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ACIDOS NUCLEICOS

Estructura general de nucleótidos

Base
Púrica ó
Pirimídica

O-
5'
Fosfato O- P O CH O
O 4'
H H 1'  Pentosa
H H
3' 2'
OH OH
Estructura de la Purina y de la Pirimidina

H
H
C N
C 6
N 3 4 5 CH N1 5C
7
8 CH
HC 2 1 6 CH HC2 3 4C
9
N N
N H
Pirimidina Purina
NUCLEOSIDOS*
Difracción de rayos X del DNA

Forma B Forma A
Puentes de hidrógeno en los pares de bases de Watson y Crick

nm CH3
0. 28 Timina
O
H H C
C H
Adenina N C
n m
0. 30 N
N C H N
C N C
H C C-1'
N C C O
N H
C-1'

1.8 n m

H H
nm
Citocina
0. 29 N
H C
C H
Guanina O C
nm
0. 30 N
N C N
C N H C
H C C-1'
N C C O
N N H
C-1' 0. 29
n m
H
1.8 n m
La desnaturalización del DNA
G + C % del total de nucleótidos
100

80
Desnaturalización (%)
60
100
40

20
tm
tm
50
60 70 80 90 100 110

tm (°C)

75 80 85
Temperatura (°C)
ARN
QUIMICA DE LOS ACIDOS NUCLEICOS
SINTESIS PROTEICA
Transcripción:
1- Iniciación: Una ARN-polimerasa comienza la síntesis del precursor del ARN a
partir de unas señales de iniciación "secuencias de consenso " que se encuentran
en el ADN.

ARNpolimerasa

T A C G A A C C G T T G C A C A T C
A U G C U U G G C A A C G U G
Transcripción:
2. Alargamiento: La síntesis de la cadena continúa en dirección 5'3'. Después
de 30 nucleótidos se le añade al ARN una cabeza (caperuza o líder) de
metil-GTP en el extremo 5‘ con función protectora.

ARNpolimerasa

T A C G A A C C G T T G C A C A T C
A U G C U U G G C A A C G U G

m-GTP
Transcripción:
3- Finalización: Una vez que la enzima (ARN polimerasa) llega a la región
terminadora del gen finaliza la síntesis del ARN. Entonces, una poliA-polimerasa
añade una serie de nucleótidos con adenina, la cola poliA, y el ARN, llamado
ahora ARNm precursor, se libera.

poliA-polimerasa

m-GTP A U G C U C G U G U A G A A A A A

ARNm precursor
4. Maduración (cont.): El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones. Se
trata, por lo tanto, de un ARNm no apto para que la información que contiene sea
traducida y se sintetice la correspondiente molécula proteica. En el proceso de
maduración un sistema enzimático reconoce, corta y retira los intrones y las
ARN-ligasas unen los exones, formándose el ARNm maduro.

Cabeza cola
ARNm AAAAAA
maduro
precursor AUG UAG
Maduración del ARNm (Visión de conjunto).

Región codificadora del gen

ADN
Promotor E1 I1 E2 I2 E3 Terminador

TAC ATC

Cabeza E1 I1 E2 I2 E3 cola
ARNm AAAAAA
precursor AUG UAG

Cabeza cola
ARNm
maduro AAAAAA
AUG UAG
Iniciación: La subunidad pequeña del ribosoma se une a la región líder del ARNm y el
ARNm se desplaza hasta llegar al codón AUG, que codifica el principio de la proteína. Se les
une entonces el complejo formado por el ARNt-metionina (Met). La unión se produce entre el
codón del ARNm y el anticodón del ARNt que transporta la metionina (Met).

Subunidad menor del ribosoma

P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG

UAC Codón

Anticodón
ARNt ARNm

(i)
1er aminoácido
Elongación I: A continuación se une la subunidad mayor a la menor completándose el
ribosoma. El complejo ARNt-aminoácido2 , la glutamima (Gln) [ARNt-Gln] se sitúa enfrente del
codón correspondiente (CAA). La región del ribosoma a la que se une el complejo ARNt-Gln
se le llama región aminoacil (A).

Subunidad menor del ribosoma

P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
UAC GUU

(i)
Elongación II: Se forma el enlace peptídico entre el grupo carboxilo de la metionina (Met) y
el grupo amino del segundo aminoácido, la glutamina (Gln).

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
UAC GUU
Elongación III: El ARNt del primer aminoácido, la metionina (Met) se libera.

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
GUU
Elongación IV: El ARNm se traslada, de tal manera que el complejo ARNt-Gln-Met queda
en la región peptidil del ribosoma, quedando ahora la región aminoacil (A) libre para la
entrada del complejo ARNt-aa3

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
GUU
Elongación V: Entrada en la posición correspondiente a la región aminoacil (A) del
complejo ARNt-Cys, correspondiente al tercer aminoácido, la cisteína (Cys).

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
GUU ACG
Elongación VI: Unión del péptido Met-Gln (Metionina-Glutamina) a la cisteína (Cys).

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
GUU ACG
Elongación VII: Se libera el ARNt correspondiente al segundo aminoácido, la glutamina
(Glu).

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
ACG

(i)
Elongación VIII: El ARNm corre hacia la otra posición, quedando el complejo ARNt3-Cys-
Glu-Met en la región peptidil del ribosoma.

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
ACG
Elongación IX: Entrada del complejo ARNt-Leu correspondiente al 4º aminoácido, la
leucina.

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
ACG

AAU

Leu
Elongación X: Este se sitúa en la región aminoacil (A).

P A ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
AC G AAU
Elongación XI: Unión del péptido Met-Gln-Cys con el 4º aminoácido, la leucina (Leu).
Liberación del ARNt de la leucina. El ARNm se desplaza a la 5ª posición

ARNm P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
AAU
Elongación XII: Entrada del ARNt de la leucina, el 5º aminoácido, la arginina (ARNt-Arg).

ARNm P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
AAU
GCU
Elongación XIII: Unión del péptido Met-Gln-Cys-Leu con el 5º aminoácido, la
arginina (Arg). Liberación del ARNt de la leucina (Leu). El ARNm se desplaza a la
6ª posición, se trata del un codón de finalización o de stop.

ARNm P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
GCU

Arg-Leu-Cys-Gln-Met
Finalización I: Liberación del péptido o proteína. Las subunidades del ribosoma se disocian
y se separan del ARNm.

ARNm P A
5’ AAAAAAAAAAA 3’

AU G CAA U G C U UA C GA UAG
GCU

Arg-Leu-Cys-Gln-Met
Finalización II: Después unos minutos los ARNm son digeridos por las enzimas del
hialoplasma.

ARNm
5’ AAAAAAAAAAA 3’
A U G C A A U G C U U A C GA U A G

(i)
• Los sitios de control en el DNA
proporcionan sitios de unión
para las proteínas.

• Las regiones codificadoras se


expresan vía la síntesis de RNA
• Un sitio de control que
actúa en cis influencia el
DNA adyacente pero no
influencia al otro alelo.

• En el tipo silvestre, los


dos alelos sintetizan RNA
• Una mutación en un sitio de
control afecta solamente al
DNA contiguo.
• Una mutación que actúa en
trans en una proteína afecta
ambos genes que controla.

• La proteína activa actúa en


ambos alelos
• Una mutación que actúa en
trans en una proteína afecta
ambos genes que controla.

• La proteína activa actúa en


ambos alelos
• La proteína mutante no se
puede unir a la región de
control de ningún alelo.
Enrollamiento y
superenrollamiento
Superenrollamiento
Eje

DNA de doble hélice


(enrollado)

enrollado

Eje
DNA
superenrollado
superenrollado

(a)

(b)
Topoisómeros cruciformes
DNA relajado

DNA parcialmente desenrollado

Rearreglo cruciforme del DNA


Electroforesis en gel de agarosa de plásmidos circulares con
diferentes grados de superhelicidad

DNA relajado

DNA altamente
superenrollado
1 2 3
OTRAS FUNCIONES DE ACIDOS
NUCLEICOS
METODOS DE CLONACION

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