Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
AMIDONUL DETERIORAT
( structura granulei de amidon, compozitie globala, factori care
influenteaza deteriorarea amidonului, implicatiile tehnologice
ale amidonului deteriorat, metode de determinare)
Structura chimica
Amidonul este un amestec de doi polimeri cu structuri primare diferite:
Amiloza – cu structura liniara
Amilopectina – cu structura ramificata
Elementele de constructie le reprezinta moleculele de glucoza legate glicozidic, in
principal -1,4 in procent de 95-96% si legaturi -1,6 glicozidice in proportie de 4-5%.
Cele doua componente se afla in procente diferite: amiloza – 17-27%, amilopectina –
83-73%.
Amiloza este formata din resturi de -D-glucopiranoza legate 1-4 intr-un lant liniar.
Molecula de amiloza are 500-6000 unitati glucozil repartizate pe mai multe lanturi (1-20)
cu un grad de polimerizare (GP) mediu de 500. Masa moleculara a amilozei variaza intre
105-106. O dovada a liniaritatii amilozei este hidroliza completa a acesteia cu -amilaza.
Aceasta enzima desface legaturile 1-4 de la capatul nereducator al catenei, eliberand
unitati de -maltoza, dar nu poate trece peste legaturile 1-6. La hidroliza 90% din
macromolecule sunt convertite la maltoza restul fiind dextrine limita formate din resturi
-D-glucopiranoza legate 1-4 cuprinse intre legaturi 1-6 existente in capetele dextrinei.
Amilopectina este componentul puternic ramificat al amidonului format din resturi de
-D-glucopiranoza cuplate in principal prin legaturi -1,4 si legaturi de ramificatie -1,6
in proportie de 5-6%. Este compusa din lanturi de trei tipuri dupa gradul de polimerizare:
- Lanturi scurte – GP=15-20 (S)
- Lanturi lungi – GP=40-45 (L)
- Lanturi cu grad mare de polimerizare – GP>60
1
AMIDONUL DETERIORAT
-amilaza – este o endoenzima, se afla in cantitati reduse, rupe legaturile -1,4 dar nu
ataca legaturile terminale.
Microstructura
In cadrul procesului de biosinteza, amiloza si amilopectina sunt depuse sub forma de
entitati (granule) semicristaline, ale caror dimensiuni, morfologie si pozitie a hilului
(central sau excentric) sunt controlate genetic.
2
AMIDONUL DETERIORAT
3
AMIDONUL DETERIORAT
4
AMIDONUL DETERIORAT
5
AMIDONUL DETERIORAT
Metode de determinare
1. Metoda directa (Kaminski)
Calculul este corelat cu valoarea capacitatii de zaharificare si se bazezza pe coloratia
suspensiei de faina cu:
- Sofranina-0 (M=350) care patrunde in granula de amidon nedeteriorat si-l
coloreaza in roz.
- Albastru de niagara-4B (M=992) coloreaza in albastru granulele de amidon
deteriorate.
In campul vizual al preparatului microscopic pe fundalul roz pot fi numarategranulele
de amidon deteriorate in comparatie cu continutul total de granule de amidon.
2. Metoda cantitativa (Hampel)
Se determina intensitatea de colorare cu o solutie de iod a amilozei extrase din
amidonul deteriorat. Valoarea indicelui amilazic – indicele de albastrire variaza cu gradul
de deteriorare (deoarece amiloza din granulele nedeteriorate nu trece in solutie).
3. Metoda colorimetrica (Williams, Fegol)
Se extrage amiloza din faina cu un reactiv special si se precipita proteinele (solutii de
formaldehida cu acid sulfosalicilic), =15min, t=500C. Dupa filtrare si tratare cu solutie
de iod se determina spectrofotometric culoarea absorbita la o lungime de unda =555nm.
Valoarea densitatii optice da o reproducere asupra gradului de deteriorare a
amidonului.
4. Metoda amperometrica (Medcalf)
Determinarea cantitatii de iod absorbita de granulele de amidon deteriorat folosind o
solutie de iod excedentar si determinarea iodului ramas prin titrare amperometrica.
Cantitatea de amidon deteriorat se calculeaza cu relatia:
%AD=0.41(IAI-28) , (IAI=indicele de absorbtie a iodului)
5. Metoda Greer, Stewart
Studiaza interdepenenta dintre amidonul deteriorat si calitatea fainii, gradul de
deteriorare fiind apreciat dupa cantitatea de maltoza care se formeaza sub actiunea
preparatelor de β-amilaze din grau.
6. Metoda Sandsted, Mattern
Similara cu metoda anterioara, dar hidroliza suspensiei de faina se face cu extract de
-amialza (din malt).
Fericianura de potasiu fiind redusa la ferocianura in mediu alcalin la dozarea maltozei
formate.
6
AMIDONUL DETERIORAT
Amidonul deteriorat apare ca o diferenta dintre valoarea maltozei din faina inactiva si
valoarea maltozei dupa adaosul de -amilaza.
8. Metoda Farrand
Consta in hidroliza unei suspensii de faina cu extract de -amilaza si dozarea
maltozei (IM).
AD=(IM-3.5)6
9. Metoda Audidier
Pentru evidentierea celei mai rationale metode de determinare a gradului de
deteriorare s-a stabilit cinetica hidrolizei amidonului nativ si a amidonului deteriorat sub
actiunea preparatelor bacteriene (-amilaza la 300C).
Se disting 2 faze:
- Faza de crestere rapida a vitezei de hidroliza
- Faza de viteza constanta
Deoarece hidroliza amidonului nativ decurge incet, cantitatea de maltoza formata in
prima faza este in concordanta cu cantitatea de amidon deteriorat.
10. Metoda polarimetrica – Chiang
Se determina polarimetric amidonul in CaCl2 – amidonul fisurat fiind hidrolizat mai
usor de -amilaza decat cel nativ.
11. Metoda Gibbson
Hidroliza amidonului din faina de un sistem enzimatic KIT (-
amilaza,amiloglucozidaza, glucoz-oxidaza-peroxidaza + un reactiv tampon concentrat).
Dozarea glucidelor
Metode fizice:
Areometrica
Refractometrica
*Polarimetrica – solubilizare cu HCl, solubilizare cu CaCl2
Zaharimetrica
7
AMIDONUL DETERIORAT
Metode chimice:
Schoorl
Dozarea celulozei
Bertrand
Dozarea iodometrica a glucozei
Dozarea zaharozei
*Dozarea amidonului din produsele alimentare
Dozarea colorimetrica a glucidelor – reactia cu fenol, reactia cu fericianura
de potasiu, reactia cu acid 3,5 dinitrosalicilic
Determinarea acidului glucuronic – colorimetric
*Dozarea amidonuluipolarimetric:
- Amidonul solubilizat cu HCl la rece 30 minute prezinta o deviatie specifica in functie
de provenienta, astfel: porumb +2020, grau +1830, orz +1810, orez +1850, secara +1840.
(2g produs + 10ml apa) + 20ml HCl / d=1.19, repaus 30minute, se trece intr-un balon de
100ml + 30ml HCl / d=1.125 + 5ml fosfowolframat de sodiu (pentru defecare –
precipitarea substantelor optic active) se aduce la semn cu apa filtrare analiza
polarimetrica.
100 100
Continutul de amidon A%=
l D M
= unghiul citit la polarimetru
M= masa de produs luata in analiza, g
l= lungimea tubului, dm
[]D20 = deviatia specifica amidonului
- Amidonul este solubilizat cu CaCl2 (d=1.3, pH=2) la fierbere timp de 30 minute. In
functie decontinutul in amidon solutia roteste planul luminii polarizate cu un unghi .
(2g proba + 10ml sol. HgCl2) agitare 2min filtrare, spalare + 10ml HgCl2 , filtrul cu
proba se introduce intr-un pahar de 250ml si se adauga 10ml apa, se destrama, se adauga
60ml CaCl2 se aduce la fierbere 5min-30min. Se mentine nivelul constant cu apa
distilta. Se raceste, se adauga SnCl2 pentru defecare balon de 100ml, se aduce la semn
cu CaCl2 filtrare. Filtratul se analizeaza la polarimetru – unghiul de rotatie. Formula
este aceeasi.
*Dozarea amidonului din produsele alimentare
Se hidrolizeaza amidonul in mediu acid/cald iar glucoza rezultata se dozeaza conform
det. glucidelor reducatoare.
(C6H10O5)n + (n-1)H2O n C6H12O6
HCl
(2g proba + 50mlHCl d=1.125) baie de apa la fierbere. Se fierbe 30minute racire
balon 100ml +ml HCl / d=1.19 + 4ml fosfowolframat de sodiu semn apa distilata
filtrare. Din filtrat – 20ml – balon cotat 100ml + 20ml apa se neutarlizeaza cu NaOH in
prezenta fenolftaleinei. Dupa racire se aduce la semn. Din solutie se iau 10-20ml – se
determina glucoza.
Din reactie rezulta:
180g glucoza--------------162g amidon
1g glucoza --------------x x =162 / 180 =0.9g
Functie de: cantitatea de glucoza determinata, dilutie, relatia amidon-glucoza, se
calculeaza cantitatea din 100g produs.
8
AMIDONUL DETERIORAT
9
AMIDONUL DETERIORAT
10
AMIDONUL DETERIORAT
Obtinerea unei proportii mari de amidon deteriorat poate duce la scaderea calitatii
fainii.
11