Testul PCR – ce este si pentru ce se

utilizeaza

Testul PCR reprezinta o metoda diagnostica extrem de utila si de uz larg in practica medicala.
Principiul investigatiei se bazeaza pe preluarea unei probe biologice in care se poate afla un
patogen de interes sau o celula neoplazica si identificarea secventei ADN sau ARN
corespunzatoare in proba respectiva. Datorita procentelor mari de sensibilitate si specificitate,
acest test este de electie in procesul diagnostic al unei patologii infectioase sau neoplazice.

Afla, in cele ce urmeaza, ce este, mai exact, testul PCR, cum se recolteaza, ce semnifica un
rezultat pozitiv si ce fel de pregatire este necesara in prealabil.
  Ce este testul PCR si pentru ce se utilizeaza
 Cum se recolteaza testul PCR si ce pregatire este necesara in prealabil
 Ce presupune un test PCR
 Ce semnifica rezultatele testului PCR

Ce este testul PCR si pentru ce se utilizeaza

Denumirea de test PCR provine de la Polymerase Chain Reaction si semnifica metoda
diagnostica de mare precizie prin care este izolat si identificat un patogen sau o celula
neoplazica, in functie de prezenta unei secvente specifice de ADN sau ARN.

 ADN-ul – reprezinta materialul genetic al unui patogen sau celule neoplazice si detine
toate informatiile necesare pentru supravietuirea si multiplicarea acestora;
 ARN-ul – reprezinta un alt tip de material genetic, intalnit in special in cazul
virusurilor, care detine informatii despre sinteza proteinelor provenite de la ADN.

Cu toate ca testul PCR poate fi folosit pentru identificarea mai multor tipuri de
microorganisme (de exemplu, bacterii) sau celule neoplazice, acest test diagnostic este cel mai
util in infectiile virale, prin izolarea ADN-ului sau ARN-ului viral.

Motivul pentru care acest test diagnostic este de prima intentie este datorat acuratetii sale si
abilitatii de a identifica ADN-ul sau ARN-ul viral chiar si in lipsa unei cantitati virale
suficiente cat sa produca o simptomatologie vizibila sau sa fie depistata de catre alte
investigatii. De asemenea, testul PCR este capabil sa identifice prezenta patogenului chiar si
inaintea momentului producerii unui titru de anticorpi detectabil.

Exista mai multe tipuri de teste PCR:

 Test PCR simplu sau real time PCR – reprezinta metoda clasica de identificare a
secventei de ADN;
 Test rtPCR – folosit in special in cazul unui virus ARN, unde este necesara copierea
secventei ARN in una ADN inainte de inceperea testului propriu-zis;
 Test qPCR (cantitativ) – are particularitatea ca poate evidentia numarul de patogeni
din proba.

Cum se recolteaza testul PCR si ce pregatire este necesara

in prealabil
Testul PCR este, in general, o investigatie diagnostica ce presupune un grad mic de disconfort
pentru pacienti, fiind destul de usor acceptata.

Primul pas este cel de prelevare a probei biologice, in general, din sange, saliva sau mucus,
dar si dintr-o zona de tesut afectat.

 Pentru proba de sange – recoltarea este realizata de catre un asistent, prin inteparea
unei vene superficiale si extragerea unei cantitati suficiente de sange in eprubeta;
 Pentru proba din saliva si/sau mucus – se foloseste un tampon de recoltare, cu ajutorul
caruia se va lua o cantitate mica de saliva (de la nivelul cavitatii bucale sau din
 retrofaringe) sau de mucus (din nazofaringe sau de la nivelul zonei anterioare a foselor
nazale).

Odata ce proba a fost recoltata, aceasta este trimisa cat mai curand posibil catre laborator, cu
scopul izolarii si identificarii patogenului sau celulei neoplazice.

Nu exista o pregatire speciala din partea pacientului inainte de recoltarea unei probe pentru
testul PCR, indiferent daca acesta se realizeaza din sange, saliva sau mucus. Principalele
efecte adverse care pot aparea ca urmare a recoltarii probei pot fi de tipul:

 Echimozelor (vanatailor) – ca urmare a punctiei venoase efectuate pentru recoltarea

sangelui;
 Tuse sau stranut – in timpul recoltarii cu tamponul la nivel nazal sau nazofaringian;
 Senzatia de varsatura – in timpul recoltarii cu tamponul la nivel retrofaringian.

Ce presupune un test PCR

Testul PCR se bazeaza pe principiul identificarii ADN-ului sau ARN-ului unui patogen sau,
in unele cazuri, a unei celule potential neoplazice.

Pentru a se putea realiza un test PCR, este nevoie de o proba biologica din care pot fi izolate
secvente ale ADN-ului sau ARN-ului (deci sa contina ADN sau ARN). Astfel, in functie de
caz, se va folosi saliva, sange, mucus sau tesut afectat. Este important sa se preia proba tinand
cont de locul in care s-ar putea afla patogenul (de exemplu, in cazul COVID-19, din spatiile
retrofaringian si nazal).
Odata ce proba a fost recoltata, aceasta va fi transportata catre laborator. Prin intermediul unei
masinarii numite termociclator si cu ajutorul unor enzime si componenti chimici specifici,
secventa de ADN de interes, in cazul in care este prezenta, este amplificata de multe ori,
rezultand, astfel, milioane de copii. Daca rezultatul este pozitiv, copiile din tubul de testare
vor produce o lumina fluorescenta. Motivul pentru care se fac toate aceste copii este de a
putea amplifica suficient de mult semnalul luminos si de a avea un rezultat cat mai clar.

In cazul in care proba de interes contine un patogen (in general, virus) ce prezinta ARN in loc
de ADN, este necesar ca, inaintea inceperii procesului de producere a copiilor, acel ARN sa
fie transpus in ADN. Acest proces poarta denumirea de rtPCR (reverse transcriptase PCR) si
nu trebuie confundat cu RT-PCR (real time PCR).