FISIOLOGIA ESBI - FACI VEGETAL

UNIVERSIDAD NACIONAL
JORGE BASADRE GROHMANN

FACULTAD DE CIENCIAS

ESCUELA DE BIOLOGIA – MICROBIOLOGIA

MANUAL PRACTICO

FISIOLOGIA VEGETAL

Blgo. Víctor Carbajal Zegarra

Tacna - 2011

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PREFACIO

La fisiología vegetal como disciplina científica, es para los estudiosos e interesados en conocer e
indagar lo que hacen las plantas, evaluar los factores físicos y químicos que originan que respondan
como lo hacen. Por lo tanto, es importante incursionar en una diagnosis acerca de cómo funcionan
las plantas en los distintos niveles de organización interna, y como se adaptan funcionalmente al
ambiente en que habitan, de manera que esta información contribuya a aumentar las relaciones
beneficiosas entre el hombre y la planta. El progreso en la acumulación de nuevos conocimientos
depende de métodos con los que sea posible obtener la información. Los acontecimientos descritos
aquí son útiles y sirven para fines orientados a determinados propósitos, deben desarrollarse
continuamente métodos nuevos para realizar progresos más rápidos en la investigación.
El objetivos del este manual de prácticas es facilitar a los estudiantes el acceso a métodos útiles para
estudiar la fisiología vegetal práctica, luego a medida que avanzan nuestros conocimientos en este
campo estimularlos para que ideen nuevos ensayos que serán necesarios para comprender mejor la
fisiología de las plantas. Además proporcionar una explicación amplia de la fisiología de los vegetales
desde la germinación de la semilla, hasta el crecimiento vegetativo, maduración y floración.
A pesar de las angustias de elaborar un manual de prácticas como este, el balance final de desarrollar
la presente edición es que ha sido una agradable experiencia de aprendizaje, Aun hay mucho que
aprender y las respuestas vendrán rápido a medida que las técnicas se vayan acondicionando a las
perspectivas de nuestras metas,
Esperemos que el manual de prácticas motive a muchos otros a avanzar aún más en la fisiología
vegetal así como a llevar a cabo investigaciones encaminadas a solucionar problemáticas de
actualidad y a futuro.
El autor agradecerá los comentarios críticas y sugerencias.

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INDICE

PROCESO DE GERMINACION ………………………………………………………..

RELACION PLANTA AGUA ………………………………………………………..
RELACION PLANTA AGUA SUELO ………………………………………………………..
RELACION PLANTA AGUA SUELO LUZ ………………………………………………………..
RELACION PLANTA AGUA SUELO AMBIENTE ……………………………………………………….
MEDIDA DEL POTENCIAL HIDRICO (DPD) ……………………………………………………….
TEJIDOS QUE INTERVIENE EN LA CONDUCCION DE AGUA ……………………………………………………….

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Practica # 1
GERMINACION
EXPERIMENTO:
Introducción.- Entre las características principales del ciclo reproductivo de las plantas se incluyen: la
germinación de los gametos, las interacciones polen-estigma, las interacciones entre gametos que
conducen a la fecundación, el desarrollo de la semilla, el desarrollo del fruto, la germinación de la
semilla y el crecimiento de la plántula.
Para el caso de la germinación: es el proceso que se inicia con la toma de agua por parte de la semilla
seca (imbibición) y termina cuando una parte de esta (eje embrionario en dicotiledóneas o radícula en
monocotiledóneas y gimnospermas) se extiende y atraviesa (emerge) las estructuras que la rodean.
En el caso de semillas endospermicas (gramíneas) la resistencia que oponen los tejidos envolventes
del embrión (testa y endospermo) es tan importante, que para que se produzca la emergencia se
requiere la degradación enzimática de ciertas zonas envolventes, y estas acciones son en algunos
casos muy puntuales en las diferentes especies,
Objetivos:

• Demostrar que las semillas necesitan de condiciones para su germinación.

• .Evaluar las condiciones y potenciar sus respuestas en la germinación.

Procedimiento:
• Colectar semillas (monocotiledóneas, dicotiledóneas) y colocarlas en ambientes adecuados para
lograr su germinación, esto es:
- Humedad
- Temperatura
- Luz
- Ventilación
- Etc.

• Evaluar: tiempo que demoran en emerger, radículas, cotiledones, cladiodos, foliolos, etc.

• Modificar las condiciones para potenciar la germinación, en términos de tiempo.

Responder:
• Como se puede inhibir la cubierta en el proceso germinativo.
• A que se llama, semilla no viable.
• Que factores inviabilizan a una semilla.

• Puede realizar la inhibición una semilla no viable.

• Por qué en especies silvestres las semillas no maduran todas al mismo tiempo.

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Practica # 2
RELACION PLANTA AGUA
EXPERIMENTO:
Introducción.- El contenido hídrico de una planta varía según la edad, órgano, especie, variedad y aún
según su procedencia o hábitat.
El agua en las plantas interviene de muchas maneras, fundamentalmente en 3 formas principales:
Solvente de solutos; como constituyente de sus células y como reactante, en las reacciones propias
de su metabolismo; su deficiencia se traduce en el fenómeno conocido como marchites.
Objetivos:

• Determinar el contenido hídrico en los tres órganos fundamentales de plantas herbáceas,

arbustivas y arbóreas.
• Determinar el porcentaje de agua constituyente.
Procedimiento:

• Recolectar del campo una planta, (cultivable, xerofítica, hidrofito y halófito) que contenga sus tres
órganos fundamentales; pesar 100 gramos para los tres órganos fundamentales; Adecuar en
paquetitos de papel y ponerlos a desecación en estufa a 80 ° C por un tiempo de 24 horas al cabo
del cual vuelva a pesar y anote los pesos iniciales y finales en un cuadro. Con los datos obtenidos
calcular el contenido hídrico en % de peso fresco y luego haga una discusión de los resultados.
• Acondicionar a 7 plántulas en macetas, determinando el peso inicial, luego añadir volúmenes
diferentes de agua a cada maceta, en tiempos diferentes, repitiendo el proceso durante 6 días,
evaluar los resultados y discutir:

Responder:
• Cuál es el % de agua en cada una de las estructuras de la planta.
• Que diferencia en cuanto a % de agua, existe entre las diferentes estructuras de la planta.
• Que diferencia existe entre los diferentes tipos de plantas, en cuanto a la proporción de agua.
• En cuanto al % de agua, que caracteriza a:

• Una planta halófito

• Una planta xerofita

• Una planta hidrofito

• En qué se diferencia en cuanto al % de agua una planta cultivable del resto

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Practica # 3

EXPERIMENTO:
Introducción.- La absorción pasiva de agua y de sustancias minerales que realizan las plantas, se
lleva a cabo por simple difusión, gobernados por leyes fisicoquímicas y termodinámicas. El
transporte de agua y de los solutos se hace a través de la membrana celular que es diferencialmente
permeable o que presenta permeabilidad selectiva.
Objetivos:
• Demostrar la absorción del agua y de los solutos mediante mecanismos pasivos.
• Demostrar la permeabilidad de la membrana.
• Comprobar la absorción de agua y de solutos
Procedimiento:
• Preparar en un vaso una suspensión de levaduras, agregando media cucharadita de las mismas
en una solución de carbonato de sodio al 0.5 %. Con dicha suspensión, llenar un tubo de prueba
hasta un tercio del tubo. Añadir un volumen igual de rojo neutro al 0.2 %; Mezclar bien y dejar en
reposo por unos minutos. Note que la suspensión toma un color naranja, luego divida en 4 tubos
en partes iguales y hacer las siguientes experiencias:
a) Tubo # 1 Filtrarlo, observar el filtrado y el color de las células que quedan retenidas en el filtro.
b) Tubo # 2 Añadir un poco de hidróxido de potasio al 0.1 N observar y explicar.
c) Tubo # 3 Añadir un poco hidróxido de amonio al 0.01 N, observar y explicar.
d) Tubo # 4 Hacerlo hervir por unos minutos, observar y explicar.
Anote los resultados y Discutir los mismos.

• Acondicionar a 5 plántulas en macetas, determinando el peso inicial, cubrir la superficie superior

de la maceta de manera que solo se exponga tallo y hojas, añadir volúmenes diferentes de agua a
cada maceta, en tiempos diferentes, repitiendo el proceso durante 12 días, evaluar los resultados.
Responder:

• Cuáles son los mecanismos de transporte que utilizan las sustancias disueltas para atravesar la
membrana.
• Que mecanismos de transporte utiliza el agua.
• Como afecta la concentración de sustancias en el transporte.
• Que factores favorecen el transporte de sustancias.

• Que factores impiden el transporte de sustancias.

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Practica # 4
PLANTA AGUA SUELO
EXPERIMENTO: Turgencia y flacidez:
Introducción.- La osmosis es la difusión del agua a través de una membrana diferencialmente
permeable, de un medio de menor concentración osmótica a otra de mayor concentración osmótica.
Cuando los tejidos vegetales toman agua se desarrolla en el interior de las células una presión
hidrostática hacia las paredes y los tejidos se ponen turgentes. Cuando ocurre lo contrario los tejidos
se ponen flácidos: ambos son conocidos como turgencia y plasmólisis.
Objetivos:
• Demostrar las relaciones osmóticas en células vegetales.
• Demostrar la turgencia y flacidez.
Procedimiento:

• Tomar un pedúnculo tierno de una planta (halófito, hidrofito, xerofita y cultivable), ejecutar dos
cortes longitudinales en cruz de unos 4 o 5 cm de longitud; observe y explique.
• Transferir el pedúnculo a un vaso con agua destilada. Observe y explique.
• Transfiera el pedúnculo a un vaso con una solución de sacarosa 1 M Observe y explique.
• Interpretar los resultados:

• Acondicionar a 8 plántulas, determinando el % de humedad y acidez del terreno, cubrir la

superficie de manera que solo se exponga tallo y hojas, añadir volúmenes diferentes de agua, con
nutrientes y/o sales minerales a cada plántula, en tiempos diferentes, repitiendo el proceso
durante 15 días, evaluar los resultados.

Responder: según la experiencia práctica.

• Como se manifiesta la turgencia en plantas:
• Halófitos
• Xerofitos
• Hidrofitos
• Que concentraciones son tolerables por las plantas
• Halófitos
• Xerofitos
• Hidrofitos

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Practica # 5
RELACION PLANTA AGUA SUELO

MEDIDA DEL POTENCIAL HIDRICO (DPD)

EXPERIMENTO
Introducción.- El déficit de presión de difusión o DPD, se define como la capacidad de una solución o
de una célula para tomar agua de otro sistema o de otra célula.
Objetivos:
Determinar el DPD y la PO en tejidos vegetales por tres métodos diferentes.
Procedimiento.-
a) Determinación del DPD por el método volumétrico.-
Este método se basa en los cambios de curvatura experimentados por tejidos que han sido
puestos en solución de sacarosa de diferentes molaridades. En este experimento utilizamos
porciones de tejido de Taraxacun officinales.
A partir de una solución 1M de sacarosa preparar 10 ml en 10 placas petri las siguientes
soluciones:
0.00M; 0.10 M; 0.15 M; 0.20 M; 0.25 M; 0.30 M; 0.35 M; 0.40 M; 0.45 M; 0.50 M. Cortar 10 trozos de
tamaño uniforme de T. officinales, y colocar en cada una de las placas; anotar la forma de la
curvatura natural del tejido, en la placa donde no hay variación de dicha curvatura esa será la PO
del tejido. Calcular el DPD del tejido utilizado la tabla de valores de la PO de sacarosa a 20 ° C.
Consignar los datos y las formas de la curvatura en un cuadro.

Molaridad Variaciones de Curvatura DPD PT

0.00
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0.35
0.40
0.45
0.50

Responder:
1. Cual es la PO y el DPD del tejido
2. Como procedería si con estas molaridades no logra determinar el DPD del tejido.
3. Colocar los diferentes DPD y las PT en el cuadro.

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b) Determinar el DPD por el método alternado.-

Este Método se basa en que la densidad de la PO de una solución varía con la concentración en
razón directa, por tal razón los cambios de densidad que experimenta una solución, nos dará una
medida de sus respectivos cambios de PO. Si a un determinado tejido vegetal, se le sumerge en un
volumen igual de una solución de PO . Conocido los cambios de densidad experimentados por la
solución, nos servirá como referencia para determinar su DPD . Este último colocando una gota de
dicha solución en el vaso de la solución original observando el desplazamiento de la misma; si la gota
sube a la superficie quiere decir que la gota es menos densa y que la solución ha traído agua del
tejido; osea que la PO de la solución es mayor que la del tejido. Si la gota va al fondo, demostrará lo
contrario; osea que la PO de la solución es menor que la del tejido; Si la gota no se desplaza, quiere
decir que no hubo osmosis y que la PO de la solución es igual a la del tejido.
Siguiendo este principio se puede determinar fácilmente el DPD de cualquier tejido vegetal.
A partir de una solución 1M de sacarosa, prepare 10 ml en 10 tubos de prueba las siguientes
soluciones molares: 0.00M; 0.10 M; 0.15 M; 0.20 M; 0.25 M; 0.30 M; 0.35 M; 0.40 M; 0.45 M; 0.50 M.
Con un sacabocados, preparar 10 discos de una hoja de T officinales y colocarlos en 10 placas con
0.5 ml de las soluciones molares anteriores, agregando para colorear una gota de azul de metileno 1
%; tenga cuidado que el disco quede completamente inmerso en la solución. Después de 30 minutos
de experimentación, con una pipeta Pasteur extraiga una gota de la solución en tratamiento y
colocarlo en el seno de la solución original.
Observe el desplazamiento de la gota y de acuerdo a ello, determine la PO del tejido utilizando la tabla
.
Responder:
• Cual es el DPD del tejido
• Con qué objeto se usa el azul de metileno

Molaridad Desplazamiento de la gota DPD

0.00
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0.35
0.40
0.45
0.50

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c) Determinar el DPD por el método gravimétrico.-

Se basa en el cambio de peso experimentado por un tejido vegetal. En un medio físico el DPD es
igual a la PO, por lo tanto cuando un tejido vegetal cualquiera se le sumerge en una solución con la
cual se encuentra en equilibrio, la PO de la solución es la medida de la DPD del tejido. Si el DPD del
tejido es menor que la PO de la solución el tejido perderá agua y por lo tanto perderá peso; Si el DPD
del tejido es mayor que la PO de la solución, el tejido absorberá agua y aumentará de peso;
Finalmente si el DPD del tejido es igual a la PO de la solución no habrá osmosis por lo tanto el tejido
no ganará ni perderá agua; Tampoco variará el peso. Este es el principio que se utiliza para
determinar el DPD de tejidos vegetales mediante este método.
A partir de una solución 1 M de sacarosa prepare 10 ml en 10 tubos de prueba las siguientes
soluciones molares: 0,00 M; 0,10 M; 0,20 M; 0,30 M; 0,40 M; 0,50 M; 0,60 M; 0,70 M; 0,80 M; 0,90 M; y
con un sacabocados obtener cilindros de tejido de reserva (de Solanum tuberosun ), lavarlos
rápidamente y colocarlos sobre un papel. Cortar 10 rodajas de tamaño uniforme ( 5 mm de ancho)
pesarlos separadamente en balanza analítica y anotar el peso inicial. Colocar cada rodaja pesada en
cada una de las soluciones anteriores. Dejar los tubos en reposo por el tiempo de 24 horas, al cabo
del cual elimine la solución, extraiga la rodaja pesar y anotar el peso final. Determine el DPD del tejido
utilizando la siguiente tabla:

Molaridad Peso inicial Peso final DPD PO PT

0.00
0.10
0.20
0.30
0.40
0.50
0.60
0.70
0.80
0.90

Responder:
* Cual es el DPD del tejido

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Practica # 6
RELACION PLANTA AGUA LUZ

EXPERIMENTO:
Introducción:
La absorción de sustancias minerales que realizan las plantas, llevada a cabo por simple difusión, y
gobernadas por leyes fisicoquímicas y termodinámicas, así como el transporte de agua y de los
solutos que se hace a través de la membrana celular, requiere de energía luminosa, la calidad e
intensidad de esta energía determinara de alguna forma el crecimiento de la planta.

Procedimiento:

• Acondicionar a 8 plántulas, cubrir la superficie superior con celofán (color verde, amarillo, rojo y
azul) de manera que solo la plántula se exponga a la luz filtrada por el celofán, evaluar los
resultados en un tiempo mínimo de 10 días.

Responder:
• De qué manera intervienen los filtros de celofán en la calidad de luz para las plantas.
• Cuál de estos es el más adecuado para un óptimo desarrollo.
• Explique qué es y en que consiste un fotosistema.
• Cuál es el espectro de luz captado por las plantas.
• Porque se usan filtros en el experimento.

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Practica # 7
RELACION PLANTA AGUA SUELO LUZ
EXPERIMENTO:
Procedimiento:
• Acondicionar a 8 plántulas, cubrir la superficie superior con celofán (color verde, amarillo, rojo y
azul) de manera que solo la plántula se exponga a la luz filtrada por el celofán, añadir volúmenes
diferentes de agua, con nutrientes y/o sales minerales a cada plántula, en tiempos diferentes,
repitiendo el proceso durante 12 días, evaluar los resultados.

Responder:
• Cuál de los filtros de celofán es el más adecuado para las plantas.

• Cuál de estos filtros incrementa la absorción de nutrientes y agua.

• Explique en que consiste la interrelación de tasa fotosintética, absorción de nutrientes y

desarrollo.

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Practica # 8
TEJIDOS QUE INTERVIENE EN LA CONDUCCION DE AGUA
EXPERIMENTO:
Introducción. El xilema, constituido por tres tipos celulares: los vasos o traqueidas, las fibras
xilematicas y el parénquima xilematico son los principales elementos de la conducción del agua y
sustancias minerales en forma ascendente, a todo el cuerpo de la planta; además de los parénquimas
medulares y corticales que intervienen en los movimientos laterales o de distribución.
Procedimiento:
Colocar una rama tierna de Medicago sativa en un vaso de precipitados con fucsina básica al 1 %.
Después de cierto tiempo, calculando más o menos que el colorante ya haya ascendido por la planta
hacer finos cortes transversales y observar al microscopio evitando que se desequen.
Responder:

• Cuál es el tejido coloreado

• Que otros tejidos además del anterior también se tiñen

• Puede identificar los elementos del xilema
• A que conclusión llega con este experimento

• Hacer un esquema de lo observado

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Practica # 9

FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ABSORCION DEL AGUA POR LA RAIZ

EXPERIMENTO:
Introducción. Como factores que intervienen en la absorción del agua por la raíz, podemos citar las
siguientes:
Factor suelo.- Como el tamaño de partículas, temperatura, contenido de sales, aireación.
Factor planta.- Como la profundidad de las raíces, desarrollo radicular, número de raíces, especie
Factor ambiente.- Como la humedad relativa, temperatura, viento.
De todos estos factores, dentro del factor suelo, el más importante es el contenido de sales. Las altas
concentraciones de sales en un suelo determinan en una planta el llamado marchites fisiológica; la
planta no se marchita debido a la falta de agua sino a la falta de una adecuada gradiente de difusión,
por razones de alta concentración osmótica del suelo.
Procedimiento:
Efecto de la temperatura:
Colocar en un tubo de prueba 15 ml de agua destilada o de caño o una solución nutritiva completa y
una planta cualquiera. Todo el conjunto colocarlo en un vaso conteniendo agua fría y hielo. Observar
lo sucedido en la plántula después de haber finalizado la sesión de prácticas. Hacer una discusión de
lo observado.

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Practica # 10

FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ABSORCION DEL AGUA POR LA RAIZ

Efecto de la concentración de sales:

A partir de una solución 1 M de NaCl prepare en tubos de ensayo 10 ml de las siguientes soluciones:
0.00M; 0.1M; 0.3M; 0.4M; 0.5M; para completar los 15 ml en lugar de agua destilada utilizar una
solución nutritiva completa, en cada tubo colocar una plántula cualquiera. Al inicio del experimento,
marcar el nivel a de agua observando diariamente, en que tubo existe mayor absorción, luego
cosechar y medir la cantidad de agua absorbida.
Responder:
• En que tubo existe mayor absorción
• En que tubo existe menor absorción
• Como explica lo observado

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