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REDVET.

Revista electrónica de Veterinaria 1695-7504


2010 Volumen 12 Número 5B

REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet


Vol. 12, Nº 5B Mayo/2011– http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n0505411B.html

Universidad Autónoma de Zacatecas. México. Francisco García Salinas”.

ANIVERSARIO DEL VETERINARIO

La habilidad para sujetar y manejar animales de


laboratorio no se adquiere fácilmente

*M. en C. José Jesús Muñoz Escobedo. **MVZ Sergio Saldivar


Elías. **Dra. en C. Claudia Maldonado Tapia. Est. Claudia
Yadira Muñoz Moreno. **Dra. en C. María Alejandra Moreno
García.
*Unidad Académica de Odontología.**Unidad Académica de
Ciencias Biológicas. Cuerpo Académico de Biología Celular y
Microbiología. Universidad Autónoma de Zacatecas. México.
Email: amoreno_29@ hotmail.com

Los modelos experimentales son herramientas biológicas que han permitido


el estudio de procariotes (bacterias y otros microorganismos) y eucariotes
(animales y vegetales), facilitando el conocimiento de los procesos de la
vida tanto naturales como patológicos, por lo cual, es adecuado conocer su
manejo, respetando los derechos de los animales de acuerdo a los tratados
de Helsinki.

La investigación en el área biomédica demanda gran cantidad de animales


de laboratorio con características biológicas específicas y en la oportunidad
solicitada por el investigador. Para lograr el cumplimiento de esta tarea, el
Médico Veterinario especialista en animales de laboratorio, diseña y opera
métodos reproductivos acordes con las necesidades propias de la
comunidad investigadora.

Los resultados de un experimento dependen en gran parte del manejo de


los animales, siendo vital la participación del médico veterinario, al grado
que un mal manejo puede invalidar un experimento. También es
importante señalar que existen otros factores que pueden alterar el
resultado de un experimento entre ellos destacan la constitución física y el
estado inmunológico del animal, de tal forma que el manejo adecuado de
los reactivos biológicos (fármacos) depende de factores subjetivos y
objetivos que actúan en forma diferente en cada sujeto de
experimentación.

Entre los animales más utilizados en una investigación y por ende los
mayormente reproducidos en los bioterios, son el ratón, rata, conejo,

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hamster, cuyo y chimpancés. Otros animales que se usan en menor medida


como modelos experimentales son: gato, perro, peces, tortugas, cerdos,
aves en general, ranas hurones, cabras, ovejas, bovinos, equinos,
chinchilla y armadillo.

Para comenzar a hablar de técnicas del manejo adecuado de los animales


de laboratorio, debemos considerar el manejo de éstos, con la finalidad de
respetar el derecho a buen trato de los animales (Tratado de Helsinki).

Principios de los tratados de Helsinki.


¾ Diseño científico y experiencias previas en animales.
¾ Principio de la proporcionalidad entre riesgos predecibles y
beneficios posibles.
¾ Respeto a los derechos del sujeto, prevaleciendo su interés por
sobre los de la ciencia y la sociedad.
¾ Consentimiento informado y respeto por la libertad del individuo que
los riesgos sean razonables frente a los beneficios previstos.
¾ que el diseño de la investigación sea acertado.
¾ que los investigadores sean competentes.
¾ Es la obligación ética de lograr los máximos beneficios y de reducir
al mínimo el daño y la equivocación.
Desde tiempos antiguos los griegos y romanos colocaban señales o marcas
en los animales para su fácil identificación.

Todos los métodos utilizados deben gozar de selectividad, aplicación rápida


y ser preferentemente indoloros. En ocasiones cuando lo requiere se debe
aplicar anestesia local.

MÉTODOS DE MARCAJE.

Los métodos de marcaje generalmente utilizados son:

Físicos: Directo: Corte de pelo, perforaciones y muescas en orejas,


mutilación, tatuaje eléctrico.

Indirecto: Libretas, tarjetas, aretes, collares, pulseras, chips.

Químicos: Tatuaje, colorantes, fotografías.

Biológicos: Especie, marcas naturales, sexo, color edad.

Las tarjetas se utilizan principalmente para colocarlas en las jaulas o cajas.


Como marcas naturales se consideran las características fenotípicas que
sean fácilmente detectables.

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CUADRO No. 1. Tipos de marcas usadas en animales para su identificación.

ESPECIE TIPO DE MARCA ZONA DONDE SE


APLICA
• Colorantes
Ratón y Rata • Tatuaje (tipo pinzas o eléctrico) Pelaje
• Perforaciones y muescas Orejas
auriculares
• Implantación de “chips”
Perro • Collares con fichas Cuello
• Tatuaje (tipo pinzas o eléctrico) Orejas
• Collares con fichas
Gato • Bandas plásticas Cuello
• Cintas
• Tatuaje
Hamster • Perforaciones Orejas
• Muescas auriculares
Peces • Marcas naturales Aletas
• Aretes Cola
Tortugas • Pintura Caparazón
• Perforaciones Patas
• Colorantes
• Aretes numerados
Cobayo • Muescas auriculares Pelaje
• Perforaciones Orejas
• Marcas naturales
• Abrazaderas
• Tatuaje
Cerdos • Aretes Orejas
• Abrazaderas
• Perforaciones
• Colorantes Pelaje
Conejo • Aretes Orejas
• Abrazaderas Patas
• Bandas
Aves en general • Abrazaderas Alas
• Bandas Patas
Ranas • Cuentas Dorso
• Perforaciones Membranas
interdigitales
• Colorantes Orejas
Hurones • Perforaciones Pelaje
• Tatuaje
• Tatuajes Orejas
Cabras y ovejas • Perforaciones Cuello
• Aretes
• Perforaciones Orejas
• Muescas Cuello
Bovinos y equinos • Tatuajes Lomo
• Collares Labios
• Marcas naturales Lengua
• Aretes

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Las sustancias colorantes o tinturas solo se recomienda utilizarlas cuando


se trate de identificaciones temporales. Las sustancias que se pueden
utilizar son: solución saturada de ácido pícrico, fuscina fenicada, azul de metileno,
violeta de genciana, etc.

Para practicar las perforaciones se necesitan pinchas o ponchadores, las


combinaciones numéricas obtenidas por este método, puede ser ilimitado.

Los pendientes o aretes se colocan en las orejas y se prefieren los tipo tornillo, en
ellos se insertan letras o números. Las bandas y abrazaderas se prefieren para aves,
son fabricadas en plástico.

Los collares y bandas para cuello se prefieren para perro y monos, deben ser
cómodos y seguros: las ranas necesitan un tipo especial de identificación, el cual se
lleva a cabo en cuentas de diversos colores y formas que se colocan mediante hilo
nylon (Cuadro 1).

Dentro de éste grupo de animales, los ratones y las ratas son los más utilizados en la
investigación y control de calidad biológica. Estas especies representan el 90% de
todos los mamíferos utilizados en investigación científica y el número utilizado de
estas dos especies es casi 14 veces mayor que todas las demás especies usadas en
investigación experimental, en nuestro espacio de trabajo los modelos más utilizados
son: Ratón Balb/C, Rata Long/Evans y Wistar, Conejo Nueva Zelanda y en menor
frecuencia el Cerdo York, el perro y gato domestico.

Las áreas en que se utiliza más la rata como sujeto experimental son: fisiología
genética, inmunología, microbiología, conducta y todos los aspectos relacionados con
enfermedades. Debido a la gran experiencia que se tiene con estos roedores, existen
bases de datos que contienen las características de cada una de las cepas y líneas
que existen con base en las necesidades o su uso como modelo para el estudio de
enfermedades humanas.

Nuestro cuerpo académico trabaja 3 líneas: 1.-Relación huésped-parasito de


Trichinella spiralis y de cavidad oral, 2.- Estudio del estado nutricional en modelo
experimental murino y humano y 3.- Educación Ambiental.
Las 2 primeras son básicamente en modelo experimentales siendo primordial la
participación de los compañeros Veterinarios en la reproducción, manejo y el
seguimiento del estado de salud de los modelos experimentales.

TÉCNICAS DE SUJECIÓN Y DE PROCEDIMIENTOS

La habilidad para sujetar animales de laboratorio no se adquiere


fácilmente. Puede tomar varias horas de práctica en solamente una
especie para convertirse en un profesional. Los siguientes puntos pueden
ayudar a conseguir este propósito:

• Buscar información acerca de las técnicas de sujeción de las especies de


interés en libros, filmes u otra documentación. Observar personal con
experiencia en el desarrollo del procedimiento.

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• Intentar vencer el miedo y la ansiedad, ya que es casi imposible


trabajar bajo estas condiciones. Si el sujetador no está tranquilo,
tampoco lo estará el animal.

• Nunca se intente llevar a cabo un procedimiento en un animal hasta que


éste se encuentre completamente sujetado y relajado.

La sujeción impropia de un animal puede causar heridas a éste o al que lo


sujeta. Los animales que han sido sujetados incorrectamente tienden a
tener más miedo del contacto humano. Así mismo, el sujetador que ha sido
herido por un animal por que no sabía cómo sujetar al animal propiamente,
probablemente será más temeroso del animal la próxima vez que lo intente
sujetar, lo que podría aumentar las posibilidades de ser mordido o
rasguñado de nuevo. Los animales sienten el miedo y son más difíciles de
sujetar cuando esto sucede. También, la sujeción impropia del animal
podría resultar en el escape del mismo, lo que aumentaría aún más las
oportunidades de sufrir heridas. Aunque a veces se piensa que el agarrar y
sujetar a los animales propiamente se puede aprender leyendo, el único
método satisfactorio es por observación de personas con experiencia y
practicar técnicas aprobadas para la especie en cuestión.

En nuestro equipo de trabajo el Dr. Sergio Saldivar Elías es quien


habilita a los compañeros estudiantes y docentes en el manejo de
los modelos experimentales, el tiene una experiencia en el bioterio
de la Unidad de 25 años.

El sujetador debe de acercarse al animal en una forma confiada y hablarle


pausadamente; el tratar de someter a los animales bruscamente solo trae
problemas. Una de las cosas que se deben de aprender cuando se sujeten
diferentes especies es el observar señales de peligro de ataque por el
animal. Nadie debe de correr el riesgo de ser herido, y se deberá buscar
ayuda tan pronto como se necesite. Los aparatos de sujeción deberán de
ser usados solo cuando sea necesario, ya que pueden causar daño físico al
animal. Debe de evitarse poner a los animales sobre superficies
resbaladizas por la posibilidad de que se atemorizan y se hieran a sí
mismos.

Aunque sea una tentación el usar fórceps o guantes de cuero cuando se


trate de sujetar un animal extraño para el sujetador, estos deberían de ser
usados solamente cuando haya peligro de ser mordido. Esto es porque el
sujetador debe ser muy sensitivo de la fuerza usada para sujetar un animal
y es difícil de sentir esta fuerza cuando se usan guantes o fórceps,
particularmente cuando se sujetan animales pequeños.

La mayoría de los animales pequeños se tranquilizan rápidamente


facilitándose la sujeción cuando ésta se hace de una manera firme sin
apretar demasiado. Esto les da una sensación de seguridad. Si un animal

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se siente inseguro, incómodo o atemorizado, es casi seguro que luchará


para librarse, lo que usualmente puede causar heridas al animal o al que lo
sujeta.

Manejo del modelo experimental murino.

Ratón.

Es acertadamente establecido que uno de los más infortunados problemas


en la sujeción de ratones es que ellos siempre tratan de morder al
sujetador. Después de varias sujeciones, el animal se convierte en un poco
más dócil, pero aún así uno no debe de confiarse. Algunas razas son más
temperamentales que otras.

Siendo el ratón una de las pocas especies de laboratorio que no se está


tranquilo cuando se le sujeta, mucha atención se debe de tomar con el
método, con una de las manos se debe de tomar al ratón por la cola,
aproximadamente a una pulgada del comienzo de la misma, colocándolo en
una superficie donde el ratón pueda asirse con sus cuatro patas, pero
siempre sujetándolo de la cola. La mejor superficie para esta función sería
la tapa de alambre de una caja de las jaulas. Con esta acción el animal se
quedará lo suficientemente tranquilo para que pueda sujetarse de la piel
suelta de la nuca con los dedos índice y pulgar de la otra mano, siendo esta
acción rápida y deliberada en un solo movimiento. Se debe de tener
cuidado de tomar suficiente de la piel del animal o éste podría voltearse y
morder. Una vez sujetado de la nuca, la cola del animal puede sujetarse
sobre la palma de la mano con los dedos restantes.

Este método es recomendable para inyecciones intraperitoneales (IP) y


para intubación oral.

El absoluto control de los movimientos de la rata durante un procedimiento


experimental, es importante no solo para el bienestar y seguridad del
animal, sino también para la seguridad del experimentador.

Un animal que se mueve repentina y bruscamente puede ocasionar la


inyección accidental del operador y producir daño al animal. En la sujeción
de animales de laboratorio deben tomarse en cuenta las siguientes
sugerencias:

METODOS DE INMOVILIZACIÓN.

Ratón:

Para su manejo hay que considerar que es un animal muy sensitivo,


nervioso y rápido. Para sacarlo de su jaula hay que introducir la mano y
tomarlo de la cola o colocar los dedos por debajo de su cuerpo para que
suba a la palma de la mano. Posteriormente para sujetarlo, se pone al
animal en una superficie rugosa para permitir que se estire con sus patas
superiores, se levanta de la cola y se toma la mayor cantidad de piel de la
nuca con los dedos índice y pulgar, sosteniendo la cola con el dedo

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meñique, apoyado en la palma de la mano, sujeto de esta manera se le


puede aplicar cualquier tipo de administración (Fotografía 1).

Fotografía 1.- Procedimiento de toma, sujeción y manejo de Ratón Balb/C.

Rata.

Es un animal dócil y menos nervioso el macho que la hembra, para


extraerlo de la jaula, se debe abrir previamente la rejilla, dejar que los
animales tomen confianza y posteriormente se realiza una sujeción de todo
el cuerpo, con los 5 dedos, en forma gentil (Fotografía 2).

Fotografía 2.- Rata Long/Evans. Técnica de agarre y sujeción.

Una de las técnicas más recomendadas para su sujeción consiste en apoyar


la nuca del animal en el borde interno del dedo índice, si se sujeta con la
mano derecha, el dedo pulgar pondrá el miembro anterior izquierdo del
animal frente a su hocico, el miembro anterior izquierdo quedará sujeto

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entre el dedo índice y medial, de manera que la cabeza quede inmóvil


(Fotografía.3).

La forma de sujeción en las fotografía 2 y 3 es útil para el sexado de


animales.

Fotografía 3. Técnica recomendada para la sujeción de la rata y sexado.

VIAS DE ADMINISTRACIÓN PARA RATA Y RATÓN:

Las vías más frecuentes para estos animales son: intramuscular (IM),
intraperitoneal (IP), subcutánea (SC), intravenosa (IV), y esofágica (PO).

Intramuscular: Se realiza en los miembros


posteriores, previa sujeción del ratón o rata,
introduciendo la aguja en forma paralela al
fémur. Las agujas de elección son la de calibre
25 o 27 (Fotografía 4).

Fotografía 4.- Aplicación intramuscular en ratón


Balb/C.

Intraperitoneal: Consiste en aplicar por vía


abdominal el medicamento o inóculo, para lo
cual la cavidad abdominal se divide
imaginariamente en cuatro secciones,
aplicándose la inyección en cualquiera de las
dos regiones posteriores, inclinando al animal
hacia el cráneo e introduciendo la aguja en
un ángulo de 35º aproximadamente para no
tocar las vísceras y causar una peritonitis
mortal (Fotografía.5).

Fotografía 5.- Aplicación Intraperitoneal en


rata Long/Evans.

Subcutánea: Se jala la piel del dorso o


abdomen del animal y se introduce la aguja
para realizar la administración
(Fotografía.6).

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Fotografía 6.- Vía de administración


subcutánea en ratón Balb/C.

Intravenosa: Se dilatan las venas de la


cola (son tres) con xilol o un poco de
agua caliente. Se localiza una de estas
venas y se introduce la aguja. Para esta
vía se puede uno auxiliar de
contenedores mecánicos, los cuales
permiten una buena sujeción y permiten
trabajar ampliamente con la cola del animal.

Esofágica: Se mantiene al animal en forma vertical, sujetando todo el


cuerpo, se pone la sonda en el hocico y con movimientos suaves y firmes
se introduce la sonda, viendo el movimiento de deglución por parte del
animal (Se puede comprobar el paso de la sonda al sentirlo con el dedo
índice de la mano que está sujetando al animal). Se le puede administrar
el volumen requerido para cada especie, posteriormente, se extrae la
sonda con un movimiento firme y suave (Fotografía 7).

Fotografía 7.- Vía de administración esofágica en ratón Balb/C.

CONEJO:
a) MANEJO Y TRANSPORTE:

La mejor sujeción se consigue tomándolo con


la mano derecha por la piel del dorso, a nivel
de la región lumbar y con la izquierda
inmovilizando las patas traseras, que en
ningún caso, deben quedar libres por la
facilidad de poder herir con ellas a las
personas que tratan de sujetarlos
(Fotografía.8).

Fotografía 8.- Sujeción adecuada del conejo Nueva


Zelanda.

No es conveniente sujetarlo por las orejas, ya


que están formadas principalmente de
cartílago, se pueden provocar fracturas y
dejar al animal inútil para experimentación.
Para transportar adecuadamente en distancias

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cortas al conejo, es conveniente sujetarlo con una


sola mano, abarcando la mayor cantidad de piel
inmediatamente atrás de la cabeza y con la otra
mano, sostener el peso del animal, otra forma de
transportarlo es apoyarlo en la parte del brazo con
la cabeza hacia el cuerpo de uno, de forma que se
imposibilite la visión del conejo (Fotografía. 9).

Fotografía 9.- Forma adecuada de sujeción del conejo


Nueva Zelanda para su traslado a distancias cortas.

b) VIAS DE ADMINISTRACION:

Vía intravenosa:

Una vez que se tiene preparada la jeringa para inyectar, se coloca al


conejo en una caja de contención se toma una de sus orejas y se
desinfecta el área de la vena marginal. Las venas marginales son dos una
en cada oreja, se encuentran en la orilla externa de la misma.

Vía intramuscular

Sujeción del conejo


inmovilizando su cuerpo
(fotografía 10)

Fotografía 10.- Aplicación


Intramuscular en conejo Nueva
Zelanda.

Vía intraperitoneal, semejante a


la fotografía 8 pero se retrae el cuerpo para bloquear su visión y este más
tranquilo, siempre hay que tener cuidado con sus extremidades
posteriores (fotografía 10).

Fotografía 10.-
Posición para
aplicación
intraperitoneal en
conejo Nueva
Zelanda.

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Los modelos que habitualmente trabajos en el laboratorio son el ratón


Balb/C y la Rata Long/Evans (Fotografía 11).

Fotografía 11.- A) Ratón Balb/C y Rata Long/Evans.

En el manejo de animales de laboratorio es indispensable la


experiencia y la habilidad para sujetarlos, el Médico Veterinario es
indispensable, gracias a su apoyo el trabajo de investigación se
facilita y en la docencia a los alumnos permite que estos tengan las
herramientas para un adecuado manejo de estos sin miedo y con
respeto.

Bibliografía.

1. Flor de María Fuentes Paredes, Rosa Amelia Mendoza Yanavilca,


Arturo Lorenzo Rosales Fernández, Rosario Alberto Cisneros
Tarmeño. 2008. Guía de manejo y cuidado de animales de
laboratorio: Ratón. Centro Nacional de Productos Biológico. Perú.
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Santos, Linares Quevedo, Páez Borda, Castillón Vela, Marcén Letosa,
Pascual Santos, Burgos Revilla. 2008. Modelos experimentales para
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