Factori aditivi

În comparație cu metodele discutate anterior, influențarea celulelor stem către o anumită

descendență prin adăugarea de factori de creștere, substanțe chimice și alte substanțe la
bioink este abordarea cea mai simplă. Seamănă cel mai mult cu strategiile tradiționale de
inginerie a țesuturilor pentru manipularea sorții celulelor stem. Aceste substanțe pot fi incluse
ca o componentă a bioink înainte de imprimare sau pot fi adăugate în țesutul imprimat înainte
de o perioadă suplimentară de maturare.75 Acești aditivi pot influența în mod direct
diferențierea celulelor stem sau pot afecta mai indirect diferențierea prin modificarea
funcțiilor, ar fi transportul, mișcarea celulelor și atașarea. Exemple de factori de creștere
utilizați în bioimprimare includ FGF, PDGF, proteine morfogenetice osoaseși altele care au
fost bine investigate în aplicațiile tradiționale de inginerie tisulară.76Alte substanțe care au fost
utilizate pentru a induce diferențierea celulelor stem în bioimprimare includ dexametazona,
acidul ascorbicși rosiglitazona. 77, 78
Microcarrele, o clasă separată de aditivi, și-au arătat recent promisiunea de a afecta
diferențierea celulelor stem în aplicațiile de bioimprimare. Acestea sunt sfere polimerice mici
care s-au dovedit a promova diferențierea atunci când sunt adăugate la bioink prin furnizarea
unei surse de aderență și atașare.79 Disponibilă în mai multe dimensiuni diferite, de obicei sub
300 μm diametru, dimensiunea poate fi variată pentru diferite țesuturi țintă.80 Beneficiile
suplimentare includ capacitatea de a rigidizarea schelei prin alegerea microcarrierului ca o
influență suplimentară asupra diferențierii celulelor stem. 79, 80

Limitări
Materiale și producție

Un aspect critic al bioimprimării cu succes a țesutului util clinic va fi selectarea

biomaterialelor optime. Mulți polimeri din imprimarea 3D convențională și ingineria
tradițională a țesuturilor au fost studiați în bioimprimare datorită disponibilității și experienței
anterioare cu aceste materiale. Cu toate acestea, aceste materiale nu sunt cele mai adecvate
din punct de vedere biologic în aplicațiile de bioimprimare.81 După sa discutat, multe dintre
acestea sunt prea biologic active, provocând interacțiuni celulare nedorite și diferențiere
prematură sau nedorită a celulelor stem.82Accentul se îndreaptă acum către biopolimeri și
hidrogeluri noi care imită mai adecvat caracteristicile nanostructurale și capacitatea de reacție
a ECM și a altor componente ale micromediului țesutului nativ. 81, 83 Cu toate acestea,
aceste hidrogeluri și biopolimeri noi, mai biocompatibili, nu sunt întotdeauna adecvate cu
metodele convenționale de bioimprimare. Multe dintre acestea nu au integritatea structurală
necesară pentru bioimprimarea optimă și se pot prăbuși dacă sunt prea
moi. 81, 84 Optimizarea microarhitecturii acestor biopolimeri este un domeniu de cercetare
activă. O abordare promițătoare implică combinarea substanțelor pentru a maximiza utilitatea
fiecăreia, proprietățile mecanice ale unei substanțe ferme cu efectele proliferative și cito-
incompatibile ale unei substanțe mai moi.2 Atala și colegii săi, de exemplu, utilizează o
"imprimantă integrată de organe de țesut" pentru a include polimeri fermi într-o schelă moale
hidrogel care conține celule progenitoare. 2, 38, 85 Ei au fost capabili să includă cu
succes fosfat tricalcic într-o gelatină și bioink acid hialuronic pentru bioimprimarea oaselor.
În general, eficiența procesului de bioimprimare trebuie îmbunătățită. Procesul actual de
bioimprimare este consumatoare de timp și nu are în prezent capacitatea de a livra în mod
constant numărul de celule necesare pentru multe tipuri de țesuturi.2După sa discutat anterior,
forțele mecanice impuse de procesul de imprimare duc adesea la modificarea geometriei
celulelor, la modificarea căilor de semnalizareși chiar la moartea celulelor. 86, 87 Având în
vedere eforturile extraordinare care intră în fiecare proiect de bioimprimare, este necesară o
eficiență mai mare în ceea ce privește distrugerea și pierderea celulelor. O parte a soluției va
include îmbunătățirea metodelor utilizate pentru monitorizarea și evaluarea gradului de
distrugere a celulelor.

Vascularizație

Poate că cea mai mare provocare pentru traducerea bioimprimării în laborator în crearea de
țesuturi funcționale implică crearea de rețele vasculare. Fără conducte adecvate pentru
livrarea nutrienților și eliminarea deșeurilor, țesuturile de o complexitate chiar minoră nu vor
putea supraviețui.
 In vivo, este necesară o rețea vasculară pentru ca țesuturile să crească dincolo de 100-200
μm, deoarece aceasta este limita de difuzie a oxigenului.88 Fără o rețea vasculară, țesuturile
proiectate vor avea limitări nutritive care duc la formarea incompletă a țesuturilor sau
necroză.89
Pentru a peria în mod adecvat țesuturile bioimprimate, o rețea vasculară trebuie să fie
prezentă într-un stadiu de dezvoltare suficient de timpuriu pentru a preveni moartea
țesuturilor și pentru a permite atașarea și creșterea endoteliului. Pe măsură ce dezvoltarea
apare, structurile vasculare trebuie să-și asume toate rolurile care apar în dezvoltarea normală,
inclusiv menținerea unei bariere selective pentru deșeuri și nutrienți, precum și participarea la
reacții inflamatorii, coagulare și alte funcții homeostatice.90
Provocările actuale la bioimprimarea vasculaturii se datorează în mare parte limitărilor
rezoluției și vitezei de imprimare. Capilarele, de exemplu, pot avea un diametru de până la 3
μm,91 în timp ce bioimprimatoarele pe bază de laser cu cea mai mare rezoluție utilizează în
prezent o dimensiune a picăturii de 20 μm.92 Chiar dacă rezoluția de imprimare este
îmbunătățită în măsura în care ar putea fi imprimată o rețea complexă de capilare, timpul
necesar cu tehnologia disponibilă în prezent ar fi prohibitiv. Dacă imprimarea nu a putut fi
finalizată în timp util, viabilitatea celulară poate fi compromisă.1
Având în vedere aceste provocări, au fost luate în considerare mai multe soluții. Una dintre
cele mai promițătoare implică încercări de a proiecta vascularizațiai n vivo prin încorporarea
factorilor de creștere angiogenici în bioincuri pentru a încuraja creșterea vasculaturii gazdă
după implantarea țesutului bioimprimat. 93, 94 În ciuda rezultatelor încurajatoare, această
strategie are nevoie de rafinament. Alternativ, s-au făcut încercări de a forma rețele vasculare
de origine sintetică.95 Deși a existat un oarecare succes în bioimprimarea vaselor cu diametru
mai mare, grefele vasculare de calibru mic, de calibru sintetic, de mai puțin de 5 mm, au
demonstrat rate scăzute de permeabilitate și nu sunt în prezent o opțiune realistă.96 Din păcate,
problema fundamentală a dezvoltării vasculaturii mature, funcționale în timp util pentru a
preveni moartea țesuturilor și pentru a sprijini dezvoltarea dorită a țesutului nu a fost încă
depășită.

concluzie
Încă de la începuturile sale, bioimprimarea 3D a făcut progrese mari în direcția obiectivului
imprimării funcționale a țesuturilor. În ciuda provocărilor, această perioadă timpurie a
anchetei s-a dovedit în mod clar a fi demnă de investigarea în curs. Va fi nevoie de mai mult
timp, efort și expertiză multidisciplinară pentru a îndeplini potențialul clinic pentru această
tehnologie, dar viitorul este luminos. Bioimprimarea este gata să joace un rol cheie în
medicina regenerativă personalizată.