Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Llorente, Lucía
Parsons, Ágata
Suarez, Tamara
Materiales
.Placa de Petri limpia y desengrasada
.Pipetas de plástico de 5 ml
.Propipetas
.Pipetas Pasteur
.Tips
.Frasco Elenmeyer
.Cámara húmeda
.Agar al 2%
.Buffer Fosfato Salino (PBS 1 %)
.Reactivos (sueros y antígenos)
Muestras: Se utilizó suero puro bovino, y diluciones de 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32 de este
mismo y un antisuero bovino.
Metodología:
2) Preparación del gel la placa de Petri: se coloca sobre la placa5 ml de agar utilizando una
pipeta, distribuyendo el mismo homogéneamente el volumen en la placa, dejando reposar
hasta su completa solidificación.
1
3) Perforación del Gel: se realiza según el modelo siguiente
A: Patrón
B: Dilución 1:2
C: Dilución 1:4
D: Dilución 1:8
E: Dilución 1:16
F: Dilución 1:32
G: Antisuero Bovino
4) Preparación de los Reactivos: se realiza una dilución seriada en base 2 del suero,
partiendo de la muestra de suero puro, usando como diluyente el PBS ( Buffer Fosfato
Salino), las cantidad de diluciones a realizar son acordes al número de perforaciones que
posea el modelo seleccionado, para el presente trabajo se utilizan diluciones 1:2 ; 1:4 ; 1:8 ;
1:16 ; 1:32 .
2
DILUCIONES
Objetivo:
Disminuir la concentración de un soluto en una solución, con el fin de ser utilizado en
distintas pruebas semi cuantitativas.
Procedimiento
Muestras: Colorante en representación del suero.
Materiales necesarios:
Colorante (en representación del suero)
Agua destilada (en representación de solución salina o medio de cultivo)
Pipetas
Propipetas de tres vías con válvulas
Tubos
Gradillas
Vaso descartador
Metodología:
a) Realizar una dilución 1:10 a partir del suero puro. A partir de esta primera dilución,
efectuar cinco diluciones en base 2 (Volumen necesario: 3 ml).
b) Realizar una dilución 1:2 a partir de un suero puro. A partir de esta dilución (1:2),
efectuar cinco diluciones en base 10 (Volumen necesario: 9 ml).
a)
b)
3
Cuestionario:
3. Para la técnica de ELISA necesito realizar la dilución del anticuerpo conjugado con
peroxidasa. La dilución de trabajo es 1:1500. Quiero preparar 3 ml ¿Cómo podría
realizar esa dilución utilizando la menor cantidad de conjugado posible?
4
Cuestionario