Sunteți pe pagina 1din 2

Electroforeza capilara este cea mai moderna dintre metode.

Dezvoltata in paralel cu
cea clasica, ea ofera avantajul automatizarii complete, fiind un intermediar intre
electroforeza clasica de zona pe diverse suporturi si cromatografia lichida.

Electroforeza capilara permite separarea moleculelor incarcate electric functie de


mobilitatea proprie intr-un tampon cu un pH dat si functie de fluxul electroosmotic.
Separarea are loc in capilare de siliciu, cu un diametru mai mic de 100 micrometri,
umplute cu un tampon format din diversi electroliti. Injectia probelor (diluate in prealabil
cu tampon) se face la anod prin aspiratie. Separarea se face prin aplicarea unei diferente
de potential la extremitatea capliarului. Densitometrarea fractiunilor are loc la catod, la
lungimi de unda adecvate tipului de amestec proteic de separat. La final, capliarele sunt
spalate cu solutie de spalare si apoi cu solutie tampon.

Electroforeza capilara este o alternativa viabila la electroforeza clasica, in special


datorita faptului ca cele mai frecvente interferente cunoscute pentru tehnicile
electroforetice (hemoliza, icterul si lactescenta serului, precum si artefactele legate de
punctul de aplicare a probelor si prezenta componentelor monoclonale de concentratie
scazuta) raman fara efect asupra electroforezei capilare. Separarea electroforetica a
proteinelor din fluidele hipoproteice (lichid cefalorahidian si urina) precum si
determinarea cantitativa a hemoglobinei glicozilate in sistem multicapilar constituie
perspective importante in dezvoltarea tehnicilor electroforetice in sistem Capillarys. Desi
putin accesibila in prezent, electroforeza capilara se impune ca o metoda de viitor, rapida
si mult mai sensibila decat electroforeza in gel de agaroza.

Avantajele electroforezei capilare:

• gradul mare de rezolutie, specificitate si sensibilitate.


• rapiditatea conferita de posibilitatea analizei simultane a 10 probe/ora (in cazul
imunotiparii) pana la 80 de probe/ora (in cazul proteinelor serice). In termeni de
timp vorbim despre 20 minute in electroforeza standard in gel de agaroza si de
120 de secunde in electroforeza capilara.
• trasabilitatea totala de la proba primara pana la rezultat, precum si a lotului de
reactivi.
• implementarea programului de control de calitate pe 3 nivele cu posibilitatea de
prelucrare statistica a rezultatelor (curba Levey-Jennings) si a programului de
transfer a rezultatelor pentru controlul inter laboratoare si a celui de acces la
aceste rezultate.
• posibilitatea conectarii la un scanner pentru importul si monitorizarea imaginilor
obtinute pentru imunofixarea (IF) sau a rezultatelor pentru proteine specifice.
• diversificarea parametrilor de investigat prin posibilitatea determinarii, cu o
rezolutie excelenta, a sialoformelor tranferinei si a hemoglobinelor normale(Hb F
si A) si patologice (Hb S, C, D, E, Bart) ale noului nascut.
• analiza directa a globulelor rosii nespalate, centrifugate sau decantate, hemoliza
fiind efectuata de catre aparat.
• eliminarea interferentelor uzuale: hemoliza, icterul si lactescenta serului, precum
si artefactele legate de punctul de aplicare a probelor si prezenta componentelor
monoclonale de concentratie scazuta.
• costul scazut per analiza.

Electroforeza capilara este o tehnica mai noua care combina mecanismele de separare ale electroforezei
cu aparatura si automatizarea cromatografiei. Exista numeroase variante de electroforeza capilara care
solutioneaza diversele probleme de separare. Acestea includ electroforeza zonala, electroforeza pe gel,
focalizare izoelectrica si izotacoforeza. Puterea extraordinara de separare, viteza analizelor si sensibilitatea
extrema (o singura molecula prin detectarea cu fluorescenta indusa cu laser) conduc la aplicarea intensiva a
electroforezei capilare de catre multe dintre cele mai bune laboratoare de cercetare analitica din lume.

Electroforeza capilara, fiind modalitatea cea mai potrivita si eficienta de a separa moleculele incarcate
mari si mici, ofera o larga varietate de aplicatii privind analiza lichidelor biologice umane.