Sunteți pe pagina 1din 42

Neurogeneza la adult in zona subventriculara / sistemul olfactiv prezinta 4 etape:

a. Proliferarea
b. Diferentierea
c. Specializarea
d. Migrarea
e. Integrarea sinaptica
2. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la densitatea postsinaptică (PSD) sunt adevarate:
a. este o structură submembranară specifică
b. este o structură membranară nespecifică
c. la acest nivel receptorii neurotransmiţătorilor sunt conectaţi la citoschelet şi la molecule de
semnalizare
d. reprezintă un complex multiproteic asociat receptorilor de la nivelul membranelor sinaptice din SNC
e. reprezintă un complex lipidic asociat receptorilor de la nivelul membranelor sinaptice din SNC
3. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memorie sunt adevarate:
a. Memoria este un proces prin care oamenii şi alte organisme codifică, înmagazinează si refolosesc
informatii
b. Memorarea poate fi intenţionată (voluntară) sau neintenţionată (involuntară)
c. Se pot diferenţia memorarea logică şi memorarea mecanică, dar specifică pentru om este
memorarea logică
d. Fenomenul invers memorării este uitarea, care se manifestă prin incapacitatea de a reproduce sau
de a recunoaşte
e. Niciun raspuns corect.
4. Principalele procese ale memoriei sunt:
a. Invatarea
b. Memorarea
c. Pastrarea
d. Actualizarea
e. Uitarea
5. Care din urmatoarele reprezinta tipuri de memorie
a. Memoria imaginativa
b. Memoria verbal-logica
c. Memoria afectiva
d. Niciuna de mai sus
e. Punctele a,b,c sunt corecte
6. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memoria centrala este adevarata:
a. este capacitatea ariilor corticale vizulale de a asambla şi a reţine modele spatiale pentru amintirea
ulterioara
b. este capacitatea creierului de a învăţa şi a reţine informaţii pentru executarea ulterioară a unor
acţiuni
c. este capacitatea creierului de a asambla, integra şi de a da sens unor informaţii senzoriale şi de a
le înmagazina pentru folosirea ulterioară la nevoie
d. este incapacitatea creierului de a inmagazina informatii la nivel central
e. toate raspunsurile sunt corecte
7. Care din urmatoarele afirmatii cu privire la invatare sunt false:
a. Învăţarea este un proces în care creierul acumulează informaţii din mediul extern
b. Învăţarea este un proces în care creierul acumulează informaţii din mediul intern
c. Învăţarea a fost împărţită în asociativă şi neasociativă
d. Învăţarea neasociativă a fost împărţită în continuare în deprindere şi sensibilizare.
e. Învăţarea asociativă - este împărţită în condiţionare clasică (Pavloviană) şi condiţionare operantă
(instrumentală)
1
8. Care din urmatoarele structuri reprezinta arii primare implicate in memorie
a. Cerebel
b. Hipocamp
c. Amigdala
d. Cortexul cerebral
e. Trunchi cerebral
9. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta roluri ale hipocampului in memorie:
a. Este implicat în formarea memoriei de scurtă durată
b. Realizează facilitarea legăturilor interneuronale
c. Participă la transferul datelor în memoria de lungă durată
d. Rol fundamental în formarea memoriei spaţiale
e. Toate afirmatiile sunt corecte.
10. Maladii neurodegenerative generate de prioni sunt reprezentate de:
a. maladia Creutzfeld-Jacob (CJD)
b. sindromul Gerstmann-Straussler-Scheinker (GSS)
c. insomnia fatală familială (FFI)
d. sindromul Alpers (la copii)
e. Niciuna de mai sus
11. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la maladiile prionice sunt adevarate:
a. Procesul care declanşează boala este reprezentat de conversia unei proteine normale (PrPc), într-
una mutantă, anormală (PrPSc)
b. natura acestor afecţiuni poate fi genetică
c. natura acestor afecţiuni poate fi infecţioasă
d. natura acestor afecţiuni poate fi sporadică
e. toate afirmatiile de mai sus sunt false
12. Care din urmatoarele enzime sunt deficitare in fenilcetonurie:
a. Cistationidaza
b. Histidaza
c. Fenilalanin-hidroxilaza
d. Tirozin transaminaza
e. Urat-oxidaza
13. Care din urmatoarele simptome apar in maladia Huntington:
a. modificări de personalitate
b. degradare cognitivă până la demenţă
c. distonie
d. dereglări ale mişcărilor care devin sporadice, incontrolabile
e. Toate simptomele de mai sus
14. Care din urmatoarele sindroame/maladii reprezinta cea mai importanta maladie demielinizanta:
a. maladia Pelizaeus-Merzabacher
b. sindromul Charcot-Marie-Tooth
c. sindromul Dejerine-Sottas
d. scleroza multipla
e. maladia Alzheimer
15. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la scleroza multipla (SM) sunt corecte:
a. Cel mai bun indicator al demielinizării active este prezenţa produsilor de degradare ai mielinei in
citoplasma macrofagelor
b. Cel mai bun indicator al demielinizării active este prezenţa celulelor care participa la demielinizare
c. Demielinizarea activă este prezentă pe o perioadă nelimitată din dezvoltarea unei leziuni în SM
d. Demielinizarea activă este prezentă numai pe o perioadă limitată din dezvoltarea unei leziuni în SM
e. Toate afirmatiile sunt incorecte

2
1. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la insertia co-translationala a proteinelor sunt adevarate:
a. Primii 20-30 AA din lantul polipeptidic ce se formeaza, alcatuiesc o secventa semnal
b. Secventa semnal este recunoscuta de catre o “particula de recunoastere a semnalului” (SRP)
c. Proteinele sintetizate co-translational sunt destinate exportului

2. Veziculele de transport si cele secretorii sunt invelite de o proteina denumita:


a. Clatrina

3. Proteinele motorii de transport de-a lungul axonului sunt reprezentate de:


a. Kinezina
b. Dineina

4. Eliberarea neurotransmitatorilor este influentata de influxul de:


a. Calciu

5. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la neurotransmitatori este adevarata:


a. Toate afirmatiile de mai sus sunt adevarate

6. Efectele acetilcolinei se realizeaza prin legarea Ach de urmatorii receptori:


a. Nicotinici
b. Muscarinici

7. Sistemul dopaminergic este reprezentat de:


a. sistemul dopaminergic nigrostriatal implicat in controlul motor
b. sistemul dopaminergic mezolimbic implicat in controlul emotiilor

8. Sinteza serotoninei (5-hidroxitriptamina) necesita 2 enzime:


a. Triptofan hidroxilaza
b. Decarboxilaza aminoacizilor aromatici

9. Neurotransmitatorii excitatori sunt reprezentati de:


a. Acidul glutamic
b. Acidul aspartic

10. Neurotransmitatorii inhibitori sunt reprezentati de:


a. Glicina
b. GABA

11. Neuropeptidele sunt reprezentate de:


a. Raspunsurile a, b, c sunt corecte

12. Oxidul nitric are unul din urmatoarele efecte asupra musculaturii:
a. Relaxarea musculaturii netede

13. Mecanoreceptorii transforma un stimul fizic in impuls electric si sunt reprezentati de:
a. corpusculii Meissner
b. corpusculii Ruffini
c. corpusculii Pacini
3
14. Care din afirmatiile urmatoare referitoare la perceptia gustativa sunt adevarate:
a. modalitatile de receptie gustative sunt distribuite inegal pe limba
b. gustul acru este perceput pe marginile limbii
c. gustul amar este perceput posterior
d. gustul dulce si sarat sunt situate in partea anterioara

15. Care din afirmatiile urmatoare referitoare la simtul gustativ sunt adevarate:
a. Simtul gustativ poate fi pierdut in tulburari circulatorii, malformatii, corpi straini, tumori, hematoame sau abcese
b. Senzitivitatea celulelor senzoriale este stimulata de estrogeni si scade la oamenii varstnici
c. Senzitivitatea celulelor senzoriale este scazuta in cadrul anomaliilor genetice
d. Senzitivitatea celulelor senzoriale este scazuta dupa administrarea de anumite medicamente sau toxine

16. Cum se numeste procesul prin care sunt inserate proteine direct in RE rugos:
a. Insertie co-translationala

17. Care din urmatoarele procese au loc la nivelul aparatului Golgi:


a. Glicozilare terminala

18. Clatrina este o proteina de invelis cu o structura caracteristica de:


a. 3 brate = trischelion

19. Care din urmatoarele reprezinta transporturi de-a lungul axonului:


a. Transport rapid de la corpul celular catre capatul sinaptic (anterograd)
b. Transport lent de la capatul sinaptic catre corpul celular (retrograd)

20. Microfilamentele de actina sunt reprezentate de:


a. Fibrele de actina (actina-F)
b. Actina globulara (actina-G)

21. Gazele cu rol de neurotransmitator sunt reprezentate de:


a. Monoxid de azot
b. Oxid nitric
c. Monoxid de carbon

22. Acetilcolina este un neurotransmitator cu rol:


a. Excitator in SNC
b. la terminatiile nervoase autonome, Ach poate fi fie excitatorie fie inhibitorie, in functie de organul implicat

23. Receptorii nicotinici sunt localizati:


a. In regiuni specifice ale creierului
b. In ganglionii autonomi
c. Fibrele musculare scheletice

24. Eliberarea acetilcolinei (Ach) din neuronii motori somatici si legarea de receptorii nicotinici:
a. stimuleaza contractia musculara

25. Receptorii muscarinici sunt localizati:


4
a. membrana plasmatica a celulelor musculare netede
b. membrana plasmatica a celulelor musculare cardiace
c. membrana plasmatica a celulelor anumitor glande

26. Care din urmatorii receptori reprezinta subtipuri de receptori glutamat:


a. Receptori NMDA
b. Receptori kainat
c. Receptori AMPA

27. Inhibarea activitatii receptorilor NMDA poate fi indusa de:


a. Toate raspunsurile sunt corecte

28. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la GABA sunt adevarate:


a. este un neurotransmitator inhibitor
b. hiperpolarizeaza membrana postsinaptica prin deschiderea canalelor de Cl-
c. este un derivat al acidului glutamic
d. GABA este cel mai raspandit neurotransmitator din creier (1/3 din neuroni folosesc GABA)

29. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta caracteristici ale potentialului de receptor:
a. se raspandeste electrotonic in zonele invecinate
b. raspunsul poate fi gradat
c. poate ramane localizat sau, cand amplitudinea sa depaseste pragul poate initia un potential de actiune
d. cu cat potentialul de receptor este mai mare decat nivelul prag, cu atat este mai mare frecventa de descarcare a
potentialelor de actiune.

30. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la sinaptozomi sunt adevarate:


a. toate afirmatiile de mai sus sunt corecte

31. Neurogeneza la adult in zona subventriculara / sistemul olfactiv prezinta 4 etape:


a. Proliferarea
b. Diferentierea
c. Migrarea
d. Integrarea sinaptica

32. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la densitatea postsinaptica (PSD) sunt adevarate:
a. este o structura submembranara specifica
b. la acest nivel receptorii neurotransmitatorilor sunt conectati la citoschelet si la molecule de semnalizare
c. reprezinta un complex multiproteic asociat receptorilor de la nivelul membranelor sinaptice din SNC

33. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memorie sunt adevarate:


a. Memoria este un proces prin care oamenii si alte organisme codifica, inmagazineaza si refolosesc informatii
b. Memorarea poate fi intentionata (voluntara) sau neintentionata (involuntara)
c. Fenomenul invers memorarii este uitarea, care se manifesta prin incapacitatea de a reproduce sau de a recunoaste

34. Principalele procese ale memoriei sunt:


a. Memorarea
b. Pastrarea
c. Actualizarea
5
35. Care din urmatoarele reprezinta tipuri de memorie
a. Punctele a,b,c sunt corecte

36. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memoria centrala este adevarata:
a. este capacitatea creierului de a asambla, integra si de a da sens unor informatii senzoriale si de a le inmagazina pentru
folosirea ulterioara la nevoie

37. Care din urmatoarele afirmatii cu privire la invatare sunt ADEVARATE (!!!):
a. Invatarea este un proces in care creierul acumuleaza informatii din mediul extern
b. Invatarea a fost impartita in asociativa si neasociativa
c. Invatarea neasociativa a fost impartita in continuare in deprindere si sensibilizare.
d. Invatarea asociativa - este impartita in conditionare clasica (Pavloviana) si conditionare operanta (instrumentala)

38. Care din urmatoarele structuri reprezinta arii primare implicate in memorie
a. Cerebel
b. Hipocamp
c. Amigdala
d. Cortexul cerebral

39. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta roluri ale hipocampului in memorie:
a. Toate afirmatiile sunt corecte.

40. Maladii neurodegenerative generate de prioni sunt reprezentate de:


a. maladia Creutzfeld-Jacob (CJD)
b. sindromul Gerstmann-Straussler-Scheinker (GSS)
c. insomnia fatala familiala (FFI)
d. sindromul Alpers (la copii)

41. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la maladiile prionice sunt adevarate:
a. Procesul care declanseaza boala este reprezentat de conversia unei proteine normale (PrPc), intr-una mutanta,
anormala (PrPSc)
b. natura acestor afectiuni poate fi genetica
c. natura acestor afectiuni poate fi infectioasa
d. natura acestor afectiuni poate fi sporadica

42. Care din urmatoarele enzime sunt deficitare in fenilcetonurie:


a. Fenilalanin-hidroxilaza

43. Care din urmatoarele simptome apar in maladia Huntington:


a. Toate simptomele de mai sus

44. Care din urmatoarele sindroame/maladii reprezinta cea mai importanta maladie demielinizanta:
a. scleroza multipla

45. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la scleroza multipla (SM) sunt corecte:
a. Cel mai bun indicator al demielinizarii active este prezenta produsilor de degradare ai mielinei in citoplasma
macrofagelor
6
b. Cel mai bun indicator al demielinizarii active este prezenta celulelor care participa la demielinizare
c. Demielinizarea activa este prezenta numai pe o perioada limitata din dezvoltarea unei leziuni in SM

TEST 1 NEUROBIOLOGIE

FACULTATEA: NUMELE ŞI PRENUMELE:


GRUPA: DATA:

1. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la insertia co- a. sistemul dopaminergic nigrostriatal implicat în
translationala a proteinelor sunt adevarate: controlul motor
a. Primii 20-30 AA din lanţul polipeptidic ce se b. sistemul dopaminergic nigrostriatal implicat în
formează, alcătuiesc o secvenţă semnal controlul emotiilor
b. Secvenţa semnal este recunoscută de către o c. sistemul dopaminergic mezolimbic implicat în
“particulă de recunoaştere a semnalului” (SRP) controlul motor
c. Proteinele sintetizate co-translational sunt destinate d. sistemul dopaminergic mezolimbic implicat în
exportului controlul emotiilor
d. Proteinele sintetizate co-translational sunt destinate e. Niciunul de mai sus
structurii nucleului si mitocondriei 8. Sinteza serotoninei (5-hidroxitriptamina) necesita 2 enzime:
e. Toate afirmatiile de mai sus sunt adevarate a. Triptofan hidroxilaza
2. Veziculele de transport şi cele secretorii sunt invelite de o b. Triptofan fosfataza
proteina denumita: c. Decarboxilaza aminoacizilor aromatici
a. Elastina d. Carboxilaza aminoacizilor aromatici
b. Lamina e. Niciuna de mai sus
c. Efedrina 9. Neurotransmitatorii excitatori sunt reprezentati de:
d. Clatrina a. Acidul glutamic
e. Ciclina b. Acidul acetic
3. Proteinele motorii de transport de-a lungul axonului sunt c. Acidul aspartic
reprezentate de: d. Acidul ribonucleic
a. Kinina e. Toate de mai sus
b. Kinezina 10. Neurotransmitatorii inhibitori sunt reprezentati de:
c. Nexina a. Glicina
d. Clatrina b. GABA
e. Dineina c. Histamina
4. Eliberarea neurotransmitatorilor este influentata de influxul d. Valina
de: e. Toate de mai sus
a. Calciu 11. Neuropeptidele sunt reprezentate de:
b. Magneziu a. Colecistokinina (CCK)
c. Fier b. Substanta P
d. Vitamina A c. Neuropeptid Y
e. Coenzima Q d. Niciunul de mai sus
5. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la e. Raspunsurile a, b, c sunt corecte
neurotransmitatori este adevarata: 12. Oxidul nitric are unul din urmatoarele efecte asupra
a. Molecula trebuie sintetizată în cadrul neuronului de musculaturii:
unde este eliberată a. Relaxarea musculaturii striate scheletale
b. Agenţii care blochează răspunsul postsinaptic la b. Relaxarea musculaturii striate cardiace
stimularea presinaptică ar trebuie de asemenea să c. Relaxarea musculaturii netede
blocheze răspunsul la transmiţători aplicaţi exogen d. Contractia musculaturii striate scheletale
c. Răspunsul postsinaptic la transmiţător trebuie să se e. Contractia musculaturii netede
termine rapid atunci cand este aplicat exogen 13. Cum se numeste procesul prin care sunt inserate proteine
d. Molecula exogena trebuie să se comporte identic cu direct in RE rugos:
transmiţătorul endogen în ceea ce priveşte a. Insertie pre-translationala
potenţialul farmacologic, inhibiţia şi inactivarea sa b. Insertie co-translationala
e. Toate afirmatiile de mai sus sunt adevarate c. Insertie post-translationala
6. Efectele acetilcolinei se realizeaza prin legarea Ach de d. Glicozilare initiala
urmatorii receptori: e. Glicozilare terminala
a. Adrenergici 14. Care din urmatoarele procese au loc la nivelul aparatului
b. Noradrenergici Golgi:
c. Nicotinici a. Insertie pre-translationala
d. Muscarinici b. Insertie co-translationala
e. Niciunul de mai sus c. Insertie post-translationala
7. Sistemul dopaminergic este reprezentat de: d. Glicozilare initiala
7
e. Glicozilare terminala a. Receptori NMDA
15. Clatrina este o proteina de invelis cu o structura b. Receptori kainat
caracteristica de: c. Receptori AMPA
a. 1 brat = monoschelion d. Receptori muscarinici
b. 2 brate = bischelion e. Receptori nicotinici
c. 3 brate = trischelion 24. Inhibarea activitatii receptorilor NMDA poate fi indusa de:
d. 4 brate = trischelion a. Creşterea concentraţiei extracelulare a ionilor de
e. “inel cu pecete” hidrogen datorită acumulării acidului lactic, Zn2+, şi
16. Care din urmatoarele reprezinta transporturi de-a lungul radicalilor liberi
axonului: b. Defosforilarea receptorului NMDA ca urmare a
a. Transport rapid de la corpul celular către capătul scăderii nivelului ATP
sinaptic (anterograd) c. Activarea calicineurinei de către Ca2+
b. Transport lent de la corpul celular către capătul d. Inhibarea directă a receptorului NMDA de către
sinaptic (retrograd) complexul Ca-calmodulină
c. Transport rapid de la capătul sinaptic către corpul e. Toate raspunsurile sunt corecte
celular (anterograd) 25. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la GABA sunt
d. Transport lent de la capătul sinaptic către corpul adevarate:
celular (retrograd) a. este un neurotransmiţător inhibitor
e. Transporturile de-a lungul axonului se realizeaza b. este un neurotransmiţător excitator
alternativ si la o viteza constanta c. hiperpolarizează membrana postsinaptică prin
17. Microfilamentele de actina sunt reprezentate de: deschiderea canalelor de Cl-
a. Fibrele de actina (actina-F) d. este un derivat al acidului glutamic
b. Fibrele de actina (actina-G) e. GABA este cel mai răspândit neurotransmiţător din
c. Actina globulara (actina-F) creier (1/3 din neuroni folosesc GABA)
d. Actina globulara (actina-G) 26. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta caracteristici ale
e. Niciun raspuns corect potentialului de receptor:
18. Gazele cu rol de neurotransmitator sunt reprezentate de: a. se răspândeşte electrotonic în zonele învecinate
a. Monoxid de azot b. răspunsul poate fi gradat
b. Oxid nitric c. poate rămâne localizat sau, când amplitudinea sa
c. Monoxid de carbon depăşeşte pragul poate iniţia un potenţial de acţiune
d. Dioxid de carbon d. cu cât potenţialul de receptor este mai mare decât
e. Heliu nivelul prag, cu atât este mai mare frecvenţa de
19. Acetilcolina este un neurotransmitator cu rol: descărcare a potenţialelor de acţiune.
a. Inhibitor in SNC e. Niciun raspuns corect
b. Excitator in SNC 27. In functie de numarul de prelungiri (procese) neuronale,
c. Neutru in SNC neuronii se clasifica in:
d. la terminaţiile nervoase autonome, Ach poate fi fie a. Neuroni pseduounipolari
excitatorie fie inhibitorie, în funcţie de organul b. Neuroni bipolari
implicat c. Neuroni multipolari
e. Niciun raspuns corect d. toate afirmatiile de mai sus sunt corecte
20. Receptorii nicotinici sunt localizati: e. niciun raspuns correct
a. In regiuni specifice ale creierului 28. Care din urmatoarele reprezinta celule gliale:
b. In ganglionii autonomi a. Astrocit
c. Fibrele musculare cardiace b. Oligodendrocit
d. Fibrele musculare netede c. Multidendrocit
e. Fibrele musculare scheletice d. Microglie
21. Eliberarea acetilcolinei (Ach) din neuronii motori somatici şi e. Celule ependimare
legarea de receptorii nicotinici: 29. Care din urmatoarele reprezinta functii ale astrocitelor:
a. stimuleaza relaxarea musculara a. Astrocitele atrag K+
b. inhiba relaxarea musculara b. Astrocitele atrag neurotransmitatori
c. stimuleaza contractia musculara c. Piciorul astrocitar preia glicogenul din sange
d. inhiba contractia musculara d. Astrocitele sunt necesare pentru formarea de
e. toate raspunsurile sunt corecte in functie de organ sinapse în SNC
22. Receptorii muscarinici sunt localizati: e. Astrocitele induc formarea barierei hemato-
a. membrana plasmatică a celulelor musculare encefalice
scheletale 30. Care din urmatoarele reprezinta tipuri de sinapse:
b. membrana plasmatică a celulelor musculare netede a. Axo-dendritice
c. membrana plasmatică a celulelor musculare b. Axo-somatice
cardiace c. Axo-axonale
d. membrana plasmatică a celulelor anumitor glande d. Dendro-dendritice
e. membrana plasmatică a celulelor pigmentare e. Perikario-axonale
23. Care din urmatorii receptori reprezinta subtipuri de receptori
glutamat:

8
Raspunsuri:
1. abc
2. d
3. be
4. a
5. e
6. cd
7. ad
8. ac
9. ac
10. ab
11. e
12. c
13. b
14. e
15. c
16. a d
17. a d
18. a b c
19. b d
20. a b e
21. c
22. b c d
23. a b c
24. e
25. a c d e
26. a b c d
27. d
28. a b d e
29. a b d e
30. a b c d

Neurogeneza la adult in zona subventriculara / sistemul olfactiv prezinta 4 etape:

f. Proliferarea
g. Diferentierea
h. Specializarea
i. Migrarea
j. Integrarea sinaptica

1
16. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la densitatea postsinaptică (PSD) sunt adevarate:
a. este o structură submembranară specifică
b. este o structură membranară nespecifică
c. la acest nivel receptorii neurotransmiţătorilor sunt conectaţi la citoschelet şi la molecule de
semnalizare
d. reprezintă un complex multiproteic asociat receptorilor de la nivelul membranelor sinaptice din SNC
e. reprezintă un complex lipidic asociat receptorilor de la nivelul membranelor sinaptice din SNC
17. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memorie sunt adevarate:
a. Memoria este un proces prin care oamenii şi alte organisme codifică, înmagazinează si refolosesc
informatii
b. Memorarea poate fi intenţionată (voluntară) sau neintenţionată (involuntară)
c. Se pot diferenţia memorarea logică şi memorarea mecanică, dar specifică pentru om este
memorarea logică
d. Fenomenul invers memorării este uitarea, care se manifestă prin incapacitatea de a reproduce sau
de a recunoaşte
e. Niciun raspuns corect.
18. Principalele procese ale memoriei sunt:
a. Invatarea
b. Memorarea
c. Pastrarea
d. Actualizarea
e. Uitarea
19. Care din urmatoarele reprezinta tipuri de memorie
a. Memoria imaginativa
b. Memoria verbal-logica
c. Memoria afectiva
d. Niciuna de mai sus
e. Punctele a,b,c sunt corecte
20. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memoria centrala este adevarata:
a. este capacitatea ariilor corticale vizulale de a asambla şi a reţine modele spatiale pentru amintirea
ulterioara
b. este capacitatea creierului de a învăţa şi a reţine informaţii pentru executarea ulterioară a unor
acţiuni
c. este capacitatea creierului de a asambla, integra şi de a da sens unor informaţii senzoriale şi de a
le înmagazina pentru folosirea ulterioară la nevoie
d. este incapacitatea creierului de a inmagazina informatii la nivel central
e. toate raspunsurile sunt corecte
21. Care din urmatoarele afirmatii cu privire la invatare sunt false:
a. Învăţarea este un proces în care creierul acumulează informaţii din mediul extern
b. Învăţarea este un proces în care creierul acumulează informaţii din mediul intern
c. Învăţarea a fost împărţită în asociativă şi neasociativă
d. Învăţarea neasociativă a fost împărţită în continuare în deprindere şi sensibilizare.
e. Învăţarea asociativă - este împărţită în condiţionare clasică (Pavloviană) şi condiţionare operantă
(instrumentală)
22. Care din urmatoarele structuri reprezinta arii primare implicate in memorie
a. Cerebel
b. Hipocamp
c. Amigdala
d. Cortexul cerebral
e. Trunchi cerebral
23. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta roluri ale hipocampului in memorie:
2
a. Este implicat în formarea memoriei de scurtă durată
b. Realizează facilitarea legăturilor interneuronale
c. Participă la transferul datelor în memoria de lungă durată
d. Rol fundamental în formarea memoriei spaţiale
e. Toate afirmatiile sunt corecte.
24. Maladii neurodegenerative generate de prioni sunt reprezentate de:
a. maladia Creutzfeld-Jacob (CJD)
b. sindromul Gerstmann-Straussler-Scheinker (GSS)
c. insomnia fatală familială (FFI)
d. sindromul Alpers (la copii)
e. Niciuna de mai sus
25. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la maladiile prionice sunt adevarate:
a. Procesul care declanşează boala este reprezentat de conversia unei proteine normale (PrPc), într-
una mutantă, anormală (PrPSc)
b. natura acestor afecţiuni poate fi genetică
c. natura acestor afecţiuni poate fi infecţioasă
d. natura acestor afecţiuni poate fi sporadică
e. toate afirmatiile de mai sus sunt false
26. Care din urmatoarele enzime sunt deficitare in fenilcetonurie:
a. Cistationidaza
b. Histidaza
c. Fenilalanin-hidroxilaza
d. Tirozin transaminaza
e. Urat-oxidaza
27. Care din urmatoarele simptome apar in maladia Huntington:
a. modificări de personalitate
b. degradare cognitivă până la demenţă
c. distonie
d. dereglări ale mişcărilor care devin sporadice, incontrolabile
e. Toate simptomele de mai sus
28. Care din urmatoarele sindroame/maladii reprezinta cea mai importanta maladie demielinizanta:
a. maladia Pelizaeus-Merzabacher
b. sindromul Charcot-Marie-Tooth
c. sindromul Dejerine-Sottas
d. scleroza multipla
e. maladia Alzheimer
29. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la scleroza multipla (SM) sunt corecte:
a. Cel mai bun indicator al demielinizării active este prezenţa produsilor de degradare ai mielinei in
citoplasma macrofagelor
b. Cel mai bun indicator al demielinizării active este prezenţa celulelor care participa la demielinizare
c. Demielinizarea activă este prezentă pe o perioadă nelimitată din dezvoltarea unei leziuni în SM
d. Demielinizarea activă este prezentă numai pe o perioadă limitată din dezvoltarea unei leziuni în SM
e. Toate afirmatiile sunt incorecte

1. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la insertia co-translationala a proteinelor sunt adevarate:
a. Primii 20-30 AA din lantul polipeptidic ce se formeaza, alcatuiesc o secventa semnal
b. Secventa semnal este recunoscuta de catre o “particula de recunoastere a semnalului” (SRP)
c. Proteinele sintetizate co-translational sunt destinate exportului

2. Veziculele de transport si cele secretorii sunt invelite de o proteina denumita:


3
a. Clatrina

3. Proteinele motorii de transport de-a lungul axonului sunt reprezentate de:


a. Kinezina
b. Dineina

4. Eliberarea neurotransmitatorilor este influentata de influxul de:


a. Calciu

5. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la neurotransmitatori este adevarata:


a. Toate afirmatiile de mai sus sunt adevarate

6. Efectele acetilcolinei se realizeaza prin legarea Ach de urmatorii receptori:


a. Nicotinici
b. Muscarinici

7. Sistemul dopaminergic este reprezentat de:


a. sistemul dopaminergic nigrostriatal implicat in controlul motor
b. sistemul dopaminergic mezolimbic implicat in controlul emotiilor

8. Sinteza serotoninei (5-hidroxitriptamina) necesita 2 enzime:


a. Triptofan hidroxilaza
b. Decarboxilaza aminoacizilor aromatici

9. Neurotransmitatorii excitatori sunt reprezentati de:


a. Acidul glutamic
b. Acidul aspartic

10. Neurotransmitatorii inhibitori sunt reprezentati de:


a. Glicina
b. GABA

11. Neuropeptidele sunt reprezentate de:


a. Raspunsurile a, b, c sunt corecte

12. Oxidul nitric are unul din urmatoarele efecte asupra musculaturii:
a. Relaxarea musculaturii netede

13. Mecanoreceptorii transforma un stimul fizic in impuls electric si sunt reprezentati de:
a. corpusculii Meissner
b. corpusculii Ruffini
c. corpusculii Pacini

14. Care din afirmatiile urmatoare referitoare la perceptia gustativa sunt adevarate:
a. modalitatile de receptie gustative sunt distribuite inegal pe limba
b. gustul acru este perceput pe marginile limbii
c. gustul amar este perceput posterior
d. gustul dulce si sarat sunt situate in partea anterioara
4
15. Care din afirmatiile urmatoare referitoare la simtul gustativ sunt adevarate:
a. Simtul gustativ poate fi pierdut in tulburari circulatorii, malformatii, corpi straini, tumori, hematoame sau abcese
b. Senzitivitatea celulelor senzoriale este stimulata de estrogeni si scade la oamenii varstnici
c. Senzitivitatea celulelor senzoriale este scazuta in cadrul anomaliilor genetice
d. Senzitivitatea celulelor senzoriale este scazuta dupa administrarea de anumite medicamente sau toxine

16. Cum se numeste procesul prin care sunt inserate proteine direct in RE rugos:
a. Insertie co-translationala

17. Care din urmatoarele procese au loc la nivelul aparatului Golgi:


a. Glicozilare terminala

18. Clatrina este o proteina de invelis cu o structura caracteristica de:


a. 3 brate = trischelion

19. Care din urmatoarele reprezinta transporturi de-a lungul axonului:


a. Transport rapid de la corpul celular catre capatul sinaptic (anterograd)
b. Transport lent de la capatul sinaptic catre corpul celular (retrograd)

20. Microfilamentele de actina sunt reprezentate de:


a. Fibrele de actina (actina-F)
b. Actina globulara (actina-G)

21. Gazele cu rol de neurotransmitator sunt reprezentate de:


a. Monoxid de azot
b. Oxid nitric
c. Monoxid de carbon

22. Acetilcolina este un neurotransmitator cu rol:


a. Excitator in SNC
b. la terminatiile nervoase autonome, Ach poate fi fie excitatorie fie inhibitorie, in functie de organul implicat

23. Receptorii nicotinici sunt localizati:


a. In regiuni specifice ale creierului
b. In ganglionii autonomi
c. Fibrele musculare scheletice

24. Eliberarea acetilcolinei (Ach) din neuronii motori somatici si legarea de receptorii nicotinici:
a. stimuleaza contractia musculara

25. Receptorii muscarinici sunt localizati:


a. membrana plasmatica a celulelor musculare netede
b. membrana plasmatica a celulelor musculare cardiace
c. membrana plasmatica a celulelor anumitor glande

26. Care din urmatorii receptori reprezinta subtipuri de receptori glutamat:


a. Receptori NMDA
5
b. Receptori kainat
c. Receptori AMPA

27. Inhibarea activitatii receptorilor NMDA poate fi indusa de:


a. Toate raspunsurile sunt corecte

28. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la GABA sunt adevarate:


a. este un neurotransmitator inhibitor
b. hiperpolarizeaza membrana postsinaptica prin deschiderea canalelor de Cl-
c. este un derivat al acidului glutamic
d. GABA este cel mai raspandit neurotransmitator din creier (1/3 din neuroni folosesc GABA)

29. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta caracteristici ale potentialului de receptor:
a. se raspandeste electrotonic in zonele invecinate
b. raspunsul poate fi gradat
c. poate ramane localizat sau, cand amplitudinea sa depaseste pragul poate initia un potential de actiune
d. cu cat potentialul de receptor este mai mare decat nivelul prag, cu atat este mai mare frecventa de descarcare a
potentialelor de actiune.

30. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la sinaptozomi sunt adevarate:


a. toate afirmatiile de mai sus sunt corecte

31. Neurogeneza la adult in zona subventriculara / sistemul olfactiv prezinta 4 etape:


a. Proliferarea
b. Diferentierea
c. Migrarea
d. Integrarea sinaptica

32. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la densitatea postsinaptica (PSD) sunt adevarate:
a. este o structura submembranara specifica
b. la acest nivel receptorii neurotransmitatorilor sunt conectati la citoschelet si la molecule de semnalizare
c. reprezinta un complex multiproteic asociat receptorilor de la nivelul membranelor sinaptice din SNC

33. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memorie sunt adevarate:


a. Memoria este un proces prin care oamenii si alte organisme codifica, inmagazineaza si refolosesc informatii
b. Memorarea poate fi intentionata (voluntara) sau neintentionata (involuntara)
c. Fenomenul invers memorarii este uitarea, care se manifesta prin incapacitatea de a reproduce sau de a recunoaste

34. Principalele procese ale memoriei sunt:


a. Memorarea
b. Pastrarea
c. Actualizarea

35. Care din urmatoarele reprezinta tipuri de memorie


a. Punctele a,b,c sunt corecte

36. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memoria centrala este adevarata:
a. este capacitatea creierului de a asambla, integra si de a da sens unor informatii senzoriale si de a le inmagazina pentru
6
folosirea ulterioara la nevoie

37. Care din urmatoarele afirmatii cu privire la invatare sunt ADEVARATE (!!!):
a. Invatarea este un proces in care creierul acumuleaza informatii din mediul extern
b. Invatarea a fost impartita in asociativa si neasociativa
c. Invatarea neasociativa a fost impartita in continuare in deprindere si sensibilizare.
d. Invatarea asociativa - este impartita in conditionare clasica (Pavloviana) si conditionare operanta (instrumentala)

38. Care din urmatoarele structuri reprezinta arii primare implicate in memorie
a. Cerebel
b. Hipocamp
c. Amigdala
d. Cortexul cerebral

39. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta roluri ale hipocampului in memorie:
a. Toate afirmatiile sunt corecte.

40. Maladii neurodegenerative generate de prioni sunt reprezentate de:


a. maladia Creutzfeld-Jacob (CJD)
b. sindromul Gerstmann-Straussler-Scheinker (GSS)
c. insomnia fatala familiala (FFI)
d. sindromul Alpers (la copii)

41. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la maladiile prionice sunt adevarate:
a. Procesul care declanseaza boala este reprezentat de conversia unei proteine normale (PrPc), intr-una mutanta,
anormala (PrPSc)
b. natura acestor afectiuni poate fi genetica
c. natura acestor afectiuni poate fi infectioasa
d. natura acestor afectiuni poate fi sporadica

42. Care din urmatoarele enzime sunt deficitare in fenilcetonurie:


a. Fenilalanin-hidroxilaza

43. Care din urmatoarele simptome apar in maladia Huntington:


a. Toate simptomele de mai sus

44. Care din urmatoarele sindroame/maladii reprezinta cea mai importanta maladie demielinizanta:
a. scleroza multipla

45. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la scleroza multipla (SM) sunt corecte:
a. Cel mai bun indicator al demielinizarii active este prezenta produsilor de degradare ai mielinei in citoplasma
macrofagelor
b. Cel mai bun indicator al demielinizarii active este prezenta celulelor care participa la demielinizare
c. Demielinizarea activa este prezenta numai pe o perioada limitata din dezvoltarea unei leziuni in SM

TEST 1 NEUROBIOLOGIE

7
FACULTATEA: NUMELE ŞI PRENUMELE:
GRUPA: DATA:

1. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la insertia co- e. Niciunul de mai sus
translationala a proteinelor sunt adevarate: 8. Sinteza serotoninei (5-hidroxitriptamina) necesita 2 enzime:
a. Primii 20-30 AA din lanţul polipeptidic ce se a. Triptofan hidroxilaza
formează, alcătuiesc o secvenţă semnal b. Triptofan fosfataza
b. Secvenţa semnal este recunoscută de către o c. Decarboxilaza aminoacizilor aromatici
“particulă de recunoaştere a semnalului” (SRP) d. Carboxilaza aminoacizilor aromatici
c. Proteinele sintetizate co-translational sunt destinate e. Niciuna de mai sus
exportului 9. Neurotransmitatorii excitatori sunt reprezentati de:
d. Proteinele sintetizate co-translational sunt destinate a. Acidul glutamic
structurii nucleului si mitocondriei b. Acidul acetic
e. Toate afirmatiile de mai sus sunt adevarate c. Acidul aspartic
2. Veziculele de transport şi cele secretorii sunt invelite de o d. Acidul ribonucleic
proteina denumita: e. Toate de mai sus
a. Elastina 10. Neurotransmitatorii inhibitori sunt reprezentati de:
b. Lamina a. Glicina
c. Efedrina b. GABA
d. Clatrina c. Histamina
e. Ciclina d. Valina
3. Proteinele motorii de transport de-a lungul axonului sunt e. Toate de mai sus
reprezentate de: 11. Neuropeptidele sunt reprezentate de:
a. Kinina a. Colecistokinina (CCK)
b. Kinezina b. Substanta P
c. Nexina c. Neuropeptid Y
d. Clatrina d. Niciunul de mai sus
e. Dineina e. Raspunsurile a, b, c sunt corecte
4. Eliberarea neurotransmitatorilor este influentata de influxul 12. Oxidul nitric are unul din urmatoarele efecte asupra
de: musculaturii:
a. Calciu a. Relaxarea musculaturii striate scheletale
b. Magneziu b. Relaxarea musculaturii striate cardiace
c. Fier c. Relaxarea musculaturii netede
d. Vitamina A d. Contractia musculaturii striate scheletale
e. Coenzima Q e. Contractia musculaturii netede
5. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la 13. Cum se numeste procesul prin care sunt inserate proteine
neurotransmitatori este adevarata: direct in RE rugos:
a. Molecula trebuie sintetizată în cadrul neuronului de a. Insertie pre-translationala
unde este eliberată b. Insertie co-translationala
b. Agenţii care blochează răspunsul postsinaptic la c. Insertie post-translationala
stimularea presinaptică ar trebuie de asemenea să d. Glicozilare initiala
blocheze răspunsul la transmiţători aplicaţi exogen e. Glicozilare terminala
c. Răspunsul postsinaptic la transmiţător trebuie să se 14. Care din urmatoarele procese au loc la nivelul aparatului
termine rapid atunci cand este aplicat exogen Golgi:
d. Molecula exogena trebuie să se comporte identic cu a. Insertie pre-translationala
transmiţătorul endogen în ceea ce priveşte b. Insertie co-translationala
potenţialul farmacologic, inhibiţia şi inactivarea sa c. Insertie post-translationala
e. Toate afirmatiile de mai sus sunt adevarate d. Glicozilare initiala
6. Efectele acetilcolinei se realizeaza prin legarea Ach de e. Glicozilare terminala
urmatorii receptori: 15. Clatrina este o proteina de invelis cu o structura
a. Adrenergici caracteristica de:
b. Noradrenergici a. 1 brat = monoschelion
c. Nicotinici b. 2 brate = bischelion
d. Muscarinici c. 3 brate = trischelion
e. Niciunul de mai sus d. 4 brate = trischelion
7. Sistemul dopaminergic este reprezentat de: e. “inel cu pecete”
a. sistemul dopaminergic nigrostriatal implicat în 16. Care din urmatoarele reprezinta transporturi de-a lungul
controlul motor axonului:
b. sistemul dopaminergic nigrostriatal implicat în a. Transport rapid de la corpul celular către capătul
controlul emotiilor sinaptic (anterograd)
c. sistemul dopaminergic mezolimbic implicat în b. Transport lent de la corpul celular către capătul
controlul motor sinaptic (retrograd)
d. sistemul dopaminergic mezolimbic implicat în c. Transport rapid de la capătul sinaptic către corpul
controlul emotiilor celular (anterograd)
8
d. Transport lent de la capătul sinaptic către corpul a. Creşterea concentraţiei extracelulare a ionilor de
celular (retrograd) hidrogen datorită acumulării acidului lactic, Zn2+, şi
e. Transporturile de-a lungul axonului se realizeaza radicalilor liberi
alternativ si la o viteza constanta b. Defosforilarea receptorului NMDA ca urmare a
17. Microfilamentele de actina sunt reprezentate de: scăderii nivelului ATP
a. Fibrele de actina (actina-F) c. Activarea calicineurinei de către Ca2+
b. Fibrele de actina (actina-G) d. Inhibarea directă a receptorului NMDA de către
c. Actina globulara (actina-F) complexul Ca-calmodulină
d. Actina globulara (actina-G) e. Toate raspunsurile sunt corecte
e. Niciun raspuns corect 25. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la GABA sunt
18. Gazele cu rol de neurotransmitator sunt reprezentate de: adevarate:
a. Monoxid de azot a. este un neurotransmiţător inhibitor
b. Oxid nitric b. este un neurotransmiţător excitator
c. Monoxid de carbon c. hiperpolarizează membrana postsinaptică prin
d. Dioxid de carbon deschiderea canalelor de Cl-
e. Heliu d. este un derivat al acidului glutamic
19. Acetilcolina este un neurotransmitator cu rol: e. GABA este cel mai răspândit neurotransmiţător din
a. Inhibitor in SNC creier (1/3 din neuroni folosesc GABA)
b. Excitator in SNC 26. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta caracteristici ale
c. Neutru in SNC potentialului de receptor:
d. la terminaţiile nervoase autonome, Ach poate fi fie a. se răspândeşte electrotonic în zonele învecinate
excitatorie fie inhibitorie, în funcţie de organul b. răspunsul poate fi gradat
implicat c. poate rămâne localizat sau, când amplitudinea sa
e. Niciun raspuns corect depăşeşte pragul poate iniţia un potenţial de acţiune
20. Receptorii nicotinici sunt localizati: d. cu cât potenţialul de receptor este mai mare decât
a. In regiuni specifice ale creierului nivelul prag, cu atât este mai mare frecvenţa de
b. In ganglionii autonomi descărcare a potenţialelor de acţiune.
c. Fibrele musculare cardiace e. Niciun raspuns corect
d. Fibrele musculare netede 27. In functie de numarul de prelungiri (procese) neuronale,
e. Fibrele musculare scheletice neuronii se clasifica in:
21. Eliberarea acetilcolinei (Ach) din neuronii motori somatici şi a. Neuroni pseduounipolari
legarea de receptorii nicotinici: b. Neuroni bipolari
a. stimuleaza relaxarea musculara c. Neuroni multipolari
b. inhiba relaxarea musculara d. toate afirmatiile de mai sus sunt corecte
c. stimuleaza contractia musculara e. niciun raspuns correct
d. inhiba contractia musculara 28. Care din urmatoarele reprezinta celule gliale:
e. toate raspunsurile sunt corecte in functie de organ a. Astrocit
22. Receptorii muscarinici sunt localizati: b. Oligodendrocit
a. membrana plasmatică a celulelor musculare c. Multidendrocit
scheletale d. Microglie
b. membrana plasmatică a celulelor musculare netede e. Celule ependimare
c. membrana plasmatică a celulelor musculare 29. Care din urmatoarele reprezinta functii ale astrocitelor:
cardiace a. Astrocitele atrag K+
d. membrana plasmatică a celulelor anumitor glande b. Astrocitele atrag neurotransmitatori
e. membrana plasmatică a celulelor pigmentare c. Piciorul astrocitar preia glicogenul din sange
23. Care din urmatorii receptori reprezinta subtipuri de receptori d. Astrocitele sunt necesare pentru formarea de
glutamat: sinapse în SNC
a. Receptori NMDA e. Astrocitele induc formarea barierei hemato-
b. Receptori kainat encefalice
c. Receptori AMPA 30. Care din urmatoarele reprezinta tipuri de sinapse:
d. Receptori muscarinici a. Axo-dendritice
e. Receptori nicotinici b. Axo-somatice
24. Inhibarea activitatii receptorilor NMDA poate fi indusa de: c. Axo-axonale
d. Dendro-dendritice
e. Perikario-axonl

TEST 2 NEUROBIOLOGIE
30. Neurogeneza la adult in zona subventriculara / sistemul olfactiv 31. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la densitatea postsinaptică
prezinta 4 etape: (PSD) sunt adevarate:
a. Proliferarea a. este o structură submembranară specifică
b. Diferentierea b. este o structură membranară nespecifică
c. Specializarea c. la acest nivel receptorii neurotransmiţătorilor sunt
d. Migrarea conectaţi la citoschelet şi la molecule de semnalizare
e. Integrarea sinaptica
9
d. reprezintă un complex multiproteic asociat receptorilor de 40. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la maladiile prionice sunt
la nivelul membranelor sinaptice din SNC adevarate:
e. reprezintă un complex lipidic asociat receptorilor de la a. Procesul care declanşează boala este reprezentat de
nivelul membranelor sinaptice din SNC conversia unei proteine normale (PrPc), într-una mutantă,
32. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memorie sunt adevarate: anormală (PrPSc)
a. Memoria este un proces prin care oamenii şi alte b. natura acestor afecţiuni poate fi genetică
organisme codifică, înmagazinează si refolosesc informatii c. natura acestor afecţiuni poate fi infecţioasă
b. Memorarea poate fi intenţionată (voluntară) sau d. natura acestor afecţiuni poate fi sporadică
neintenţionată (involuntară) e. toate afirmatiile de mai sus sunt false
c. Se pot diferenţia memorarea logică şi memorarea 41. Care din urmatoarele enzime sunt deficitare in fenilcetonurie:
mecanică, dar specifică pentru om este memorarea logică a. Cistationidaza
d. Fenomenul invers memorării este uitarea, care se b. Histidaza
manifestă prin incapacitatea de a reproduce sau de a c. Fenilalanin-hidroxilaza
recunoaşte d. Tirozin transaminaza
e. Niciun raspuns corect. e. Urat-oxidaza
33. Principalele procese ale memoriei sunt: 42. Care din urmatoarele simptome apar in maladia Huntington:
a. Invatarea a. modificări de personalitate
b. Memorarea b. degradare cognitivă până la demenţă
c. Pastrarea c. distonie
d. Actualizarea d. dereglări ale mişcărilor care devin sporadice,
e. Uitarea incontrolabile
34. Care din urmatoarele reprezinta tipuri de memorie e. Toate simptomele de mai sus
a. Memoria imaginativa 43. Care din urmatoarele sindroame/maladii reprezinta cea mai
b. Memoria verbal-logica importanta maladie demielinizanta:
c. Memoria afectiva a. maladia Pelizaeus-Merzabacher
d. Niciuna de mai sus b. sindromul Charcot-Marie-Tooth
e. Punctele a,b,c sunt corecte c. sindromul Dejerine-Sottas
35. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memoria centrala este d. scleroza multipla
adevarata: e. maladia Alzheimer
a. este capacitatea ariilor corticale vizulale de a asambla şi a 44. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la scleroza multipla (SM)
reţine modele spatiale pentru amintirea ulterioara sunt corecte:
b. este capacitatea creierului de a învăţa şi a reţine informaţii a. Cel mai bun indicator al demielinizării active este prezenţa
pentru executarea ulterioară a unor acţiuni produsilor de degradare ai mielinei in citoplasma
c. este capacitatea creierului de a asambla, integra şi de a macrofagelor
da sens unor informaţii senzoriale şi de a le înmagazina b. Cel mai bun indicator al demielinizării active este prezenţa
pentru folosirea ulterioară la nevoie celulelor care participa la demielinizare
d. este incapacitatea creierului de a inmagazina informatii la c. Demielinizarea activă este prezentă pe o perioadă
nivel central nelimitată din dezvoltarea unei leziuni în SM
e. toate raspunsurile sunt corecte d. Demielinizarea activă este prezentă numai pe o perioadă
36. Care din urmatoarele afirmatii cu privire la invatare sunt false: limitată din dezvoltarea unei leziuni în SM
a. Învăţarea este un proces în care creierul acumulează e. Toate afirmatiile sunt incorecte
informaţii din mediul extern
b. Învăţarea este un proces în care creierul acumulează
informaţii din mediul intern
c. Învăţarea a fost împărţită în asociativă şi neasociativă 1. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la insertia co-
d. Învăţarea neasociativă a fost împărţită în continuare în
deprindere şi sensibilizare. translationala a proteinelor sunt adevarate:
e. Învăţarea asociativă - este împărţită în condiţionare clasică a. Primii 20-30 AA din lantul polipeptidic ce se formeaza,
(Pavloviană) şi condiţionare operantă (instrumentală)
37. Care din urmatoarele structuri reprezinta arii primare implicate in alcatuiesc o secventa semnal
memorie b. Secventa semnal este recunoscuta de catre o “particula
a. Cerebel
b. Hipocamp
de recunoastere a semnalului” (SRP)
c. Amigdala c. Proteinele sintetizate co-translational sunt destinate
d. Cortexul cerebral
e. Trunchi cerebral
exportului
38. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta roluri ale hipocampului in
memorie:
2. Veziculele de transport si cele secretorii sunt invelite de
a. Este implicat în formarea memoriei de scurtă durată
b. Realizează facilitarea legăturilor interneuronale o proteina denumita:
c. Participă la transferul datelor în memoria de lungă durată a. Clatrina
d. Rol fundamental în formarea memoriei spaţiale
e. Toate afirmatiile sunt corecte.
39. Maladii neurodegenerative generate de prioni sunt reprezentate de: 3. Proteinele motorii de transport de-a lungul axonului
a. maladia Creutzfeld-Jacob (CJD)
b. sindromul Gerstmann-Straussler-Scheinker (GSS) sunt reprezentate de:
c. insomnia fatală familială (FFI) a. Kinezina
d. sindromul Alpers (la copii)
e. Niciuna de mai sus b. Dineina

10
4. Eliberarea neurotransmitatorilor este influentata de pe limba
influxul de: b. gustul acru este perceput pe marginile limbii
a. Calciu c. gustul amar este perceput posterior
d. gustul dulce si sarat sunt situate in partea anterioara
5. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la
neurotransmitatori este adevarata: 15. Care din afirmatiile urmatoare referitoare la simtul
a. Toate afirmatiile de mai sus sunt adevarate gustativ sunt adevarate:
a. Simtul gustativ poate fi pierdut in tulburari circulatorii,
6. Efectele acetilcolinei se realizeaza prin legarea Ach de malformatii, corpi straini, tumori, hematoame sau abcese
urmatorii receptori: b. Senzitivitatea celulelor senzoriale este stimulata de
a. Nicotinici estrogeni si scade la oamenii varstnici
b. Muscarinici c. Senzitivitatea celulelor senzoriale este scazuta in cadrul
anomaliilor genetice
7. Sistemul dopaminergic este reprezentat de: d. Senzitivitatea celulelor senzoriale este scazuta dupa
a. sistemul dopaminergic nigrostriatal implicat in controlul administrarea de anumite medicamente sau toxine
motor
b. sistemul dopaminergic mezolimbic implicat in controlul 16. Cum se numeste procesul prin care sunt inserate
emotiilor proteine direct in RE rugos:
a. Insertie co-translationala
8. Sinteza serotoninei (5-hidroxitriptamina) necesita 2
enzime: 17. Care din urmatoarele procese au loc la nivelul
a. Triptofan hidroxilaza aparatului Golgi:
b. Decarboxilaza aminoacizilor aromatici a. Glicozilare terminala

9. Neurotransmitatorii excitatori sunt reprezentati de: 18. Clatrina este o proteina de invelis cu o structura
a. Acidul glutamic caracteristica de:
b. Acidul aspartic a. 3 brate = trischelion

10. Neurotransmitatorii inhibitori sunt reprezentati de: 19. Care din urmatoarele reprezinta transporturi de-a
a. Glicina lungul axonului:
b. GABA a. Transport rapid de la corpul celular catre capatul
sinaptic (anterograd)
11. Neuropeptidele sunt reprezentate de: b. Transport lent de la capatul sinaptic catre corpul celular
a. Raspunsurile a, b, c sunt corecte (retrograd)

12. Oxidul nitric are unul din urmatoarele efecte asupra 20. Microfilamentele de actina sunt reprezentate de:
musculaturii: a. Fibrele de actina (actina-F)
a. Relaxarea musculaturii netede b. Actina globulara (actina-G)

13. Mecanoreceptorii transforma un stimul fizic in impuls 21. Gazele cu rol de neurotransmitator sunt reprezentate
electric si sunt reprezentati de: de:
a. corpusculii Meissner a. Monoxid de azot
b. corpusculii Ruffini b. Oxid nitric
c. corpusculii Pacini c. Monoxid de carbon

14. Care din afirmatiile urmatoare referitoare la perceptia 22. Acetilcolina este un neurotransmitator cu rol:
gustativa sunt adevarate: a. Excitator in SNC
a. modalitatile de receptie gustative sunt distribuite inegal b. la terminatiile nervoase autonome, Ach poate fi fie
11
excitatorie fie inhibitorie, in functie de organul implicat
31. Neurogeneza la adult in zona subventriculara /
23. Receptorii nicotinici sunt localizati: sistemul olfactiv prezinta 4 etape:
a. In regiuni specifice ale creierului a. Proliferarea
b. In ganglionii autonomi b. Diferentierea
c. Fibrele musculare scheletice c. Migrarea
d. Integrarea sinaptica
24. Eliberarea acetilcolinei (Ach) din neuronii motori
somatici si legarea de receptorii nicotinici: 32. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la
a. stimuleaza contractia musculara densitatea postsinaptica (PSD) sunt adevarate:
a. este o structura submembranara specifica
25. Receptorii muscarinici sunt localizati: b. la acest nivel receptorii neurotransmitatorilor sunt
a. membrana plasmatica a celulelor musculare netede conectati la citoschelet si la molecule de semnalizare
b. membrana plasmatica a celulelor musculare cardiace c. reprezinta un complex multiproteic asociat receptorilor
c. membrana plasmatica a celulelor anumitor glande de la nivelul membranelor sinaptice din SNC

26. Care din urmatorii receptori reprezinta subtipuri de 33. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memorie
receptori glutamat: sunt adevarate:
a. Receptori NMDA a. Memoria este un proces prin care oamenii si alte
b. Receptori kainat organisme codifica, inmagazineaza si refolosesc informatii
c. Receptori AMPA b. Memorarea poate fi intentionata (voluntara) sau
neintentionata (involuntara)
27. Inhibarea activitatii receptorilor NMDA poate fi indusa c. Fenomenul invers memorarii este uitarea, care se
de: manifesta prin incapacitatea de a reproduce sau de a
a. Toate raspunsurile sunt corecte recunoaste

28. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la GABA 34. Principalele procese ale memoriei sunt:
sunt adevarate: a. Memorarea
a. este un neurotransmitator inhibitor b. Pastrarea
b. hiperpolarizeaza membrana postsinaptica prin c. Actualizarea
deschiderea canalelor de Cl-
c. este un derivat al acidului glutamic 35. Care din urmatoarele reprezinta tipuri de memorie
d. GABA este cel mai raspandit neurotransmitator din a. Punctele a,b,c sunt corecte
creier (1/3 din neuroni folosesc GABA)
36. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la memoria
29. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta caracteristici centrala este adevarata:
ale potentialului de receptor: a. este capacitatea creierului de a asambla, integra si de a
a. se raspandeste electrotonic in zonele invecinate da sens unor informatii senzoriale si de a le inmagazina
b. raspunsul poate fi gradat pentru folosirea ulterioara la nevoie
c. poate ramane localizat sau, cand amplitudinea sa
depaseste pragul poate initia un potential de actiune 37. Care din urmatoarele afirmatii cu privire la invatare
d. cu cat potentialul de receptor este mai mare decat sunt ADEVARATE (!!!):
nivelul prag, cu atat este mai mare frecventa de a. Invatarea este un proces in care creierul acumuleaza
descarcare a potentialelor de actiune. informatii din mediul extern
b. Invatarea a fost impartita in asociativa si neasociativa
30. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la c. Invatarea neasociativa a fost impartita in continuare in
sinaptozomi sunt adevarate: deprindere si sensibilizare.
a. toate afirmatiile de mai sus sunt corecte d. Invatarea asociativa - este impartita in conditionare
12
clasica (Pavloviana) si conditionare operanta prezenta celulelor care participa la demielinizare
(instrumentala) c. Demielinizarea activa este prezenta numai pe o
perioada limitata din dezvoltarea unei leziuni in SM
38. Care din urmatoarele structuri reprezinta arii primare
implicate in memorie
a. Cerebel
b. Hipocamp
c. Amigdala
d. Cortexul cerebral

39. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta roluri ale


hipocampului in memorie:
a. Toate afirmatiile sunt corecte.

40. Maladii neurodegenerative generate de prioni sunt


reprezentate de:
a. maladia Creutzfeld-Jacob (CJD)
b. sindromul Gerstmann-Straussler-Scheinker (GSS)
c. insomnia fatala familiala (FFI)
d. sindromul Alpers (la copii)

41. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la maladiile


prionice sunt adevarate:
a. Procesul care declanseaza boala este reprezentat de
conversia unei proteine normale (PrPc), intr-una mutanta,
anormala (PrPSc)
b. natura acestor afectiuni poate fi genetica
c. natura acestor afectiuni poate fi infectioasa
d. natura acestor afectiuni poate fi sporadica

42. Care din urmatoarele enzime sunt deficitare in


fenilcetonurie:
a. Fenilalanin-hidroxilaza

43. Care din urmatoarele simptome apar in maladia


Huntington:
a. Toate simptomele de mai sus

44. Care din urmatoarele sindroame/maladii reprezinta


cea mai importanta maladie demielinizanta:
a. scleroza multipla

45. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la scleroza


multipla (SM) sunt corecte:
a. Cel mai bun indicator al demielinizarii active este
prezenta produsilor de degradare ai mielinei in citoplasma
macrofagelor
b. Cel mai bun indicator al demielinizarii active este
13
TEST 1 NEUROBIOLOGIE

FACULTATEA: NUMELE ŞI PRENUMELE:


GRUPA: DATA:

1. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la insertia co- d. sistemul dopaminergic mezolimbic implicat în
translationala a proteinelor sunt adevarate: controlul emotiilor
a. Primii 20-30 AA din lanţul polipeptidic ce se e. Niciunul de mai sus
formează, alcătuiesc o secvenţă semnal 8. Sinteza serotoninei (5-hidroxitriptamina) necesita 2 enzime:
b. Secvenţa semnal este recunoscută de către o a. Triptofan hidroxilaza
“particulă de recunoaştere a semnalului” (SRP) b. Triptofan fosfataza
c. Proteinele sintetizate co-translational sunt destinate c. Decarboxilaza aminoacizilor aromatici
exportului d. Carboxilaza aminoacizilor aromatici
d. Proteinele sintetizate co-translational sunt destinate e. Niciuna de mai sus
structurii nucleului si mitocondriei 9. Neurotransmitatorii excitatori sunt reprezentati de:
e. Toate afirmatiile de mai sus sunt adevarate a. Acidul glutamic
2. Veziculele de transport şi cele secretorii sunt invelite de o b. Acidul acetic
proteina denumita: c. Acidul aspartic
a. Elastina d. Acidul ribonucleic
b. Lamina e. Toate de mai sus
c. Efedrina 10. Neurotransmitatorii inhibitori sunt reprezentati de:
d. Clatrina a. Glicina
e. Ciclina b. GABA
3. Proteinele motorii de transport de-a lungul axonului sunt c. Histamina
reprezentate de: d. Valina
a. Kinina e. Toate de mai sus
b. Kinezina 11. Neuropeptidele sunt reprezentate de:
c. Nexina a. Colecistokinina (CCK)
d. Clatrina b. Substanta P
e. Dineina c. Neuropeptid Y
4. Eliberarea neurotransmitatorilor este influentata de influxul d. Niciunul de mai sus
de: e. Raspunsurile a, b, c sunt corecte
a. Calciu 12. Oxidul nitric are unul din urmatoarele efecte asupra
b. Magneziu musculaturii:
c. Fier a. Relaxarea musculaturii striate scheletale
d. Vitamina A b. Relaxarea musculaturii striate cardiace
e. Coenzima Q c. Relaxarea musculaturii netede
5. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la d. Contractia musculaturii striate scheletale
neurotransmitatori este adevarata: e. Contractia musculaturii netede
a. Molecula trebuie sintetizată în cadrul neuronului de 13. Cum se numeste procesul prin care sunt inserate proteine
unde este eliberată direct in RE rugos:
b. Agenţii care blochează răspunsul postsinaptic la a. Insertie pre-translationala
stimularea presinaptică ar trebuie de asemenea să b. Insertie co-translationala
blocheze răspunsul la transmiţători aplicaţi exogen c. Insertie post-translationala
c. Răspunsul postsinaptic la transmiţător trebuie să se d. Glicozilare initiala
termine rapid atunci cand este aplicat exogen e. Glicozilare terminala
d. Molecula exogena trebuie să se comporte identic cu 14. Care din urmatoarele procese au loc la nivelul aparatului
transmiţătorul endogen în ceea ce priveşte Golgi:
potenţialul farmacologic, inhibiţia şi inactivarea sa a. Insertie pre-translationala
e. Toate afirmatiile de mai sus sunt adevarate b. Insertie co-translationala
6. Efectele acetilcolinei se realizeaza prin legarea Ach de c. Insertie post-translationala
urmatorii receptori: d. Glicozilare initiala
a. Adrenergici e. Glicozilare terminala
b. Noradrenergici 15. Clatrina este o proteina de invelis cu o structura
c. Nicotinici caracteristica de:
d. Muscarinici a. 1 brat = monoschelion
e. Niciunul de mai sus b. 2 brate = bischelion
7. Sistemul dopaminergic este reprezentat de: c. 3 brate = trischelion
a. sistemul dopaminergic nigrostriatal implicat în d. 4 brate = trischelion
controlul motor e. “inel cu pecete”
b. sistemul dopaminergic nigrostriatal implicat în 16. Care din urmatoarele reprezinta transporturi de-a lungul
controlul emotiilor axonului:
c. sistemul dopaminergic mezolimbic implicat în a. Transport rapid de la corpul celular către capătul
controlul motor sinaptic (anterograd)
1
b. Transport lent de la corpul celular către capătul 24. Inhibarea activitatii receptorilor NMDA poate fi indusa de:
sinaptic (retrograd) a. Creşterea concentraţiei extracelulare a ionilor de
c. Transport rapid de la capătul sinaptic către corpul hidrogen datorită acumulării acidului lactic, Zn2+, şi
celular (anterograd) radicalilor liberi
d. Transport lent de la capătul sinaptic către corpul b. Defosforilarea receptorului NMDA ca urmare a
celular (retrograd) scăderii nivelului ATP
e. Transporturile de-a lungul axonului se realizeaza c. Activarea calicineurinei de către Ca2+
alternativ si la o viteza constanta d. Inhibarea directă a receptorului NMDA de către
17. Microfilamentele de actina sunt reprezentate de: complexul Ca-calmodulină
a. Fibrele de actina (actina-F) e. Toate raspunsurile sunt corecte
b. Fibrele de actina (actina-G) 25. Care din urmatoarele afirmatii referitoare la GABA sunt
c. Actina globulara (actina-F) adevarate:
d. Actina globulara (actina-G) a. este un neurotransmiţător inhibitor
e. Niciun raspuns corect b. este un neurotransmiţător excitator
18. Gazele cu rol de neurotransmitator sunt reprezentate de: c. hiperpolarizează membrana postsinaptică prin
a. Monoxid de azot deschiderea canalelor de Cl-
b. Oxid nitric d. este un derivat al acidului glutamic
c. Monoxid de carbon e. GABA este cel mai răspândit neurotransmiţător din
d. Dioxid de carbon creier (1/3 din neuroni folosesc GABA)
e. Heliu 26. Care din urmatoarele afirmatii reprezinta caracteristici ale
19. Acetilcolina este un neurotransmitator cu rol: potentialului de receptor:
a. Inhibitor in SNC a. se răspândeşte electrotonic în zonele învecinate
b. Excitator in SNC b. răspunsul poate fi gradat
c. Neutru in SNC c. poate rămâne localizat sau, când amplitudinea sa
d. la terminaţiile nervoase autonome, Ach poate fi fie depăşeşte pragul poate iniţia un potenţial de acţiune
excitatorie fie inhibitorie, în funcţie de organul d. cu cât potenţialul de receptor este mai mare decât
implicat nivelul prag, cu atât este mai mare frecvenţa de
e. Niciun raspuns corect descărcare a potenţialelor de acţiune.
20. Receptorii nicotinici sunt localizati: e. Niciun raspuns corect
a. In regiuni specifice ale creierului 27. In functie de numarul de prelungiri (procese) neuronale,
b. In ganglionii autonomi neuronii se clasifica in:
c. Fibrele musculare cardiace a. Neuroni pseduounipolari
d. Fibrele musculare netede b. Neuroni bipolari
e. Fibrele musculare scheletice c. Neuroni multipolari
21. Eliberarea acetilcolinei (Ach) din neuronii motori somatici şi d. toate afirmatiile de mai sus sunt corecte
legarea de receptorii nicotinici: e. niciun raspuns correct
a. stimuleaza relaxarea musculara 28. Care din urmatoarele reprezinta celule gliale:
b. inhiba relaxarea musculara a. Astrocit
c. stimuleaza contractia musculara b. Oligodendrocit
d. inhiba contractia musculara c. Multidendrocit
e. toate raspunsurile sunt corecte in functie de organ d. Microglie
22. Receptorii muscarinici sunt localizati: e. Celule ependimare
a. membrana plasmatică a celulelor musculare 29. Care din urmatoarele reprezinta functii ale astrocitelor:
scheletale a. Astrocitele atrag K+
b. membrana plasmatică a celulelor musculare netede b. Astrocitele atrag neurotransmitatori
c. membrana plasmatică a celulelor musculare c. Piciorul astrocitar preia glicogenul din sange
cardiace d. Astrocitele sunt necesare pentru formarea de
d. membrana plasmatică a celulelor anumitor glande sinapse în SNC
e. membrana plasmatică a celulelor pigmentare e. Astrocitele induc formarea barierei hemato-
23. Care din urmatorii receptori reprezinta subtipuri de receptori encefalice
glutamat: 30. Care din urmatoarele reprezinta tipuri de sinapse:
a. Receptori NMDA a. Axo-dendritice
b. Receptori kainat b. Axo-somatice
c. Receptori AMPA c. Axo-axonale
d. Receptori muscarinici d. Dendro-dendritice
e. Receptori nicotinici e. Perikario-axonale

2
Raspunsuri:
1. abc
2. d
3. be
4. a
5. e
6. cd
7. ad
8. ac
9. ac
10. ab
11. e
12. c
13. b
14. e
15. c
16. a d
17. a d
18. a b c
19. b d
20. a b e
21. c
22. b c d
23. a b c
24. e
25. a c d e
26. a b c d
27. d
28. a b d e
29. a b d e
30. a b c d

Which of the following processes occurs in the Golgi apparat?

3
a-pre-translational insertion

b-co-translational insertion

c-post-translational insertion

d-Glocozilare page

e-terminal glycosylation

Clathrin is an envelope protein with a characteristic structure:

a-1 arm = monoschelion

b-2 arm = bischelion

c-3 arm = trischelion

d-4 arm = trischelion

e- "signet ring"

Which of the following represents transport along the axon?

a-rapid transport of the body from the cell to the synaptic end (antegrade)

d-slow synaptic transmission at the end of the cell body (retrograde)

Actin microfilaments are:

a-fiber actin (F-actin)

d-globular actin (G actin)

Inhibition of NMDA receptor activity can be induced by:

4
a-increase in the extracellular concentration of hydrogen ions due to the accumulation of lactic
acid, Zn, and free radicals

c-activation of calcineurin by Ca +2

d-Direct inhibition of NMDA receptor complex by calmodulin

The central nervous system consists of:

a-brain (also good answer…)

b-brain and spinal cord

c-brain, spinal cord and nerves brushing

d-cerebellum

e-sciatic nerve

Motor neuron is located:

a-in the cerebral cortex

Peripheral motor neuron is found in:

a-spinal cord

b-anterior horns of the spinal cord

C- posterior horns of the spinal cord

d-trunk spinal cord

e-peripheral nervous system

The central nervous system consists of:


5
a-brain (also good answer…)

b-brain and spinal cord

c-brain, spinal cord and nerves brushing

d-cerebellum

e-sciatic nerve

Among the types of synapses, which are the following:

- Axial axonal

- Axial dendritic

- Dendritic dendritic

- Somatic axial

- Axonal perikario (perikaro-perikarionale)

Which of the following represents glial cells?

- Oligodendrocytes

- Microglia

- Astrocytes

- Ependymal cell

The release of neurotransmitters may require:

- Calcium and ATP

- Magnesium and ATP

6
- Vitamin A and GTP

- Coenzyme Q and GTP

- Iron and GTP

NEUROBIOLOGIE MGFR3 S2
Le protéines moteur de transport a long des axones sont représentés par:
{ ~%33.333%kinin
~%50%kinésines
~%33.333%nexine
~%33.333%chlatrine
~%50%dineine

La libération du neurotransmetteur est influencé par l'afflux de: {


=calcium
~magnésium
~fer ~vitamine A
~coenzyme Q}

Les effets d'acétylcholine est réalisée en liant les prochaines récepteurs Ach: { ~
%33.333%adrénergiques
~%33.333%noradrenergiques
~%50%nicotiniques
~%50%muscariniques
~%33.333%aucune de ces réponses

Le système dopaminergique est represente par: {


~%50%système dopaminergique nigrostriatale impliquées dans le contrôle moteur
~%-50%système dopaminergique nigrostriatale impliqués dans le contrôle des émotions
~%-50%système dopaminergique mésolimbique impliqué dans le contrôle moteur
~%50%système dopaminergique mésolimbique impliqués dans le contrôle des émotions
~%-100%aucune de ces réponses

La synthese de la serotonine (5-hydroxytryptamine) nécessite deux enzymes: {


~%50%triptophane hidroxilase
~%-50%triptophane phosphatase
~%50%decarboxilase des aminoacids aromatiques
~%-50%carboxilase des aminoacids aromatique
~%-100% aucune de ces réponses

Les neurotransmetteurs excitateurs sont: {


~%50%acide glutamique
~%-33.333%acide acétique
~%50%acide aspartique
~%-33.333%acide ribonucléique

7
~%-33.333%Tout les reponse sont correcte

O metodă nouă de detecţie PCR-RFLP folosind un set optim de enzime de restricţie

1. Introducere

Un număr de metode noi şi folositoare de detecţie a mutaţiilor a evoluat în anii recenţi activat de
apariţia de reacţie în lanţ a polimerazei (PCR) (Grompe, 1993). Aceste metode pot fi împărţite în două
grupe: (1) tehnicile PCR menite să scaneze secvenţele ADN pentru mutaţiile necunoscute şi (2) tehnicile
pentru identificarea polimorfismelor cunoscute. Esenţa primului grup este sensibilitatea, şi acest grup
este reprezentat de analiza polimorfismului cu conformaţie unică (SSCP), electroforeza denaturată a
variaţiei gelului (DGGE), analiza heteroduplex (HA), o separare Rnase, separarea nepotrivirii chimice,
analiza bazată pe enzime de reparare a neportivirii escherichia coli (Grompe,1993), şi amprentarea
restricţiei endonucleazei. (Liu şi Sommer, 1995). Odată ce a fost descoperit un polimorfinsm cu ajutorul
uneia din tehnicile descrise mai sus, există o necesitate clară de a trece la o tehnică mai simplă.
Metodele menite pentru simplificare şi rapiditatea de genotipare a numărului mare de indivizi sunt
reprezentate de testul de hibridizare a oligodeoxnucleotidei, testul de ligatură a oligonucleotidului,
amplificarea specifică PCR sau, dacă se detectează variaţia de ADN printr-o enzimă de restricţie (RE),
restricţia PCR a lungimii fragmentului de polimorfism (RFLP) (Grompe, 1993). Limitarea acestor tehnici,
în special a primului grup, este legată de faptul că acestea sunt dependente de o serie de variabile, cum
ar fi natura mutaţiei, dimensiunea fragmentului ADN, compoziţia gelului, durata elecroforezei gelului,
raportul între concentraţia ADN şi concentraţia de clivaj chimic şi altele. Am conceput şi testat o nouă
tehnică de detectare a restricţiei PCR directe a polimorfismului (DPRPD). Metoda combină abilitatea de
recunoaştere corectă a Res şi eficienţa PCR. Sunt doi paşi innovatori : o analiză a ADN-ului genomic
regrupat de la mai mulţi indivizi şi folosirea unui set de RE care sunt capabile să detecteze variaţia de
ADN.

8
2. Proiect experimental general

S-a amestecat ADN-ul genom în concentraţia lui PCR (50-100 ng/µL) de la 10 până la 20 de indivizi
într-un singur puţ de cercetare. Cu cât numărul de ADN genom individual amestecat este mai mare, cu
atât şansa de a detecta un polimorfism rar este mai mare. Folosind o mostră de 19, de exemplu,
probabilitatea ca o allele polimorfică să lipsească având o frecvenţă a populaţiei de 0.1 este mai mică de
1 la 50; pentru o allele cu o frecvenţă de 0.05 este mai mică de 1 la 7. (Sklonick şi White, 1982).ADN-ul
cercetat serveşte drept şablon ADN pentru PCR în scopul de a amplifica zona de interes. Cantitatea de
ADN adăugat ar trebui calculat conform numărului de enzime care sunt testate. Din experienţa noastră,
aproximativ 0.2-0.3 µg din produsul PCR este necesar pentru fiecare RE, În pasul următor alicotele (0.2-
0.3 µg) din produsul PCR adăugat sunt mistuite cu diverse RE. Principille selecţiei enzimelor sunt descrise
în subcapitolul 3.

Fiecare extras al produselor PCR regrupate este apoi încărcat într-un culoar diferit de gel de agaroză.
Concentraţia gelului depinde de dimensiunea produselor PCR: pentru fragmente de ADN mici 100-250
bp, este necesară o concentraţie de 3-4% de gel de agaroză, în timp ce pentru produse PCR mari,
concentraţia mai mică de gel este optimă. Gelul este supus timp de 2-4 ore voltajului standard şi
amortizoarelor pentru a separa fragmentele de asimilare.

Enzima care detectează un RFLP într-un fragment ADN amplificat este evidentă în cazurile în care nu
există alte situaţii de restricţie exceptând-o pe cea polimorfică. În acest caz, pe lângă banda de mărime
originală a produsului PCR, există una sau mai multe benzi mai mici reprezentând o allele alternativă.
Într-o situaţie mult mai complexă unde există mai multe zone de restricţie, verificarea enzimelor
informative se bazează pe suma lungimilor fragmentelor observate. Dacă lungimea totală a fragmentelor
asimilate/digerate este mai mare decât partea neasimilată a produsului PCR, este posibil ca enzima să
identifice un polimorfism. Aceste enzime informative sunt apoi supuse unei re-testări pe ADN –uri

9
separate, individuale. Se efectuează amplificarea aceleiaşi porţiuni de ADN pe fiecare mostră individuală
de ADN şi digerarea pe fiecare produs PCR separat cu aşa-zisele enzime informative. FCR-RFLP rezultant
este apoi evaluat cu electroforeză gel-agaroză .

Există două complexităţi referitoare la această metodă care trebuie menţionate. Prima este legată de
apariţia obişnuită a amplificării PCR non-specifică. După digestie, legăturile de ADN adiţionale
nespecifice pot indica un RFLP fals. Pentru a evita acest lucru, stringenţa de PCR trebuie să fie mărită şi
amplificarea condiţiilor trebuie să fie aleasă cât mai exact cu putinţă. Dacă această optimizarea a
condiţiilor PCR nu este de folos, este de folos a se încerca o metodă în trei paşi: (1) PCR din modelul
ADN, (2) purificarea fragmentului de ADN şi (3) un al doilea PCR folosind fragmentul purificat de ADN
drept model/şablon. Acest fragment de ADN serveşte drept model ADN în cel de-al doilea PCR; în acest
caz, absenţa altor molecule ADN pe lângă fragmentul de inters protejează de orice altă amplificare
nonspecifică.

O altă problemă a fost digestia incompletă a unor fragmente de ADN cu unele RE. În majoritatea
cazurilor, produsul PCR nu a fost purificat şi digestia s-a făcut direct în amestecul PCR cu adăugarea
cantităţii necesare de soluţie- tampon de restricţie şi 2-10 U de RE. Deşi majoritatea enzimelor lucrează
destul de bine în acest PCR plus starea de substanţă –tampon de digestie, unele dintre ele (de exemplu,
ScrFI sau AciI) au realizat digestia numai până la nivelul de 70-90%. Fragmentele de DNA nedigerate
simulează absenţa situaţiei de restricţie şi drept urmare un potenţial RFLP. Aceste RFLP-uri false pot fi
verificate uşor şi excluse în digestia separată a fiecărui ADN individual.

3. Selecţia enzimelor de restricţie

Am realizat o investigaţie detaliată care s-a îndreptat spre definirea folosirii optime a RE. Analiza s-a
bazat pe secvenţele umane ADN cunoscute care sunt mai mari de 5 kb (recuperate din EMBL Release 37)
cu o lungime totală combinată de 2,848,305 bp. Programul pentru analiza secvenţială a fost scris şi
efectuat pe un computer 486DX2-66MHz. S-au realizat două rânduri de analize. În primul, s-a presupus
că gradul de mutabilitate pentru toate cele patru nucleotide este identic, şi caracterul informativ al RE
depinde în mare parte de frecvenţa părţilor de restricţie. (RS). În cea de-a doua analiză, pe lângă
frecvenţa părţilor de restricţie şi gradul de suprapunere între părţile de restricţie,

10
s-a inclus un nou parametru de mutabilitate pentru fiecare nucleotid. Unele principii ale selecţiei RE cum
ar fi RFLP ca urmare a pierderii/câştigului unui RS, suprapunenrea RS pentru diferite enzime, şi cea mai
mică detecţie de fragment au fost preluate din studiul lui Wijsman (1984).

3.1. Selecţia enzimelor de restricţie fără evaluarea diferitelor grade de mutabilitate

Punctul de plecare pentru selecţia RE a fost să stabilim ce proporţie dintr-o secvenţă ADN este
cuprinsă de RS într-un RE dat. Am realizat o analiză sistematică a mai mult de 150 RE (REBASE, New
England BioLabs, 1994). Enzima care a avut cel mai mare grad de acoperire a secvenţei ADN (acoperire
înseamnă numărul de nucleotide în suma RS în fragmentul ADN dat împărţit la lungimea fragmentului
ADN) a fost ScrFI (RS este CCNGG). Numărul de nucleotide, mutaţii din care ar duce la dispariţia RS
pentru ScrFI , a fost 77,432 într-o lungime Mb de 2.848 de secvenţe de ADN uman însumate. În acest caz
analiza a fost îndreptată catre mutaţiile ADN care a dus la dispariţia RS. Cu alte cuvinte, RS a fost prezent
în alelele sălbatice , şi s-a presupus că era absent în alelel mutante.

O situaţie opusă o reprezintă absenţa RS în tipul sălbatic şi apariţia RS în alelele mutante. În ceea ce
priveşte ScrFI, există patru variante potenţiale pentru RS, adică NCNGG, CNNGG (unde N nu este C), şi
CCNNG, CCNGN (unde N nu este G). În majoritatea cazurilor N nu se schimbă deloc, dar în unele situaţii
rare s-ar putea schimba în alte nucleotide. Dacă N se schimbă, probabilitatea medie este de unu-la trei
să se schimbe în nucleotida necesară (C în primele două cazuri şi G în ultimele două cazuri) şi crează un
RS complet. Conform calculelor noastre, acoperirea ADN din cauza PRS pentru ScrFI a fost de 46,642.3
nucleotide, şi numărul total de nucleotide în RS plus PRS a fost de 124,074.3 (tabelul 1, coloana 3). În
plus, un grad de suprapunere între părţile ScrFI ar trebui evaluat. O secvenţă formată din CCCGGC
hexanucleotidic ca formă are două părţi

Tabelul 1

1 2 3 4 5 6

1. ScrFl CCNGG 124074 3 97.4 4.24 4.24

2. Tsp5091 AATT 114868.3 96.3 3.89 8 13


11
3. Ddel CTNAG 110665.0 93.9 3.65 11.78

4. Acil CCGC 105615 3 88.2 3.27 15 05

5. NlaIII CATG 100327 7 89.5 3.15 18.20

6. Alul AGCT 102530 0 80.5 2.90 21.10

7. Msel TTAA 102477.7 78.9 2.84 23.94

8. HaeIII GGCC 97989.0 72.4 2.49 26.43

9. MboII GAAGA 77686.3 88.9 2.42 28 85

10. Hinfl GANTC 78935.7 80.4 2.23 31 08

11. Bsll CC(N)GG 93120.7 56.3 1.84 32 92

12. DpnII GATC 67691 0 78.8 1.87 34 79

13. Bfal CTAG 72084 7 72.6 1.84 36 63

14. BsmAl GTCTC 69629 0 71.1 1.74 38 37

15. HphI GGTGA 66778.0 71.8 1.68 40.05

16. Csp61 GTAC 51520 0 86.2 1.56 41.61

17. Fokl GGATG 62998 7 68.0 1.50 43 11

18. NlaIV GGNNCC 91673.3 41.4 1.33 44 45

19. Mwol GC(N)GC 80794.3 44.4 1.26 45 71

20. Bsrl ACTGG 63085.0 55.2 1.22 46.93

21. BbvI GCAGC 69226 7 40.4 0.98 47.91

22. Bsp1286 GDGCHC 66236.3 40.6 0.94 48.86

23. BsaJI CC(N)GG 113666 7 22.5 0.90 49.76

24. BsmFI GGGAC 58174.3 39.3 0.80 50.56

25. Taql TCGA 37787.3 58.8 0.78 51.34

26. MspI CCGG 59124.7 28.5 0.59 51 93

27. HhaI GCGC 43814.3 36.3 0.56 52 49

28. MsII CAY(N)RTG 31936.3 45.3 0.51 53 00

12
29. BsrDI GCAATG 16607 7 66.4 0.39 53 38

30. Sau96I GGNCC 88360 7 11.1 0.35 53 73

1 Enzima de restricţie 2. Zona de restricţie 3. Numărul de nucleotide în zonele de restricţie plus zonele
potenţiale de restricţie 4. Eficienţa (%) a enzimei folosite (100% minus suprapunerea cu zonele
enzimelor localizate mai sus) 5. Acoperirea ADN pe zone de restricţie şi zone de restricţie potenţiale (%)
6. Acoperirea totală a ADN-ului (%)

de restricţie pentru ScrFI, dar aceste două părţi se suprapun (CCCGG şi CCGGG).

Cel de-al doilea C mutant şi cel de-al doilea G vor schimba ambii/ambele RS, deşi nu este nevoie decât
de un singur eveniment de restricţie pentru a detecta mutaţia.Conform calculelor noastre , 2,6% din
toate cele 124,074.3 nucleotide în părţile ScrFI se suprapuneau, şi restul de 97.4% (tabelul 1, coloana 4)
reprezintă numărul real al acoperirii ADN. Totalul acoperirii ADN datorat părţilor ScrFI în cei 2.845Mb
testaţi a fost de 4.24% (tabelul 1, coloana 5).

Suprapunerea RS s-a extins la toate enzimele în calculul nostru. Începând cu cel de-al doilea RE, în
plus de suprapunerea discutată mai sus, gradul de suprapunere cu RE de mai sus de pe listă a fost
evaluat pentru toţi candidaţii RE în RS-ul lor şi PRS. Coloana 4 (tabelul 1) arată gradul de suprapunere a
fiecărei enzime cu ea însăşi şi enzimele de grad mai înalt. Enzima ScrFI de top nu are competitori în
sensul acoperirii ADN decât ea îsăşi, în timp ce HaeIII foloseşte numai 72.4% din informaţionalitatea sa
potenţială şi restul de 27.6% a fost acoperit de enzimele mult mai informative. Pentru RS non
palindromic recunoscând RE, de exemplu , MboII, BsmAI, ambele variante ale direcţiei 5”-3” a părţii de
recunoaştere ADN au fost calculate separat şi adunate. Conform datelor noastre, primele 30 de enzime
ar trebui să fie capabile să detecteze mai mult de 50% din variaţia nucleotidică într-o secvenţă ADN dată
(Tablelu 1, coloana 6).

13
Alte două aspecte au fost evaluate în analiză. Primul, cel mai mic fragment detectabil prin tehnica
DPRPD este semnificativ mult mai mic în comparaţie cu cel mai mic fragment detectabil în hibridizarea-
pată de sud. Experienţa noastră a arătat că 3-4% gel agaroză permite o seăparare clară a alelelor cu o
diferenţă de 30-50bp când tipul sălbatic variază de la 150 la 600 bp. Lungimea medie a fragmentului
ADN a celui mai frecvent cuter ScrFI a fost de aproximativ 140bp. Numai o minoritate de fragmente de
restricţie (inclusiv cele polimorfice) sunt mai scurte decât 30 bp, şi şansele de a identifica două alele
ScrFI diferite sunt destul de mari pentru că mărimea unui fragment mediu depăşeşte diferenţa minimă
detectabilă de aproape cinci ori. Al doilea aspect a fost preţul pentru fiecare enzimă. Simularea analizei a
arătat că numai o mică parte din detecţia de informaţie RFLP se pierde când enzimele candidate erau
limitate la nu mai mult de 50 de cenţi per unitate.

3.2. Selecţia enzimelor de restricţie cu evaluarea pentru diferite grade de mutabilitate

Pe lângă acoperirea ADN de către părţile de restricţie reale şi potenţiale, plus suprapunerea între părţi
pentru diferite enzime, în cel de.al doilea studiu de simulare, am inclus un parametru de mutabilitate
nucleotidică. S-a arătat că diferite nucleotide au o rată a mutabilităţii diferită, şi că depinde în md
semnificativ de nucleotidele din jur (Cooper şi Krawczak, 1993). Bazaţi pe informaţia acumulată privind
polimirfismele umane ADN, coeficienţii au fost oferiţi pentru mutabilitatea dinucleotidă relativă atât
pentru nucleotidul 5’şi 3’ (tabelul 6.6, în Cooper şi Krawczack, 1993). În calculele nostre coeficienţii au
fost folosiţi pentru a evalua probabilitatea pentru fiecare parte de restricţie specifică de a se modifica
într-o parte non-restrictivă şi invers. Au fost necesare unele transformări ai coeficienţilor de mutabilitate
din dinucleotide în trinucleotide pentru a evita ambiguitatea datorată nucleotidelor mărginaşe 5’sau
5’.De exemplu încazul lui 5’–TCG-3’ mutabilităţile lui C în TC sunt după cum urmează: C A=0.34, C
G=0.42 şi C T=1.38 (total 2.14), în timp ce C în combinaţia CG are un grad de mutabilitate semnificativ
mai mare : C =>A=0.64, C=>G=0.45, şi C=> T=13.27 (total 14.36). În plus, mutabilitatea în G în
componenta complementară 5’ –CGA-3’ ar trebui evaluată. Pentru a include datele de mutabilitate
individuale, coeficienţii totali de mutabilitate au fost calculaţi pentru nucleotizii centrali pentru toate
cele 64 de permutări trinucleotidice. În pasul următor, mutabilităţile pentru toţi 2,848,305 bp au fost
adunate, şi s-a realizat o analiză similară ca şi în primul studiu de simulare. Spre deosebire de prima
dată, în loc de acoperirea fizică ADN cu părţile de restricţie, s-a evaluat o rată a mutabilităţilor pentru

14
fiecare parte de restricţie a enzimei individuale versus mutabilitatea totalului de 2.848 Mb a
componentei ADN. Lista cu enzimele opţionale este oferită în tabelul 2.

Există doar o singură schimbare în cea de-a doua listă, care constă în înlocuirea BbvI (GCAGC) cu
Fnu4HI (GCNGC), în timp ce restul de 29 de RE există pe ambele liste. Ambele seturi sunt capabile să
detecteze aproximativ acelaşi număr de polimorfisme (53.7% fără să admită mutabilitatea şi 56.3% cu
mutabilităţi). Unele dintre dinucleotidele CG care conţin enzime au primit o poziţie mai mare: Hhal de pe
locul 27 a ajuns pe 16, MspI a crescut de la 26 la 21, TaqI de la 25 la 24, şi AciI de la poziţia patru la
prima.

4. Detectarea lungimii fragmentelor de restricţie ale polimorfismelor

Am dovedit şi operaţionalizat această tehnologie în detectarea polimorfismelor descrise anterior cum


ar fi MspI PCR-RFLP în regiunea 5’ netradusă a genei EST-25 (Avramopoulos et al.,1993).

Tabel 2

Selecţia enzimelor de restricţie optime cu evaluarea pentru diferite grade de mutabilitate

1 2 3 4

1. AciI CCGC 4 5 4%

2. ScrFJ CCNGG 1 10.6%

3. Ddel CTNAG 3 14.3%

4. NlaIII CATG 5 18.1%

5. Tsp5091 AATT 2 21.1%

15
6. HaeIII GGCC 8 23.8%

7. Alul AGCT 6 26.3%

8. BslI CC(N)GG 11 30.6%

9. Msel TTAA 7 32.7%

10. BsmAl GTCTC 14 34.6%

11. HphI GGTGA 15 36.7%

12. NlaIV GG(N)CC 18 38.4%

13. FokI GGATG 17 40.1%

14. BfaI CTAG 13 41.7%

15. HhaI GCGC 27 43.3%

16. DpnII GATC 12 44.8%

17. Csp6I GTAC 16 46.4%

18. HinfI GANTC 10 47.7%

19. MwoI GC(N)GC 19 48.8%

20. MspI CCGG 26 49.9%

21. BsaJI CC(N)GG 23 50.9%

22. BsmFI GGGAC 24 51.7%

23. TaqI TCGA 25 52.8%

24. Fnu4HI GCNGC - 53.6%

25. BsrI ACTGG 20 54.4%

26. Bsp1286I GDGCHC 22 55.1%

27. BsrDI GCAATG 29 55.5%

28. MsII CAY(N)RTG 28 56.0%

29. Sau96I GGNCC 30 56.3%

1. Enzimă de restricţie 2. Zonă de restricţie 3. Poziţia în tabelul 1 4. Acoperirea totală a AND-ului

16
ADN-ul genomic cu o concentraţie de 50 ng/µL a fost adunat de la 10 indivizi şi acest şablon ADN a fost
folosit în PCR. Acizii nucleici pentru EST-2 MspI RFLP au fost GCACAGCTAATICTACTCAC şi
TGTTAAGGGATTCTGAGAAC (Avramopoulos et al. 1993). PCR a constat din 200 ng din ADN-ul genomic
adunat , 1x PCR soluţie tampon(Perkin Elmer) cu 2.0mM MgCl 2, 200 µM din fiecare dNTP, 10 pmol din
fiecare acid nucleic şi 1.0 U din polimerază Taq (perkin Elmer). Mostra de ADN a fost denaturată la 94 0 C
timp de 6 min, urmată de 24 de cicluri de 95 0 C pentru 30 s, 570C pentru 30 s, şi 720 C pentru 30s. S-a
generat aproximativ 2 µg de ADN, şi părţi alicote de 0.2 µg care corespund celor 10 µL de volum PCR au
fost digerate cu enzime de restricţie diferite. Digestia s-a realizat într-un volum total de 50µL, conţinând
12.5 µL din reacţia PCR, 5 µL din 10X soluţia –tampon de reacţie pentru fiecare enzimă şi 5-10 U enzimă
de restricţie. Aceşti produşi de digestie au fost amestecaţi cu 3% gel agaroză şi supuşi electroforezei
timp de 2 h la 100V. În figura 1A, sunt prezentate produsele de digestie EST-2 pentru cele 10 enzime. În
culoarul 5, digestia MspI, atât fragmentul PCR în mărime originală , împreună cu un produs digerat au
fost observate. Acest lucru sugerează prezenţa unei situaţii MspI polimorfică. S-au realizat analize pe
mostre individuale de ADN cu enzime MspI informative în acelaşi mod cu excepţia faptului că au fost
folosite mostre individuale de ADN în loc de ADN amestecat (Fig. 1B).

Aceeaşi abordare s-a folosit în căutarea polimorfismelor noi în gena proteinei asociate sinapto-somale
25 (SNAP-25). Acelaşi ADN amestecat descris mai sus s-a folosit pentru analizarea polimorfismului ADN
în cele 700 bp ale fragmentului genei SNAP 25. Acizii nucleici pentru SNAP- 25 au fost
CAACTCGATCGTGTCGAAGA şi AAGCATGAAGGAGCTATCTTGC. S-a efectuat PCR conform protocolului:
100ng din ADN-ul model , 1x soluţie-tampon Perkin Elmer PCR, 1.5 mM MgCl 2, 200 µMdNTP, 10 pmol
din fiecare acid nucleic , şi 1.5 polimerază U Taq într-un volum total de 12.5 µL.Denaturarea iniţială a
fost la 950 timp de 5 minute, urmată de 30 de cicluri la 95 0C pentru 45 secunde, 600C 45 secunde, şi 720C
timp de 45 de secunde. Digerarea produselor PCR s-a realizat după cum este descris mai sus pentru EST-
2 Mspl PCR-RFLP. Au fost testate şaisprezece enzime de restricţie. S-a identificat o enzimă informativă
probabilă HinfI (culoarul 12, Fig. 2A), şi a fost mai apoi verificată ca o enzimă informativă adevărată prin
digerarea individuală a produselor PCR (Fig. 2B).

Într-o fază timpurie a dezvoltării acestei tehnici s-a identificat un nou SmaI PCR-RFLP în gena DRD4,
atunci când lista de enzime optimizate nu era disponibilă (Petronis et al. ,1994).

5. Discuţie

17
Fig. 1 Identificarea MspI PCR-RFLP în gena ETS-2. A. Produşi de digestie ETS-2 pentru enzimele (1) HphI,
(2) BfaI, (3) MscI, (4) AluI, (5) MspI, (6) BslI, (7) HinfI, (8) ScrFI, (9) MseI, (10) HaeIII; M- dimensiune
marker molecular. Culoarul 5, digestie MspI: atât fragmentul PCR original la dimensiunea reală cât şi
produsul digerat au fost observaţi. B. Analiza mostrelor individuale de ADN cu enzime informative AspI
s-a realizat în acelaşi mod exceptând faptul că s-au folosit mostrele individuale de ADN în loc de ADN-ul
amestecat.

Verificarea cum că detecţia directă a PCR-RFLP poate fi eficace pentru analiza de varaţie a ADN-ului
vine din diverse studii cu scopul detectării polimorfismului comprehensiv de-a lungul unei secvenţe ADN
tipice. Lucassen et al. (1993) au efectuat o secvenţare completă a opt haplotipuri în regiunea genei
insulinei. În fragmentul de 12.5 kb, au fost identificate 17 polimorfisme, şi şapte dintre ele au putut fi
detectate cu ajutorul metodei DPRPD. Într-un alt studiu, regiunea netradusă 3 din 17 gene din
cromozomul 21 a fost amplificată cu PCR şi supusă analizei SSCP (Avramopoulos et. Al., 1993). Au fost
detectate opt variante polimorfice şi şase dintre ele au fost supuse secvenţierii directe. S-a observat că
toate cele şase existau datorită substituirilor de perechi singulare , şi toate erau în interiorul RS pentru
enzimele HaeIII, RsaI, AciI, MspI, DdeI şi Fnu4HI. Toate aceste enzime de restricţie se aflau pe lista de

18
enzime optimizate dintr-o analiză a priori (Tabelul2, isoschizomerul pentru RsaI este Csp6I), în ciuda
faptului că analiza noastră a informatizării RE s-a realizat printr-o cu totul altă metodă.

Fig. 2. Detecţia HinfI PCR-RFLP în SNAP-25 .A. Enzimele de restricţie folosite pentru digestia ADN-ului
amestecat au fost (1)ScrFI, (2) NlaIII, (3) Ddel, (4) HaeIII, (5) AluI, (6) MboII, (7) NlaIV, (8) HphI, (9) MseI,
(10) FokI, (11) BfaI, (12) HinfI, (13) MscI, (14) HhaI, (15) BglI; M- dimensiune marker molecular. B. Enzima
de restricţie HinfI detectează locurile cu ADN polimorfic în produsele PCR individuale.

Marele avantaj al DPRPD este că este „non-parametric”, altfel spus, nu este nevoie să ajustăm un
număr mare de variabile (parametri) pentru diverse secvenţe target. Tehnica poate fi aplicată unei game
relativ largă de mărime de produse PCR, de la mai puţin de 100 bp până la mai mult de 1kb, cu acelaşi
grad de eficienţă. În plus, metoda noastră nu necesită schimbarea tehnicilor de la pasul de detectare a
polimorfismului ADN la adoptarea noului polimorfism la formatul la scare mară a genotipului. Aceiaşi
acizi nucleici, condiţii PCR identice, şi RE-ul informativ pot fi aplicate imediat la o analiză a
polimorfismului la scară largă. Folosind primii 30 RE de pe lista opţională, analiza de detecţie ar trebui să
ofere identificarea a mai mult de 50% din locurile cu variaţie ADN existente.

Metoda poate fi aplicată cu succes drept prim ecran pentru experimentele de detectare a
polimorfismelor la scară largă. Un exemplu de un potenţial domeniu de aplicare este detecţia
polimorfismului în porţiunile de secvenţă exprimate (ESTs) cu reprezentürile genetice ulterioare. Apariţia
metodelor de secvenţiere automată a făcut posibilă secvenţarea unui număr mare de ESTs din ţesuturi
specifice (Adams et al, 1991a;. 1991b; Khan et al, 1992;.. Okubo et al, 1992)
19
Pe baza de datelor recente, mai mult de 25.000 de ESTs au fost generate cu peste 80% din acestea
derivate din ţesuturi umane, inclusiv creier, ficat, testicul, inimă, rinichi, limfocite, şi muşchii scheletici
(Síkela et al, 1993.). Pentru cercetare pentru a continua pe un front larg al biologiei moleculare umană şi
a mecanismelor de boală, există o nevoie urgentă de a reprezenta/marca atât fizic cât şi genetic aceste
numere mari de ESTs. Pentru cartografiere fizică, o metodă YAC şi FISH bazată pe două etape de
cartografiere cADN a fost propusă (Khan et al, 1992.). Conform cunoştinţelor noastre, nu a fost
raportată până acum nicio metodă eficientă pentru cartografierea genetică a EST. Markerii microsateliţi,
deşi foarte polimorfici, nu sunt de obicei găsiţi în secvenţele transcrise.S-a estimat că procentul de cADN
umane care ar putea fi transformat în markeri microsateliţi bazaţi pe CA este în intervalul de doar 1-2%
(Khan et al, 1992.).

EST generate din regiunea 3'-netradusă (3'-UT) sunt cele mai utile pentru detectarea polimorfismului
ADN-ului şipentru cartografierea genetică.Există două avantaje majore pentru utilizarea regiunii 3'-UT:
în primul rând, există o rată relativ mare a polimorfismului în regiunea 3'-UT comparativ cu secvenţele
exon, şi în al doilea rând, regiunea 3'-UT este relativ lungă şi nu este întreruptă de secvenţa de ADN
intronic care ar împiedica, de obicei, amplificarea ulterioare a genotipului din ADN-ului genomic.  Gradul
de variaţie genetică în regiunile 3'-UT a fost atent evaluat de Levitt (1991).  Douăzeci şi şapte de gene
cunoscute (sau cADN), care au fost eşalonate de două sau mai multe ori au fost analizate.  Douăzeci şi
patru dintre aceste secvenţe s-a descoperit că conţin unul sau mai multe polimorfisme din regiune 3-UT
care aveau o lungime medie de 600 bp. Acest nivel de variaţie a ADN-ului este similar cu datele din alte
studii. O analiză de opt haplotipuri pentru un segment de 9 kb a detectat un total de 18 polimorfisme, o
rată de 2 pe kb (Lucassen et al, 1993.).Secvenţierea directă a trei cosmids acoperind o regiune de 30- kb
a găsit o rată a polimorfismului de 2.3 pe 1 kb (McCombie et al, 1992.).  Pe scurt, rata medie a
polimorfismului ADN-ul este de cel puţin 1 din 400 -500 bp. Lungimea medie a regiunii 3'-UT în
secvenţele EST este de 350 - 400 pb (Khan et al, 1992.), prin urmare, de aproximativ un polimorfism ar
trebui să există în fiecare EST. Făcând estimarea mai conservatoare, în cazul în care se folosesc grunduri
cu un produs PCR de lungime medie de 250 pb, şi şansele de a avea un polimorfism a unei zone de
restricţie reală sau potenţială sunt de aproximativ 50%, în cazul general, atunci ar trebui să fie un
polimorfism dezvăluit în 27% din EST-urile examinate (lungimea fragmentelor ADN-ului analizat /
lungimea fragmentelor de ADN care conţin un polimorfism x gradul de acoperire al ADN-ului: 250 / 450 x
50% = 27%). Este rezonabil să împarţim pasul de digestie în două runde. Prima rundă de digestie pot fi
efectuată cu primele 15 enzime. Acest lucru ar trebui să acopere mai mult de 40% dintr-o secvenţă

20
"medie" ADN şi ar trebui să identifice mai mult de 70% din toate polimorfismele detectabile prin această
metodă. Dacă nu este identificat niciun RFLP, testarea restului de 15 enzime este indicată, şi aceasta
oferă o suplimentare de 15% de acoperire a unei secvenţă ADN la întâmplare. 

În cele din urmă, metoda noastră PCR-RFLP de detecţie poate fi, de asemenea, utilă în crearea de hartă
genetică a celei de-a treia generaţii, care va consta din polimorfisme bi-alelice de nucleotide singlare
(Wang et al, 1996.). Astfel de polimorfisme tradiţionale bi-alelice, acum convertite în formatul PCR, au
mai multe avantaje semnificative în comparaţie cu microsateliţii foarte informativi, dintre care cea mai
importantă este posibilitatea automată de notare, datorită naturii lor "da" sau "nu".

21

S-ar putea să vă placă și