-Capítulo 7 Los países con citricultura de avanzada
han basado su éxito en el empleo de Progra- mas de Certificación utilizando plantas libres Plantas cítricas libres de enfermedades de enfermedades, especialmente las causa- das por virus u organismos similares. Costa, Norma; Plata, María Inés; Estas plantas libres de virus se obtienen Anderson, Catalina a partir de plantas de variedades cítricas agronómicamente ideales pero afectadas por 1 Introducción una o más enfermedades causadas por virus u organismos similares. Para esto se recurre a Para competir en un mercado citrícola técnicas que permitan la obtención de plan- globalizado se necesita de la máxima eficien- tas libres de virus a partir de individuos en- cia en todas las fases de la producción. Para fermos. La termoterapia y la obtención de lograrlo es primordial partir con material de plantas nucleares han sido técnicas usadas excelencia desde el vivero. La planta es el pri- para conseguir aquel objetivo. Otra técnica mer escalón para iniciar una citricultura que cumple este objetivo es la técnica de exitosa. microinjerto de ápices caulinares in vitro. Las exigencias de calidad en los cítricos Dicha técnica es la que actualmente se utiliza producidos en los viveros comerciales de todo en gran parte de los países citrícolas que tie- el país aumentan día a día. El material de nen programas de eliminación de virus y multiplicación para la producción de plantas viroides. de vivero debe provenir de un origen cierto y Con la combinación de las técnicas de certificado. El citricultor espera que la planta termoterapia y de microinjerto de ápices que pondrá en sus explotaciones tenga un caulinares in vitro es posible obtener un ele- porte adecuado, un sistema radicular desa- vado porcentaje de plantas cítricas libres de rrollado y la garantía sanitaria y varietal co- virus, cosa que una técnica sola no permite rrespondiente para obtener una producción lograr. rentable y duradera. La técnica de microinjerto se basa en la Las enfermedades producidas por virus, hipótesis de que los virus vegetales no llegan viroides y otros organismos similares produ- a infectar el meristema. Una vez obtenida la cen importantes pérdidas económicas en los planta por esta técnica debe ser sometida a cítricos de todo el mundo. Algunas enferme- las pruebas de comprobación sanitaria (prue- dades provocan la muerte de las plantas y bas biológicas, químicas, inmunoquímicas, otras disminuyen la producción y la calidad serológicas, moleculares, etc.) que determi- de la fruta, causando pérdida de vigor y de nen con certeza que esa planta esta «libre» longevidad de la planta. de lo que se está analizando. Algunas de las principales enfermedades El PROCITRUS es un proyecto que el INTA causadas por este tipo de microorganismos desarrolló para la obtención, producción, son la psorosis, tristeza, exocortis y mantenimiento y distribución de material de cachexia. Estas enfermedades se han exten- portainjertos y cultivares de especies cítricas dido debido a la propagación vegetativa de con identidad varietal y estado sanitario con- material infectado. Es normal encontrar va- trolados y en su esquema básico (Tabla 1) rias virosis en una misma planta y en muchos emplea estas técnicas para cumplir dichos países como la Argentina casi la totalidad de objetivos. las plantas adultas están afectadas por algu- na virosis. 2 Técnica de microinjerto de ápices La psorosis y otras enfermedades se caulinares in vitro transmiten mediante el injerto de yemas. Una vez hecho el injerto, la planta puede La planta a microinjertar es seleccionada permanecer con la enfermedad latente du- de las introducciones de variedades cítricas rante muchos años. Las yemas que se extrai- de copa y portainjerto que se realizan a los gan de una planta con enfermedad latente Bancos de Germoplasma, de selecciones lo- originarán plantas enfermas. cales y de variedades obtenidas en los Pro-
Biotecnología y Mejoramiento Vegetal 317
Tabla 1: Esquema operativo del proyecto PROCITRUS: difícil de eliminar es el virus de la psorosis de para la obtención de una planta libre de enfermedades los cítricos (CPsV). - Introducciones. Una vez obtenida la planta de microin- - Selecciones locales. jerto y cuando tiene tamaño suficiente, se - Programas de Mejoramiento. realizan las pruebas de diagnóstico para com- probar que estén libres de patógenos (Ta- Planta candidata bla 2). Termoterapia Las técnicas de diagnóstico para cada 32°C enfermedad pueden ser varias pero deben emplearse aquellas reconocidas interna- Cultivo de Tejidos cionalmente por organismos de referencia. Para el PROCITRUS y para el Programa Nacio- Diagnóstico nal de Certificación de Cítricos las técnicas Sanitario empleadas son las recomendadas por las Planta Madre Original «Normas para la Producción, Comercialización Protegida e Introducción de Plantas Cítricas de Vivero (RES N° 149/98)» y las «Normas de Funciona- miento de Laboratorios de Diagnóstico para gramas de Mejoramiento. Una vez obteni- Enfermedades de Plantas Cítricas de Vivero da esta «planta candidata a planta madre», y sus partes, aprobadas por el INASE y el es sometida a termoterapia y cultivo de teji- SENASA dependientes de la SAGPyA (Secre- dos empleando la técnica de «microinjerto taría de Agricultura, Ganadería, Pesca y Ali- de ápices caulinares in vitro». mentación). Esta técnica comprende las siguientes eta- pas: preparación del portainjerto, prepara- 3 Lecturas recomendadas: ción del ápice, injerto, cultivo de plantas in- jertadas e injerto sobre un plantín vigoroso. 1- Enfermedades de los Cítricos. 2000 Monografía de la Las plantas obtenidas por microinjerto no SEF (Sociedad Española de Fitopatología). Editores Científicos: Núria Duran-Vila y Pedro Moreno 165 pp presentan caracteres juveniles y en las mis- mas no se han observado anormalidades con 2-Proceedings of the IOCV (International Organization respecto a la planta madre. of Citrus Virologists): 1957-2002 (15 Conferencias) El éxito de la técnica depende del tama- 3-Improvements in serodiagnosis of Citrus Psorosis Virus ño del tejido extraído (0.1-0.2 mm) y del pa- (CPsV). 2000. Aliotto, D.,M. Gangemi,P. Sposato, S. tógeno que se quiera eliminar. En el caso de Deaglio, E. Luisoni and R.G. Milne.14th Proceedings of exocortis, tristeza y cachexia, el porcentaje the IOCV 353-356pp de plantas libres es superior al 90%. El más 4- Indexing of Citrus viroids by imprint hybridisation. 1999.Palacio-Bielsa, A.,X. Foissac and N. Tabla 2: Pruebas de Diagnóstico para Plantas Madres Duran-Vila. European Journal of Plant Pathology 105:897-903 Enfermedad Metodología Duración Repetición 5- Cancrosis de los Citrus en el Litoral Inmunoimpresión ELISA 4h Argentino.2001. Canteros, Blanca I. IDIA XXI Tristeza Plantas indicadoras 12 meses 1 año Año I- Nro.1 23-27pp ELISA DAS 48 h Plantas indicadoras 12 meses 3 años 6- Citrus Canker in Argentina- Control, Psorosis ELISA TAS 48 h Eradication, and Current Managment. 2000 Plantas indicadoras 12-24 International Citrus Canker Research Exocortis Hibridación Molecular meses 6 años Workshop. Ft. Pierce, Florida USA. 12-13pp Electroforesis 3 meses 3 meses 7- Manual para Productores de Naranja y Plantas indicadoras 12 meses Mandarina de la Region del Río Uruguay. Cachexia-xiloporosis Hibridación Molecular 3 meses 6 años 1996. INTA Manual Serie «A» Nro. 2 - Electroforesis 3 meses Diversificación Productiva. Eds. A. Fabiani, R. CVC ELISA DAS 48 hs 6 años Mika, L. Larocca y C. Anderson. 238 pp Infiltración de tejido susceptible 10 días Cancrosis Medio Selectivo 7 días 1 año 8- Graft-Transmissible Diseases of Citrus. Inmunofluorescencia indirecta 7 días Handbook for detection and diagnosis. 1991. ELISA DAS 48 hs Roistacher, C.N. FAO and IOCV 286 pp.
318 COSTA, Norma; PLATA, María Inés; ANDERSON, Catalina