Biotehnologii medicale

SEPARAREA CU
SCHIMBATORI DE IONI
Prof. Univ. Dr. Anca Galaction
anca.galaction@umfiasi.ro
SEPARAREA CU AJUTORUL
SCHIMBATORILOR DE IONI
• Reacţii de schimb ionic = Reacţii de dublu schimb
• Pot avea loc in sisteme eterogene
• Pot avea loc in sisteme omogene

Prof. Dr. Anca Galaction

R-H+ + M+X- R - M+ + H+X-
R+OH - + M+X- R+X- + M+OH-

ionii din soluţie sunt preluaţi de schimbătorii de ioni,

aceştia cedȃnd soluţiei ioni de acelaşi semn
 Clasificarea schimbatorilor de ioni
(compusi naturali sau sintetici, de natura anorganica sau organica)

Specia ionica schimbata

• Cationiti (R-H+) sau schimbători de cationi
• Anioniti (R+OH -) sau schimbători de anioni
Starea de agregare
• Solizi

Prof. Dr. Anca Galaction

• Geluri
• Lichizi
Structura chimica
• Anorganici
• Organici
• Rasini schimbatoare de ioni
Structura chimica a gruparii active
• cationiti carboxilici, sulfonici, aminici
Caracterul acido - bazic:
• cationiti slab sau puternic acizi
• anioniti slab sau puternic bazici
Elutia
Regenerarea schimbătorilor de ioni, cu refacerea structurii iniţiale a
acestora şi retrecerea ionilor reţinuţi în soluţie, se realizează diferenţiat, în
funcţie de tipul ionitului:
• cationiţii se tratează cu soluţii acide (HCl, H2SO4)
RM + HCl RH + MCl

Prof. Dr. Anca Galaction

• anioniţii se tratează cu soluţii alcaline
RX + MOH ROH + MX

Există situaţii în care reacţiile de schimb ionic nu sunt reversibile, şi anume

atunci cȃnd din proces rezultă apă:
RH + MOH RM + H2 O
ROH + HX RX + H2 O

Si în aceste cazuri, regenerarea schimbătorilor de ioni se face prin tratare cu agenţii de

regenerare menţionaţi anterior
Utilizari
1. dedurizarea si demineralizarea apelor industriale (reţinerea cationilor Ca2+, Mg2+, a anionilor HCO3-, SO42-,
SiO32-) = alimentarea cazanelor, a circuitelor primare ale reactoarelor nucleare, ca ape tehnologice pentru
industria chimică, textilă, a hȃrtiei şi celulozei.

2. separarea şi recuperarea unor ioni din soluţiile diluate de electroliţi, aplicată la recuperarea unor metale, a
unor metale rare sau radioactive (germaniu, uraniu), la regenerarea soluţiilor utilizate în galvanotehnică (soluţii
de nichelare, cromare, decapare), la izolarea şi recuperarea compuşilor toxici din apele reziduale, la
decontaminarea apelor reziduale din industria combustibilor nucleari.

3. industria chimica:
- purificarea avansata a reactivilor anorganici si organici, a solventilor, prepararea acizilor si bazelor libere din
sarurile lor
- procese catalitice: alchilari, esterificari,hidratarea olefinelor, suporturi pentru catalizatori

Prof. Dr. Anca Galaction

4. industria farmaceutica: separarea antibioticelor, acizilor carboxilici, aminoacizilor, vitaminelor, alcaloizilor,
hormonilor, purificarea solutiilor.

5. industria alimentara:
- industria zaharului (purificarea melasei, a solutiilor de zahar, recuperarea zaharului)
- purificarea solutiilor de glucoza, glicerinei, fenolilor, gelatinelor
- separarea acizilor carboxilici (acid lactic, citric, tartric), aminoacizilor, vitaminelor
- innobilarea vinurilor si a sucurilor de fructe.

6. tehnica de laborator: analize calitative si cantitative, separari analitice ale izotopilor, aminoacizilor, metalelor
etc., purificarea solutiilor, prepararea reactivilor puri.

7. determinari biologice: dozari si purificari de componenti ai sangelui, ai plasmei si ai altor lichide biologice.

8. practica terapeutica: tratamentul hiperaciditatii, ameliorarea regimului alimentar fara sare, mentinerea
calitatii sangelui utilizat in transfuzii, sterilizare, efectuarea unor analize etc.
 Rasini schimbatoare de ioni
• Rășinile schimbătoare de ioni sunt compuși
macromoleculari sintetici care conțin grupări polare
ionizabile ce favorizează schimbul ionic.
• Datorită structurii tridimensionale, aceste materiale permit
difuzia internă a ionilor din soluția unui electrolit, proces
facilitat de caracterul hidrofil al acestor ioniți (la contactul
cu apa, apare fenomenul de umflare al rășinii). Pătrunderea
apei accelerează difuzia ionilor ȋn interiorul particulei de

Prof. Dr. Anca Galaction

rășină.
• Rășinile sintetice au forma unor granule cu dimensiuni
cuprinse ȋntre 0,2 - 1,5 mm, fiind obținute prin
policondensarea sau polimerizarea și grefarea pe structura
matriceală a polimerului de bază a grupărilor funcționale.
Capacitatea de schimb ionic este mărită prin creșterea
numărului de grupări polare, ȋnsă aceasta poate cauza
accentuarea tendinței de dizolvare a rășinii ȋn apă.
• Rășinile sub formă de gel nu posedă o porozitate reală, ionii
difuzȃnd prin structura gelului către centrii de schimb ionic.
Pentru aceste rășini se definește o porozitate aparentă,
determinată de distanțele intermoleculare și care nu
depășește 40 Å.
1 Ångström = 10−10 m
Tipuri de schimbatori de ioni
 cationiți slab acizi (Amberlit IRC-50, KB-4, KB-4P-2): conțin grupări carboxilice,
obținȋndu-se prin copolimerizarea acidului metacrilic cu divinil-benzenul

 cationiți puternic acizi (CS-3, Amberlit IR-124, Dowex 50): conțin grupări
sulfonice. CS-3 se obține prin copolimerizarea stirenului cu divinil-benzenul, urmată
de sulfonare cu acid clorsulfonic

Prof. Univ. Dr. Anca Galaction

La modul general, cationiții se utilizează ȋn procesele de separare și purificare ale
unor produse de biosinteză, cum ar fi: antibiotice (streptomicina, tetracicilină,
clortetraciclină, oxitetracicilină, albomicinei), aminoacizi (l-lizină), vitamine
(vitamina B12 ), alcaloizi etc, precum și la demineralizarea unor soluții.
 anioniți slab bazici (AN-2F, Amberlit IR-2V, EDE-10): conțin ȋn moleculă grupări
aminice primare, secundare, sau terțiare și se obțin prin condensarea aminelor
aromatice cu aldehidă formică, sau prin interacțiunea polietilen-poliamidelor cu
epiclorhidrina
 anioniți puternic bazici (PEK, Amberlit IRA-400, IRA-410): conțin grupări
cuaternare de amoniu, obținȋndu-se prin clorometilarea copolimerului stiren-
divinil-benzen și introducerea grupei aminice terțiare, care se transformă ȋn grupare
cuaternară de amoniu ȋn prezența unui anion
Prof. Univ. Dr. Anca Galaction
 Etapele procesului de separare
prin schimb ionic
Separarea prin schimb ionic este o operaţie care constă
într-o succesiune de 4 - 6 etape:
• reţinerea ionilor din soluţia supusă separării
• eluţia ionilor reţinuţi, pentru retrecerea lor în soluţie

Prof. Dr. Anca Galaction

• spălarea schimbătorului de ioni, pentru îndepărtarea
eluentului reţinut fizic
• regenerarea schimbătorului de ioni
• spălarea schimbătorului de ioni regenerat
• afȃnarea stratului de schimbător de ioni (pentru răşini
depuse în strat fix).
Sorbtia se considera incheiata, respectiv schimbatorul de ioni saturat, atunci cind la iesire solutia are o anumita
valoare a concentratiei speciei chimice care se doreste a fi separata, de circa 80% din concentratia sa in solutia initiala
(in general, se constata o crestere brusca a concentratiei acesteia in efluent, fenomen care poarta denumirea de
strapungere).

• Elutia reprezinta eliberarea ionilor retinuti si retrecerea lor in solutie, si se realizeaza cu reactivi specifici ionilor eluati sau
schimbatorilor de ioni folositi. Cationitii se trateaza cu solutii acide de concentratie 2 - 8% (HCl, H2SO4), iar anionitii cu solutii
alcaline de concentratie 2 - 5% (NaOH, mai rar Na2CO3 sau NH4OH). In anumite situatii, in functie de structura chimica a
gruparii active (de exemplu, cationit in forma acida H sau sodica Na), prin elutie se obtine si regenerarea schimbatorului de
ioni.
• Regenerare - ionitul este readus in forma sa activa. Aceasta etapa se realizeaza cu reactivi specifici tipului de rasina utilizata
si a ionului care va fi retinut. Astfel, pentru cationiti sub forma acida H, prin elutie cu o solutie acida se produce si
regenerarea. Daca se utilizeaza sub forma Na, dupa elutie cu o solutie acida, cationitul se trateaza cu o solutie 4% NaCl sau
NaOH. Anionitii se trateaza pentru elutie cu o solutie 2 - 5% NaOH si, apoi, cu o solutie 5 - 7% HCl, daca anionitul este sub
forma Cl.
• In anumite procese de separare, dupa elutia ionului principal retinut, se poate proceda si la elutia altor specii ionice similare,

Prof. Dr. Anca Galaction

inainte de regenerare. De exemplu, in cazul separarii streptomicinei pe cationiti, elutia antibioticului se face cu o solutie 3 -
4% H2SO4. Ionii de Ca, Mg, Fe, retinuti de rasina din filtratul supus prelucrarii, se indeparteaza de pe cationit cu o solutie 5 -
7% HCl, dupa care rasina se regenereaza (cationitul se utilizeaza sub forma Na).
Regenerarea se poate face fara spalarea prealabila a ionitului sau concomitent cu elutia, iar etapa de afinare poate fi eliminata.
In schimb, in special in cazul produselor care impun restrictii privind sterilitatea, se realizeaza si sterilizarea schimbatorului
de ioni (de exemplu, cu o solutie 1% formol) inaintea retinerii ionilor.
• In coloanele cu schimbatori de ioni dispusi in straturi fixe, inaintea unui nou ciclu de sorbtie, se procedeaza la afinare.
Operatia are rolul de a indeparta impuritatile mecanice si bulele de aer din stratul de rasina, in scopul reasezarii particulelor
de schimbatori de ioni pentru o distribuire uniforma si o circulatie corespunzatoare a solutiei de prelucrat prin stratul de
rasina. Afinarea se realizeaza introducind apa distilata sau demineralizata de jos in sus prin coloana cu rasina. Operatia se
opreste atunci cind apa care paraseste coloana pe la partea superioara devine limpede (durata poate fi de pina la 2 ore).
In timpul afinarii, volumul stratului de ionit se poate mari considerabil, de aceea se impune existenta unui spatiu gol la partea
superioara a coloanei.
Mecanismul separarii prin
sorbtie pe schimbatori de ioni
Mecanismul procesului de schimb ionic consta in trecerea ionilor din
solutie in rasina si a ionilor corespondenti din rasina in solutie.

Viteza procesului global poate fi controlata de trei tipuri de rezistente

(etape limitative):

• difuzia ionilor prin filmul de lichid de la suprafata particulei de

Prof. Dr. Anca Galaction

schimbator de ioni

• difuzia ionilor prin particula de schimbator de ioni

• reactia chimica de schimb ionic

Matrice:
a) Neporoase
b) Microporoase
c) macroporoase
Etapele retinerii speciilor ionice pe schimbatorii de ioni

solutie granula de schimbator de ioni

Prof. Univ. Dr. Anca Galaction

1
specie ionica
2 3
 Natura etapei limitative
In functie de efectul conditiilor hidrodinamice asupra sorbtiei, se poate determina daca difuzia prin filmul de
lichid constituie rezistenta principala.
Daca viteza de sorbtie ramȃne constanta cu modificarea intensitatii amestecarii fazelor, se aplica testul
intreruperii, pentru a se stabili daca difuzia interna, sau reactia chimica, controleaza procesul.

Testul intreruperii consta in scoaterea rasinii din solutie si reintroducerea ei, dupa un anumit timp. Daca
viteza de sorbtie inregistreaza un salt, atunci difuzia interna in particula de schimbator reprezinta etapa
determinanta (in perioada cȃt rasina a fost scoasa din solutie, difuzia in particula a continuat.

12 12 12

Prof. Dr. Anca Galaction

a b c

Concentra]ie, g/l
9
Concentra]ie, g/l

9
Concentra]ie, g/l

6 6 6
regim static regim static [ i dinamic
3 3 3
regim dinamic
0 0 0
0 20 30 40 50 60 0 20 30 40 50 60 0 20 30 40 50 60
Timp, min Timp, min Timp, min

Stabilirea naturii etapei limitative a unui proces de separare prin sorbtie pe schimbatori de ioni
a - difuzia prin filmul de lichid este etapa limitativa
b - difuzia prin filmul de lichid nu este etapa limitativa
c - difuzia interna este etapa limitativa.
 Stabilirea naturii etapei limitative a unui proces de separare
prin sorbţie pe schimbători de ioni
- difuzia internă este etapa limitativă.

12
Concentra]ie, g/l

Prof. Univ. Dr. Anca Galaction

6

0
0 20 30 40 50 60

Timp, min
Mecanismul schimbului ionic este determinat de:

• valoarea concentratiei solutiei

• regimul hidrodinamic
• dimensiunea particulei de rasina
• porozitatea si dimensiunea porilor particulei
• coeficientii de difuzie in rasina etc.
• valoarea coeficientului de difuzie in particula
• difuzie interna

Prof. Dr. Anca Galaction

• caracteristicile ionilor participanti la procesul de
schimb
• structura rasinii - se obtin viteze ridicate de difuzie in
cazul ionilor putin voluminosi si rasini cu porozitate
ridicata.
• difuzia in particula, daca valoarea concentratiei solutiei
este de peste 0,1M, pentru concentratii sub 0,01M
fiind controlat de difuzia prin filmul de lichid.
STREPTOMICINA

• In 1943, S.A.Waksman (premiul Nobel ȋn 1952) a descoperit și

izolat din sol de grădină și, ulterior, din gȃtul unui pui de găină
2 tulpini de Streptomyces griseus. Pentru această descoperire
a studiat peste 5000 de tulpini de actinomicete din sol, deși
avea ȋn dulapul său de culturi o tulpină de S. griseus

Prof. Univ. Dr. Anca Galaction

neproductivă.
• In 1948, streptomicina a fost obținută industrial și devine al
doilea antibiotic ca importanță terapeutică și tonaj fabricat
(după benzilpenicilină).
• Streptomicina a fost utilizată cu succes atȃt pentru
tratamentul tuberculozei, cȃt și ciumei, fiind introdusă ȋn
terapeutică chiar din 1944. Intre anii 1944 - 1949 au fost scrise
peste 1800 de articole referitoare la streptomicină.
Formulă chimică

HN NH2
C

Prof. Univ. Dr. Anca Galaction

HN
CH
O CH
HO O
H2N HC NHCH3
CH
C HN OH
O=CH C OH HC OH
HN O
HO O HO CH
CH
CH
CH3
CH2OH
Studiul mecanismului reținerii streptomicinei pe schimbători de ioni –

• Reținerea antibioticului este posibilă datorită disocierii sale ȋn

soluția apoasă, mecanismul procesului de separare prin
schimb ionic fiind descris de reacțiile:

Prof. Univ. Dr. Anca Galaction

Str-NH2 + H2O Str-NH3+HO-

R-COO-Na+ + Str-NH3+HO- R-COO-H3N+-Str + NaOH

Sisteme de operare la separarea prin retinere pe
schimbatori de ioni
• sisteme discontinue si continue, rasina fiind dispusa, in
general, in utilaje de tip coloana. Contactarea solutiei
supusa prelucrarii cu rasina consta din trecerea solutiei
peste stratul fix de rasina, fluidizarea rasinii sau circulatia
in contracurent a celor doua faze.

Prof. Dr. Anca Galaction

Instalatia de separare poate fi alcatuita dintr-o singura
coloana cu schimbatori de ioni sau dintr-o baterie de
astfel de coloane legate in serie. Utilizarea bateriei ofera
posibilitatea unei separari avansate a produsului util si
desfasurarea simultana a operatiilor de sorbtie, elutie,
regenerare, ceea ce conduce la cresterea productivitatii
etapei de separare.
 Studiul separării streptomicinei ȋn coloane cu strat fix de
schimbători de ioni

• Analiza comparativă a eficienței separării streptomicinei

(sorbție și eluție) ȋn coloane cu cationiți carboxilici, respectivi
sulfonici, dispuși ȋn strat fix.

Prof. Univ. Dr. Anca Galaction

 Instalația de separare și purificare a streptomicinei
cu ajutorul schimbătorilor de ioni
Sorbția se realizează ȋntr-o baterie de coloane cu schimbători de
cationi ȋn strat fix (IRC-50, KB-4-P2), ȋn utilajele (1) - (3), la un pH =
7 - 7,5, debitul filtratului fiind de 800 - 1200 l/h
filtrat
sol. H2SO4

Prof. Univ. Dr. Anca Galaction

1 2 3 4 5 6

eluat
condi]ionare
ape spalare

Prima coloană din baterie se consideră saturată atunci cȋnd concentrația antibioticului
la ieșire este de circa 80% din concentrația sa din filtrat.
Coloana se izolează de baterie, iar rășina se supune eluției și regenerării.
 Eluția
• Eluția streptomicinei se realizează cu o soluție de 3 - 4% H2SO4 și
decurge conform mecanismului

R-COO-H3N+-Str + 3/2 H2SO4 Str-NH2.3/2H2SO4 + R-COOH

Prof. Univ. Dr. Anca Galaction

Debitul soluției de H2SO4 este de 60 - 70 l/h, eluatul reprezentȃnd o soluție acidă de
sulfat de streptomicină cu pH = 4 - 4,5.

Indepărtarea H2SO4 din eluat se face prin sorbție pe anionitul slab bazic, ȋn coloana
(4), iar impuritățile organice (histamină, compuși pirogeni etc.) și minerale (ioni Ca2+,
Mg2+, Fe2+, metale grele) prin reținere pe cationitul sulfonic din coloana (5).

Coloana (6) conține straturi succesive de anioniți și cationiți și este utilizată pentru
demineralizarea soluției de sulfat de streptomicină.
Regenerarea
• Regenerarea cationiților se face cu o soluție 5 - 7% HCl, care
eluează ionii metalici reținuți, urmată de spălare cu apă
demineralizată, pȃnă la un pH al efluentului de 3 - 4.

• Rășinile cationice ȋn forma Na (coloanele (1) - (3)) se tratează,

Prof. Univ. Dr. Anca Galaction

apoi, cu o soluție 4% NaOH, iar pentru asigurarea sterilității, se
spală cu apă, pȃnă la pH = 8 - 8,5, și cu o soluție 1% formol.

• Anioniții se regenerează prin tratare cu o soluție 5 - 7% HCl,

spălare cu apă demineralizată, tratare cu o soluție 5% Na2CO3
și spălare cu apă pȃnă la un pH = 7 - 7,5 al efluentului.
Operarea cu rasina in strat fluidizat
Avantajele unei amestecari intense, respectiv o suprafata de contact ridicata si
accelerarea transferului de masa. In plus, in cazul produselor de biosinteza, acest
sistem permite retinerea componentului util fara filtrarea prealabila a biomasei.
• Comparativ cu stratul fix, dimensiunile particulelor de rasina pot fi mai reduse (0,2
mm), deoarece nu apar probleme create de rezistenta hidraulica a fazei solide.
Dezavantaje:
• antrenarea particulelor de rasina de dimensiuni reduse
• distrugerea mecanica a particulelor de rasina
• aparitia rezistentei hidraulice ridicate pentru straturile inalte de rasina.

Prof. Dr. Anca Galaction

• timp de contact redus intre solutie si rasina.
Pentru evitarea unora dintre deficientele mentionate, se poate proceda astfel:
• crearea unor regiuni cu sectiune mai mare in utilajul de sorbtie pe schimbatori de
ioni, care va diminua antrenarea particulelor de rasina
• marirea eficientei sorbtiei se face fie prin utilizarea unui raport dintre inaltimea
coloanei si diametrul ei apropiat de 6, fie prin circulatia in contracurent a fazelor
• utilajele cu mai multe sectiuni permit marirea timpului de contact dintre faze.
Clasificarea utilajelor folosite in operarea in strat fluidizat

a. regimul de functionare:
- discontinue
- continue
b. forma:
- cilindrice
- conice
- prismatice

Prof. Dr. Anca Galaction

c. sistemul de distributie a agentului de fluidizare:
- aparate fara site: - cu difuzori
- cu insertii conice
- aparate cu site: - pulsatoare
- vibratoare
- mobile
- cu dispozitiv de prea-plin
 Aparate conice, fara site, in care distributia agentului de fluidizare se realizeaza prin
difuzoare de constructie speciala

• Folosirea acestor aparate conice

conduce la o fluidizare mai uniforma, la
o erodare mai redusa a particulelor de
rasina (datorita unei amestecari mai Solutie de Solutie
epuizata
putin intense, comparativ cu utilajele prelucrat
tip coloana), la diminuarea
fenomenului de antrenare a granulelor

Prof. Dr. Anca Galaction

de ionit.
• Absenta sitelor permite prelucrarea Agent de
fluidizare
lichidelor de fermentatie nefiltrate sau
opalescente (fara indepartarea Rasina
prealabila a proteinelor din lichidul de
fermentatie). Aparat conic cu rasina in strat fluidizat.
Operarea in contracurent

• consta in circulatia continua in contracurent a

solutiei de prelucrat si a rasinii, sistem care se
aplica atit elutiei, cit si regenerarii schimbatorilor
de ioni.

Prof. Dr. Anca Galaction

• Aceasta modalitate de operare este intilnita
frecvent in industria chimica, fiind mai putin
raspindita in industria de biosinteza, procedeul
putind fi utilizat pentru prelucrarea lichidelor de
fermentatie nefiltrate. Utilajele folosite sint
orizontale, transportul rasinii realizindu-se cu
ajutorul unui transportor cu palete.