Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
2
Disciplina Microbiologie alimentară
Prin noţiunea de probă se înţelege orice produs sau material destinat examenului
microbiologic.
Indiferent de natura probelor sau de tipul examenului solicitat recoltarea se efectuează după
următoarele reguli:
- trimiterea probelor la laborator trebuie să se facă cât mai rapid şi în condiţii de asepsie,
respectând cât mai mult posibil condiţiile de păstrare originale;
- fiecare probă se individualizează prin înscrierea pe banda de marcare de pe recipient a
denumirii acesteia;
- este indicat să se recolteze cel puţin 100 g/probă;
- instrumentele de lucru reprezentate de linguri, pensule, spatule, foarfece din oţel
inoxidabil, etc., se sterilizează prin autoclavare (este periculoasă sterilizarea prin imersie în alcool
sau la flacără);
- pentru probele lichide se pot utiliza recipienţi ca: borcane de plastic, căni de metal
etanşe, etc. (se evită folosirea recipientilor de sticlă); probele solide se recoltează în cutii, saci,
sticle de plastic sau pachete sterile;
- probele sunt însoţite de un certificat în care se specifică ora şi data recoltării, precum şi
a primirii acestora în laborator;
- recoltarea eşantioanelor relativ mici dintr-o cantitate mare de alimente trebuie să fie cât
mai uniformă;
- trimiterea probelor la laborator se face în recipienţi sterili, intacţi;
- probele refrigerate se transportă la laborator în gheaţă la 0-4 °C; nu trebuie analizate la
mai mult de 36 de ore de la recoltare;
- în cazul probelor lichide se va recolta şi o probă suplimentară pentru controlul
temperaturii.
Recoltarea probelor de lapte: dacă recoltarea se face în fermă se va ţine cont şide igiena
adăpostului a mulgătorului şi a animalului; recoltarea se face în recipienţi sterili din fiecare sfert
în parte eliminând primele jeturi; pentru depistarea mamitelor streptococice recoltarea se va
realiza de la începutul mulsului; pentru tuberculoză de la sfârşitul mulsorii, iar pentru bruceloză
de mijlocul mulsului.
In cazul produselor în ambalaje sub un kilogram proba va fi constituită din ambalajul
original, iar în cazul celor peste un kilogram se recoltează aseptic 250-500 ml de lapte.
Examenul de laborator
NTG reprezintă un indicator microbiologic sanitar, care poate furniza informaţii asupra
stării de contaminare a produsului sau obiectului analizat.
Lichidul de diluţie are importanţă deosebită deoarece poate distrugere microorganismele
din alimente. Se recomandă utilizarea diluţiilor “protectorii”. Se consideră că apa peptonată
tamponată sau soluţia fiziologică peptonată 1%o sunt cele mai bune lichide de diluţie. Pentru
diluarea probelor de brânzeturi, lapte praf, lapte concentrat, se utilizează soluţia de citrat de sodiu
2% sau soluţia de fosfat de potasiu bibazic 2% încălzite la 450C.
La alimentele cu conţinut mare de grăsimi ( unt, margarină, maioneze, icre, etc) examenul
bacteriologic se face pe faza apoasă (“ser” sau “plasmă”) a acestora, care se obţine prin
menţinerea probei la 430C până la topire, apoi se corectează pH-ul la 7.
Obţinerea unor suspensii omogene din produsele formate din faze diferite, greu miscibile (
carne sau grăsimi) se face prin folosirea diluanţilor cu 0,5% tergitol sau tween 80, pentru
realizarea primei diluţii.
Numărarea coloniilor se poate face manual (fig.2) sau cu ajutorul numărătorului de colonii
ACOLYTE (fig3)
Mediile cu ser
Se prepară din medii uzuale (bulion, agar) la care se adaugă ser normal, de obicei de cal,
în proporție de 1/10. Pentru prepararea agarului cu ser, la mediul topit în prealabil și răcit la 45ºC,
se adaugă serul, se omogenizează și se lasă să se solidifice în poziția dorită.
Agarul cu sânge
Sângele defibrinat se adaugă steril la agarul nutritiv, în proporție de 5-10%, după o
prealabilă topire și răcirre a mediului la 40ºC.
Mediile cu ser și sânge se utilizează pentru cultivatrea bacteriilor cu anumite exigențe
nutritive, care nu se dezvoltă pe mediile simple
Mediu PCA - mediul de cultura folosit pentru determinarea numărului total de germeni
Compoziţie: peptonă pancreativă din cazeină, ectract de drojdii, glucoză, agar, apă distilată