DETERMINACION DE NITRATOS EN LA MUESTRA DE SUELO

Sara Marcela Suárez, Andrés Sebastián Salinas

Laboratorio de Agroquímica Avanzada, Departamento de Química
Universidad del Cauca, Popayán
2007.

Resumen. En esta práctica se determino el contenido de nitratos en la muestra de suelo

en dos extractos, pasta saturada y KCl normal. El procedimiento seguido fue le
espectrofotométrico, mediante una curva de calibración con patrones de nitrato en un
rango de 0 a 25ppm de NO3-. El resultado fue un bajo contenido de nitratos, pero, en un
nivel equilibrado, pues se reducen los peligros de contaminación, y suficiente para los
requerimientos del cultivo. Los resultados se analizan con base a las propiedades
fisicoquímicas del suelo.

1. Introducción. naturaleza estática, sino más bien

El nitrógeno es después del C, H y O el
elemento que la planta requiere y
consume en mayor cantidad. El nitrógeno
forma parte de todas las proteínas, como
también de los nucleoproteidos.
Entonces no hay crecimiento sin N, por
que no puede realizarse una mitosis.
Todos los procesos bioquímicos
requieren un soporte proteico, entonces
no ocurre ningún proceso metabólico sin
interferencia del nitrógeno. La
fotosíntesis depende también del
elemento en cuestión por que es parte
importante de la clorofila.
Tanto el hombre como los animales
aprovechan en su nutrición los productos
nitrogenados vegetales. Cuando los
restos animales y vegetales retornan al
suelo, son objeto de numerosos
procesos de transformación, en su
mayoría bioquímicos. A través de los
procesos microbianos de fijación del
nitrógeno se produce un enriquecimiento
en el suelo. Todos estos procesos
dinámicos conllevan una serie de
transformaciones de los compuestos
nitrogenados en los suelos. Así resulta
que el contenido y las formas del
nitrógeno en el suelo no presentan una
dinámica.
La nitrificación es el proceso por el cual
el nitrógeno es transformado por la
acción de los microorganismos de la
forma amoniacal a nitritos y
posteriormente a nitratos. El proceso es
de gran importancia agrícola, ya que,
aunque algunas plantas pueden
aprovechar el nitrógeno amoniacal, para
la muchas la forma mas disponible es la
de nitrato. En algunas plantas como la de
tabaco, son toxicas las altas
concentraciones de amonio.
El proceso de nitrificación se realiza bajo
condiciones aeróbicas, es decir, en
presencia de oxigeno libre. La
transformación de NO2- a NO3-
generalmente ocurre a tasas más altas
que la conversión de NH4+ a NO2-. Por
esta razón es poco frecuente que el NO2-
se acumule en el suelo.
Debido a la importancia de la fertilización
nitrogenada, por mucho tiempo grupos
importantes de investigadores han tenido
como objetivo establecer índices de
disponibilidad del nitrógeno en el suelo
con el fin de basar en ellos decisiones
sobre tazas de aplicación de fertilizantes.
Este objetivo no se ha cumplido, por
múltiples razones, entre las cuales están:
a) La gran dinámica de las formas
químicas del N en el suelo que determina
el paso rápido de una forma a otra, b)
Las múltiples variables que regulan los
procesos de transformación del N, c) La
dificultad de controlar las variables antes
mencionadas, muchas de las cuales son
de tipo ambiental, d) La capacidad de las
plantas de utilizar mas de una fuente
química de N para su nutrición, e) Las
múltiples variables que regulan los
procesos de absorción de N por las
plantas, etc.
De acuerdo a lo expuesto antes, toma
importancia la sugerencia de basar las
decisiones sobre tasas de fertilización
nitrogenada en los resultados de
experimentos de campo sobre
respuestas a la fertilización nitrogenada,
adelantadas con suficiente rigor, junto
con consideraciones sobre las
condiciones locales, el nivel de
productividad esperado, la información
de que se disponga sobre eficiencia de
los fertilizantes nitrogenados por cada
caso, etc.
A partir de lo planteado en esta sección,
se propone como objetivo, el de
encontrar los niveles de nitratos en la
muestra de suelo, y correlacionarlos con
propiedades fisicoquímicas del suelo,
para dar un juicio acerca de la dinámica
del nitrógeno en esta muestra de suelo.
2. Sección Experimental.
Antes de la medición de absorbancia de
los patrones para realizar la curva de
calibración, y de las muestras, se
introdujeron dos celdas con los blancos
necesarios para cada etapa de la
determinación, en los dos portamuestras
del espectrofotómetro Intralab DMS-100
empleado en la práctica, y se llevo a cero
con la tecla ZERO.
Curva de Calibración.
Se prepararon patrones de 0, 5, 10, 15,
20 y 25 ppm, expresado como NO3-, los
cuales llevaban 2mL de acido clorhídrico
1N. Cada uno de estos se leyó a 220nm
y 275nm, después de llevar acero en el
equipo.
Extracto Pasta Saturada.
Se preparo la pasta saturada con 100.0g
de suelo, (81.6g en base seca) y 74.5mL
de agua. La pasta saturada se filtro por
medio de vacío. A 5mL del filtrado
obtenido se le agrego 2mL de HCl 1N, y
se aforo a 25.0mL. Luego, el extracto
acidulado se leyó a 220nm y 275nm,
después de haber llevado acero en el
equipo.
Extracto KCl normal.
La extracción se realizo con 25.0mL de
KCl 1N sobre 10.0301g de suelo
(8.1846g en base seca), agitando por
30min. en un agitador horizontal. Luego
se procedió a filtrar. 5mL del filtrado se
acidularon con HCl 1N y aforaron a
25.0mL. Luego se leyó a 220nm y
275nm, después de haber llevado acero
en el equipo.
3. Metodología.
El método para la determinación de
nitratos en la muestra de suelo se basa
en las absorbancias que presentan las
muestras a 220 y 275nm. Con la lectura
de 220nm se cuantifican los nitratos y la
materia orgánica disuelta. Para eliminar
la interferencia debida a la materia
orgánica disuelta se realiza una segunda
lectura a 275nm, donde no absorben los
nitratos. Es necesario realizar la filtración
del extracto de suelo para eliminar
interferencias por partículas
suspendidas, así como acidificación con
HCl 1N para impedir interferencias por
presencia de hidróxido o carbonato de
calcio.
 4. Datos y Resultados. en base seca. A continuación se muestra
el proceso para llegar a la concentración
Tabla 1. Datos de absorbancia de los real.
patrones y los extractos a 220 y 275nm.
Patrón(ppm)/ Absorbancia Nitratos en pasta saturada.
muestra 220nm 275nm 3.06 µgNO3 _ 25mL 74.5mL
0 0,0130 -0,030 NO3 _ ( µg/g)) = x x
mL 5mL 81.6gsuelo
5 0,120 -0,032
10 0,238 -0,033 NO3 _ ( µg/gsuelo)) = 13.97 µgNO3 _ / gsuelo
15 0,345 -0,034 %NO3_ = 0.00140%
20 0,495 -0,032
25 0,580 -0,034
Pasta saturada
Nitratos en extracto KCl normal.
0,242 0,050
Extracto KCl 0,224 0,018 5.02 µgNO3 _ 25mL 25mL
NO3 _ ( µg/gsuelo)) = x x
mL 5mL 8.1846gsuelo
Tabla 2. Curva patrón para determinar NO3 _ ( µg/gsuelo)) = 76.67 µgNO 3 _ / gsuelo
nitratos y concentración en la muestra.
- %NO3_ = 0.00767%
NO3 (ppm) Absorbancia
220-2(275)
0 0,073
5 0,184 5. Discusión de Resultados.
10 0,304
15 0,413 Se obtuvo la linealidad de la curva de
20 0,559 calibración mostrada en la figura 1 en un
25 0,648 rango de concentración de 0.0 a
Pasta satura. 3,066 0,1420 25.0ppm de nitratos. Con los datos
Extracto KCl 5,026 0,1880 obtenidos y aplicando la regresión lineal
mediante una hoja de cálculo de Excel se
Grafica 1. Curva de calibración de llegó a la ecuación de línea, mostrada en
nitratos. (Se muestra la respectiva la misma figura, con un coeficiente de
ecuación y valor de r) correlación (r) de 0.9988. Las lecturas
0,7 obtenidas se muestran en la tabla 1.
0,6
0,5
Las concentraciones de nitratos en las
Absorbancia

0,4

0,3 y = 0,0235x + 0,07

0,2
0,1
0 de absorbancias a 220 y 275nm, debidas
0 5 10 15
NO3-(ppm )
Los valores de concentración de nitratos
de los dos extractos mostrados en la
tabla 2, fueron calculados mediante una
hoja de cálculo de Excel, pero no
corresponden a la concentración real,
para calcular esta se debe tener en
cuenta el factor de dilución, y el
porcentaje de humedad de la muestra
de, 18.4%, para expresar los resultados
muestras se calcularon mediante la
r = 0,9988 regresión lineal a partir de las soluciones
patrón, por interpolación de la diferencia
20 25 30
a los nitratos presentes en la muestra,
tabla 2. Los valores de nitratos obtenidos
aplicando los debidos factores de
dilución fueron 13.97 y 76.67µg/g en los
extractos de pasta saturada y KCl
normal, respectivamente, o, expresando
esto en porcentaje 0.00140% y
0.00767%, en el mismo orden.
La diferencia en las dos formas de
determinar nitratos, la constituye, que la
concentración determinada en pasta
saturada representa la fracción de los
nitratos soluble en la solución del suelo y
por tanto la inmediatamente disponible al
cultivo. Mientras que la concentración de
nitratos determinada por extracción con
KCl normal, representa la fracción de
nitratos que se encuentra adsorbida a los
coloides del suelo y es intercambiable
anionicamente, pero incluye los nitratos
disueltos en la solución. Sustrayendo los
dos resultados, se encuentra que el
porcentaje de nitratos intercambiables es
de 0.00627%. Pero, la fracción extraída
por pasta saturada como es la
inmediatamente disponible por el cultivo,
así mismo, es la que mas fácilmente se
pierde por fenómenos de lixiviación y
percolación, la cual puede pasar a
cuerpos de agua y generar
inconvenientes de contaminación y
eutrofización.
El porcentaje total de nitratos encontrado
(el determinado en KCl, de, 0.00767%)
en relación al 0.63% de nitrógeno total,
constituye una muy baja proporción, y es
debido a que tan solo el 5%,
aproximadamente, del nitrógeno total es
disponible al año, es decir 0.0315%, muy
lejano al porcentaje de nitratos
encontrado. La diferencia se puede
deber a la especie amoniacal.
Hay que tener en cuenta que la cantidad
tan baja de nitratos es debida a que el
cultivo esta continuamente sustrayendo
nutrientes desde la solución del suelo
para su desarrollo, y la principal fuente
nitrogenada la constituye el nitrato.
Entonces resulta complicado dar una
concentración real de nutrientes y más
específicamente de nitratos, pues la
concentración de nutrientes presenta una
dinámica bastante activa.
Un factor importante que incide
directamente sobre la baja cantidad de
nitratos, es la alta solubilidad de estos en
la solución del suelo, constituida
principalmente por agua, pues un monto
importante de nitratos pasan a los
cuerpos de agua por lixiviación o
percolación, proceso impulsado a un mas
por el periodo de intensas lluvias que
soporto el terreno muestreado, días
antes de tomar la muestra. De ahí la
importancia de no presentar niveles muy
elevados de nitratos, pues llevan a la
intoxicación de la planta, y conducen a la
inevitable contaminación de los cuerpos
de agua. Es decir debe haber un correcto
balance en el aporte de nutrientes,
dirigiendo esta observación en este caso
a los nitratos.
Dado que el cultivo no ha recibido
fertilización nitrogenada, ni mucho menos
de otro tipo, el balance y aporte de
nitratos proviene de la mineralización de
compuestos orgánicos, además de los
procesos biológicos de fijación de
nitrógeno y nitrificación. La razón C/N da
cuenta del proceso de transformación de
la materia orgánica a formas
nitrogenadas asimilables, y su valor de
12.70, calculado previamente, indica que
esta ocurriendo una adecuada
mineralización de la materia orgánica, y
que no se esta abusando en la
producción de nitratos, ni se esta
incurriendo en deficiencia, pues incluso
hay una reserva de nitratos participando
en procesos de intercambio iónico.
La importancia de presentar apropiados
niveles de nitratos en la planta proviene
de una equilibrada cantidad en la
solución del suelo, ello estimula el
desarrollo y actividad de la nitrato-
reductasa (NR), y esta a su vez
incrementa el potencial de reducción de
los nitratos, confiriendo una mayor
capacidad para la síntesis de
aminoácidos, síntesis de proteínas, o la
asimilación total del nitrógeno.
El alto porcentaje de nitrógeno total,
encontrado previo a esta práctica, de
0.63%, asegura una mayor liberación de
nitrógeno inorgánico y por su puesto de
nitratos. Además las condiciones
fisicoquímicas del suelo, textura (franco
arcillosa), humedad de 18.45%, pH 5.62,
temperatura de 22˚C (promedio),
favorecen los diferentes procesos
biológicos de metabolismo del nitrógeno
en todas sus formas, los cuales
conducen a producir las fuentes
nitrogenadas asimilables por el cultivo.
Así, bajo condiciones aerobias
favorecidas por la textura del suelo,
predominan las formas NO3- y NO2-,
sobre el NH4+, el cual es menos
disponible, ya que se fija fuertemente a
las láminas de arcilla y dentro de ellas.
Además el pH favorece el desarrollo de
microorganismos en busca de la
producción de las formas más útiles del
nitrógeno, además de la buena condición
de humedad y de temperatura.
La desnitrificación provoca también una
disminución en las formas inorgánicas de
nitrógeno como NO3- y NO2-, por su
conversión a formas reducidas en forma
gaseosa, tales como NO, N2O y N2. Lo
cual se ve favorecido bajo condiciones
anaerobias, a pH mayor de 6 y en
presencia de altas fuentes de energía, de
acuerdo a estas condiciones exigidas, en
la muestra de suelo este proceso se da
en muy poca proporcion. La
desnitrificación se considera como un
proceso perjudicial, pues significa la
perdida de N del suelo al pasar a una
forma no utilizable por el cultivo y una
posible causa de problemas ambientales
y de salud humana. Sin embargo, se
puede considerar que la desnitrificación
tiene un efecto beneficio desde el punto
de vista de la calidad del ambiente, pues
este proceso reduce los riesgos de
acumulación de nitratos en suelos y otros
ambientes, como aguas subterráneas,
reduciéndose así los efectos
perjudiciales que tienen estos iones para
la salud humana y animal, aunque a
costa de la salud de la atmósfera.
Definitivamente la solución es manejar
adecuadamente los suelos y la
fertilización.
6. Conclusiones.

Se determino la concentración de
nitratos de la muestra de suelo en dos
extractos, pasta saturada y KCl normal,
mediante el método fotométrico a 220 y
275nm por medio de una curva de
calibración. Las concentraciones fueron
13.97 y 76.67µg/g, en pasta saturada y
KCl, respectivamente.

La concentración determinada en
pasta saturada constituye la fracción
inmediatamente disponible para el
cultivo, y la que se encontró en el
extracto de KCl, es la fracción
comprometida en procesos de adsorción
e intercambio aniónico, e incluye la
soluble, la forma intercambiable se
puede considerar como reserva de
nitratos.

El alto contenido de nitrógeno total y
la razón C/N, están indicando un
adecuado aporte de nitrógeno en formas
inorgánicas asimilables. Además las
propiedades físicas del suelo favorecen
procesos tales como mineralización y
nitrificación, sobre el proceso de
desnitrificación, que conduce a perdidas
de nitrógeno y problemas ambientales.

Debe existir un correcto aporte de
nitrógeno para no incurrir en
contaminación de cuerpos acuáticos o la
atmósfera, por excesos en nitratos, que
por lavado se difunden a aguas
subterráneas, o por malas condiciones
físicas, que favorecen la desnitrificación.
En el cual se producen formas reducidas
gaseosas de los nitratos, responsables
de contaminación atmosférica.
 7. Bibliografía.

Silva, F. Fundamentos para la

Interpretación de Análisis de Suelos, Plantas y
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