DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS

FUNDAMENTOS DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL. 2º RELACIÓN DE PROBLEMAS.

1.- Evalúe las cantidades restantes de la tabla adjunta. Cuando sea necesario use 200 como masa
molecular del analito.

ε a B c
A %T L mol-1 cm-1 cm-1 ppm-1 cm M ppm
3
(a) 0.172 4.23 x 10 1.00
-4
(b) 44.9 0.0258 1.35 x 10
3
(c) 0.520 7.95 x 10 1.00
(d) 39.6 0.0912 1.76
3 -3
(e) 3.73 x 10 0.100 1.71 x 10
-6
(f) 83.6 1.00 8.07 x 10
(g) 0.798 1.50 33.6
4 -5
(h) 11.1 1.35 x 10 7.07 x 10

2.- La cafeína (C8H10O2N4•H2O) posee una absorbancia de 0.510 a 272 nm y 1 cm de paso óptico en
disoluciones de concentración de 1 mg/ 100 mL. Una muestra de 2.5 g de café soluble se diluye con
agua a 500 mL. Se toman 250 mL se añaden 25.0 mL de H2SO4 0.1 N y se diluye a 500 mL. Se mide la
absorbancia a 272 nm resultando ser 0.415. Calcular los gramos de cafeína por Kg de café soluble que
tiene muestra muestra.
Dato: Peso molecular (cafeína)=212 g/mol
Solución: a) A=3.25 g/Kg

3.- Una muestra de 5.12 g de un pesticida se descompuso mediante digestión húmeda y a

continuación se diluyó hasta 200.0 mL en un matraz aforado. El análisis se completó tratando las
alícuotas de esta disolución como se indica.

Volúmenes de reactivo utilizados, mL

2+
Volumen de muestra 3.82 ppm Cu Ligando H2O Abasorbancia, A, 545 nm
tomado, mL (cubetas de 1.00 cm)
50.0 0.00 20.0 30.0 0.512
50.0 4.00 20.0 26.0 0.844

Calcular el porcentaje de cobre en la muestra.

-3
Solución: 1.84x10 %

4.- Tras las diluciones oportunas de una disolución patrón, se obtuvieron disoluciones de hierro cuyas
concentraciones se muestran en la tabla mostrada a continuación. Posteriormente se obtuvo el
complejo de hierro (II)-1,10-fenantrolina en alícuotas de 25.0 mL de estas disoluciones, a
continuación cada una de ellas se diluyó hasta 50 mL. Se obtuvieron las siguientes absorbancias, a
510 nm.
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Concentración de Fe(II) en las Absorbancias, A

disoluciones originales, ppm (cubeta de 1.00 cm)
2.00 0.164
5.00 0.425
8.00 0.628
12.00 0.951
16.00 1.260
20.00 1.582
a) Construir una curva de calibrado a partir de estos datos.
b) Por el método de los mínimos cuadrados, obtener una ecuación que relacione la
absorbancia con la concentración de Fe(II).
c) Calcular la desviación estándar de la regresión.
d) Calcular la desviación estándar de la pendiente.
e) El método desarrollado, antes expuesto, se aplicó en la determinación rutinaria de hierro
en alícuotas de 25.0 mL de aguas naturales. Determinar la concentración (en ppm de Fe)
de muestras que dieron los datos de absorbancia que siguen (en cubetas de 1.00 cm).
Estimar las desviaciones estándar para las concentraciones calculadas. Repetir los
cálculos considerando que los datos de absorbancia son la media de tres medidas: e.1)
0.107 e.2) 0.721 e.3) 1.538
-2 -4
Solución: b) A=0.0781cFe + 0.0148; c) sy/x=1.24x ; d) sb=8.1x10 ; e.1) cFe=1.18 ppm, sc=0.20, sc=0.15 (media de
3), e.2) cFe=9.04 ppm, sc=0.17, sc=0.11 (media de 3), e.3) cFe=19.50 ppm, sc=0.20, sc=0.15 (media de 3)

5.- La determinación simultánea de cobalto y níquel se puede basar en la absorción de sus

respectivos complejos con 8-hidroxiquinolinol. Las absortividades molares correspondientes a sus
máximos de absorción son las siguientes:
Absortividad molar, ε
365 nm 700 nm
Co 3529 428.9
Ni 3228 10.2
Calcular la concentración molar de níquel y cobalto en cada una de las siguientes disoluciones,
basándose en los siguientes datos:
Absorbancia, A (cubetas de 1.00 cm)
Disolución 365 nm 700 nm
(a) 0.598 0.039
(b) 0.902 0.072
-5 -5
Solución: a) [Co]=8.88x10 M; [Ni]=8.82x10 M
-4 -5
b) [Co]=1.66x10 M; [Ni]=9.8x10 M

6.- La absortividad molar del complejo formado por el bismuto(III) y la tiourea es de 9.32x103 L cm-1
mol-1 a 470 nm. Calcule el intervalo de concentraciones permitidas del complejo si la absorbancia no
debe ser menor de 0.10 ni mayor de 0.90 cuando se realizan las medidas en celdas de 1.00 cm.
-5 -5
Solución: 1.1x10 M ≤ c ≤ 9.7x10 M

7.- Un indicador ácido-base bicolor tiene una forma ácida que a la concentración de 5x10-5 M absorbe
a 500 y 700 nm 0.375 y 0.098 respectivamente en una célula de 1 cm. La forma básica en las mismas
condiciones absorbe a las mismas longitudes de onda 0.110 y 0.325. Al añadir cierta cantidad de
indicador a una solución tampón de pH 5, las absorbancias leídas a 500 y 700 nm fueron 0.350 y
0.105. Hallar la constante de disociación del indicador.
-7
Solución: Ka=4.96x10
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1.- Evalúe las cantidades restantes de la tabla adjunta. Cuando sea necesario use 200 como masa
molecular del analito.

ε a B c
-1 -1 -1 -1
A %T L mol cm cm ppm cm M ppm
3
(a) 0.172 4.23 x 10 1.00
-4
(b) 44.9 0.0258 1.35 x 10
3
(c) 0.520 7.95 x 10 1.00
(d) 39.6 0.0912 1.76
3 -3
(e) 3.73 x 10 0.100 1.71 x 10
-6
(f) 83.6 1.00 8.07 x 10
(g) 0.798 1.50 33.6
4 -5
(h) 11.1 1.35 x 10 7.07 x 10

a) A = 0.172 = εbc = -Log T ∴ T = 10-A = 10-0.172 = 0.673; %T = 67.3%

El 67.3% de la intensidad incidente es transmitida, es decir absorbe un 32.7% de I0.

Absortividad molar, ε: es la absortividad definida en términos de concentración molar.

A A A
A = εbc ∴ ε = ∴ c= ∴ b=
bc εb εc
A 0.172
c= = = 4.066 x10 −5 M
εb 4.23 x10 ( Lmol cm ) x1(cm)
3 −1 −1

Para pasar de moles a gramos multiplicamos por el peso molecular, y de gramos a miligramos
por mil:

C(ppm) = C(M) xPmx103 = 4.066x10-5 (mol/L)x200 (g/mol)x103(mg/g) = 8.13 ppm (mg/L)

En cuanto a la absortividad específica, se tiene:

A 0.172
A = abc( ppm) ∴ a = = = 2.12 x10 −2 (cm −1 ppm −1 )
bc( ppm) 1x8.123

Para pasar de la absortividad molar, ε, a la absortividad específica, a, se divide ésta entre el

peso molecular (de mola a gramo) y 103 (de gramo a miligramo):
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c( M ) ε
A = εbc( M ) = abc( ppm) ∴ a = ε = 3 ∴ ε = a x 103 xPm
c( ppm) 10 xPm
a= ε/Pm/103 = 4.23x103/200/103 = 2.115x10-2 (cm-1 ppm-1)

De manera similar se completan todos los casos propuestos en la tabla, resultando:

ε a B c
A %T L mol-1 cm-1 cm-1 ppm-1 cm M ppm
3 -2 -5
(a) 0.172 67.3 4.23x10 2.11x10 1.00 4.07x10 8.13
3 -2 -4
(b) 0.348 44.9 5.155x10 2.58x10 0.5 1.35x10 27.0
3 -2 -5
(c) 0.520 30.2 7.95x10 3.97x10 1.00 6.54x10 13.1
4 -2
(d) 0.402 39.6 1.83x10 9.12x10 2.50 8.80x10-6 1.76
3 -2 -3
(e) 0.638 23.0 3.73x10 1.87x10 0.100 1.71x10 342
3 -2 -6
(f) 0.078 83.6 9.665x10 4.84x10 1.00 8.07x10 1.61
3 -2 -4
(g) 0.798 15.9 3.167x10 1.58x10 1.50 1.68x10 33.6
4 -2 -5
(h) 0.955 11.1 1.35x10 6.75x10 1.00 7.07x10 14.14
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2.- La cafeína (C8H10O2N4•H2O) posee una absorbancia de 0.510 a 272 nm y 1 cm de paso óptico en
disoluciones de concentración de 1 mg/ 100 mL. Una muestra de 2.5 g de café soluble se diluye con
agua a 500 mL. Se toman 250 mL se añaden 25.0 mL de H2SO4 0.1 N y se diluye a 500 mL. Se mide la
absorbancia a 272 nm resultando ser 0.415. Calcular los gramos de cafeína por Kg de café soluble que
tiene muestra muestra.
Dato: Peso molecular (cafeína)=212 g/mol
Solución: a) A=3.25 g/Kg

A(λ= 272 nm) = 0.510 siendo b= 1 cm y C = 1 mg en 100 mL es decir, 10 ppm.

Los 2.5 gramos de muestra se llevan a 500 mL. Se toma 250 y se llevan a 500 mL.

Con el patrón tenemos la absortividad específica, a:

A 0.510
a= = = 5.1x10 − 2 cm −1 ppm −1
bc 1 *10
La disolución de medida tiene una absorbancia de 0.415, la concentración de esta disolución:
A 0.415
c= = = 8.14 ppm
ab 5.1x10 − 2 *1
La muestra, por la dilución efectuada (de 250 a 500 mL) está el doble concentrada que la
disolución de medida:
Cm = 2C = 16.28 ppm

Teniendo en cuenta que se ha llevado a 500 mL:

mg cafeína = C x V = 16.28 (mg/L)x0.5(L) = 8.14 mg de cafeína que contienen 2.5 g de café

(que es lo mismo que mg de cafeína por gramo de café soluble).

Los gramos de cafeína por Kg de café soluble:

8.14mg cafeína x 1g
g cafeína 103 mg
= = 3.256 g / Kg
Kg café soluble
2.5 g café x 1Kg
103 g
El problema también se puede solucionar sin necesidad de calcular la absortividad específica,
simplemente comparando las absorbancias y las concentraciones.
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3.- Una muestra de 5.12 g de un pesticida se descompuso mediante digestión húmeda y a

continuación se diluyó hasta 200.0 mL en un matraz aforado. El análisis se completó tratando las
alícuotas de esta disolución como se indica.

Volúmenes de reactivo utilizados, mL

2+
Volumen de muestra 3.82 ppm Cu Ligando H2O Abasorbancia, A, 545 nm
tomado, mL (cubetas de 1.00 cm)
50.0 0.00 20.0 30.0 0.512
50.0 4.00 20.0 26.0 0.844

Calcular el porcentaje de cobre en la muestra.

-3
Solución: 1.82x10 %

Se fortifica la muestra para que el efecto matriz sea igual en la muestra problema y en el patrón,
además, si la concentración de analito es baja, aumentamos su señal.

Las disoluciones de medida tienen un volumen final de 100 mL. Con las señales obtenidas podemos
hacer establecer las siguientes proporciones para las disoluciones de medida:

[Cu ] + 4 / 100 * 3.82 0.844

= ∴ [Cu ] = 0.233 ppm
[Cu ] 0.512

Se han tomado 50 mL de muestra y se han llevado a 100 mL, luego la disolución de la muestra está el
doble concentrada (100/50). La concentración de Cu en la muestra es, por tanto:
Cm = 2 x C dm = 2x0.233 = 0.466 ppm

Teniendo en cuenta que el volumen de muestra es de 0.2 L y que se han tomado 5.12 g de pesticida:

gCu 0.466mg / Lx 0.2 Lx10 −3 ( g / mg )

x 100 = x100 = 1.82 x10 −3%
g pesticida 5.12( g )
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4.- Tras las diluciones oportunas de una disolución patrón, se obtuvieron disoluciones de hierro cuyas
concentraciones se muestran en la tabla mostrada a continuación. Posteriormente se obtuvo el
complejo de hierro (II)-1,10-fenantrolina en alícuotas de 25.0 mL de estas disoluciones, a
continuación cada una de ellas se diluyó hasta 50 mL. Se obtuvieron las siguientes absorbancias, a
510 nm.

Concentración de Fe(II) en las Absorbancias, A

disoluciones originales, ppm (cubeta de 1.00 cm)
2.00 0.164
5.00 0.425
8.00 0.628
12.00 0.951
16.00 1.260
20.00 1.582
a) Construir una curva de calibrado a partir de estos datos.
b) Por el método de los mínimos cuadrados, obtener una ecuación que relacione la
absorbancia con la concentración de Fe(II).
c) Calcular la desviación estándar de la regresión.
d) Calcular la desviación estándar de la pendiente.
e) El método desarrollado, antes expuesto, se aplicó en la determinación rutinaria de hierro
en alícuotas de 25.0 mL de aguas naturales. Determinar la concentración (en ppm de Fe)
de muestras que dieron los datos de absorbancia que siguen (en cubetas de 1.00 cm).
Estimar las desviaciones estándar para las concentraciones calculadas. Repetir los
cálculos considerando que los datos de absorbancia son la media de tres medidas: e.1)
0.107 e.2) 0.721 e.3) 1.538
-2 -4
Solución: b) A=0.0781cFe + 0.0148; c) sy/x=1.24x ; d) sb=8.1x10 ; e.1) cFe=1.18 ppm, sc=0.20, sc=0.15 (media de
3), e.2) cFe=9.04 ppm, sc=0.17, sc=0.11 (media de 3), e.3) cFe=19.50 ppm, sc=0.20, sc=0.15 (media de 3)

Hacemos uso de la hoja EXCEL para la regresión por mínimos cuadrados:

REGRESION LINEAL POR MÍNIMOS CUADRADOS
xi yi xi2 xiyi (xi-xm)2 yical (yi-yical)2 residuales (yi-ymedia)2 (ycali-ymedia)2
2.000E+00 1.640E-01 4.000E+00 3.280E-01 7.225E+01 1.710E-01 4.912E-05 4.502E-01 4.409E-01
5.000E+00 4.250E-01 2.500E+01 2.125E+00 3.025E+01 4.054E-01 3.858E-04 1.681E-01 1.846E-01
8.000E+00 6.280E-01 6.400E+01 5.024E+00 6.250E+00 6.397E-01 1.371E-04 4.285E-02 3.814E-02
1.200E+01 9.510E-01 1.440E+02 1.141E+01 2.250E+00 9.522E-01 1.380E-06 1.346E-02 1.373E-02
1.600E+01 1.260E+00 2.560E+02 2.016E+01 3.025E+01 1.265E+00 2.154E-05 1.806E-01 1.846E-01
2.000E+01 1.582E+00 4.000E+02 3.164E+01 9.025E+01 1.577E+00 2.393E-05 5.580E-01 5.507E-01

n datos 6.000E+00
Sum 6.300E+01 5.010E+00 8.930E+02 7.069E+01 2.315E+02 6.189E-04 1.413E+00 1.413E+00
media 1.050E+01 8.350E-01

estimación de x
b= 7.812E-02 1.800E+00
a= 1.478E-02 y =? 1.070E-01 1.600E+00
r2= 9.996E-01 replicados y=? 1.000E+00 1.400E+00
Señal analítica

1.200E+00
syx = 1.244E-02 x= 1.181E+00 1.000E+00
sb = 8.175E-04 sx= 1.977E-01
8.000E-01
sa = 9.973E-03 der %= 1.675E+01
6.000E-01
t(a=0) 1.481E+00
sya= 2.052E-01 4.000E-01

tya(a=0) 7.202E-02 2.000E-01

0.000E+00
0

01

1
0

00

01

01
+0

+0

+0
0

+0

+0

E+
E+

E+

E+

E+
0E

E
00

00

20

60

80
00

00

40

00
0

6.

1.

1.
2.

4.

8.

1.

1.

1.

2.

C oncentración

Datos originales D atos ajustados

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La recta por mínimos cuadrados (y = a + bx) que relación la señal de los patrones de calibrado con su
concentración es:

A = 1.478x10-2 + 7.812x10-2 CFe2+ (ppm)

Desviación estándar de la regresión syx:

n ^

∑(y − y ) i i
2
6.189 x10 −2
s yx = i =1
= = 1.24 x10 −2
n−2 6−2
Es la suma de los residuales al cuadrado, afectan más aquellos datos que se ajustan peor.
Cuanto mayor es n, menor es la desviación estándar de la regresión, si los datos se ajustan bien,
pero esto supone más trabajo experimental.

Desviación estándar de la pendiente, sb;

1.244 x10 −2
s yx
sb = n = 2
= 8.175 x10 −4
∑ ( xi − x) 2 2.315 x10
i =1

Estimación de la concentración y su precisión:

s yx 1 1 ( y − y) 2
sc = + + n
b m N b 2 ∑ ( x − x) 2
i
i =1
A tener en cuenta:

- A mayor pendiente menor desviación estándar de la estimación.

- A menor syx, menor desviación estándar de la estimación, es decir:
o menores residuales
o mayor número de datos siempre que se ajusten bien al modelo lineal (esto supone
más trabajo experimental, a tener en cuenta)
- A mayor número de replicados, más precisión en la estimación (más trabajo experimental)
- La señal a medir debe ser próxima al centro de gravedad de la recta de calibrado (valores
medios de x e y) para mejor precisión. Si se aparta mucho, quizás sea mejor diluir la
disolución de medida, o preconcentrala. A tener en cuenta que podemos introducir nuevos
errores.
- Un buen diseño del calibrado, patrones de concentración uniformemente distribuidos sobre
el centro de gravedad, lleva a una buena precisión en la estimación.
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A título de ejemplo, para 3 replicados y A = 0.107, se tiene:

1.24 x10 −2 1 1 ( 0 .107 − 0.835 ) 2

sc = + + = 1 .5 x10 −1
7 .812 x10 − 2 −2 2 2 2
3 6 ( 7 .812 x10 ) x ( 2.315 x10 )

Muestra 1, A = 0.107 (por debajo del calibrado)

Concentración Sc (1 replicado) Sc (3 replicados)
-1
1.18 2.0x10 1.5x10-1

Muestra 2, A = 0.721 (en el centro de gravedad)

Concentración Sc (1 replicado) Sc (3 replicados)
9.04 1.7x10-1 1.1x10-1

Muestra 3, A = 1.538 (en la parte superior)

Concentración Sc (1 replicado) Sc (3 replicados)
19.5 2.0x10-1 1.5x10-1
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5.- La determinación simultánea de cobalto y níquel se puede basar en la absorción de sus

respectivos complejos con 8-hidroxiquinolinol. Las absortividades molares correspondientes a sus
máximos de absorción son las siguientes:
Absortividad molar, ε
365 nm 700 nm
Co 3529 428.9
Ni 3228 10.2
Calcular la concentración molar de níquel y cobalto en cada una de las siguientes disoluciones,
basándose en los siguientes datos:
Absorbancia, A (cubetas de 1.00 cm)
Disolución 365 nm 700 nm
(a) 0.598 0.039
(b) 0.902 0.072
-5 -5
Solución: a) [Co]=8.88x10 M; [Ni]=8.82x10 M
-4 -5
b) [Co]=1.66x10 M; [Ni]=9.8x10 M

El problema se soluciona resolviendo un sistema de dos ecuaciones con dos incógnitas

(siempre que las absorbancias parciales sean aditivas):

A(λ=365) = εNi λ=365xCNi + εCuλ=365xCCo

A(λ=700) = εNi λ=700xCNi + εCuλ=700xCCo
Las absortividades molares se pueden obtener a partir de tablas de datos (como es el caso)
o, a partir de medidas de absorbancias de patrones de Ni y Cu.

Matricialmente el problema se resuelve encontrando la matriz de resultados que nos da las

coordenadas de la intersección de las dos rectas

ε Niλ =365 ε Coλ =365  C Ni   Aλ =365 

ε x  = 
 Niλ =700 ε Coλ =700  CCo   Aλ = 700 

En la disolución a:

0.598 = 3228xCNi + 3529xCCo

0.039 = 10.2xCNi + 428.9xCCo
O bien:

3228 3529  C Ni  0.598

 10.2 428.9 x C  = 0.039
   Co   
CNi = 8.81x10-5 M; CCo = 8.88x10-5 M
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En la disolución b:
0.902 = 3228xCNi + 3529xCCo
0.072 = 10.2xCNi + 428.9xCCo
O bien:

3228 3529  C Ni  0.902

 10.2 428.9 x C  = 0.072
   Co   
CNi = 9.85x10-5 M; CCo = 1.66x10-4 M
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6.- La absortividad molar del complejo formado por el bismuto(III) y la tiourea es de 9.32x103 L cm-1
mol-1 a 470 nm. Calcule el intervalo de concentraciones permitidas del complejo si la absorbancia no
debe ser menor de 0.10 ni mayor de 0.90 cuando se realizan las medidas en celdas de 1.00 cm.
-5 -5
Solución: 1.1x10 M ≤ c ≤ 9.7x10 M

ε= 9.32x103 mol-1 L cm-1

A
c=
bε
A 0 .1 −5
c1 ≥ 1 = = 1 . 1 x10 M
bε 9.32 x10 3

A 0. 9 −5
c2 ≤ 2 = = 9 . 7 x10 M
bε 9.32 x10 3
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7.- Un indicador ácido-base bicolor tiene una forma ácida que a la concentración de 5x10-5 M absorbe
a 500 y 700 nm 0.375 y 0.098 respectivamente en una célula de 1 cm. La forma básica en las mismas
condiciones absorbe a las mismas longitudes de onda 0.110 y 0.325. Al añadir cierta cantidad de
indicador a una solución tampón de pH 5, las absorbancias leídas a 500 y 700 nm fueron 0.350 y
0.105. Hallar la constante de disociación del indicador.
-7
Solución: Ka=4.96x10
[ In − ][ H + ]
InH º In + H- +
Ka =
[ HIn ]

CInH = 5x10-5; A(InH,λ=500) = 0.375; A(InH,λ=700) = 0.098

CIn- = 5x10-5; A(In-,λ=500) = 0.110; A(In-,λ=700) = 0.325

Para calcular Ka es necesario conocer el pH, en este caso es igual a 5 y las concentraciones de
HIn e In-. Estas últimas se pueden obtener de los datos de absorbancias. Las absortividades
molares se pueden obtener de los patrones.

A500 0.375 A700 0.098

ε ( HIn, λ = 500) = = −5
= 7500 ∴ ε ( HIn, λ = 700 ) = = = 1960
b[ HIn]500 5 x10 b[ HIn]700 5 x10 −5
A500 0.11 A700 0.325
ε ( In − , λ = 500) = −
= −5
= 2200 ∴ ε ( HIn, λ = 700) = = = 6500
b[ In ]500 5 x10 b[ In ]700 5 x10 −5
−

Suponiendo absorbancias aditivas:

a λ= 500 nm se tiene: 7500x[HIn] + 2200x[In-] = 0.350

a λ= 700 nm se tiene: 1960x[HIn] + 6500x[In-] = 0.105
O bien:
7500 2200 [ HIn] 0.350
1960 6500 x  [ In − ]  = 0.105
     

Resultando: [HIn]= 4.60x10-5 M; [In-] = 2.28x10-6 M

Por tanto:

[ In − ][ H + ] 2.28 x10 −6 *10 −5

Ka = = −5
= 4.96 x10 −5 ∴ pK a = 6.3
[ HIn ] 4.60 x10