6.$B$5)/$B$5  
1
9 B12=B9*$B$3/$B$2  
2
0 B15=(B7-B5)/(B6-B5)  
2
1 B16=(B8-B5)(B7-B5)  
TABLA 1.2 CALCULOS
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APLICANDO LAS ECUACIONES OBTENEMOS LO SIGUIENTE (OBSERVAR TABLA 1.2):

a) El factor de retención para cada compuesto.
k1 = 4.3
k2 = 4.7
k3 = 6.1
b) La constante de distribución para cada compuesto.
K1 = 14
K2 = 15
K3 = 19
c) El factor de selectividad para el metilciclohexano y el metilciclohexeno.
α 2,1=1.11
α 3,2=1.28