Universidade Federal de Pernambuco

Centro de Tecnologia e Geociências

Depto de Engenharia Química

Aminoácidos e Proteínas

Maria de los Angeles Perez F. Palha

Maria Alice G. de Andrade Lima
Sônia S. Melo C. de Albuquerque

Recife
1999

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 AMI-OÁCIDOS

1.Definição: São compostos orgânicos que se caracterizam por apresentarem

um grupamento carboxílico - COO−, um grupamento amínico -
NH3+ e um grupamento R de estrutura variável, ligados a um
mesmo carbono.

2.Fórmula geral:
O
//
R − CH − COO− ou R − CH − C
 α  α \
NH3 NH2 OH
+

Analisando-se a matéria seca da maioria das células, observa-se que

50% dessa matéria e´composta de proteínas. Por sua vez, as proteínas
são polímeros constituídos por amino ácidos, unidos entre si pelas
chamadas ligações peptídicas..

O H COOH H O R’
//    || 
R _ CH − C + N − C H  > R − C − C − N − C − COOH
α \    
N H2 OH H R’ NH2 H

Só os L-aminoácidos são encontrados nas proteínas. Alguns D- aminoácidos

são encontrados na natureza porém nunca foram encontrados em proteínas,
fazem parte de alguns antibióticos como a D- fenilalanina na Gramicidina S.

São 20 os aminoácidos naturais considerados unidades fundamentais

das proteínas e estes podem classificar-se de acordo com diferentes critérios:
com relação a polaridade do grupo R, de acordo com o número de grupos
amínicos, número de carboxilas, com relação a natureza química do grupo R,

2
etc. Adotaremos a classificação dos aminoácidos de acordo coma
polaridade dos grupos R.

3.Classificação dos aminoácidos de acordo com a polaridade dos grupos R.

3.1 Aminoácidos com grupos R apolares ou hidrofóbicos

Características: são pouco solúveis em H2O . O menos hidrofóbico é
alanina.

CH3
1) H 2) \
 CH − CH − COOH
CH3 − C − COOH / 
 CH3 NH2
NH2)
alanina (Ala) Valina (Val) *

3) CH3 4) H2C − CH2

\  
CH − CH2 − CH − COOH H2 C C − COOH
/  Leucina (Leu)* \ / \
CH3 NH2 N+ H
/ \
H H Prolina (Pro)

5) CH3 6) − CH2 − CH − COOH

\ 
CH − CH − CH − COOH NH2
   Isoleucina (Ile)*
H CH3 NH2 Fenilalanina (Phe)*

3
7) − C − CH 2 − CH − COOH
 
C NH2
NH H
Tripófano (Trp)*

8) CH3 − S − CH2 − CH2 − CH − COOH

Metionina (Met) * 
NH2
3.2 Aminoácidos com grupos R polares não carregados
Características: são mais solúveis em H2O . Isto porque contêm
grupos funcionais que formam pontes de hidroênio com a água.

1) HO − CH2 − CH −COOH 2) CH − CH − CH − COOH

|  
NH2 OH NH2
Serina (Ser) Treonina (Thr)*

3)
HO − − CH2 − CH − COOH Tirosina (Tyr)

NH2

4) H − S − CH2 − CH − COOH
 Cisteína (Cys)
NH2

4
5) H2C −COOH 6) O = C − CH2 − CH − COOH
| Glicina (Gly ) | | Asparagina(Asn)
NH3 NH2 NH2

7) O = C − CH2 − CH2 − CH − COOH

| | Glutamina ( Gln)
NH2 NH2

3.3- Aminoácidos com radical R carregados negativamente

1) OOC− CH2 − CH − COOH

--
Ac. Aspártico (Asp)
|
NH2

2) --
OOC − CH2 − CH2 −CH − COOH Ac. Glutâmico (Glu)
|
NH2

3.4- Aminoácidos com radical R carregados positivamente

1) H3N+− CH2 − CH2 − CH2 − CH2 −CH − COOH Lisina (Lys)*

|
NH2

5
2) H2N − C − NH − CH2 −CH2 − CH2 −CH − COOH Arginina (Arg)*
|| |
+
NH2 NH2

3) HC = C − C H2 − C H − COOH Histidina (His)*

| | |
HN+ NH NH2
\\ /
CH
.

Aminoácidos Essenciais : são aqueles que o organismo não pode sintetizar,

sendo obtidos através da dieta. Os aminoácidos classificados de acordo com
os radicais R, marcados com * são aqueles essenciais ao homem e ao rato
albino, ou seja, precisam deles, para a síntese de suas proteínas mas são
incapazes de produzi-los . As plantas superiores são capazes de sintetizar
todos os amino ácidos necessários à síntese de suas proteínas. Com relação
aos microrganismos, a capacidade de síntese dos amino ácidos é
extremamente variada, enquanto a Escherichia coli sintetiza todos que
precisa, a partir de precursores simples, as bactérias lácticas não o
conseguem.

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4.Propriedades Físicas dos Aminoácidos

4.1-Solubilidade
Todos são solúveis em água e em solventes polares como metanol e etanol.
Encontram-se ionizados em solução aquosa.

4.2-Caráter Anfótero

(Amino ácido)- + H+ → +(Amino ácido)

+

+
OH -
↓
(Amino ácido)-

(Amino ácido)- → Constitui o íon anfótero, dipolar ou Zwitterion (ver

+

proteínas)

4.3- Espectro de Absorção

Nenhum dos Amino ácido absorve luz na região visível. Somente os
aromáticos, tirosina, triptófano e fenilalanina absorvem significativamente
na região do U.V., entre 250 e 280nm. Com base nesta absorção, pode-se
determinar a concentração de proteínas.

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5-Separação e Análise de Misturas de Amino ácidos

Principalmente por métodos cromatográficos, baseados em suas

cargas elétricas tais como: Cromatografia de troca iônica, HPLC.

6- Amino Ácidos Com Intensa Atividade Biológica

6.1- Bradicinina (ante- inflamatório)
Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg
6.2- Ocitocina (estimula as concentrações uterinas)
Tyr-Ile-Gln-Asn
| |
___
Cys - S S - Cys
|
Pro-Leu-Gly

6.3- Encefalinas (induzem analgesia, são opiáceos naturais)

Tyr-Gly-Gly-Phe-Met ou Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu

6.4- Gramicidina S (antibiótico )

__ __
D- Phe L-Leu L-Orn__ L-Val __L-Pro
↑ ↓
L- Phe__ L-Val__ L-Orn __L-Leu__D Phe

Alguns venenos extremamente tóxicos, como a amanitina, ou vários

antibióticos são peptídeos. Assim apesar dos amino ácidos serem atóxicos, é

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a seqüência dos mesmos em peptídeos e polipeptídeos que determina sua
especificidade de ação e efeitos biológicos.
Outros exemplos de peptídeos com intensa atividade biológica são:
Glucagon - Hormônio pancreático que se opõe a ação da insulina
Corticotrofina- Estimula o córtex adrenal.

Curiosidade:
A parede celular de bactérias tem como estrutura peptídeos ligados a
açúcares .

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Proteínas

DEFI-IÇÃO:
São polímeros de amino ácidos unidos entre si por ligações
peptídicas. Devido ao caráter dessa ligação, as proteínas tem, em
geral, apenas uma conformação espacial em suas condições
biológicas normais (pH, temperatura) , conhecida por conformação
nativa ou proteína nativa.

Funcões:
Armazenamento: Ferritina (Fe → baço)
Catalítica : Urease; amilase; lipase
Contrácteis: Actina e Miosina; Flagelina
Estrutural: Queratinas; Colágeno; Elastinas; Proteoglicanas
Protetora: frinogênio, Trombina(coagulação do sangue);
Ricina; Gossipina. Anticorpos
Reguladora: Insulina; oxitocina (útero e glândulas mamárias)
Vasopressina (rim, artérias)
Transportadoras: Hemoglobina (O2); Albumina do soro;
Mioglobina; Citocromos
Nutritivas e de reserva: Gliadina (trigo); Ovoalbumina;
Caseína (leite); Ferritina (Fe)

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Classificação das Proteínas de acordo com a forma:

Globulares Fibrosas
Solúveis em água e soluções Insolúveis em água, resistentes à
salinas diluídas ação proteolítica
Forma esférica, Cadeia compridas e filamentosas,
polipepitídica enrolada em Cadeia polipeptídica estendida
forma globular ao longo de um eixo
Quase todas as enzimas e Proteínas estruturais
proteínas de reserva
Ex: Hexoquinase, γ-Globulinas Ex: ∝-Queratinas ,Colageno

As proteínas tem seu número de amino ácidos, estrutura e

conformação geneticamente determinados. São formadas por
apenas 20 aac. Sua conformação nativa é tão estável, que a
proteína pode ser isolada mantendo sua atividade biológica.

Estabilidade conformacional se deve as ligação peptídica e a

interação entre os radicais R laterais dos aminoácidos

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Classificação das Proteínas de acordo com a Composição

Simples Conjugadas
Contém apenas Amino-ácidos Possuem grupos químicos que
ligados em cadeia polipeptídica não são Amino-ácidos ligados à
e nenhum outro grupo químico cadeia polipeptídica
Porção não protéica chama-se
GRUPO PROSTÉTICO
queratinas, lipoproteínas ( no sangue),
colágeno, glicoproteínas (γ-Globulinas),
insulina fosfoproteínas(caseína do leite)
hemoproteínas (hemoglobina),
Metaloprotínas (Ferritinas)

Classificação das Proteínas de acordo com a Estrutura

Primária - análise de sua estrutura covalente e da seqüência de aac
Ex: Representada por linha simples

     
R1 R2 R3 R4 R5 R6 etc

Secundária-Designa o arranjo no espaço, a conformação dos

resíduos de aminoácidos sucessivos e próximos na cadeia

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polipeptídica. Esta estrutura apresenta arranjo espacial α-hélice ou
conformação-β (folha pregueada). Ex:

α-hélice β-pregueada

α-hélice conformação-β
Aumentam de tamanho ao serem
aquecidas. Em presença de calor Não aumentam de tamanho ao serem
húmido podem adquirir conformaçã-β aquecidas
(reversível)
Ligações entre aac. intracadeia Ligações entre aac intercadeia
ricas em liações cistina não há liações cistina entre cadeias
flexibilidade variável das β-queratinas. Flexíveis e moles
são ricas em aac com grupos R Os grupos R projetam-se para fora,
hidrofóbicos estrutura em zig-zag
insolúveis em H2O
Ex: α-queratinas encontradas nas Ex: β-queratinas encontradas em
unhas, pele, lã, cabelos, casco de teia de aranha, seda (fibroína)
tartaruga.

Estrutura terciária: Estrura espacial devido a ligações iônicas, -s-s-

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ligações hidrofóbicas, pontes de hidrogênio, ligações
covalentes entre os radicais R de amino ácidos que compõem a
proteína. São geralmente proteínas globulares. Ex: mioglobina,
lisozima, Quimiotripsina, ribonuclease, citocromo c.
Ex:

Representação da estrutura terciária

Estrutura Quaternária: Quando apresentam duas ou mais cadeias

polipeptídicas, unidas entre si por ligações iônicas e/ou covalentes.
Estão geralmente envolvidas na regulação metabólica.
Ex:hemoglobina, hexoquinase, citocromo-oxidase.

Representação da estrutura terciária

Desnaturação proteica
Constitui mudanças nas propriedades físicas,químicas e biológicas
de uma proteína. Essas mudanças podem ser:
Diminuição da solubilidade
Alteração da conformação
Diminuição da atividade biológica

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Causa : Mudanças de pH significativas
Mudanças de Temperatura
Radiações U.V
Raio X
Vibrações ultra-sônicas
Agitação
Solvantes orgânicos (Etanol, acetona, éter)
Ácidos

Propriedades Proteicas
1- Anfoterismo:

+
(PROTEÌNA)- + H+ → +
(PROTEÌNA)
+
OH-
↓
(PROTEÌNA)-

O pH da solução cuja a molécula de amino-ácidos ou proteína

encontra-se totalmente ionizada, mas com carga líquida igual a
zero, chama-se ponto isoelétrico (pI) e a molécula nessas

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condições, é chamada íon dipolar ou Zwitterion . Esta molécula
não se move em um campo elétrico, tende a precipitar.

2- Solubilidade
Pode ser alterada pela presença de uma solução salina. A
afinidade da proteína pode ser melhorada ou não pela adição de
sais, como (NH4)2SO4, NaCl entre outros, mas a concentração do
sal deve ser bem avaliada de modo a se obter proteína solúvel ou
precipitada.
“Salting-in” - a adiçao de sal, em pequenas quantidades, diminui a
interação proteína - proteína, aumentando a interação proteína -
H2O, solubilizando o polipeptídeo.
“Salting-out”- A adição de sal em grandes quantidades, aumenta a
interação proteína - proteína, diminuindo a interação proteína -
H2O, resultando numa “desidratação da H2O ativa” e precipitação
do polipeptídeo.

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Purificação das Proteicas
As proteínas podem ser separadas e purificadas em seu estado
nativo através de diferentes processos:
1- Diálise: separ as proteínas de moléculas de baixo peso
molecular presentes no extrato das células.
2- Filtração em gel (peneira molecular): separação das
diferentes proteínas por peso molecular.
3- Eletroforese: Separação das diferentes proteínas com base
no sinal e número de cargas elétricas de cad uma delas
4- Cromatografia de troca iônica: fundamenta-se nas
diferenças entre as densidades e o sinal de suas cargas
elétricas em determinado pH.

Dosagens proteicas
As mais tradicionais são :
Método de Kjeldahl
Absorção no U.V.
Método de Biureto
Método de Lowry

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Referências Bibliográficas
Lehninger, A L.; Principios de Bioquímica.São Paulo. Ed.
Savier, 1993
Garret, R.G. & Grisham, C.M.; Biochemistry. Nova York.
Saunders College Publishing, 1995
Brock, T. D. & Madigan, M. T.; Biology ofMicrorganisms.
Nova Jersey. Prentice-Hall International, Inc.1991.
Elliott, W. H. & Elliott, D. C.; Biochemistry and Molecular
Biology. Oxford. Oxford University Press, 1997

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