Dr S.
CAILLAT-ZUCMAN
Aventis
Internat 318a Lymphocytes B, immunoglobulines (structure, diversité, fonction), complément,
Lymphocytes NK, exploration en pratique clinique, concept de déficit inné
H O E C H S T I N T E R N AT
318b
• Réponse immunitaire (RI) HUMORALE :
Production d’anticorps spécifiques d’un antigène (Ag)
- réponse primaire : 1ère exposition à l’Ag
- réponse secondaire : mémoire immunitaire
• Le plus souvent : coopération CPA-LT-LB
AUTRES EFFECTEURS DE LA RI HUMORALE
• Les CPA : monocytes, macrophages, cellules
dendritiques folliculaires
- molécules de surface : CR1, CR2, CR3, Rfc
- présentation aux LB d’épitopes superficiels d’Ag natifs
- exposition prolongée de l’Ag : rôle dans le maintien
de la mémoire des LB
• Les cellules NK (natural killer) :
- cellules lymphoïdes cytotoxiques, avec cytotoxicité
non restreinte par CMH de classe I et dirigée contre
les tumeurs et les cellules infectées par un virus
- respect des cellules autologues par inhibition du
signal de lyse : reconnaissance du CMH I autologue
par le killer inhibitory receptor (KIR)
EXPLORATION
• Dosage des Ig : EPP, IEPP, dosage pondéral
• Etude de la production de certains Ac : anti-toxine
tétanique, ASLO...
• Numération des LB circulants : 10 à 30%
• Etude fonctionnelle in vitro : test de prolifération
lymphoblastique (LPS, PWM...)
IMMUNITÉ HUMORALE
Laboratoire
d’Immunologie Clinique,
Hôpital Necker, Paris
E S T D I R I G É PA R : W I L L I A M B E R R E B I , PAT R I C K G E P N E R , J E A N N A U
LYMPHOCYTES B (LB) : DIFFÉRENCIATION
• A partir de cellules souches CD 34+ dans le foie foetal puis la moelle osseuse
• Réarrangement des chaînes H puis des chaînes L kappa et lambda : cellules proB puis préB
- LB immatures : IgM de surface
- LB matures : IgM et IgD de surface. Migration vers les organes lymphoïdes périphériques
- Différenciation contrôlée par micro-environnement médullaire et IL-7
- Mort (apoptose) des cellules avec réarrangement non fonctionnel des cellules avec forte affinité pour un Ag du soi
(délétion clonale)
LYMPHOCYTES B MATURES : STIMULATION
• Dans les organes lymphoïdes secondaires, en présence de l’Ag présenté par les cellules dendritiques folliculaires :
CPA (cellule présentatrice de l’Ag) et de LT auxiliaires
- Activation et migration vers le cortex superficiel ganglionnaire
- Multiplication des LB : formation du centre germinatif dans le follicule secondaire et perte de l’expression des IgD
membranaires
- Maturation d’affinité des Ac : commutation (Switch) des chaînes H en autres isotypes et mutations somatiques sur
les gènes VH et VL
- Différenciation des LB avec récepteur de haute affinité pour l’Ag en :
• LB mémoire (IgG, A ou E membranaires)
• PLASMOCYTE (synthèse et sécrétion des Ac)
PRIMAIRE RÉPONSE HUMORALE SECONDAIRE
• Succède à une 1ère immunisation • Après réintroduction du même Ag
• Temps de latence puis augmentation d’Ac IgM de façon • Temps de latence plus court puis augmentation plus
exponentielle importante du taux d’Ac
• Décroissance des IgM puis production d’IgG en faible • Production d’IgG et IgA et décroissance lente
quantité • Taux résiduel plus important
DÉFICITS INNÉS
• Agammaglobulinémie liée à X : mutations du gène XLA, codant pour une tyrosine-kinase spécifique de la lignée B,
pas de LB ni Ac
• Déficits en IgA : asymptomatiques ou infections respiratoires et/ou digestives
• Déficits en sous-classes d’IgG : asymptomatiques ou infections à pyogènes
• Déficits en IgA et IgG avec augmentation des IgM : pyogènes ou germes opportunistes
JUIN 1999
 Dr S. CAILLAT-ZUCMAN
IMMUNITÉ HUMORALE
Aventis
Internat 318b Lymphocytes B, immunoglobulines (structure, diversité, fonction), complément,
Lymphocytes NK, exploration en pratique clinique, concept de déficit inné
Laboratoire
d’Immunologie Clinique,
Hôpital Necker, Paris
AV E N T I S I N T E R N AT E S T D I R I G É PA R : W I L L I A M B E R R E B I , PAT R I C K G E P N E R , J E A N N A U

318a 318c VOIE ALTERNE ACTIVATION DU COMPLÉMENT VOIE CLASSIQUE

■ Activation par polysaccharides (insuline, zymosan,
• Complément : ensemble de protéines solubles et
membranaires, susceptibles de s’activer en cascade
• 2 voies d’ACTIVATION : alterne (activation aspécifique)
et classique (en présence d’Ac IgG1, 2 ou 3)
conduisant au clivage de C3 puis à l’unité terminale
effectrice commune
DÉFICITS CONGÉNITAUX EN COMPLÉMENT
• en C1 inhibiteur : oedème angioneurotique
• en C1q, C4 et C2 : fréquent au cours du lupus
• partiel en C4 : fréquent dans les pathologies auto-
immunes
• en C3, facteurs D et B, properdine : infections
■ Mécanismes REGULATEURS
bactériennes récidivantes
• en C5, 6, 7, 8 : infections à Neisseria
• en DAF et autres inhibiteurs du MAC : hémoglobinurie
paroxystique nocturne
endotoxines bactériennes)
• Clivage (spontané ou par C3 convertase) de C3 en C3a
et C3b
• Liaison Mg++ dépendante de C3b au facteur B
• Clivage de B en Ba et Bb par la protéine D (sérine
estérase)
• Formation de C3bBb (C3 convertase alterne)
• Stabilisation de C3bBb par la properdine P
• Inactivation de C3b en C3bi par facteur I
• Clivage de nouvelles molécules de C3 : formation de
(C3b)n Bb : C5 convertase alterne
• Clivage de C5 en C5a et C5b puis intégration de C5b
dans le complexe d’attaque membranaire (MAC)
• Le facteur H se lie à C3b en compétition avec le facteur
B et sert de cofacteur au facteur I
• Le facteur néphritique (C3Nef) : auto Ac anti-C3bBb les
rendant résistant à H
■ Activation de C1q par interaction avec le domaine CH2
des IgG1, 2, ou 3
• Activation de C1r et C1s par C1q
• Clivage par C1s activé de C4 en C4a et C4b et C2 en
C2a et C2b
• Formation de C4b2a (C3 convertase) et clivage de C3
en C3a (anaphylatoxine) et C3b (fixation)
• Clivage par C4b2a3b de C5 en C5a (anaphylatoxine) et
C5b (fixation)
■ Mécanismes REGULATEURS
• C1 inhibiteur : inhibition de C1r et C1s
• C4bp : se lie à C4b et permet au facteur I (inactivateur
de C3b) d’inactiver C4b
• C1q inhibiteur
• Protéine DAF, CR1 et MCP : contrôle de C4b2a

EXPLORATION
COMPLEXE D’ATTAQUE MEMBRANAIRE
• Etude fonctionnelle : mesure de l’activité hémolytique
de la voie classique (CH50) • A partir de C5b, formation du MAC : C5b, 6, 7, 8, 9
• Dosages immunochimiques de C1q, C3, C4 et facteur B • Formation de pores membranaires par polymérisation de C9 :
lyse osmotique
• Régulation : inhibition du MAC par mécanismes d’endocytose

RÔLES DU COMPLÉMENT
• INFLAMMATION : libération d’anaphylatoxines (C3a, C5a, C4a) : libération de médiateurs et
signaux chimiotactiques
• LYSE des membranes des micro-organismes, de cellules sanguines et virus à enveloppe lipidique
• OPSONISATION de micro-organismes et cellules étrangères
• PRESENTATION de l’Ag aux LB (CR1, CR2, CR3)

JUIN 1999
 Dr S. CAILLAT-ZUCMAN
IMMUNITÉ HUMORALE
Aventis
Internat 318c Lymphocytes B, immunoglobulines (structure, diversité, fonction), complément,
Lymphocytes NK, exploration en pratique clinique, concept de déficit inné
Laboratoire
d’Immunologie Clinique,
Hôpital Necker, Paris
AV E N T I S I N T E R N AT E S T D I R I G É PA R : W I L L I A M B E R R E B I , PAT R I C K G E P N E R , J E A N N A U

318b STRUCTURE DE BASE DES Ig

• Un monomère d’Ig : association de 2 chaînes lourdes H et légères L, identiques 2 à 2
• Ig : glycoprotéine soluble (anticorps) ou implantée dans
la membrane des LB (récepteur BCR) • La chaîne lourde H : , , 1, 2, 3, 4, 1, 2, 
• DUALITE FONCTIONNELLE : - définit l’isotype de l’Ig : classe (IgM, D, G, A ou E) et sous-classe (IgG1, 2, 3 ou 4 et IgA1 ou 2)
- partie variable N-terminale : site anticorps - comporte 1 domaine variable VH et 3 (, , ) ou 4 (, ) domaines constants CH. La région charnière (entre CH1 et
- partie constante C-terminale : déclenche les signaux CH2) assure la flexibilité de l’Ig
biologiques • La chaîne légère L : kappa ou lambda
- comporte 1 domaine variable (VL) et un domaine constant (CL)
GÈNES DES Ig
• Modèle de base : (H2L2)n où n = 1(IgG) à 5 (IgM)
• Les gènes sont portés par des chromosomes différents • Chaque domaine variable (VL ou VH) possède 3 régions hypervariables CDR séparées par des régions plus conservées.
(2 pour kappa, 22 pour lambda et 14 pour H) La juxtaposition de VL et VH forme le site Ac (ou paratope).
• Différents gènes pour une même chaîne H • La lyse enzymatique d’une IgG par la papaïne donne :
- gènes VH (>100) et D (diversité) pour la région variable - 2 fragments Fab (VL+CL/VH+CH1) porteurs d’un paratope
- gènes J (jonction) - 1 fragment Fc (dimère CH2+CH3) qui porte les propriétés effectrices de l’IgG : activation du complément, passage
- gènes des régions constantes (1 exon/domaine) transplacentaire...
• Rapprochement des gènes par :
- réarrangement : transposition des gènes VH, D et J
- commutation (switch) : un même LB peut exprimer CARACTÉRISTIQUES DES Ig
différents isotypes selon son degré de maturation isotype M D G1 G2 G3 G4 A1 A2 E
nbre sous-unités H2L2 5 1 1 1 1 1 1 ou 2 1
CARACTÈRE MONO OU POLYCLONAL DES Ig
PM kD 970 184 146 146 170 146 160/400 188
• Un clone de LB produit un seul type d’Ig, dite
monoclonale nbre liaisons Ag 5 2 2 2 ou 4 2
• Un hybridome : résultat de la fusion entre une cellule Concentration 0,5/1,6 0.03/0.4 8-15 1,2/2,6 <100 ng
tumorale et un clone de LB : production in vitro d’un plasmatique (adulte) g/l
Ac monoclonal 1/2 vie plasmatique (j) 5 2-8 21 20 7 21 5-8 2-3
• En pathologie, prolifération monoclonale B au cours du passage transplacentaire - - + + + + - -
myélome, de la maladie de Waldenström, de la LLC et
liaison R polyIg épithélial + - - - - - ++ -
de la LAL préB
activation complément
• La réponse Ac est dégénérée : pour chaque épitope,
voie classique +++ - ++ (+) ++ - - -
production de différents Ac spécifiques (réponse
polyclonale) par différents clones de plasmocytes. voie alterne +/- - +/- +/- +/- ? +++ -

JUIN 1999
 MOLÉCULES DU COMPLEXE MAJEUR Dr S. CAILLAT-ZUCMAN
Aventis
Internat 319 D’HISTOCOMPATIBILITÉ DE CLASSES I ET II (système HLA)
Présentation de l’antigène et cellules impliquées dans cette présentation
Laboratoire
d’Immunologie Clinique,
Hôpital Necker, Paris
AV E N T I S I N T E R N AT E S T D I R I G É PA R : W I L L I A M B E R R E B I , PAT R I C K G E P N E R , J E A N N A U

• Complexe majeur d’histocompatibilité (CMH) = système HLA chez l’homme CMH

• Localisé sur le bras court du chromosome 6
• Subdivisé en 3 régions :
- classe I télomérique : gènes principaux A, B, C et gènes non classiques E, F, G
- classe II centromérique : gènes HLA DR, DQ et DP + gènes de présentation
antigénique (LMP, TAP, DM, DO)
- classe III intermédiaire : gènes codant pour des fractions du complément (C2,
C4a, C4b, Bf), TNF  et , protéines de choc thermique (HSP 70)
• TRANSMISSION EN HAPLOTYPE : un enfant hérite en bloc d’un haplotype paternel
et d’un haplotype maternel
• POLYMORPHISME : nombreux allèles pour un même locus
• CODOMINANCE : coexpression des molécules codées par chaque haplotype à la
surface cellulaire

CMH I
MOLÉCULES ET GÈNES
• Sur toutes les cellules nucléées (sauf
hématies et cellules du SNC)
• Dimères : chaîne lourde  polymorphe
(45 KD) + 2-microglobuline
monomorphe (12 KD)
• Domaines : 3 extracellulaires + 1
transmembranaire + 1 intracytoplasmique
• Structure tridimensionnelle : formation
d’une cavité : site de fixation du peptide
antigénique
• 3 gènes principaux : HLA-A, B, C
- polymorphisme +++ avec environ 60
allèles pour HLA-A, 130 pour B et 20
pour C
- ce polymorphisme allélique est
concentré au niveau des exons codant
pour les domaines externes constituant
le site de fixation de l’Ag
FONCTIONS
• Présentation de peptides antigéniques du
soi ou provenant de virus ou bactéries à
développement intracellulaire
• Présentation aux LT CD8 cytotoxiques
→ lyse des cellules cibles exprimant à leur
surface les peptides antigéniques
• Génération des peptides (processing) :
- dégradation des protéines
cytoplasmiques par le système
multicatalytique du protéasome
- translocation vers le reticulum
endoplasmique (RE) par le transporteur
TAP
- dans le RE, association du peptide avec
la 2M et la chaîne lourde 
- migration du complexe à la surface
cellulaire et exposition au TCR
C M H II
MOLÉCULES ET GÈNES
• Seulement à la surface des CPA :
monocytes, macrophages, cellules
dendritiques, LB, LT activés et cellules
endothéliales
• Dimères : chaîne lourde  (35 KD) +
chaîne légère  (29 KD)
• Domaines : 2 extracellulaires + 1
transmembranaire + 1
intracytoplasmique (pour chaque chaîne)
• Organisation génomique :
- à chaque locus (DP, DQ, DR), 2 gènes
A1 et B1 codent pour  et 
- pour DR, 3 autres gènes (DRB3, 4 et
5) codant pour une chaîne 3, 4 ou 5
qui s’associe à  pour former un 2ème
dimère DR
- polymorphisme +++ : environ 140
allèles DRB1, 5 DRB3, 3 DRB4,
6 DRB5, 15 DQA1, 25 DQB1,
10 DPA1 et 80 DPB1
FONCTIONS
• Présentation de peptides dérivés de
protéines exogènes (bactéries à
développement extracellulaire) ou de
protéines membranaires
• Présentation aux LT CD4 auxiliaires puis
coopération T-B ou T-T (production de
cytokines)
• Génération des peptides :
- internalisation des protéines par
endocytose, puis dégradation en
peptides par les protéases du
compartiment endolysosomal acide
- stabilisation des molécules du CMH II
dans le RE par la chaîne invariante Ii
(complexes nonamériques 3Ii + 3 +
3) et fixation des peptides en
présence de la protéine DM dans
l’endosome

JUIN 1999
 CELLULES T ET IMMUNITÉ CELLULAIRE Dr S. CAILLAT-ZUCMAN
Aventis
Internat 320 Récepteur T (structure, diversité, répertoire). Antigènes de différenciation (CD4, CD8). Activation. Cellules T auxiliaires et
immunorégulation. Lymphokines (interférons, TNF, IL1, IL2, IL4) et cytotoxicité. Concept de déficit de l’immunité cellulaire
Laboratoire
d’Immunologie Clinique,
Hôpital Necker, Paris
AV E N T I S I N T E R N AT E S T D I R I G É PA R : W I L L I A M B E R R E B I , PAT R I C K G E P N E R , J E A N N A U

LE RÉCEPTEUR DES LT (TCR) DIFFÉRENCIATION DES LT

• HETERODIMERE : association de 2 chaînes
polypeptidiques ,  ou , 
• Gènes du TCR : même organisation que les Ig
- V, J, C pour  et 
- V, D, J, C pour  et 
• Synthèse d'un TCR fonctionnel  réarrangements  et 
puis  et 
• Diversité induite par les gènes D et D et par les gènes
J, mais pas de mutations somatiques
• Liaison des récepteurs  avec les peptides présentés
par CMH I ou II
• Liaison des récepteurs  avec les épitopes non
associés au CMH
• Association du TCR au complexe CD3 à la surface des
LT (transduction des signaux induits par l'interaction
TCR-Ag) et aux molécules invariantes CD4 (LT auxiliaires)
ou CD8 (LT cytoxiques = CTL)
• A partir de précurseurs médullaires qui migrent vers le thymus
• Dans le thymus : PROTHYMOCYTE CD34+, CD3-, 4-, 8-
• Dans le CORTEX thymique :
- thymocyte cortical (CD2+, 3-, réarrangement TCR  , , 
- sélection positive, par les molécules du CMH I et II des cellules épithéliales thymiques, de thymocytes CD3+, 4+, 8+;
TCR faible
- Sélection négative des thymocytes AUTORÉACTIFS
- Elimination (apoptose) des thymocytes avec réarrangements non fonctionnels
• Dans la MEDULLAIRE thymique :
- Différenciation des LT matures par reconnaissance de peptides associés à des molécules CMH du soi
(TCR +, CD3+ 4 + 8 - ou 3 + 4 - 8 +)
PRÉSENTATION DE L'ANTIGÈNE AUX LT
• Pour les LT CD4 + : reconnaissance des Ag peptidiques d'origine exogène ou membranaire, présentés par CMH II
à la surface des CPA
• Pour les LT CD8 + : reconnaissance des Ag peptides d'origine endogène, présentés par CMH I à la surface des
cellules nucléées

LYMPHOKINES ACTIVATION DES LT

Médiateurs intercellulaires se liant à des récepteurs de • Par INTERACTION entre TCR et complexe CMH/peptide
haute affinité, produits en réponse à un signal activateur. • Nécessite un 2ème signal d'activation par interaction de molécules sur le
• TNF  (macrophages) et TNF  (LT) : activité antitumorale LT et la CPA (CD28/B7, CD40/CD40L, Fas/FasL…)
et antivirale, induit la synthèse des médiateurs de • Conduit à l'activation des gènes de l'IL-2 et de la chaîne  du récepteur
l'inflammation et l'expression des molécules d'adhésion de l'IL-2 (CD25)
• IL-1  (cellulaire) et IL-1 (sécrétée) : produite par les
CPA, rôle dans la réaction inflammatoire et l'induction
des réponses immunes spécifiques CD4 + CD8 +
• IL-6 : action sur la maturation des LB, la différenciation • Prolifération et différenciation des LT CD4 + en : • Prolifération des précurseurs des LT cytotoxiques (pCTL)
des CTL et la synthèse des protéines de l'inflammation - LTh1 : production d'IL-2 et IFN  spécifiques de l'Ag en présence d'IL-2
par les hépatocytes → recrutement d'autres LT et amplification de la • Différenciation en CTL avec lyse des cellules cibles
• IFN  (cellules hématopoïétiques) et  (fibroblastes, réponse immunitaire présentant l'Ag associé au CMH I
cellules épithéliales) : action antivirale et antiproliférative - LTh2 : production d'IL-4, 6, 10, 13
• IFN  : induit l'expression du CMH II → coopération avec les LB
• IL-2 : facteur de croissance des LT • Antagonisme mutuel des LTh1 et Th2

JUIN 1999
 Dr S. CAILLAT-ZUCMAN
NOTIONS SUR LA TOLÉRANCE ET L’AUTO-IMMUNITÉ
Aventis
Internat 321 Distinction du soi et du non-soi. Sélection thymique positive et négative. Tolérance périphérique,
conséquences pour la compréhension de l’anergie et des maladies auto-immunes
Laboratoire
d’Immunologie Clinique,
Hôpital Necker, Paris
AV E N T I S I N T E R N AT E S T D I R I G É PA R : W I L L I A M B E R R E B I , PAT R I C K G E P N E R , J E A N N A U

MÉCANISMES DE TOLÉRANCE MÉCANISMES D'AUTO-IMMUNITÉ

Les mécanismes de TOLÉRANCE NATURELLE aux constituants du soi sont acquis au
cours du développement et concernent LT et LB.
■ TOLÉRANCE CENTRALE AUX ANTIGENES DU SOI
→ Acquise au cours de l'éducation INTRATHYMIQUE des LT (= génération du
RÉPERTOIRE T) en 2 étapes :
• SELECTION POSITIVE des thymocytes CD4+ CD8+ par les molécules du CMH I
et II exprimées à la surface des cellules épithéliales thymiques
• SELECTION NÉGATIVE : délétion clonale des thymocytes AUTO-RÉACTIFS
(apoptose) ⇒ pas de passage périphérique de clone T très auto-réactifs vis à vis des
peptides du soi présentés par CMH I et II dans le thymus, mais possible passage de
clone T spécifiques de peptides "ignorés" (non exprimés dans le thymus)
■ TOLÉRANCE PÉRIPHÉRIQUE
→ Nécessaire au contrôle des clones de LT auto-réactifs ayant échappé à la
délétion intra-thymique
• ANERGIE = blocage de l'activation T induite par l'interaction TCR/CMH + peptide,
en l'absence d'un 2ème signal de costimulation (interaction CD28/B7, CD40-CD40L).
Cet état est reversible en présence d'IL-2 exogène ou si restauration du cosignal
d'activation
• SUPPRESSION ou DÉVIATION de la réponse immune impliquant 2 populations
lymphocytaires CD4 + mutuellement antagonistes : Th1 (IL-2 et IFN) et Th2
(IL-4 et IL-10)
■ TOLÉRANCE DES LB
Par mécanisme de délétion clonale et d'anergie (modulation du récepteur
immunoglobulinique
La rupture des mécanismes de tolérance conduit à l'émergence des MALADIES
AUTO-IMMUNES, qui sont multifactorielles, multigéniques et en partie sous contrôle
du CMH. Certaines sont induites par des anomalies des gènes de contrôle de
l'apoptose (Fas, bcl2). Le défaut de tolérance aux Ag du soi peut être expliqué par :
■ LE MIMÉTISME MOLÉCULAIRE
• Lié à une homologie de séquence peptidique entre un auto-Ag (peptide du soi)
et un agent exogène (infectieux, environnemental) → ex : RAA par réaction croisée
entre la myosine et la protéine M du streptocoque -hémolytique
■ LA DÉVIATION DE LA RÉPONSE IMMUNE
• Après immunisation par un Ag tissulaire en présence d'adjuvant, pouvant conduire
à une réponse de type Th1 (cellulaire) ou Th2 (humorale)
• Le développement d'une maladie auto-immune est sous contrôle du CMH et
dépend des cytokines produites
■ LE DÉFAUT D'ANERGIE
• Ex : thyroïdite auto-immune induite par un traitement par IL-2 exogène
■ LA LIBÉRATION D’ANTIGÈNES "IGNORÉS"
• Ag séquestrés : chambre antérieure de l'œil
• Ag membranaires d'expression tissulaire restreinte
• Ag tardivement exprimés dans l'ontogenèse : insuline, thyroglobuline,
spermatozoïdes…
■ LA PRODUCTION ANORMALE D'ÉPITOPES "CRYPTIQUES"

JUIN 1999
 Dr S. CAILLAT-ZUCMAN
IMMUNOGLOBULINES E
Aventis
Internat 322 Rôle dans l’allergie et l’atopie
Laboratoire
d’Immunologie Clinique,
Hôpital Necker, Paris
AV E N T I S I N T E R N AT E S T D I R I G É PA R : W I L L I A M B E R R E B I , PAT R I C K G E P N E R , J E A N N A U

LES ANTICORPS DE TYPE IgE

• ALLERGIE IMMÉDIATE : réaction d'hypersensibilité
de type I, dépendante des IgE
• Synthèse par les plasmocytes à IgE, concentration plasmatique faible (100 à 200 g/ml)
•Structure de base H2 L2, pas de sous-classes connues
•Chaîne lourde  = 1 domaine variable VH + 4 domaines constants
• Fixation des Ac IgE sur des récepteurs
- de haute affinité (RFc 1) sur mastocytes et basophiles surtout
- de faible affinité (RFc 2, CD23) sur éosinophiles, plaquettes, macrophages
•Durée de vie : courte (2-3 jours) pour les IgE plasmatiques, longues (plusieurs mois) pour les IgE fixées sur les récepteurs
de haute affinité des mastocytes du derme et des muqueuses
• Pontage (= dimérisation) des IgE de surface par l'ALLERGENE ⇒ activation de la cellule effectrice

EXPLORATIONS DE L'ALLERGIE
• Interrogatoire : pneumallergène, trophallergène
(alimentaire), médicaments
•Explorations fonctionnelles respiratoires
•Dosage des IgE totales et spécifiques
CELLULES EFFECTRICES
• BASOPHILES ET MASTOCYTES conjonctifs et muqueux : dégranulation induite par des allergènes liés aux Ac IgE
ou par des substances endogènes (substance P, anaphylatoxines C3a et C5a) ou exogènes
•LYMPHOCYTES : par l’intermédiaire de cytokines pro-inflammatoires
•EOSINOPHILES - attirés au site de l'allergie par PAF-acéther et cytokines (IL-3, IL-5, GM-CSF)
- activés par IgE liées aux RFc 
•NEUTROPHILES, PLAQUETTES, MACROPHAGES (surtout alvéolaires)

FORMES CLINIQUES DE L'ALLERGIE MÉDIATEURS DE L'ALLERGIE

• CHOC ANAPHYLACTIQUE : collapsus, œdème de
QUINCKE, déclenché par médicaments ou venins
• ALLERGIE MUQUEUSE : conjonctivite, rhinite,
asthme, déclenché par pneumallergènes
•ALLERGIE CUTANÉE : dermite atopique (eczéma)
• MÉDIATEURS PRÉFORMÉS
- HISTAMINE (mastocytes) : fixation sur les récepteurs H1 des terminaisons nerveuses
- SEROTININE (plaquettes) : effet vaso-actif
• MÉDIATEURS NÉOFORMÉS : PAF-acéther, prostaglandines, leucotriènes

JUIN 1999
 FORMES ANATOMO-CLINIQUES DE L’INFLAMMATION Dr S. CAILLAT-ZUCMAN
Aventis
Internat 323 Les cellules de l’inflammation, principaux médiateurs de l’inflammation.
Le granulome inflammatoire
Laboratoire
d’Immunologie Clinique,
Hôpital Necker, Paris
AV E N T I S I N T E R N AT E S T D I R I G É PA R : W I L L I A M B E R R E B I , PAT R I C K G E P N E R , J E A N N A U

Réaction inflammatoire : système de défense non spécifique

- Réponse IMMÉDIATE : activation en cascade des protéines GRANULOME INFLAMMATOIRE
INFLAMMATION AIGUË
plasmatiques, limitée dans le temps (mécanismes régulateurs) ou CICATRICIEL
- Réponse TARDIVE : phase de réparation

PHASE PRÉCOCE PHASE TARDIVE

■ MANIFESTATIONS DE L'INFLAMMATION AIGUË : ■ MANIFESTATIONS DE LA PHASE DE RÉPARATION

- ÉRYTHEME : vasodilatation et accumulation d'hématies dans les capillaires - Elimination des cellules lésées : PHAGOCYTOSE
consécutive à l'adhérence des plaquettes et des leucocytes à l'endothélium - CICATRISATION : fibrose, modification de la matrice extra-cellulaire, angiogénèse
- ŒDÈME : extravasation des leucocytes et du plasma - RÉGÉNÉRATION tissulaire (autorenouvellement et remodelage) à partir d'un
- DOULEUR ET FIÈVRE : liées à la production de cytokine (TNF, IL-1) granulome cicatriciel

■ MÉDIATEURS DE L'INFLAMMATION AIGUË ■ MISE EN JEU DES MACROPHAGES

- Eléments INITIATEURS : activation des facteurs de la coagulation (plaquettes, - Phagocytose de débris cellulaires générés pendant la phase aiguë
fibrine, facteur XII) et du complément ➜ libération de médiateurs chimiotactiques - Production de CYTOKINES et de MEDIATEURS (facteurs de coagulation, facteurs
et de molécules agissant sur l'endothélium (bradykinine, anaphylatoxines) du complément, activateur du plasminogène, élastase, collagénase, médiateurs
- Eléments CELLULAIRES PRÉFORMÉS : histamine et sérotonine (mastocytes, lipidiques) ➜ contrôle de la mobilisation et de la prolifération des FIBROBLASTES
basophiles), enzymes des granules des PN
- Eléments CELLULAIRES NÉOFORMÉS : cytokines, eicosanoïdes synthétisés en ■ INTERACTIONS MACROPHAGE/LT/CELLULE ENDOTHÉLIALE
présence de phospholipase A2 (Thromboxane A2, PG, leucotriènes), PAF-acéther - Activation réciproque (rôle des molécules d'adhésion ICAM1 et LFA1)
- Migration des cellules activées à travers la paroi capillaire
■ CELLULES DE L'INFLAMMATION - Développement du granulome par interaction entre LT CD4 + et macrophages
- Plaquettes : sérotonine et thromboxane - Attraction des PE et fibroblastes
- Mastocytes tissulaires et polynucléaires basophiles - Transformation du macrophage en cellule géante épithélioïde
- Polynucléaires neutrophiles : radicaux libres oxygénés toxiques et enzymes
lysosomales (activateur du plasminogène, hydrolases acides, collagènase, élastase),
contrôlées par des inhibiteurs plasmatiques (1-antitrypsine)
- Polynucléaires éosinophiles : protéines cationiques et médiateurs phospholipidiques,
chimiotactisme
- Monocytes : cytokines et médiateurs lipidiques

JUIN 1999
 CICATRISATION NORMALE et PATHOLOGIQUE
Aventis
Internat 324
AV E N T I S I N T E R N AT
Cicatrisation : séquence d’évènements mettant en jeu des processus de prolifération, différenciation,
CICATRISATION NORMALE : 3 PHASES
1. PHASE VASCULAIRE ET INFLAMMATOIRE :
2ème au 4ème jour : formation d’un caillot et
migration des cellules participant à la réaction
inflammatoire.
• Blessure, nécrose cellulaire et effraction
vasculaire. Arrivée de protéines
(fibronectine, vitronectine, fibrinogène)
intervenant dans la formation d’une matrice
permettant la migration cellulaire.
• Activation plaquettaire et 1ère phase de
libération de cytokines et facteurs de
croissance (PDGF, TGFß, TGFα, IGF1).
• Rôle des cellules inflammatoires :
macrophages : libération d’enzymes
(protéases, élastases, collagénases) et
2ème phase de libération de cytokines
et facteurs de croissance.
PN = rôle anti-infectieux.
Lymphocytes : prolifération des fibroblastes
et régulation de l’activité des macrophages.
Physiopathologie et anatomopathologie
Dr V. SAADA
Service de Dermatologie
Hôpital Saint-Louis, Paris
E S T D I R I G É PA R : W I L L I A M B E R R E B I , PAT R I C K G E P N E R , J E A N N A U
migration cellulaire, synthèse de molécules de la matrice extracellulaire.
CICATRISATION PATHOLOGIQUE
2. PHASE PROLIFÉRATIVE : Différents aspects pathologiques
10ème au 15ème jour : prolifération et migration des • Cicatrice hypertrophique
fibroblastes, des cellules endothéliales et des Aspect inflammatoire, rouge jusqu’au 6ème mois,
kératinocytes. associé à un prurit.
• Réparation du derme :
• Cicatrice chéloïde
- migration des fibroblastes sur la lésion, synthèse de
Hypertrophie de la cicatrice (masse régulière, polylobée,
collagène et des constituants de la matrice ;
dure, incolore) évoluant encore après le 6ème mois.
- néoangiogenèse (influence du bFGF) ;
- contraction de la plaie due aux myofibroblastes • Cicatrice rétractile
(rôle du PDGF) ; Rétraction dans l’axe de la cicatrice due à une suture
mal réalisée ou une perte de substance non traitée.
• Réparation de l’épiderme :
- migration des kératinocytes des berges de la plaie ; • Cicatrice dyschromique
- prolifération des kératinocytes ; Hyper ou hypopigmentation après abrasion cutanée.
- maturation et différenciation du nouvel épiderme
régénéré par les mélanocytes et les cellules de • Cicatrice élargie
Langerhans. liée à la topographie (tension cutanée importante : dos,
cuisse).
• Cicatrice tatouée
Due à un parage initial défectueux. Particules pigmen-
3. PHASE DE REMODELAGE DE LA CICATRICE : tées laissées en place puis recouvertes par le nouvel
épiderme.
plusieurs mois : modifications de la matrice qui
s’enrichit en collagène et en protéoglycanes • Kyste d’inclusion dermique
(remplaçant la fibronectine et l’acide hyaluronique). Incarcération de fragments cutanés dans la cicatrice.
JUIN 1999

MÉCANISMES ET EXPRESSION CLINIQUE DU REJET DE LA GREFFE
Aventis
Internat 326 ET DE LA MALADIE DU GREFFON CONTRE L’HÔTE
AV E N T I S I N T E R N AT
• Alloantigènes : antigènes tissulaires
reconnus comme étrangers chez un
receveur d’allogreffe, principalement
représentés par les antigènes du complexe
majeur d’histocompatibilité HLA
• Rejet de greffe = réaction immunologique
du receveur dirigée contre les alloantigènes
du donneur exprimés à la surface des
cellules du greffon.
• Réaction du greffon contre l’hôte (GVH =
“graft versus host” reaction) : réaction des
cellules immunitaires du donneur contre les
alloantigènes du receveur, survenant lorsque
le receveur est lui-même immuno-
incompétent (déficit immunitaire, traitement
immunosuppresseur)
RÉACTION DU GREFFON CONTRE L’HÔTE
• Complication principale d’une allogreffe de
moelle osseuse
• Gravité corrélée au niveau d’incompatibilité
HLA entre donneur et receveur
 Mécanisme :
. survient lors de l’introduction de
lymphocytes T allogéniques chez un
receveur immuno-incompétent
. destruction des cellules du receveur
exprimant les antigènes HLA de classe I
ou II par les lymphocytes T activés du
donneur
 Signes cliniques :
. formes aiguës de degré variable (grade I
à IV) associant fièvre, atteinte cutanée
(érythrodermie), hépatique (cholestase),
intestinale (diarrhée)
. forme chronique : atteinte cutanée,
hématologique, manifestations
autoimmunes
Dr S. CAILLAT-ZUCMAN
Laboratoire
d’Immunologie Clinique,
Hôpital Necker, Paris
E S T D I R I G É PA R : W I L L I A M B E R R E B I , PAT R I C K G E P N E R , J E A N N A U
SURAIGU REJET DE GREFFE D’ORGANE CHRONIQUE
survient dans les heures suivant peut évoluer sur de nombreuses années
la transplantation  Mécanisme : mal compris, implique en
 Mécanisme : partie des alloanticorps se fixant sur
• Lié à l’existence chez le receveur d’alloanticorps préformés lors l’endothelium vasculaire du greffon
d’une immunisation antérieure (transfusion, grossesse ou greffe),  Signes cliniques :
se fixant sur les alloantigènes du greffon exprimés sur • Détérioration progressive et irréversible de
l’endothelium vasculaire et activant le complément (réaction la fonction du greffon
d’ARTHUS) • Lésions vasculaires (prolifération
• Doit être évité par la recherche systématique chez le receveur endothéliale et des fibres musculaires lisses)
d’anticorps sériques dirigés contre les antigènes HLA du donneur • Fibrose interstitielle
(cross-match réalisé avant toute transplantation d’organe)
• Un cross-match positif est une contre-indication à la greffe
 Signes cliniques :
• Infarctus du greffon ± coagulopathie de consommation
AIGU
survient à partir de la première semaine suivant la transplantation
 Mécanisme :
rôle des lymphocytes T ++++ = équivalent in vivo de la réaction lymphocytaire mixte in vitro :
• 2 voies d’activation des lymphocytes T du receveur :
- reconnaissance directe des alloantigènes HLA ( classe I et II) du donneur à la surface des cellules du greffon
- reconnaissance indirecte de peptides dérivés des alloantigènes du donneur, présentés par les molécules HLA de classe II du receveur
à la surface des cellules présentatrices d’antigène (monocytes, cellules dendritiques)
• Activation des lymphocytes T CD4+ (reconnaissance TCR-CMH/peptide, et 2ème signal de co-activation)
• Production de cytokines (IL-2, IFNγ, TNFα) qui agissent de manière autocrine et paracrine (sur d’autres populations lymphocytaires)
• Prolifération lymphocytaire
• Différenciation des lymphocytes T cytotoxiques CD8+ spécifiques des alloantigènes
• Destruction des cellules du greffon (lyse par T CD8+, cellules NK, polynucléaires, cytokines)
• Coopération T-B pour la production d’alloanticorps anti-HLA
 Signes cliniques :
• Signes généraux (fièvre, oedème du greffon)
• Dysfonctionnement de l’organe transplanté :
- oligurie, élévation de la créatininémie (greffe de rein)
- cholestase, cytolyse hépatique (greffe de foie)
- troubles du rythme, insuffisance cardiaque (greffe de coeur)
 Action des immunosuppresseurs sur les étapes précoces de la réaction allogénique :
• Inhibition de la production de cytokines (IL-2) : cyclosporine A, tacrolimus
• Inhibition de la prolifération et différenciation T : azathioprine, acide mycophénolique
• Blocage du recepteur T : anticorps monoclonaux anti-CD3, sérum anti-lymphocytaire
• Blocage de la transduction du signal induit par le récepteur de l’IL-2 : rapamycine
JUIN 1999
 Dr S. CAILLAT-ZUCMAN
PRÉLÈVEMENTS ET TRANSPLANTATIONS D’ORGANES
Aventis
Internat 327 Aspects juridiques et éthiques
Laboratoire
d’Immunologie Clinique,
Hôpital Necker, Paris
AV E N T I S I N T E R N AT E S T D I R I G É PA R : W I L L I A M B E R R E B I , PAT R I C K G E P N E R , J E A N N A U

RÈGLES GÉNÉRALES
• Transplantation = prélèvement d’un organe chez un donneur et réimplantation chez un
receveur avec rétablissement de la continuité vasculaire (rein, foie, coeur, pancréas, • Gratuité et anonymat du don
poumon, intestin) • Interdiction de publicité en faveur d’un don au profit d’une
• La loi CAILLAVET (22-12-1976), modifiée par les lois de “bioéthique” (29-7-1994) relatives : personne ou d’un établissement particulier
- au respect du corps humain • La sécurité sanitaire impose la recherche chez le donneur
- au don et à l’utilisation des éléments et produits du corps humain d’une infection par :
pose les principes généraux fondant le statut juridique du corps humain et régissant le - HIV1 et 2, HTLV1 et 2, VHC (greffe interdite dans ces cas)
don et l’utilisation de ses éléments. - VHB, CMV, EBV, syphilis, toxoplasmose
• Le principe de sauvegarde de la dignité de la personne humaine est reconnu comme valeur • Consentement du donneur
constitutionnelle par le Conseil Constitutionnel.

DONNEUR CADAVÉRIQUE DONNEUR VIVANT

• La loi CAILLAVET avait consacré une “présomption de consentement” faisant de tout individu un donneur potentiel • Don à finalité thérapeutique exclusivement
d’organes après sa mort. • Donneur majeur et jouissant de son intégrité mentale
• La réglementation actuelle fixe : • Receveur : père, mère, fils, fille, frère ou soeur
- le constat précoce du décès (2-12-1996) : exclusivement
. en cas d’arrêt cardiaque et respiratoire persistant • Don entre époux admis en cas d’urgence
. en cas de personne assistée par ventilation mécanique et conservant une fonction hémodynamique • Information du donneur sur les risques physiques et
. 3 critères obligatoires : psychologiques d’un prélèvement
- absence totale de conscience et d’activité motrice spontanée • Consentement libre et éclairé, révocable à tout
- abolition de tous les réflexes du tronc cérébral moment, consigné auprès du Président du Tribunal
- abolition de toute respiration spontanée (ou tracé nul sur 2 EEG à 4 heures d’intervalle en cas de ventilation assistée) de Grande Instance
- la présomption de consentement en absence de refus exprimé du vivant du donneur (sur registre national • Gratuité du don
automatisé prévu à cet effet, en cours d’élaboration) • Don de rein, exceptionnellement d’un lobe hépatique
- si le médecin n’a pas directement connaissance de la volonté du défunt, il doit recueillir le témoignage de sa famille
- consentement exprimé obligatoire en cas de prélèvement à but scientifique (et non à finalité thérapeutique)

• L’Etablissement Français des Greffes (EFG), placé sous tutelle du Ministère de la MODALITÉS DE PRÉLÈVEMENT
Santé, a pour rôle :
• Dans un établissement de santé autorisé par l’autorité administrative
- l’enregistrement des patients sur liste d’attente de transplantation
• L’équipe médicale de prélèvement est en général celle qui a à transplanter
- les règles de répartition des greffons
les organes
- la coordination et la surveillance des activités de prélèvement et de greffe
• Interdiction de rémunération à l’acte pour l’activité de prélèvement
- la planification de la carte sanitaire
• Séparation des équipes médicales concernées par le prélèvement et le
• Sanctions pénales :
constat de décès
- repression des atteintes à la gratuité du don et du trafic d’organes
• La loi impose de s’assurer de la restauration décente du corps du donneur
- repression des atteintes à la sécurité sanitaire
- repression des violations de prescriptions relatives au prélèvement sur donneur vivant

JUIN 1999