Informații

tehnice

Partener exclusiv al în România

Banca de celule stem #1 în Marea Britanie
singura bancă din România care oferă toate metodele de procesare
a celulelor stem: TotiCyte, sânge integral, separare celulară
 Informaţii tehnice – TotiCyte
TotiCyte este un reactiv marcat CE utilizat pentru izolarea supernatantului leuco-trombocitar
(fracţia celulei stem) din sângele cordonului ombilical. TotiCyte păstrează 97% din celulele stem
hematopoietice post-procesare şi 63% din celulele stem hematopoietice post-decriogenare.
Acest lucru înseamnă că aceasta metoda recuperează de 2,1 ori mai multe celule stem post-de-
criogenare decât metoda de procesare a liderului în industrie.

Celulele stem izolate utilizând metoda TotiCyte au, de asemenea, o performanţă cu 20% mai
bună decât liderul în industrie în ceea ce privește capacitatea de multiplicare celulară (unităţi
formatoare de colonii sau UFC). UFC reprezintă modul în care clinicile medicale evaluează cât de
bine vor acţiona celulele stem în procedura de tratament.

Având în vedere atât numărul total al celulelor reţinute post-decriogenare, şi cât de bine se mul-
tiplică fiecare dintre aceste celule, TotiCyte obţine de 3 ori mai multe celule viabile care ar putea
fi folosite in cadrul unui eventual tratament, față de cazul în care ar fi fost folosite sistemele con-
curente din Marea Britanie.

Eficiență
Fig.1 Grafic comparativ privind gradul de recuperare a celulelor
CD34+ viabile post-procesare pentru metodele TotiCyte, liderii în
Am realizat un test intern al propriului nostru sistem şi a două sisteme industrie şi low-cost

utilizate de alte bănci private de sânge din cordonul ombilical din Mar- 100
ea Britanie. În scopul acestui studiu, am numit aceste sisteme „lider 90
în industrie” şi „low-cost”, pe baza pozițiilor lor actuale pe piaţă în 80
industria globală de procesare a sângelui. 70
60
Toate experimentele au fost realizate conform protocoalelor pro- 50
ducătorilor de către tehnicieni instruiţi de producătorii fiecărui sistem. 40
30
Recuperarea celulelor 20
96.9%

89.8%

87.6%

pre- şi post-decriogenare 10
0
TotiCyte Lider de piață Variantă low-cost
• CD34+ este markerul pentru celulele stem hematopoietice,
care sunt celulele utilizate în prezent în terapiile cu sânge din post-procesare
cordonul ombilical.
• Post-procesare înseamnă numărul de celule viabile care
rămân într-o probă după ce a fost procesată, însă înainte de Fig. 2 Grafic comparativ privind gradul de recuperare a celulelor
CD34+ viabile post-decriogenare pentru metodele TotiCyte, liderii
criogenare. în industrie şi low-cost
• Post-criogenare înseamnă numărul de celule viabile care
60
rămân după ce o probă a fost procesată, criogenată şi apoi
decriogenată. 50

Tabelul 1. Recuperarea de celule CD34+ viabile post-procesare şi post-decriogenare pentru 40

TotiCyte, sistemele lider în industrie şi low-cost
30
Medie celule CD34+ viabile
20
Post-procesare Post-decriogenare
63.2%

29.8%

26.0%

TotiCyte 96,9% 63,2% 10

Lider în industrie 89,8% 29,8% 0

TotiCyte Lider de piață Variantă low-cost
Low-cost 87,6% 26,0%
post-decriogenare
Tabelul 2. Creştere a gradului de recuperare a celulelor CD34+ viabile post-de-
criogenare atunci când probele sunt procesate utilizând TotiCyte în comparaţie
cu probele procesate utilizând sistemele lider în industrie şi low-cost. A fost apl-
icat un nivel de încredere de 95% pentru a ilustra, sub forma unui multiplicator,
potențialul de creştere a performanței care s-ar putea obţine folosind TotiCyte.
Lider în industrie Low-cost
Multiplicator creștere
post-decriogenare folosind 2,1 2,4
TotiCyte (medie)
Nivel de încredere 95% 1,6-2,9 1,8-3,5
TotiCyte depăşeşte performanţa atât a liderului în in-
dustrie cât şi a sistemului low-cost post-procesare,
obţinând cu 8% mai multe celule CD34+ viabile decât
liderul în industrie şi cu 9% mai multe celule CD34+
viabile decât sistemul low-cost.
Cu toate acestea, cea mai evidenta diferenta se ob-
serva la masurarea gradului de recuperare a celule-
lor ulterior decriogenarii, adica numărand celulele
pe care proba l-ar conţine când ar fi utilizată intr-un
tratament. Sistemul low-cost pierde peste 74% din
celulele CD34+ viabile şi liderul în industrie pierde
peste 70%. TotiCyte recuperează cel mai mare număr
de celule CD34+ post-decriogenare, pierzand doar
36.8%, restul de 63.2% de celule viabile fiind recu-
perate. In etapa de normalizare in vederea începerii
pre-procesării viabilităţii pozitive a celulelor CD34+,
TotiCyte recuperează de 2,1 ori mai multe celule via-
bile post-decriogenare decât liderul în industrie şi de
2,4 ori mai multe decât sistemul low-cost.
Cu un nivel de încredere de 95%, comparând cea mai
redusă performanță a TotiCyte cu cea mai mare per-
formanţă a celorlalte două sisteme, TotiCyte obţine de
1,6-2,9 ori mai multe celule CD34+ viabile post-decri-
ogenare decât sistemul lider în industrie, şi de 1,8-3,5
ori mai multe celule CD34+ viabile post-decriogenare
decât opţiunea low-cost.
Creşterea UFC
De asemenea, am comparat TotiCyte cu liderul în
industrie şi sistemul low-cost pentru creşterea UFC.
UFC reprezintă unitatea formatoare de colonii şi este
un indicator pentru cat de bine se divizează si se mul-
tiplica celulele. Creşterea UFC este cel mai bun indi-
cator al modului în care celulele stem vor acționa în
cadrul tratamentului; cu cât cresc mai bine, cu atât
mai eficiente vor fi. Acesta este testul standard de aur
utilizat de clinicile de tratament pentru a măsura cali-
tatea celulelor recuperate.(1)
Tabelul 3. Creşterea unităţilor formatoare de colonii per celulă CD34+ atunci
când sunt puse pe placă, în cazul TotiCyte, liderul în industrie şi sistemul
low-cost
TotiCyte Lider în industrie Low-cost
Creşterea UFC (medie) 0,74 0,61 0,55
În condiții identice, celulele izolate utilizând TotiCyte
cresc în medie cu 20% mai mult decât cele procesate
utilizând sistemele lider în industrie şi low-cost.
Tabelul 2. Creşterea totală a numărului de CD34+ atunci când se ia în con-
siderare atât recuperarea celulelor CD34+ viabile post-decriogenare cât şi
creşterea UFC a celulelor recuperate când probele sunt procesate utilizând
TotiCyte, comparativ cu probele procesate utilizând sistemul lider în industrie şi
low-cost. Nivelul de încredere de 95% a fost aplicat pentru a calcula intervalul
creşterii potențiale în cazul utilizării TotiCyte.
Creşterea TotiCyte vs. liderul în industrie
(comparaţie post-decriogenare + UFC) 2,5
Nivel de încredere 95% 1,4-5,3
Creşterea TotiCyte vs. sistemul low-cost
(comparaţie post-decriogenare + UFC) 3,3
Nivel de încredere 95% 1,7-18,5
Metoda de funcționare
Când este adăugat la sângele din cordonul ombilical
în raport de 1:1, TotiCyte determină eritrocitele (glob-
ulele roşii) sa alunece si sa se cada la baza probei.
Celulele albe rămân suspendate în plasmă, care este
apoi transferata într-o pungă separată. Acest lucru
permite eliminarea a peste 90% din globulele roşii
reziduale, cu o pierdere minimă de celule albe. Plas-
ma este apoi centrifugată la viteză mică pentru a izola
supernatantul leuco-trombocitar şi a reduce volumul
de stocare până la 25ml. Se pare că viteza mică de
rotire pe centrifugare este răspunzătore pentru nivelul
superior de recuperarea a celulelor şi pentru creşterea
UFC post-decriogenare.
Siguranță
TotiCyte este pregătit din soluţii cu concentraţii mici
transfuzate în mod obişnuit în terapia cu sânge.
Concentraţia finală a DMSO (dimetilsulfoxid) într-o
probă procesată utilizând TotiCyte este de 7,5%.
Concentraţia finală din probele procesate utilizând
toate celelalte metode este între 10% şi 12%. Aceste
nivele ale DMSO sunt transfuzate în mod obişnuit pa-
cienţilor ca parte a transfuziei de sânge ombilical.(2)
Concentraţia finală de Dextran în TotiCyte este de
1,25%. Această concentraţie de Dextran este trans-
fuzată în mod obişnuit pacienților fără efect advers.(3)
Sarea fosfatică tamponată este de asemenea trans-
fuzată în mod obişnuit pacienţilor fără efect advers.(4)
Majoritatea clinicilor de tratament utilizează un proto-
col de spălare, însemnând că nu vor exista reziduuri
de DMSO sau Dextran în proba de sânge ombilical în
momentul tratamentului.(5)
 Materii prime: Certificări:
• PBS 95% • Marcat CE
• Dextran 2,5% • ISO13485
• DMSO 2,5% • Autorizat de HTA

Referințe
(1) Page et al., 2011. Total Colony-Forming Units are a strong, independent predictor of neutrophil and platelet engraftment
after unrelated umbilical cord blood transplantation: a single center analysis of 435 cord blood transplants. Biology of Blood
and Marrow Transplantation: Vol.17 (9), 1362-74.
(2) Fry et al, 2015. Assessing the toxic effects of DMSO on cord blood to determine exposure time limits and the optimum
concentration for cryopreservation. International Society of Blood Transfusion: Vol. 109 (2), 181-90.
(3) National Center for Biotechnology Information. PubChem Compound Database; CID=105075, https://pubchem.ncbi.
nlm.nih.gov/compound/105075 (accessed Nov. 28, 2017).
(4) Annual Reports in Medicinal Chemistry, Volume 43 Academic Press, 17 Dec 2008.
(5) Nagamura-Inoue et al., 2003. Wash-out of DMSO does not improve the speed of engraftment of cord blood transplan-
tation: follow-up of 46 adult patients with units shipped from a single cord blood bank, Transfusion Vol 43: 1285-94.

Partener exclusiv al în România

Banca de celule stem #1 în Marea Britanie
singura bancă din România care oferă toate metodele de procesare
a celulelor stem: TotiCyte, sânge integral, separare celulară

Tel: 0310 056 000

Fax: 0314 215 750
Mobil: 0748 064 968
0799 666 353
0727 749 249
0727 845 123
E-mail: office@babystem.ro
Web: www.babystem.ro

Baby Stem Cells SRL - Strada George Valentin Bibescu, numărul 20, sector 1, București, România
Cells4Life - Units 2&3 Oak House, Woodlands Office Park, Albert Drive, Burges Hill, RH15 9TN, UK