Laboratorio de biología molecular

Preparación y observación de células sanguíneas

Hernán Jiménez gallego (1.007.833.734) francisco vega (1.003.396.049) ronny barrera

Facultad de educación y ciencias humanas, Departamento de ciencias naturales,

Universidad de Córdoba, Carrera 6 No 76-103, km 3, Vía Cerete, Montería, Colombia.

RESUMEN
En el siguiente laboratorio mediante el uso del microscopio y distintas técnicas de
coloración realizaremos la observación a muestras de sangre donde observaremos e
identificaremos las diferentes clases de células que la constituyen, como son los glóbulos
blancos o leucocitos los cuales son la defensa del cuerpo contra las infecciones y las
sustancias extrañas que pueden entrar en él, también identificaremos los glóbulos rojos,
eritrocitos entre otros.
Como veremos hay tres tipos de técnica para el posterior desarrollo de la practica la
primera es la técnica de may-gruwald Giemsa, la segunda es la técnica de Wright y la
tercera es la técnica con hematoxilina estas facilitan la posterior observación de las células
sanguíneas.

Palabras Claves: glóbulos rojos, leucocitos, eritrocitos, glóbulos blancos

ABSTRACT
In the following laboratory through the use of the microscope and different coloring
techniques we will perform the observation of blood samples where we will observe and
identify the different kinds of cells that constitute it, such as white blood cells or
leukocytes which are the body's defense against Infections and foreign substances that may
enter it, we will also identify red blood cells, erythrocytes among others.
As we will see, there are three types of technique for the subsequent development of the
practice, the first is the May-Gruwald Giemsa technique, the second is the Wright
technique and the third is the hematoxylin technique, these facilitate the subsequent
observation of blood cells.

Keywords: red blood cells, leukocytes, erythrocytes, white blood cells

1. Introducción
La sangre es una forma especializada de tejido conectivo que incluye elementos figurados
(principalmente células) y una substancia intercelular líquida, llamada plasma sanguíneo.
Las células sanguíneas se dividen en hematíes o glóbulos rojos, los glóbulos blancos o
leucocitos y las plaquetas. Por otra parte, el plasma transporta los materiales nutritivos
(absorbidas del sistema digestivo), las substancias de deshecho producidas por el
metabolismo y las hormonas. Es un líquido algo alcalino, homogéneo, el cual contiene una
proteína llamada fibrinógeno la cual favorece el proceso de coagulación sanguínea al
formar una red de filamentos a partir de la fibrina. Cuando a la sangre se le elimina esta
proteína, el plasma se convierte en suero.

Las células sanguíneas se producen principalmente en la médula ósea o en los tejidos

linfoides, a partir de las células denominadas pluripotenciales o totipotenciales. La médula
ósea es el mayor órgano del organismo y comprende aproximadamente el 4.5% del peso
corporal. En el adulto existen dos tipos de médula ósea: la roja y la amarilla. La roja es
principalmente hematopoyética y la amarilla, grasa. Los huesos con médula roja son el
esternón, las costillas, las vértebras, el cráneo y las epífisis de algunos huesos largos.

Al proceso de formación de las células sanguíneas se conoce como hematopoyesis. Estas

células originan dos tipos o series de producción de células: a) la serie roja, b) la serie
blanca.

La serie roja:

La serie roja la componen los glóbulos rojos o eritrocitos (eri = rojo; cito = célula) y los
granulocitos. Estas células se originan en la médula ósea a partir de una célula denominada
hemocitoblasto. La serie es la siguiente: Hemocitoblasto eritroblasto basófilo eritroblasto
policromático normoblasto Reticulocito I Reticulocito II Reticulocito III Reticulocito IV
Eritrocito. La principal función de los eritrocitos es el transporte del oxígeno y del gas
carbónico a partir de la combinación con la hemoglobina (Hb). El control de la unión de los
gases a la hemoglobina depende de las situaciones de cada tejido. Así, cuando la presión de
oxígeno (Po2) es baja, la hemoglobina se disocia y libera el oxígeno hacia las células. En
este proceso interviene el 2-3 difosfoglicerato (2-3 DPG) reduciendo la afinidad de la
Hemoglobina por el O2. De la misma manera, el eritrocito contiene grandes cantidades de
anhidrasa carbónica, enzima que cataliza la reacción entre el CO 2 y el agua para formar
ácido carbónico (CO2 + H2O H2CO3). De esta manera el CO 2 es retirado de las células y
trasportado hasta los capilares pulmonares donde la ecuación se invierte y el CO 2 es
transportado hacia los alvéolos y por allí, a la atmósfera. Por término medio, la
concentración de eritrocitos en sangre es de 5.2 millones por microlitro (l) en el hombre y
de 4.7 mil/ l en la mujer. Los glóbulos rojos no pueden contener más de 34 gr de Hb y cada
gramo de hemoglobina se combina con 1,39 ml O 2, lo que significa que el transporte de
oxígeno por cada mm de sangre es de 21 ml para el hombre y 19 ml para la mujer, en
promedio. La masa total de glóbulos rojos está controlada de tal manera que se mantiene en
un nivel constante. El nivel de requerimientos de oxígeno por parte de los tejidos es el
principal factor regulador. La eritropoyetina (EPO) es la principal herramienta para llevar a
cabo la respuesta de equilibrio, de modo que el riñón producirá mayor cantidad de
eritropoyetina una vez el nivel de O2 en sangre disminuya. El riñón produce el 80-90% de
la eritropoyetina y el hígado el 10-20% restante. En una atmósfera con bajos niveles de
oxígeno (hipóxica) como es la situación de incremento de altura sobre el nivel del mar, el
nivel de EPO en sangre empieza a incrementar pasados unos minutos, alcanzando su
máximo al cabo de 24 horas. La producción de EPO continúa hasta que persista el estímulo
hipóxico. La acción de la EPO dependerá del estado nutricional del sujeto, especialmente
del contenido de vitamina B12 y de ácido fólico. El objetivo principal de esta práctica
mediante el uso del microscopio y técnicas de coloración adecuadas es observar e
identificar en tejidos sanguíneos las diferentes clases de células que la constituyen y sus
principales organelas.

2. Procedimiento Experimental
Se tomo una lanceta estéril y pinchamos a un compañero, después se agregó una gota de
muestra sanguínea en el portaobjetos, luego con otro portaobjetos se realizó un esparcido
rápido para obtener una muestra delgada se dejo secar a temperatura ambiente, luego se le
agrego el colorante de Wright y se dejo actuar durante 5 minutos, una vez pasado los 5
minutos se lavo con agua destilada esta retirar el exceso de colorante, se dejo secar a
temperatura ambiente, luego se observó atreves del microscopio.

NOTA CONSULTA EXTERNA: La tinción de Giemsa es un tipo de coloración de

muestras clínicas, basada en la mezcla de colorantes ácidos y básicos. Su creación estuvo
inspirada por el trabajo realizado por Romanowsky, donde Gustav Giemsa, químico y
bacteriólogo originario de Alemania, la perfeccionó agregando glicerol para estabilizar los
compuestos. Los cambios generados a la técnica original de Romanowsky permitieron
mejorar considerablemente las observaciones microscópicas, por lo tanto la técnica fue
bautizada con el nombre de tinción de Giemsa. La técnica de tinción de Giemsa es muy útil
para estudios citológicos, ya que permite la observación de estructuras específicas de las
células. Esta técnica tiñe los citoplasmas, núcleos, nucléolos, vacuolas y gránulos de las
células, pudiéndose distinguir incluso finas trazas de cromatina.
3. materiales y reactivos
Materiales Reactivos
microscopio Colorante de wright
Portaobjetos Colorante de giemsa
Cubreobjetos Eosinato de azul de metileno
Lanceta estéril Aceite de inmersión
Algodón Alcohol metílico absoluto
Alcohol
Guantes de látex
Gotero
Agua destilada
Papel de filtro
Puente de coloración
Tabla 1: materiales y reactivos

4. Resultados
en esta imagen podemos hacer diferenciación de células,
como vemos la tinción de Wright tiño los glóbulos
blancos y los que tienen el núcleo más grande son los
monocitos y también se alcanzan a observar los
eritrocitos.

Imagen 1: muestra de sangre

5. Discusiones
El empleo de las técnicas de tinción utilizadas en esta
práctica presenta una gran ventaja ya que permite
identificar con mayor facilidad las estructuras básicas de
las células. Mediante la practica logramos observar un gran número de células, como los
eritrocitos de forma ovalada aplanada, estos son los encargados de transportar el O 2 y el
CO2 por toda la célula y los tejidos del cuerpo gracias a que en su interior contiene la
hemoglobina, quien es la responsable de esta función.

6. Conclusiones
En el laboratorio observamos las estructuras de las células cuando se utilizó la respectiva
técnica tinción especializada, el cual era el principal objetivo de la práctica. Observamos
también la importancia de estas técnicas para la observación de las distintas estructuras de
la célula sanguínea como lo son los linfocitos, monocitos, neutrófilo entre otros. Durante la
investigación en el desarrollo de la practica aprendimos que durante una infección se
incrementa el número de leucocitos en la sangre, ya que son los encargados de la defensa
del cuerpo, y tienen que aumentar en caso de infecciones para poder combatir los agentes
extraños (virus, bacterias, hongos).

7. Cuestionario
1. describa el fundamento de cada una de las técnicas usadas en el laboratorio.

R/ TINCION DE WRIGHT
Esta coloración es policromática, lo que quiere decir que genera varios colores dependiendo
de la estructura que absorbe el colorante. Esta técnica de coloración ha sido muy utilizada
para realizar recuentos diferenciales de glóbulos blancos y estudiar la morfología de los
glóbulos rojos, plaquetas y leucocitos en sangre periférica y médula ósea.
Su aplicación es muy importante, ya que se pueden apreciar anormalidades en las diferentes
líneas celulares de la sangre, facilitando el diagnóstico de enfermedades como la leucemia o
infecciones bacterianas o parasitarias.

TINCIÓN DE GIEMSA 
La técnica de tinción de Giemsa es muy útil para estudios citológicos, ya que permite la
observación de estructuras específicas de las células. Esta técnica tiñe los citoplasmas,
núcleos, nucléolos, vacuolas y gránulos de las células, pudiéndose distinguir incluso finas
trazas de cromatina. Además, se pueden detectar cambios significativos en el tamaño,
forma o coloración del núcleo, donde es posible visualizar la pérdida de la relación núcleo –
citoplasma.

2. escriba el color de los núcleos de leucocitos con cada una de las técnicas empleadas en el
laboratorio.

R/ los leucocitos con la técnica de tinción de grihgt se tiñen de color rosado y con la técnica
La técnica de tinción de Giemsa se tiñen de color violeta.

4. Cuál es la razón por la cual en una infección se incrementan el número de leucocitos?

R/ Los glóbulos blancos (leucocitos) son una parte importante de la defensa del cuerpo
contra microorganismos infecciosos y sustancias extrañas (el sistema inmunológico). Para
defender adecuadamente al organismo, un número suficiente de glóbulos blancos
(leucocitos) debe recibir el aviso de que un microorganismo infeccioso o una sustancia
extraña ha invadido el cuerpo, y llegar al lugar donde son necesarios para, a continuación,
destruir y digerir el patógeno o la sustancia dañinos.

5. Qué tipo de células sanguíneas están más implicada en la inmunidad de los organismos?

En la respuesta inmune pueden intervenir muchos tipos de células, aunque sea de forma

indirecta y no especializada, algo evidente en el sistema inmunitario inespecífico. Por
ejemplo, las células parietales del estómago producen ácido clorhídrico con fines
digestivos, pero también destruye muchísimos patógenos ingeridos con la comida.

Pero al hablar de células del sistema inmune, se habla de las células especializadas en

ejecutar una respuesta inmunitaria. Este grupo de células se conocen en su conjunto
como leucocitos o glóbulos blancos.

Los leucocitos se forman a partir de células madre hematopoyéticas, un tipo de células

multipotenciales de la médula ósea a partir de las cuales se desarrollan los elementos
formes de la sangre, lo que incluye a leucocitos, eritrocitos y plaquetas. Al compartir este
origen, los leucocitos se incluyen dentro del grupo de las células sanguíneas, aunque
muchos migran a otros tejidos y pasan buena parte de su ciclo vital fuera de la sangre.

6. Que células de la sangre atacan primero a una infección?

R/ las células que atacan primero a una infección son los monocitos.  Su función consiste
en acudir a la zona de infección para eliminar las células muertas y los desechos. Contienen
enzimas (un tipo de proteínas) especiales con las que también matan bacterias. Se forman
en la médula ósea y tras pasar por la sangre vigilan y cumplen sus funciones en los
diferentes tejidos como la piel, los pulmones, el hígado o el bazo.

7. ¿por qué los eritrocitos no tienen núcleo? Cuál es el contenido del eritrocito que se
combina fácilmente con el O2 y el CO2.

Los eritrocitos no tienen mitocondria para un eficiente metabolismo oxidativo, ni ribosomas

para la regeneración de las proteínas dañadas o perdidas; tienen un repertorio metabólico
muy limitado que impide la síntesis de novo de lípidos y carecen de núcleo para dirigir
procesos regenerativos, adaptarse al estrés circulatorio o dividirse para remplazarse a sí
mismos.
Los eritrocitos se caracterizan por que su contenido fundamental es la hemoglobina, que le
proporciona al eritrocito su color característico y la función de transportar el oxígeno desde
los pulmones hasta los tejidos, y parte del dióxido de carbono desde los tejidos hasta los
pulmones, participa de esta manera en el proceso de la respiración.

8. por qué cree usted que el hombre tiene un mayor número de eritrocitos que la mujer?

R/ Los hombres tienen un hematocrito mayor, o HCT , que las mujeres porque ellas pierden
sangre regularmente a través de la menstruación, de acuerdo con la Asociación Americana
de Pacientes Renales. Las hormonas masculinas también estimulan una mayor producción
de glóbulos rojos de la médula ósea.

Referencias
1.  Manual de Biología Celular autor Ermilio Humberto López | Fuente: Tecnológico
Nacional de México.
2.  La célula, unidad de vida autor Educalab.es | Fuente: Educalab.es.
3.  Fundamentos de la Biología Celular autor Alejandro Masotti | Fuente: Universidad
del Salvador.